WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPOD II

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1 GE Healthcare Life Sciences WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento Tradotto dall'inglese

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3 Sommario Sommario 1 Introduzione Importanti informazioni d'uso Informazioni di carattere normativo Sistema WAVE Bioreactor Documentazione per l'utente WAVE Bioreactor 20/ Documentazione associata... 2 Istruzioni di sicurezza Precauzioni di sicurezza Etichette Procedure di emergenza Procedure di riciclaggio Dichiarazione per sostanze pericolose (DoHS)... 3 Descrizione del sistema Descrizione generale Descrizione funzionale Bioreattore Cellbag WAVEPD II Configurazione del sistema WAVE Bioreactor... 4 Installazione Requisiti di stabilimento Installazione di WAVE Bioreactor 20/ Trasporto Installazione di WAVEPD II Collegamento a UNICRN DAQ Sistema di controllo WAVE Bioreactor Schermata principale e funzioni generali Controlli dei parametri Controllo oscillazione Controllo del peso Controllo perfusione Cellbag e selezione modalità singola/doppia Controllo temperatura Controllo aerazione Controllo aerazione/concentrazione di C Controllo aerazione/concentrazione dell' Allarmi Modifica delle impostazioni di funzionamento... 6 Sistema di controllo WAVEPD II Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 3

4 Sommario 6.2 Schermata delle informazioni di sistema WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo di ph Controllo dell'ossigeno disciolto Controllo aerazione Controllo della concentrazione di Controllo della concentrazione di C Controllo remoto dello strumento WAVE Bioreactor Allarmi Modifica delle impostazioni di funzionamento... 7 Software UNICRN DAQ Introduzione UNICRN DAQ Moduli UNICRN DAQ... 8 Funzionamento Generalità di funzionamento Avvio del sistema Montaggio del sistema Collegamento dell'aerazione Preparazione di WAVEPD II Impostazione delle condizioni di monitoraggio e del controllo di funzionamento. 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione Effettuazione della coltura pzioni di coltura Coltura finale... 9 Manutenzione Informazioni generali Programma di manutenzione Pulizia dello strumento Procedura di ispezione dell'interruttore di sicurezza Calibratura Regolazione temperatura Manutenzione di WAVEPD II Eliminazione dei guasti Problemi generali Problemi specifici del modulo WAVEPD II... A Informazioni di riferimento... A.1 Specifiche... A.2 Parti di ricambio, accessori e informazioni per gli ordini WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

5 Sommario B Teoria del controllo dei parametri... B.1 Generalità... B.2 Misurazione e controllo del ph... B.3 Misurazione e controllo dell'ossigeno disciolto... B.4 Misurazione e controllo dell'ossigeno... B.5 Misurazione e controllo dell'anidride carbonica... C Comunicazioni e collegamenti... C.1 Panoramica sulla comunicazione dei dati... C.2 Porta analogica/allarme... C.3 Contatto di allarme... C.4 Collegamento di PUMP20 a WAVEPD II... C.5 Porta di comunicazione MDBUS... C.6 Collegare WAVE Bioreactor a UNICRN DAQ WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 5

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7 1 Introduzione 1 Introduzione Scopo delle Istruzioni di funzionamento Le Istruzioni di funzionamento forniscono le istruzioni necessarie per installare e utilizzare il WAVE Bioreactor 20/50 e il WAVEPD II in piena sicurezza. Presupposti Per utilizzare gli strumenti WAVE Bioreactor e WAVEPD II in sicurezza e secondo l'uso previsto, è necessario rispettare i seguenti prerequisiti: È necessario essere in grado di usare le più comuni apparecchiature da laboratorio e saper maneggiare materiali biologici. È necessario leggere e comprendere il capitolo sulle istruzioni di sicurezza presente in questo manuale. Il sistema deve essere installato secondo quanto indicato nel presente manuale. In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni: Sezione 1.1 Importanti informazioni d'uso 1.2 Informazioni di carattere normativo 1.3 Sistema WAVE Bioreactor 1.4 Documentazione per l'utente WAVE Bioreactor 20/ Documentazione associata Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 7

8 1 Introduzione 1.1 Importanti informazioni d'uso 1.1 Importanti informazioni d'uso Leggerlo prima di utilizzare WAVE Bioreactor 20/50 Gli utenti devono leggere interamente le Istruzioni di funzionamento prima di procedere all'installazione, all'uso o alla manutenzione dello strumento. Tenere sempre le Istruzioni di funzionamento a portata di mano durante l'utilizzo di WAVE Bioreactor 20/50. Utilizzare WAVE Bioreactor soltanto nel modo descritto nella documentazione d'uso. In caso contrario, l'operatore potrebbe essere esposto a pericoli che possono causare lesioni personali, nonché danni all'attrezzatura. Uso previsto WAVE Bioreactor 20/50 deve essere utilizzato come attrezzatura di ricerca, sviluppo e fabbricazione per la dilatazione delle celle. Nota: In caso di applicazioni di terapia a celle fuori dall'unione Europea e dall'australia, deve essere utilizzato unicamente per scopi di ricerca. Avvisi di sicurezza La presente documentazione d'uso contiene delle AVVERTENZE, delle PRECAUZINI e degli AVVISI riguardanti l'utilizzo sicuro del prodotto. Vedere le definizioni seguenti. Avvertenze AVVERTENZA AVVERTENZA indica una situazione pericolosa che, se non viene evitata, potrebbe causare la morte o lesioni gravi. È importante procedere soltanto quando tutte le condizioni indicate sono state soddisfatte e chiaramente comprese. 8 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

9 1 Introduzione 1.1 Importanti informazioni d'uso Avvertenze ATTENZINE PRECAUZINE indica una situazione pericolosa che, se non viene evitata, potrebbe causare lesioni moderate o di lieve entità. È importante procedere soltanto quando tutte le condizioni indicate sono state soddisfatte e chiaramente comprese. Avvisi AVVIS AVVIS indica delle istruzioni che devono essere seguite al fine di evitare danni al prodotto o ad altre attrezzature. Note e suggerimenti Nota: Suggerimento: Una Nota è utilizzata per indicare importanti informazioni relative all'utilizzo ottimale del prodotto senza inconvenienti. Un suggerimento contiene informazioni utili che possono migliorare o ottimizzare le procedure. Convenzioni tipografiche Gli elementi software sono identificati all'interno del testo mediante caratteri in corsivo grassetto. Dvita kiu atskiriami meniu komandų lygiai, taigi File:pen rei kia, kad komanda pen yra meniu File. Gli elementi hardware sono evidenziati all'interno del testo da caratteri in grassetto (ad es., interruttore Power). WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 9

10 1 Introduzione 1.2 Informazioni di carattere normativo 1.2 Informazioni di carattere normativo La presente sezione elenca le direttive e le norme soddisfatte da WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II. Informazioni sulla costruzione La seguente tabella riepiloga le informazioni necessarie per la produzione. Per ulteriori informazioni, vedere il documento della Dichiarazione di conformità CE. Requisito Nome e indirizzo del costruttore Contenuto GE Healthcare Bio-Sciences AB, Björkgatan 30, SE Uppsala, Svezia Conformità CE Questo prodotto è conforme alle direttive europee elencate nella tabella e rispetta le relative norme armonizzate. Direttiva 2006/42/CE 2006/95/CE 2004/108/CE Titolo Direttiva macchine (MD) Direttiva bassa tensione (LVD) Direttiva Compatibilità Elettromagnetica (EMC) Norme internazionali Questo prodotto rispetta i requisiti delle seguenti norme: Norma EN , IEC EN , IEC (Emissioni secondo CISPR 11, Gruppo 1, Classe A) EN IS Descrizione Prescrizioni di sicurezza per gli apparecchi elettrici di misurazione, controllo e uso in laboratorio. Apparecchi elettrici di misurazione, controllo e uso in laboratorio - Requisiti EMC (compatibilità elettromagnetica) Sicurezza del macchinario. Principi generali di progettazione. Valutazione e riduzione dei rischi. Note La norma EN è armonizzata con la direttiva UE 2006/95/CE La norma EN è armonizzata con la direttiva UE 2004/108/CE Lo standard EN IS è armonizzato con la direttiva UE 2006/42/CE 10 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

11 1 Introduzione 1.2 Informazioni di carattere normativo Marcatura CE La marcatura CE e la corrispondente Dichiarazione di conformità sono valide per lo strumento quando il medesimo risulta: utilizzato come unità autonoma, oppure collegato ad altri strumenti a marchio CE, oppure collegato ad altri prodotti suggeriti o descritti nella documentazione d'uso, e utilizzato nello stesso stato in cui è stato spedito GE Healthcare, fatta eccezione per le modifiche descritte nella documentazione d'uso. La Dichiarazione di conformità si riferisce esclusivamente ai sistemi contrassegnati dalla marcatura CE. Conformità normativa dell'attrezzatura collegata Eventuali attrezzature collegate al sistema WAVE Bioreactor devono rispettare i requisiti di sicurezza della norma EN /IEC oppure le relative norme armonizzate. All'interno dell'ue, le apparecchiature collegate devono essere marcate CE. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 11

12 1 Introduzione 1.3 Sistema WAVE Bioreactor 1.3 Sistema WAVE Bioreactor Introduzione La categoria di strumenti WAVE Bioreactor è stata progettata per effettuare colture di celle consentendo lo scale-up del volume di coltura da 0,1 l a 500 l, utilizzando una camera monouso per bioreattori. Il volume della coltura di celle per il WAVE Bioreactor 20/50 può variare tra 0,1 l e 25 l. La miscelazione e il trasferimento dell'ossigeno sono realizzati in base al principio dell'agitazione indotta dal movimento ondulatorio. Una sacca monouso, irradiata con raggi gamma e denominata bioreattore Cellbag è collocata sullo strumento WAVE Bioreactor. Il bioreattore Cellbag viene gonfiato con gas, viene riempito parzialmente con il mezzo di coltura e quindi viene inoculato di celle. Questa sezione fornisce una panoramica sulla categoria di sistemi WAVE Bioreactor. Per informazioni dettagliate sullo strumento WAVE Bioreactor 20/50, vedere Capitolo 3 Descrizione del sistema, a pagina 36. Immagine del sistema La seguente illustrazione mostra lo strumento WAVE Bioreactor 20/ WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

13 1 Introduzione 1.3 Sistema WAVE Bioreactor La seguente illustrazione mostra il regolatore opzionale WAVEPD II che può essere collegato a WAVE Bioreactor 20/50 e utilizzato per controllare i parametri della coltura. Suggerimento: Il software UNICRN DAQ 1.0 for WAVE Bioreactor può essere utilizzato per l'acquisizione dei dati provenienti dalla coltura. Funzioni principali Le principali caratteristiche della categoria di sistemi WAVE Bioreactor sono: I bioreattori Cellbag monouso e irradiati con raggi gamma per scongiurare il rischio di contaminazioni incrociate, non necessitano di pulizia e richiedono minime procedure di validazione. I bioreattori Cellbag sono forniti pronti all'uso, riducendo al minimo i tempi di preparazione. I bioreattori Cellbag sono adatti alla produzione commerciale GMP senza l'utilizzo di un armadio biosicuro. Nessuna shear di celle con sparging di bolle d'aria. Adatti per applicazioni con sospensioni, microsupporti, batch, fed-batch e colture in perfusione. Configurazioni multiple per il controllo dei parametri, quali ph e ossigeno disciolto (D). WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 13

14 1 Introduzione 1.3 Sistema WAVE Bioreactor Sistemi scalabili capaci di gestire volumi di coltura compresi tra 0,1 l in WAVE Bioreactor 2/10 e 500 l in WAVE Bioreactor 500/1000. Espansione fino a 1:10 per singola coltura. Controllo di temperatura integrato. Terminologia utilizzata in questo manuale per ph e ossigeno disciolto I termini... Sensore ph e sensore phpt Controllo ph e controllo phpt sensore D e sensore DPT II controllo D e controllo DPT II si riferiscono a... sensore ph ottico utilizzato nella Cellbag. Controllo ph attraverso WAVEPD II. sensore ottico D utilizzato nella Cellbag. Controllo D attraverso WAVEPD II. Nota: Il suffisso "II" in DPT II fa riferimento al nuovo sensore DPT di tipo patch integrato in alcuni bioreattori Cellbag, a differenza del vecchio sensore DPT in formato di sonda esterna. Per lo strumento WAVEPD II, viene ancora usato il termine DPT. Applicazioni La categoria WAVE Bioreactor può essere utilizzata per la dilatazione di linee cellulari, produzione di proteine ricombinanti, virus o vaccini e applicazioni ad alto contenimento. Possono essere realizzate colture di celle di mammiferi, insetti, piante e microbi, sia in sospensione sia con microsupporti. pzioni Un assortimento di regolatori, pompe e sensori opzionali consentono di monitorare, mantenere e regolare le condizioni della coltura, in base alle necessità, all'interno del bioreattore Cellbag. Il regolatore opzionale WAVEPD II integra la strumentazione associata al WAVE Bioreactor 20/50. Questo comprende i controlli di ph, ossigeno disciolto e miscelazione di C 2 / WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

15 1 Introduzione 1.4 Documentazione per l'utente WAVE Bioreactor 20/ Documentazione per l'utente WAVE Bioreactor 20/50 Introduzione Questa sezione descrive la documentazione per l'utente fornita con il sistema WAVE Bioreactor. Documentazione per l'utente Documento Istruzioni di funzionamento del bioreattore WAVE 20/50 e WAVEPD II Help UNICRN DAQ (se è incluso UNICRN DAQ) Documentazione per l'utente di UNICRN DAQ 1.0 (se è incluso UNICRN DAQ) Principali contenuti Tutte le istruzioni necessarie al funzionamento dello strumento WAVE Bioreactor, incluse, ad es., installazione, descrizione delle caratteristiche, funzionamento e manutenzione. Descrizione delle finestre di dialogo di UNICRN DAQ (dal menu Help) Panoramica e descrizione dettagliata delle caratteristiche di UNICRN DAQ. Istruzioni per l'utilizzo del software. Descrizione del flusso di lavoro per le operazioni più comuni. Configurazione di rete e installazione completa del software. Amministrazione di UNICRN DAQ e database UNICRN DAQ. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 15

16 1 Introduzione 1.5 Documentazione associata 1.5 Documentazione associata File di dati e note applicative Per ordinare o scaricare le note applicative e i file di dati prodotti, vedere le seguenti istruzioni. Passo perazione Passare a Fare clic su Literature in Related information. Selezionare se si desidera scaricare o ordinare la documentazione scelta. Altro Per ulteriori informazioni sugli strumenti autonomi opzionali, fare riferimento a Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/50 o contattare un rappresentante di GE Healthcare. 16 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

17 2 Istruzioni di sicurezza 2 Istruzioni di sicurezza Informazioni sul capitolo Questo capitolo descrive la conformità alla sicurezza, le etichette di sicurezza, le precauzioni generali di sicurezza, le procedure d'emergenza, la mancanza d'alimentazione e il riciclaggio di strumenti WAVE. In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni: Sezione 2.1 Precauzioni di sicurezza 2.2 Etichette 2.3 Procedure di emergenza 2.4 Procedure di riciclaggio 2.5 Dichiarazione per sostanze pericolose (DoHS) Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 17

18 2 Istruzioni di sicurezza 2.1 Precauzioni di sicurezza 2.1 Precauzioni di sicurezza Introduzione Prima di procedere all'installazione, alla messa in esercizio o alla manutenzione del sistema, è necessario essere consapevoli dei pericoli descritti nel presente manuale. Per evitare il rischio di infortuni personali o danni all'attrezzatura, attenersi alle istruzioni fornite. Le precauzioni di sicurezza nella presente sezione sono raggruppate nelle seguenti categorie: Precauzioni generali Protezioni individuali Installazione e movimentazione dello strumento Funzionamento del sistema Manutenzione Precauzioni generali AVVERTENZA Utilizzare i sistemi WAVE esclusivamente secondo le modalità descritte nella documentazione d'uso WAVE. AVVERTENZA Il sistema WAVE deve essere utilizzato e sottoposto a manutenzione unicamente da personale adeguatamente addestrato. AVVERTENZA Non utilizzare accessori che non siano stati forniti o consigliati da GE Healthcare. AVVERTENZA Sull'apparecchiatura possono essere utilizzati esclusivamente i bioreattori Cellbag approvati da GE Healthcare per WAVE. 18 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

19 2 Istruzioni di sicurezza 2.1 Precauzioni di sicurezza Utilizzo di liquidi infiammabili AVVERTENZA WAVE Bioreactor non è stato progettato per operare con liquidi infiammabili. WAVE Bioreactor non è certificato per l'uso in atmosfera potenzialmente esplosiva. Uso di sostanze chimiche o reagenti biologici pericolosi AVVERTENZA Quando si utilizzano sostanze chimiche o biologiche pericolose, è necessario adottare le giuste misure protettive, comprese le precauzioni richieste per fare fronte al rischio remoto di perdita del bioreattore Cellbag. Protezione individuale AVVERTENZA Durante il funzionamento e la manutenzione dei sistemi WAVE si raccomanda l'uso di dispositivi di protezione individuale adeguati. AVVERTENZA Sostanze pericolose. Quando si usano sostanze biologiche e chimiche pericolose, adottare tutte le misure protettive adeguate: ad esempio, indossare guanti e occhiali di protezione resistenti a tali sostanze. Seguire la normativa nazionale e/o locale in merito al funzionamento e alla manutenzione in sicurezza del sistema. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 19

20 2 Istruzioni di sicurezza 2.1 Precauzioni di sicurezza AVVERTENZA Fuoriuscita di sostanze biologiche. L'operatore deve fare il possibile per evitare la fuoriuscita di sostanze biologiche pericolose in prossimità dello strumento. L'impianto deve essere conforme al codice di procedura nazionale per la biosicurezza. Installazione e movimentazione dello strumento AVVERTENZA Arresto di emergenza. Posizionare il sistema WAVE in modo che l'interruttore di alimentazione sia facilmente accessibile per spegnere l'alimentazione. L'interruttore di alimentazione si trova sulla parte posteriore dello strumento. AVVERTENZA Messa a terra. Gli strumenti WAVE devono essere sempre collegati ad una presa di corrente collegata a terra. AVVERTENZA ggetto pesante. Il bioreattore Cellbag pieno ha un peso considerevole e deve essere sollevato con cautela. 1 persona può portare 15 kg di peso, quindi per un peso dai 30 a 45 kg sono necessarie 3 persone. Il sollevamento e lo spostamento deve avvenire conformemente alle norme locali. AVVERTENZA Scollegamento dell'alimentazione. Scollegare sempre l'alimentazione prima di collegare lo strumento WAVE Bioreactor o WAVEPD II a qualsiasi altro dispositivo. 20 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

21 2 Istruzioni di sicurezza 2.1 Precauzioni di sicurezza ATTENZINE Scollegare tutte le tubazioni, i manicotti e i cavi prima di spostare lo strumento WAVE. ATTENZINE Verificare sempre che tutti le tubazioni, i manicotti e i cavi siano posizionati in modo da non intralciare i movimenti, al fine di evitare cadute accidentali. ATTENZINE Verificare che attorno allo strumento ci sia spazio sufficiente per consentire il movimento oscillatorio. ATTENZINE La funzionalità degli interruttori di sicurezza dello strumento WAVE deve essere testata dopo l'installazione dell'attrezzatura o il trasporto dello strumento e successivamente a intervalli di 6 mesi. Per il corretto metodo di prova, vedere Capitolo 9 Manutenzione, a pagina 237. ATTENZINE Per evitare surriscaldamenti, non attivare il riscaldatore, se non per pochi minuti, senza un bioreattore Cellbag pieno nel vassoio di oscillazione. Funzionamento del sistema AVVERTENZA Rischio biologico. Verificare che il bioreattore Cellbag sia sigillato prima e durante il processo di coltura. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 21

22 2 Istruzioni di sicurezza 2.1 Precauzioni di sicurezza AVVERTENZA Pericolo di elettroshock causato da una fuoriuscita.se esiste il pericolo che grosse quantità di liquido fuoriuscito possano penetrare nel corpo dello strumento WAVE, spegnerlo immediatamente, scollegare il cavo di alimentazione e contattare un tecnico autorizzato. AVVERTENZA Per prevenire eventuali perdite di gas dallo strumento autonomo C2MIX20, interrompere sempre l'erogazione della C 2 quando non è in uso. Nel corso di colture che richiedano l'uso di C2MIX20, assicurarsi che la stanza sia ben ventilata. AVVERTENZA Per prevenire eventuali perdite di gas dallo strumento autonomo 2MIX20, interrompere sempre l'erogazione della C 2 quando non è in uso. Nel corso di colture che richiedano l'uso di 2MIX20, assicurarsi che la stanza sia ben ventilata. AVVERTENZA Se l'azoto è collegato alla presa AIR IN, potrebbe verificarsi una perdita di azoto all'interno di WAVEPD II durante l'uso normale, anche se non è presente alcun flusso di gas verso lo strumento. Accertarsi che la stanza sia ben ventilata e che l'erogazione di azoto sia chiusa quando non è necessaria. AVVERTENZA Gonfiare il bioreattore Cellbag esclusivamente con la pompa dell'aria interna. Essa è dotata di un sistema di arresto automatico per sovrapressione che eviterà possibili superamenti di pressione. Il collegamento diretto a una sorgente di gas o l'utilizzo di qualsiasi altra pompa potrebbe causare la rottura del bioreattore Cellbag. 22 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

23 2 Istruzioni di sicurezza 2.1 Precauzioni di sicurezza ATTENZINE La pressione sulla porta Air In del WAVE Bioreactor non deve superare 0,1 bar. L'eventuale superamento di questo limite può causare la rottura del bioreattore Cellbag. Prevedere un apparecchio di regolazione della pressione di sicurezza idoneo. ATTENZINE Rischio di schiacciamento. Allontanarsi dai componenti in movimento durante il funzionamento. Arrestare il movimento oscillatorio prima di intervenire sul bioreattore Cellbag o sul vassoio di oscillazione. ATTENZINE L'azionamento dello strumento in assenza di una sacca contenente liquido può provocare il surriscaldamento. Non toccare un vassoio di oscillazione che potrebbe essere surriscaldato. ATTENZINE Rischio di perdita di sostanze biologiche. Prima di ogni uso, controllare tutti i manicotti per accertare eventuali tracce di incrinature o lacerazioni. Nessun manicotto dell'aria deve contenere liquidi di alcun tipo. ATTENZINE Eliminare immediatamente dal pavimento l'eventuale liquido versato per evitare possibili scivolamenti. ATTENZINE Utilizzare soltanto sostanze chimiche che abbiano dimostrato di non essere dannose per il bioreattore Cellbag e per l'intero sistema. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 23

24 2 Istruzioni di sicurezza 2.1 Precauzioni di sicurezza ATTENZINE Accertarsi che il gas collegato all'apparecchiatura sia quello corretto. Adeguata qualità e pressione del gas immesso evitano situazioni pericolose o il rischio di effetti indesiderati sulla coltura. AVVIS Assicurarsi che le tubazioni siano prive di ostruzioni e che il gas possa liberamente attraversarle. Manutenzione AVVERTENZA Rischio di shock elettrico Tutte le riparazioni devono essere eseguite da personale di assistenza autorizzato GE Healthcare. Non aprire i coperchi e non sostituire componenti se non diversamente specificato nella documentazione dell'utente. AVVERTENZA Scollegamento dell'alimentazione. Scollegare sempre l'alimentazione dallo strumento prima di eseguire qualsiasi intervento o procedura di manutenzione. AVVERTENZA Pulire sempre l'attrezzatura in un'area ben ventilata. Non bagnare o immergere parti dello strumento in alcun tipo di liquido. Per la pulizia usare solo acqua e alcol. Prima di collegare lo strumento, verificare che sia completamente asciutto. Rispettare tutte le linee guida relative all'ambiente e alla salute e sicurezza concernenti i materiali utilizzati. 24 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

25 2 Istruzioni di sicurezza 2.1 Precauzioni di sicurezza AVVERTENZA Utilizzare soltanto pezzi di ricambio approvati o forniti da GE Healthcare per la manutenzione e il servizio d'assistenza sull'impianto. ATTENZINE Non versare acqua direttamente sullo strumento. ATTENZINE Non collegare l'alimentazione allo strumento prima che si sia asciugato completamente. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 25

26 2 Istruzioni di sicurezza 2.2 Etichette 2.2 Etichette Questa sezione descrive le etichette di sicurezza e quelle relative alle sostanze pericolose che sono state applicate sugli strumenti WAVE Etichette sullo strumento L'illustrazione indicata di seguito indica un esempio di etichetta identificativa attaccata agli strumenti WAVE. WAVE Bioreactor BASE20/50EHT V Code no: Serial no: Mfg Year: 2009 ~ Voltage: V Frequency: 50/60 Hz Max Power: 630 VA Fuse: 2x T 6.3AL 250 V N3732 Made in Sweden GE Healthcare Bio-Sciences AB Uppsala Sweden WAVEPD II 26 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

27 2 Istruzioni di sicurezza 2.2 Etichette Simboli utilizzati nelle etichette di sicurezza Rinomina Descrizione Attenzione! Prima di utilizzare il sistema, leggere la documentazione d'uso. Aprire i coperchi o sostituire i componenti solo se ciò è specificamente indicato nella documentazione d'uso. Il sistema rispetta le direttive europee applicabili. Il sistema rispetta i requisiti di compatibilità elettromagnetica (EMC) per l'australia e la Nuova Zelanda. Questo simbolo indica che WAVEPD II è stato certificato da un Nationally Recognized Testing Laboratory (NTRL). Per NRTL si intende un'organizzazione riconosciuta dall'ente US ccupational Safety and Health Administration (SHA) conforme ai requisiti legali della sezione 29 del Code of Federal Regulations (29 CFR), Parte Indica il rischio che parti del corpo restino intrappolate tra due componenti dello strumento e che, pertanto, occorre prestare attenzione onde scongiurare eventuali infortuni. Etichette concernenti le sostanze pericolose Rinomina Proprietà Questo simbolo indica che i rifiuti elettrici ed elettronici non devono essere smaltiti come rifiuti municipali generici ma devono essere raccolti separatamente. Contattare un rappresentante autorizzato o il produttore per informazioni relative allo smantellamento dell'attrezzatura. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 27

28 2 Istruzioni di sicurezza 2.2 Etichette Rinomina Proprietà Questo simbolo indica che il prodotto contiene delle sostanze pericolose oltre i limiti stabiliti dalla norma cinese SJ/T Requisiti sui Limiti delle Concentrazioni per Certe Sostanze Pericolose negli Apparecchi Elettronici. 28 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

29 2 Istruzioni di sicurezza 2.3 Procedure di emergenza 2.3 Procedure di emergenza Introduzione La presente sezione descrive come eseguire lo spegnimento di emergenza di uno strumento WAVE. La presente sezione descrive anche le conseguenze della mancanza di alimentazione. Interruttori di sicurezza Gli interruttori di sicurezza bianchi in gomma si trovano sotto al vassoio di oscillazione. Se uno degli interruttori di sicurezza viene premuto, il movimento oscillatorio si arresta e il vassoio di oscillazione si porta in posizione piana. Se è stato premuto un interruttore di sicurezza, è necessario spegnere () e riaccendere (I) il sistema per resettare l'interruttore stesso. Procedure di emergenza In caso di emergenza arrestare il ciclo nel modo seguente: Passo 1 2 perazione Spegnere l'alimentazione allo strumento portando l'interruttore di alimentazione in posizione. Se necessario, scollegare il cavo di alimentazione della presa di corrente. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 29

30 2 Istruzioni di sicurezza 2.3 Procedure di emergenza Ripristino dell'interruttore di sicurezza Per ripristinare l'interruttore di sicurezza: Spegnere l'alimentazione allo strumento portando l'interruttore di alimentazione in posizione. Accendere l'alimentazione allo strumento portando l'interruttore di alimentazione in posizione I. Interruzione di corrente In caso d'interruzione di corrente, il ciclo viene immediatamente sospeso. Se l'opzione AUTSTART è impostata su N, il funzionamento riprende automaticamente non appena viene ripristinata la corrente. Per la risoluzione dei problemi, vedere Sezione 10.1 Problemi generali, a pagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

31 2 Istruzioni di sicurezza 2.4 Procedure di riciclaggio 2.4 Procedure di riciclaggio L'attrezzatura deve essere decontaminata prima di essere smantellata e devono essere rispettate tutte le normative locali in merito alla rottamazione della stessa. Smaltimento, istruzioni generali Quando i sistemi WAVE Bioreactor vengono messi fuori uso, i vari materiali devono essere separati e riciclati secondo le normative ambientali locali e nazionali. Riciclaggio delle sostanze pericolose I sistemi WAVE Bioreactor contengono sostanze pericolose. Informazioni dettagliate sono disponibili presso il rappresentante GE Healthcare di zona. Smaltimento dei componenti elettrici I rifiuti di attrezzature elettriche ed elettroniche non devono essere smaltiti come rifiuti urbani non differenziati, ma devono essere raccolti separatamente. Contattare un rappresentante autorizzato di GE Healthcare per informazioni relative allo smantellamento dell'attrezzatura. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 31

32 2 Istruzioni di sicurezza 2.5 Dichiarazione per sostanze pericolose (DoHS) 2.5 Dichiarazione per sostanze pericolose (DoHS) Introduzione Le seguenti informazioni sul controllo dell'inquinamento dei prodotti sono fornite secondo lo standard SJ/T , Contrassegno per il controllo dell'inquinamento causato dai prodotti informatici elettronici. 根据 SJ/T 电子信息产品污染控制标识要求 特提供如下有关污染控制方面的信息 Simboli usati nell'etichettatura di controllo dell'inquinamento 电子信息产品污染控制标志说明 Rinomina Significato Questo simbolo indica che il prodotto contiene materiali pericolosi in eccesso rispetto ai limiti stabiliti dallo standard cinese SJ/T Requirements for Concentration Limits for Certain Hazardous Substances in Electronic Information Products (Requisiti per i limiti di concentrazione per determinate sostanze pericolose nei prodotti informatici elettronici). Il numero contenuto nel simbolo è l'environment-friendly Use Period (EFUP / Periodo d'uso ecocompatibile), che indica il periodo durante il quale le sostanze o gli elementi tossici o pericolosi contenuti nei prodotti elettronici per informatica non subiranno perdite o mutamenti nelle normali condizioni di funzionamento, cosicché l'utilizzo di tali prodotti non provochi grave inquinamento ambientale, lesioni fisiche alle persone o danni alle cose. L'unità di misura di tale periodo è l' anno. Per poter mantenere l'efup dichiarato, il prodotto deve essere utilizzato normalmente, in base alle istruzioni ed alle condizioni ambientali definite nel manuale del prodotto e si dovranno rispettare rigorosamente le tempistiche di manutenzione periodica indicate nelle Procedure di manutenzione del prodotto. I materiali di consumo, o certe parti, possono avere una propria etichetta con un valore EFUP inferiore a quello del prodotto. La sostituzione periodica di questi materiali di consumo o parti al fine di conservare l'efup dichiarato deve essere effettuata conformemente alle Procedure di manutenzione del prodotto. Il prodotto non deve essere smaltito come rifiuto urbano indifferenziato ma, dopo la dismissione, raccolto separatamente e correttamente trattato. 32 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

33 2 Istruzioni di sicurezza 2.5 Dichiarazione per sostanze pericolose (DoHS) Rinomina Significato 该标志表明本产品含有超过 SJ/T 电子信息产品中有毒有害物质的限量要求 中限量的有毒有害物质 标志中的数字为本产品的环保使用期, 表明本产品在正常使用的条件下, 有毒有害物质不会发生外泄或突变, 用户使用本产品不会对环境造成严重污染或对其人身 财产造成严重损害的期限 单位为年 为保证所申明的环保使用期限, 应按产品手册中所规定的环境条件和方法进行正常使用, 并严格遵守产品维修手册中规定的期维修和保养要求 产品中的消耗件和某些零部件可能有其单独的环保使用期限标志, 并且其环保使用期限有可能比整个产品本身的环保使用期限短 应到期按产品维修程序更换那些消耗件和零部件, 以保证所申明的整个产品的环保使用期限 本产品在使用寿命结束时不可作为普通生活垃圾处理, 应被单独收集妥善处理 Elenco delle sostanze pericolose e loro concentrazioni 产品中有毒有害物质或元素的名称及含量 Indicazione di superamento del limite soglia della sostanza per ogni componente maggiore Valore X Significato Indica che la quantità della sostanza tossica o pericolosa, contenuta in tutti i materiali omogenei di questa componente, è inferiore ai requisiti limite dello standard SJ/T 表示该有毒有害物质在该部件所有均质材料中的含量均在 SJ/T 标准规定的限量要求以下 Indica la quantità della sostanza tossica o pericolosa, contenuta in almeno uno dei materiali omogenei di questa componente, eccede i requisiti limite dello standard SJ/T I dati elencati in tabella sono i migliori disponibili al momento della pubblicazione 表示该有毒有害物质至少在该部件的某一均质材料中的含量超出 SJ/T 标准规定的 限量要求 此表所列数据为发布时所能获得的最佳信息 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 33

34 2 Istruzioni di sicurezza 2.5 Dichiarazione per sostanze pericolose (DoHS) List of hazardous substances Component name 部件名称 Hazardous substance 有毒有害物质或元素 Pb Hg Cd Cr6+ PBB PBDE 铅 汞 镉 六价铬 多溴联苯 多溴二苯醚 X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X 34 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

35 2 Istruzioni di sicurezza 2.5 Dichiarazione per sostanze pericolose (DoHS) Component name 部件名称 Hazardous substance 有毒有害物质或元素 Pb Hg Cd Cr6+ PBB PBDE 铅 汞 镉 六价铬 多溴联苯 多溴二苯醚 X X X X X X X X X X The product has not been tested as per the Chinese standard SJ/T Requirements for Concentration Limits for Certain Hazardous Substances in Electronic Information Product. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 35

36 3 Descrizione del sistema 3 Descrizione del sistema Informazioni sul capitolo Il presente capitolo descrive le caratteristiche del WAVE Bioreactor 20/50. In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni: Sezione 3.1 Descrizione generale 3.2 Descrizione funzionale 3.3 Bioreattore Cellbag 3.4 WAVEPD II 3.5 Configurazione del sistema WAVE Bioreactor Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

37 3 Descrizione del sistema 3.1 Descrizione generale 3.1 Descrizione generale Panoramica del sistema Un sistema WAVE Bioreactor 20/50 completo è costituito da: WAVE Bioreactor 20/50 Vassoio di oscillazione (ordinato separatamente) Bioreattore Cellbag monouso irradiato ai raggi gamma (ordinato separatamente) WAVEPD II (opzionale) Coperchio (opzionale) Strumenti autonomi (opzionali) Sensori ph e D (integrati nei bioreattori Cellbag, opzionali) Software UNICRN DAQ (opzionale) Vista frontale del WAVE Bioreactor 20/50 L'illustrazione sottostante indcia la parte anteriore dello strumento WAVE Bioreactor 20/50 con vassoio di oscillazione installato. Parte Funzione Soffietti di protezione, meccanismo di oscillazione Piattaforma di oscillazione Vassoio di oscillazione Pannello a sfioramento rimovibile WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 37

38 3 Descrizione del sistema 3.1 Descrizione generale Illustrazione del Cellbag La sacca di coltura celle viene fornita in molte configurazioni diverse, con assortimenti standard e personalizzati. Questa illustrazione mostra un esempio di configurazione per la Cellbag Parte Funzione Asta della Cellbag Filtro dell'aria in uscita Filtro dell'aria in entrata Porta Luer di riserva Porta di campionamento senza ago CLAVE Porta per le aggiunte Porta per le aggiunte e la raccolta 38 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

39 3 Descrizione del sistema 3.1 Descrizione generale Vista frontale del WAVEPD II Il regolatore WAVEPD II opzionale esegue il monitoraggio e controlla i parametri di coltura. L'illustrazione seguente mostra la parte anteriore del regolatore WAVEPD II. 1 2 Parte 1 2 Funzione Pannello a sfioramento Connettori per i cavi dei sensori e la tubazione del gas Caratteristiche opzionali Per informazioni relative ad altri strumenti opzionali, vedere Sezione 3.5 Configurazione del sistema WAVE Bioreactor, a pagina 52. Per informazioni relative a UNICRN DAQ, leggere la documentazione per l'utente di UNICRN DAQ 1.0. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 39

40 3 Descrizione del sistema 3.2 Descrizione funzionale 3.2 Descrizione funzionale Principio di funzionamento Il bioreattore Cellbag è installato in WAVE Bioreactor 20/50, viene gonfiato col gas, viene riempito parzialmente con il mezzo di coltura e quindi viene inoculato di celle. Un movimento ondulatorio viene indotto nella coltura contenuta nel bioreattore Cellbag mediante il meccanismo oscillante. Grazie al movimento ondulatorio viene miscelato il fluido all'interno del bioreattore Cellbag portando in sospensione le eventuali celle e particelle. L'agitazione indotta dal movimento ondulatorio non richiede un miscelatore meccanico invasivo o lo sparging di gas. Inoltre, il movimento ondulatorio genera una superficie libera per consentire un trasferimento efficace dell'ossigeno dalla parte superiore del bioreattore. L'aria passa continuamente attraverso la parte superiore del bioreattore per fornire l'ossigeno e per rimuovere i gas metabolici di scarto. L'aerazione avviene tramite una pompa dell'aria interna e un regolatore di flusso a massa. In alternativa, si può utilizzare un miscelatore di gas opzionale. Come opzione, si utilizza un regolatore WAVEPD II per controllare il ph, l'ossigeno disciolto, la portata aria, così come la miscela di gas C 2 e 2. Illustrazione del movimento ondulatorio Fase 1 2 Descrizione L'aria entra nel bioreattore Cellbag attraverso il filtro in ingresso. Gonfia la sacca e fornisce ossigeno alla coltura. L'aria e i gas metabolici escono dal bioreattore Cellbag attraverso il filtro in uscita e la valvola di controllo della pressione. La valvola di controllo della pressione garantisce il mantenimento di una sovrapressione corretta e costante all'interno del bioreattore Cellbag. 40 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

41 3 Descrizione del sistema 3.2 Descrizione funzionale Fase 3 4 Descrizione Il meccanismo oscillante mette in moto la relativa piattaforma. Le onde si formano durante l'oscillazione. La coltura viene miscelata con attenzione e l'ossigeno viene trasferito alla coltura. Parametri di controllo Parametri di controllo disponibili I controlli di oscillazione, temperatura e aerazione sono disponibili in maniera predefinita. Gli altri parametri di controllo dipendono dalla configurazione del sistema. Controllo oscillazione Il livello di miscelazione e di trasferimento può essere controllando regolando l'angolo e la velocità di oscillazione. Controllo temperatura La temperatura è controllata da una piastra di riscaldamento che si trova tra la piattaforma di oscillazione e il vassoio di oscillazione. Un sensore di temperatura non invasivo è fissato sulla sinistra del vassoio. Il cavo del sensore si inserisce in un jack installato a lato dello strumento. Successivamente, la sacca di coltura celle viene posizionata sul vassoio di oscillazione. Nota: Durante il doppio funzionamento, vederesezione 3.5 Configurazione del sistema WAVE Bioreactor, a pagina 52, i sensori di temperatura sono utilizzati a sinistra e a destra, uno per sacca. Aerazione L'aria viene aspirata dalle pompe interne del WAVE Bioreactor e viene quindi pompata nella parte superiore del bioreattore Cellbag. In alternativa, WAVEPD II può fornire il controllo dell'aerazione. Controllo concentrazione gas C 2 e 2 L'aria viene aspirata dalla pompa interna dalla porta aria in ingresso. Se l' 2 o la C 2 sono collegati alle specifiche porte laterali, consentono di miscelare l'aria con il gas C 2 e/o 2 alla concentrazione preimpostata. Questa operazione richiede la configurazione della C 2 o dell' 2 nello strumento WAVE Bioreactor 20/50. In alternativa, l'aria in ingresso può essere miscelata con gas C 2 e/o 2 alla concentrazione preimpostata all'interno di WAVEPD II. Dopo di ciò, collegare la miscela controllata di gas direttamente al bioreattore Cellbag e non attraverso lo strumento WAVE Bioreactor. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 41

42 3 Descrizione del sistema 3.2 Descrizione funzionale Controllo dell'ossigeno disciolto L'ossigeno disciolto (D) può essere misurato con un WAVEPD II unitamente a un sensore ottico D integrato nella parte inferiore delle configurazioni DPT II Cellbag. L'ossigeno disciolto può essere controllato manualmente o automaticamente tramite WAVEPD II cambiando la concentrazione di 2 dell'aria pompata all'interno del bioreattore Cellbag o cambiando la velocità di oscillazione. Inoltre, l'angolo di oscillazione può essere impostato manualmente. Controllo di ph Il ph può essere misurato con WAVEPD II assieme a un sensore ph ottico integrato sul fondo delle configurazioni Cellbag phpt. Il controllo del ph si ottiene aggiungendo una soluzione acida o basica, o una base, e controllando la concentrazione della C 2 per l'aria aggiunta al bioreattore Cellbag. Per l'aggiunta di acido e/o base, è necessaria una pompa aggiuntiva per ciascuna soluzione. Controllo perfusione La perfusione può essere eseguita e controllata mediante WAVE Bioreactor 20/50 nella versione dotata di cella di carico integrale. Sono necessarie anche le pompe di alimentazione e raccolta PUMP20. Durante la perfusione, viene periodicamente aggiunto mezzo di coltura fresco e i mezzi di coltura privi di cellule vengono rimossi. Interfaccia utente dello strumento WAVE Bioreactor Il WAVE Bioreactor è controllato da un pannello a sfioramento posizionato nella parte anteriore dello strumento. Il pannello a sfioramento mostra lo stato attuale del sistema e può essere utilizzato anche per controllare il sistema. Il pannello a sfioramento può essere staccato dallo strumento per un funzionamento più opportuno. Un cavo collega la schermata allo strumento. Per le descrizioni dettagliate delle funzioni di controllo, vedere Capitolo 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor, a pagina 87. WAVEPD II Il regolatore WAVEPD II opzionale visualizza le informazioni di sistema in un pannello a sfioramento integrato. Per le descrizioni dettagliate delle funzioni di controllo, vederecapitolo 6 Sistema di controllo WAVEPD II, a pagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

43 3 Descrizione del sistema 3.3 Bioreattore Cellbag 3.3 Bioreattore Cellbag Introduzione La coltura di celle è effettuata all'interno del bioreattore Cellbag. Il bioreattore Cellbag è fornito già irradiato con raggi gamma e pronto all'uso. È progettato per un solo utilizzo e deve pertanto essere eliminato subito dopo. Vi invitiamo a familiarizzare un po' con le caratteristiche del bioreattore Cellbag. Immagine Schema di un bioreattore Cellbag. Descrizione Ciascun bioreattore Cellbag è avvolto da due confezioni protettive di plastica. Per i bioreattori Cellbag dotati di sensori ottici ph e/o sensori D, la confezione interna è costituita da materiale plastico nero e serve a preservare i sensori ottici dall'esposizione alla luce prima dell'uso. La confezione esterna e tutto ciò che contiene sono stati irradiati con raggi gamma. Il bioreattore Cellbag consiste di una pellicola multistrato progettata per conferire resistenza, flessibilità, essere un'eccellente barriera per i gas e un materiale di contatto inerte. Lo strato a contatto con la fase liquida è composto da etilen vinil acetato (EVA) mentre, quello più esterno, consiste di polietilene lineare a bassa densità (LLDPE). I materiali compositi brevettati provvedono alle caratteristiche di resistenza e bassa permeabilità ai gas. Tutte i componenti di contatto sono conformi alle specifiche USP di Classe VI e tutti i bioreattori Cellbag sono testati per lotti rispetto all'endotossina. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 43

44 3 Descrizione del sistema 3.3 Bioreattore Cellbag La massima pressione d'esercizio è di 0,1 bar (1,5 psig), la pressione d'esercizio consigliata è di 5-7,5 mbar (2-3 pollici d'acqua). AVVIS La confezione protettiva interna di colore nero viene rimossa immediatamente prima dell'uso. Deve essere aperta soltanto dopo essere entrati nella zona di produzione. Formati delle Cellbag Le seguenti dimensioni di bioreattore Cellbag sono disponibili per WAVE Bioreactor 20/50: 2 l 10 l 20 l 22 l 50 l Guida alla selezione Per i volumi della coltura di celle 0,1-1 l 0,5-5 l 1-10 l 5-25 l Utilizzare la Cellbag da 2 l 10 l 20 l o 22 l 50 l 44 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

45 3 Descrizione del sistema 3.3 Bioreattore Cellbag Componenti della Cellbag La sacca di coltura celle viene fornita in molte configurazioni diverse, con assortimenti standard e personalizzati. La presente illustrazione mostra un esempio di bioreattore Cellbag con i seguenti componenti irradiati con raggi gamma: Parte 1 2 Componente Asta della Cellbag Filtro dell'aria in uscita Valvola di controllo della pressione Descrizione Fissa la sacca al vassoio di oscillazione. Il filtro idrofobico in uscita rimuove il particolato presente nell'aria emessa dal bioreattore. Questo filtro è tarato per rimuovere il particolato presente nell'aria di dimensioni di 0,2 micron o maggiori, e contemporaneamente trattenere il contenuto del bioreattore. La composizione della membrana del filtro permette ai gas umidi e al condensato di passare senza compromettere la funzionalità del filtro stesso. La valvola di controllo della pressione è collegata al filtro dell'aria in uscita. Lo scopo della valvola di controllo della pressione è quello di mantenere una pressione costante nel bioreattore indipendentemente dalla portata d'aria in ingresso. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 45

46 3 Descrizione del sistema 3.3 Bioreattore Cellbag Parte Non mostrata Non mostrata Non mostrata Componente Filtro dell'aria in entrata Porte Luer Porta di campionamento CLAVE Porta di aggiunta Porta di aggiunta/raccolta Collegamento ReadyMate Porta phpt Porta DPT II Descrizione Il filtro idrofobico in ingresso rimuove il particolato presente nell'aria prima che questa venga introdotta nel bioreattore Cellbag. I filtri utilizzati sono tarati per rimuovere particolato presente nell'aria di dimensioni di 0,2 micron o maggiori. Sul bioreattore Cellbag possono essere presenti delle porte Luer aggiuntive. Questa porta è dotata di raccordo Luer auto-sigillante che consente il facile prelievo asettico dei campioni con una siringa priva di ago fornita di connessione Luer. Questa porta è dotata di connettore Luer rapido. Il collegamento e lo scollegamento devono essere effettuati secondo corrette procedure asettiche. In alternativa, si può utilizzare un dispositivo di termoretrazione per tubi. Questa porta è dotata di connettore MPC rapido. Il collegamento e lo scollegamento devono essere effettuati secondo corrette procedure asettiche. In alternativa, si può utilizzare un dispositivo di termoretrazione per tubi. I bioreattori Cellbag possono essere equipaggiati di connettori asettici ReadyMate per il collegamento al raccordo del fluido ad alta capacità. Le sacche configurate con phpt sono dotate di una porta con sensore ph ottico sul fondo. Le sacche configurate con DPT II sono dotate di una porta con sensore D ottico sul fondo della sacca. 46 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

47 3 Descrizione del sistema 3.3 Bioreattore Cellbag Parte Non mostrata Non mostrata Componente Collegamento delle tubazioni pzioni Descrizione Per facilitare connessioni sterili tramite dispositivi standard di termoretrazione per tubi, viene fornita una tubazione di prolunga. Questa tubazione termina con un connettore Luer standard che permette connessioni anche sotto cappa a flusso laminare. Le sacche di coltura cellulare personalizzate, con modifica delle porte e dei relativi componenti (tubazioni, connettori, ecc.), possono essere realizzate per applicazioni specifiche all'interno dello spazio di progetto della Cellbag. Nota: I bioreattori Cellbag dotati di filtri interni di ritenzione celle per le colture in perfusione sono disponibili in diversi formati. Procedure adatte dopo il ciclo di funzionamento Il sistema richiede un tempo di preparazione minimo. Il bioreattore Cellbag è di per sé un comodo contenitore di raccolta. Il lotto completato può essere rimosso consentendo di collocare un nuovo bioreattore Cellbag sullo strumento. Nell'eventualità di sostituzione o di contaminazione del prodotto, i bioreattori convenzionali richiedono lunghe procedure di pulizia e decontaminazione convalidate. Queste possono richiedere diverse settimane durante le quali il bioreattore non può essere utilizzato. Di contro, il sistema WAVE Bioreactor richiede minimi tempi di fermo. Inoltre, offre garanzie contro il pericolo di contaminazioni incrociate o trasferimento del prodotto. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 47

48 3 Descrizione del sistema 3.4 WAVEPD II 3.4 WAVEPD II Introduzione Il regolatore WAVEPD II integra la strumentazione di supporto associata a WAVE Bioreactor 20/50. In base alla configurazione, saranno presenti tutti o alcuni dei seguenti controlli: ph, ossigeno disciolto, portata aria e miscelazione dei gas di C 2 e 2. Molti parametri del WAVE Bioreactor possono essere controllati in remoto mediante il pannello a sfioramento WAVEPD II. Gli strumenti Dual WAVE Bioreactor 20/50 sono in grado di gestire due bioreattori Cellbag, come indicato in Vassoio di oscillazione e bioreattore Cellbag, a pagina 54. È necessario un WAVEPD II per ciascuna Cellbag. Illustrazioni di WAVEPD II L'illustrazione seguente mostra l'ubicazione dei componenti principali nella parte anteriore di WAVEPD II WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

49 3 Descrizione del sistema 3.4 WAVEPD II Parte Funzione Pannello a sfioramento Connettore PHPT Connettore C2 IN Connettore 2 IN Connettore AIR IN Connettore MIX UT Connettore DPT II L'illustrazione seguente mostra l'ubicazione dei componenti principali nella parte posteriore di WAVEPD II Parte Funzione Maniglia di sollevamento Ventilazione Connettori per strumenti, pompe e computer Connettore di alimentazione Interruttore di alimentazione WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 49

50 3 Descrizione del sistema 3.4 WAVEPD II Moduli disponibili per WAVEPD II I seguenti moduli possono essere integrati in WAVEPD II mediante apposita configurazione. I moduli vengono preinstallati al momento dell'acquisto. Modulo Regolatore ph Regolatore ossigeno disciolto (D) Regolatore portata aria Regolatore C 2 Regolatore 2 Descrizione Consente la misurazione on-line del ph nel bioreattore Cellbag mediante il sensore ottico e il controllo di feedback con aggiunte di acido/base. Il regolatore può utilizzare delle unità WAVE PUMP20 o le pompe fornite dall'utente. Inoltre, è in grado di controllare il ph attraverso i cambiamenti nella composizione della C 2 nel gas in ingresso, nel caso in cui sia installato un regolatore di C 2 in WAVEPD II. Consente la misurazione on-line dell'ossigeno disciolto nel bioreattore Cellbag mediante controllo e sensore ottico attraverso i cambiamenti della velocità di oscillazione. Inoltre, è in grado di controllare l'ossigeno disciolto attraverso i cambiamenti nella composizione dell' 2 nel gas in ingresso, nel caso in cui sia installato un regolatore di 2 in WAVEPD II. Controlla il flusso d'aria attraverso il bioreattore Cellbag mediante un sensore di flusso a massa termica e una valvola di controllo del flusso. Misura e controlla la concentrazione della C 2 nel gas di ingresso al bioreattore Cellbag mediante un sensore interno a infrarossi non dispersivo (NDIR) e un regolatore interno. Misura e controlla la concentrazione dell' 2 nel gas di ingresso al bioreattore Cellbag mediante un sensore interno all'ossido di zirconio e un regolatore interno. Nota: L'alimentazione dei gas di C 2 o 2 deve essere pura in quanto le impurità potrebbero avere degli effetti sulla coltura. Funzioni principali Design compatto caratterizzato da tutti i principali controlli dei parametri L'ampio pannello a sfioramento a colori facilita l'accesso all'utente 50 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

51 3 Descrizione del sistema 3.4 WAVEPD II Si integra con WAVE Bioreactor 20/50 per costituire un'unica unità dotata di funzioni di controllo Uscita per l'acquisizione dei dati, ad es. per UNICRN DAQ attraverso un convertitore Ethernet Allarmi con indicatore di data e ora memorizzati nella memoria non volatile per una facile risoluzione dei problemi Controllo integrato per le pompe acido/base esterne opzionali Contatti allarme per eventuali registratori con diagramma degli allarmi e sistemi di monitoraggio remoto WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 51

52 3 Descrizione del sistema 3.5 Configurazione del sistema WAVE Bioreactor 3.5 Configurazione del sistema WAVE Bioreactor Introduzione I sistemi WAVE Bioreactor offrono opportunità di coltivazione cellulare scalabile con il controllo dei parametri chiave. Sono disponibili varie configurazioni diverse che consentono una flessibilità ottimale e il controllo di parte o tutti i parametri chiave. Il controllo dei parametri può essere realizzato come segue: Moduli integrati nello strumento WAVE Bioreactor Moduli integrati nel regolatore WAVEPD II Strumenti autonomi separati Metodi alternativi per il controllo del ph e requisiti hardware Nel mezzo di crescita, il valore del ph può essere controllato in diversi modi secondo l'hardware installato nello strumento WAVE Bioreactor. Il ph può essere controllato per aggiunta di acido o base attraverso le pompe, controllando la concentrazione di C 2 oppure combinando le due modalità. La tabella che segue descrive i requisiti hardware per la gestione dei vari metodi di controllo del ph. Strategia per il controllo del ph Controllo indiretto attraverso la concentrazione di C 2 Requisiti dello strumento WAVE Bioreactor con modulo integrato per il controllo della C 2, o WAVEPD II con modulo di controllo della C 2, o C2MIX20 (strumento autonomo), o C2MIX20-R (strumento autonomo) Controllo di feedback con aggiunta di base, per aumentare il valore di ph, e di acido, per diminuirlo WAVEPD II con modulo di controllo phpt e PUMP20, e un bioreattore Cellbag configurato con phpt. Nota: Saranno necessarie due PUMP20 se è richiesta l'aggiunta sia dell'acido che della base. 52 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

53 3 Descrizione del sistema 3.5 Configurazione del sistema WAVE Bioreactor Strategia per il controllo del ph Controllo di feedback con aggiunta di base per aumentare il valore di ph e controllo della concentrazione di C 2 per diminuirlo. Requisiti dello strumento WAVEPD II con phpt e moduli di controllo della C 2, PUMP20 e un bioreattore Cellbag configurato con phpt. Questo manuale è incentrato sul controllo dei parametri utilizzando WAVEPD II. Per ulteriori informazioni circa i moduli autonomi opzionali, vi invitiamo a fare riferimento a Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/50 o a Controlli opzionali Utilizzando la configurazione o la strumentazione opzionale si possono controllare diversi parametri, vedere la tabella indicata di seguito. Per ulteriori informazioni circa gli strumenti autonomi, vedere Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/50 o oppure contattare GE Healthcare. Funzione Regolatore ossigeno disciolto Regolatore di C2/aria Regolatore di C2/aria (modello a rotametro) Regolatore di 2/aria Regolatore di 2/aria (modello a rotametro) Pompa peristaltica alimentazione/raccolta o acido/base Regolatore di ph (in combinazione con PUMP20) Nome prodotto DPT II C2MIX20 C2MIX20-R 2MIX20 2MIX20-R PUMP20 phpt Posizione WAVEPD II Strumento WAVEPD II o WAVE Bioreactor o strumento autonomo strumento autonomo Strumento WAVEPD II o WAVE Bioreactor o strumento autonomo strumento autonomo strumento autonomo WAVEPD II WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 53

54 3 Descrizione del sistema 3.5 Configurazione del sistema WAVE Bioreactor Funzione Regolatore di peso (può essere utilizzato per la perfusione) Nome prodotto LADCELL20 Posizione Strumento WAVE Bioreactor Nota: Nota: La LADCELL20 è pre-installata se WAVE Bioreactor 20/50 viene ordinato con l'opzione cella di carico. La LADCELL20 non può essere ordinata separatamente UNICRN DAQ 1.0 è compatibile con WAVEPD II e la LADCELL20. Vassoio di oscillazione e bioreattore Cellbag I bioreattori Cellbag di vari formati risultano compatibili con gli strumenti WAVE Bioreactor 20/50; i formati specifici dipendono dal KIT dell'unità di oscillazione in uso. Ciò consente lo scale-up senza cambiare lo strumento. Le versioni dello strumento WAVE Bioreactor 20/50 appositamente configurate abilitano il funzionamento doppio che prevede l'utilizzo di due bioreattori Cellbag che condividono il medesimo vassoio di oscillazione. Nella versione doppia, i pannelli di sinistra e di destra sono entrambi muniti di connettori per i sensori dell'aria e della temperatura. Con il WAVE Bioreactor 20/50 possono essere utilizzati i kit vassoio di oscillazione e le sacche indicate di seguito: WAVE Bioreactor WAVE Bioreactor 20/50- funzionamento singolo WAVE Bioreactor 20/50- funzionamento singolo WAVE Bioreactor 20/50- funzionamento doppio WAVE Bioreactor 20/50- funzionamento doppio Kit del vassoio di oscillazione KIT20EHT KIT50EHT KIT20EHTD KIT50EHTD Formato del bioreattore Cellbag 2 l 10 l 20 l 22 l 50 l 2 x 2 l 2 x 10 l 2 x 22 l 54 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

55 3 Descrizione del sistema 3.5 Configurazione del sistema WAVE Bioreactor WAVE Bioreactor WAVE Bioreactor 20/50- funzionamento singolo con kit vassoio di oscillazione doppio WAVE Bioreactor 20/50- funzionamento singolo con kit vassoio di oscillazione doppio Kit del vassoio di oscillazione KIT20EHTD KIT50EHTD Formato del bioreattore Cellbag 20 l 50 l Suggerimento: È possibile disporre una sola sacca sul lato sinistro del kit vassoio di oscillazione doppio. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 55

56 4 Installazione 4 Installazione Informazioni sul capitolo Questo capitolo fornisce informazioni relative all'installazione di WAVE Bioreactor 20/50, WAVEPD II e UNICRN DAQ 1.0. Per ulteriori informazioni sull'installazione, fare riferimento alla documentazione d'uso elencata insezione 1.4 Documentazione per l'utente WAVE Bioreactor 20/50, a pagina 15. In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni: Sezione 4.1 Requisiti di stabilimento 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/ Trasporto 4.4 Installazione di WAVEPD II 4.5 Collegamento a UNICRN DAQ 1.0 Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

57 4 Installazione 4.1 Requisiti di stabilimento 4.1 Requisiti di stabilimento Precauzioni AVVERTENZA Se l'azoto è collegato alla presa AIR IN, potrebbe verificarsi una perdita di azoto all'interno di WAVEPD II durante l'uso normale, anche se non è presente alcun flusso di gas verso lo strumento. Accertarsi che la stanza sia ben ventilata e che l'erogazione di azoto sia chiusa quando non è necessaria. AVVERTENZA Per prevenire eventuali perdite di gas dallo strumento autonomo C2MIX20, interrompere sempre l'erogazione della C 2 quando non è in uso. Nel corso di colture che richiedano l'uso di C2MIX20, assicurarsi che la stanza sia ben ventilata. AVVERTENZA Per prevenire eventuali perdite di gas dallo strumento autonomo 2MIX20, interrompere sempre l'erogazione della C 2 quando non è in uso. Nel corso di colture che richiedano l'uso di 2MIX20, assicurarsi che la stanza sia ben ventilata. ATTENZINE Accertarsi che il gas collegato all'apparecchiatura sia quello corretto. Adeguata qualità e pressione del gas immesso evitano situazioni pericolose o il rischio di effetti indesiderati sulla coltura. Alimentazione richiesta Parametro Energia elettrica Requisito Da da 110 a 120 V ~ o da 220 a 240 V ~, 50/60 Hz WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 57

58 4 Installazione 4.1 Requisiti di stabilimento Ambiente di installazione Parametro Temperatura ambiente, WAVE Bioreactor 20/50 Temperatura ambiente, WAVEPD II Umidità, WAVE Bioreactor 20/50 Umidità, WAVEPD II Requisito da 4 C a 40 C da 4 C a 40 C < 95%, senza condensa Da 10% a 90%, senza condensa Nota: Per un soddisfacente controllo della temperatura, la temperatura ambiente deve essere di almeno 5 C inferiore a quella di crescita della coltura. Requisiti di posizionamento Il banco deve essere stabile e capace di sopportare le vibrazioni create dall'oscillazione. Il banco deve essere in grado di sopportare il peso totale dello strumento, WAVEPD II (se utilizzato), e del bioreattore Cellbag pieno. Vedere Sezione A.1 Specifiche, a pagina 269 per le specifiche dello strumento. Se sono installati altri strumenti opzionali, occorrerà valutare anche il loro peso, vedere le specifiche a parte. Per motivi di sicurezza e per assicurare facilità d'accesso, è opportuno lasciare almeno 25 cm liberi sui lati di WAVE Bioreactor e, per un'adeguata ventilazione, almeno 10 cm anteriormente e posteriormente. Non disporre materiali soffici sotto il WAVE Bioreactor o WAVEPD II. Ciò potrebbe ostruire la presa di ventilazione. AVVIS Quando si utilizzano i bioreattori Cellbag dotati di sensori ottici integrati, come i sensori phpt o DPT II, il WAVE Bioreactor deve essere posizionato lontano da fonti di luce intensa, come quella diretta del sole. Una luce intensa può danneggiare i sensori ottici. 58 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

59 4 Installazione 4.1 Requisiti di stabilimento Utility opzionali Parametro C 2, 100% 2 Alimentazione presa AIR IN Requisito 1,5 slpm a 0,7-1,0 bar (da 10 a 15 psig) Mandata minima 0,2 l/min. 5,0 slpm a 0,7-1,0 bar (da 10 a 15 psig) Mandata minima 0,2 l/min. Da 0,1 a 0,2 bar (da 1 a 3 psig) Suggerimento: Suggerimento: Può essere usata aria ambiente o di processo. Tuttavia, assicurarsi che la pressione massima indicata sopra non siano superata. è possibile produrre una miscela d'ossigeno con concentrazioni inferiori al 21% (aria), collegando l'azoto alla porta AIR IN (< 0,2 bar o 3 psig) di WAVEPD II. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 59

60 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/ Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Disimballaggio Disimballare l'attrezzatura e posizionarla su una superficie stabile. Prima di iniziare l'installazione, controllare se l'attrezzatura presenta danni visibili. Documentare attentamente gli eventuali danni e contattare il proprio rappresentante GE Healthcare. WAVE Bioreactor 20/50 pannello posteriore La figura seguente mostra il pannello posteriore di WAVE Bioreactor 20/ Parte Funzione DATAPRT1 e 2 Porta FEED PUMP Porta HARVEST PUMP Porta ALARM ANALG UT Porta LAD CELL Porte FILTER HEATER Porta HEATER Porta di alimentazione Interruttore di alimentazione Portafusibili 60 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

61 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 WAVE Bioreactor 20/50 pannello laterale La figura seguente mostra il pannello laterale di WAVE Bioreactor 20/50. Nota: Nelle versioni doppie dello strumento, vengono fornite varie porte su un pannello laterale sulla destra. Parte Funzione Porta Temp Porta Air ut Porta Air In WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 61

62 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Installazione della piastra di oscillazione Per installare la piastra di oscillazione seguire le istruzioni indicate di seguito. AVVERTENZA Scollegamento dell'alimentazione. Scollegare sempre l'alimentazione dallo strumento prima di eseguire qualsiasi intervento o procedura di manutenzione. Passo 1 perazione Individuare i quattro fori di fissaggio sullo strumento. 2 Collocare la piastra di oscillazione sul bioreattore e centrare i quattro fori di fissaggio. Con la parte anteriore del bioreattore di fronte, assicurarsi che il varco destinato ai cavi si trovi a sinistra. 3 Fissare la piastra di oscillazione avvitando le quattro viti di fissaggio nelle loro sedi con una chiave Allen. 62 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

63 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Kit del vassoio di oscillazione KIT20EHT(D) o KIT50EHT(D) è utilizzato con lo strumento WAVE Bioreactor 20/50. Ciascun kit include l'hardware necessario alla corretta installazione del bioreattore Cellbag e la protezione del riscaldatore che serve a controllare la temperatura d'esercizio. Nota: L'abbreviazione EH presente nella definizione del kit, indica 'electrically heated' (riscaldato elettricamente), T indcia 'touch screen' (pannello a sfioramento) e D indica 'Dual' (funzionamento doppio). Installazione del vassoio di oscillazione e del sistema di controllo della temperatura Per impostare il sistema di controllo della temperatura, attenersi alle istruzioni indicate di seguito. Queste istruzioni riguardano anche l'installazione del vassoio di oscillazione. AVVERTENZA Scollegamento dell'alimentazione. Scollegare sempre l'alimentazione dallo strumento prima di eseguire qualsiasi intervento o procedura di manutenzione. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 63

64 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Passo 1 perazione Collocare la protezione del riscaldatore sulla piastra di oscillazione. Assicurarsi che la protezione del riscaldatore sia orientata con la superficie bianca rivolta in alto e che il connettore dell'alimentazione elettrica sia inserito nella presa collocata sul lato sinistro della piastra di oscillazione. 2 Collegare il cavo blu del riscaldatore alla porta contrassegnata con l'indicazione HEATER sul pannello posteriore. 64 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

65 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Passo 3 perazione Disporre il vassoio di oscillazione in acciaio inox sopra alla protezione del riscaldatore. 4 5 Far scorrere il vassoio di oscillazione verso il retro e accertarsi che le linguette siano agganciate. Spingere in basso il bordo anteriore e, contemporaneamente, premere sul dispositivo di blocco Push for release, in modo che si aggancino il fermo destro e quello sinistro. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 65

66 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Passo 6 perazione Accertarsi che il sensore di temperatura SRTDX sia correttamente posizionato nel dispositivo di fissaggio SRTDX. 7 Collegare con cautela il cavo giallo del sensore di temperatura alla porta Temp sul lato sinistro del vassoio di oscillazione. 8 Collegare l'altro capo del cavo alla porta del sensore di temperatura sul pannello laterale sinistro. Serrare i dadi di bloccaggio per fissare saldamente le spine. 66 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

67 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Passo 9 10 perazione Controllare che l'apposito display sulla schermata principale legga la temperatura ambiente. Per il funzionamento doppio: collegare un altro cavo giallo per il sensore di temperatura alla porta del sensore della temperatura sul lato sinistro del vassoio di oscillazione. Inserire l'altra estremità del cavo nella porta del sensore di temperatura SRTDX presente sul pannello laterale destro. Serrare i dadi di bloccaggio per fissare saldamente le spine. Cambio dei vassoi AVVERTENZA Scollegamento dell'alimentazione. Scollegare sempre l'alimentazione dallo strumento prima di eseguire qualsiasi intervento o procedura di manutenzione. Per cambiare i vassoi di oscillazione: Rimuovere l'attuale vassoio dalla piastra di oscillazione premendo sui fermi Push for release e sollevando frontalmente il vassoio. Sollevare quindi l'estremità posteriore del vassoio. Collocare un nuovo vassoio come descritto sopra. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 67

68 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Collegamento dell'alimentazione elettrica Per collegare l'alimentazione elettrica al bioreattore, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo 1 perazione Collegare il cavo d'alimentazione in dotazione all'ingresso dell'alimentazione elettrica sul pannello posteriore e a una presa di corrente con collegamento a terra. 2 Portare l'interruttore di alimentazione sul pannello posteriore in posizione I per accendere lo strumento. Risultato: il pannello a sfioramento si accende e lo strumento si avvia. Lo strumento si inclina, portandosi nella posizione iniziale e, una volta terminata l'inizializzazione, viene visualizzata la schermata principale. ATTENZINE Verificare che attorno allo strumento ci sia spazio sufficiente per consentire il movimento oscillatorio. 68 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

69 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Impostazione del sistema di aerazione del bioreattore I bioreattori Cellbag necessitano di aerazione per restare gonfi e per disporre del gas necessario all'ossigenazione e al controllo del ph. Il gas immesso può essere l'aria ambiente, l'aria prodotta da una stufa termostatica o una speciale miscela di gas in base alla linea di celle e al sistema tampone impiegati. Lo strumento WAVE Bioreactor 20/50 possiede una pompa aria interna (due nella versione doppia) che serve per aerare i bioreattori Cellbag. Per informazioni relative all'impostazione del sistema di aerazione, vedere Sezione 8.4 Collegamento dell'aerazione, a pagina 197. Verifica della funzione di oscillazione Per verificare il corretto funzionamento dell'attività di oscillazione, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo 1 2 perazione Accendere il WAVE Bioreactor e attendere l'inizializzazione del sistema. Sulla schermata MAIN, premere il pulsante RCKER. Risultato: viene visualizzata la schermata di controllo RCKER, vedere Sezione Controllo oscillazione, a pagina Premere la casella del punto di regolazione SP della velocità e, utilizzando il tastierino d'inserimento dati, immettere 20,0 come nuovo punto di regolazione. Premere per tornare alla schermata di controllo RCKER. Premere il pulsante RCK. Risultato: Il WAVE Bioreactor dovrebbe iniziare a oscillare e il pulsante RCK deve essere sostituito dal pulsante STP. Assicurarsi che l'oscillazione funzioni alla velocità corretta. Effettuare della prove con differenti velocità di oscillazione. Mentre il vassoio di oscillazione è in movimento, visualizzare la schermata di controllo RCKER premendo il pulsante RCKER. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 69

70 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Passo perazione Modificare l'angolo di oscillazione premendo la casella nera angle e inserendo un nuovo valore. Assicurarsi che l'angolo di oscillazione sia cambiato. Se la velocità o l'angolo di oscillazione non sono corretti, fare riferimento a Sezione 10.1 Problemi generali, a pagina 250. Arrestare l'oscillazione premendo il pulsante STP e tornare al menu MAIN utilizzando il pulsante BACK. Verifica della funzione di controllo della temperatura Per verificare che il sistema di controllo della temperatura funzioni correttamente, seguire le istruzioni seguenti. Passo perazione Accendere il WAVE Bioreactor e attendere l'inizializzazione del sistema. Assicurarsi che il display della temperatura sulla schermata MAIN legga la temperatura ambiente. Sulla schermata MAIN, premere il pulsante HEATER. Risultato: viene visualizzata la schermata di controllo HEATER, vedere Sezione Controllo temperatura, a pagina 100. Nota: Per il funzionamento doppio "Dual", devono essere verificati entrambi i riscaldatori concordemente alle presenti istruzioni. 4 Premere la casella SP della temperatura e, utilizzando il tastierino d'inserimento dati, immettere 40,0 come nuovo valore. Premere per tornare alla schermata di controllo HEATER. 70 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

71 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Passo 5 perazione Premere il pulsante HEAT. La misura del grafico a barre deve incrementare indicando che i riscaldatori sono in funzione e il vassoio di oscillazione deve iniziare a riscaldarsi. Nota: Perché abbia inizio il riscaldamento l'unità di oscillazione deve essere in movimento. Il riscaldamento non sarà attivato se l'unità di oscillazione è ferma, ciò per scongiurare surriscaldamenti locali nel bioreattore Cellbag. ATTENZINE Per evitare surriscaldamenti, non attivare il riscaldatore, se non per pochi minuti, senza un bioreattore Cellbag pieno nel vassoio di oscillazione Verificare il dispositivo di bloccaggio del riscaldatore disinserendo il cavo d'alimentazione elettrica della protezione del riscaldatore. Questo dovrebbe generare un allarme HEATER FAULT. Reinserire il cavo d'alimentazione elettrica della protezione del riscaldatore. Il riscaldatore deve ritornare operativo. Verificare il sensore della temperatura scollegando il cavo del sensore di temperatura SRTDX. Il riscaldatore deve passare alla posizione FF e deve attivarsi un allarme. Ricollegare il cavo del sensore di temperatura SRTDX. In pochi secondi dovrebbe di nuovo essere perfettamente operativo. Se il sistema di controllo della temperatura non funziona correttamente, fare riferimento a Sezione 10.1 Problemi generali, a pagina 250. Spegnere li riscaldatori e tornare alla schermata MAIN premendo sul pulsante BACK. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 71

72 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Verifica del sistema di aerazione Per verificare il corretto funzionamento del sistema di aerazione, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo 1 2 perazione Collegare la tubazione dell'aria alla porta Air ut sul pannello laterale del WAVE Bioreactor. Accendere il WAVE Bioreactor e attendere l'inizializzazione del sistema. Sulla schermata MAIN, premere il pulsante AIR. Risultato: viene visualizzata la schermata di controllo AIRPUMP, vedere Sezione Controllo aerazione, a pagina 103. Nota: Per il funzionamento Dual, devono essere verificate le pompe aria sinistra e destra, concordemente alle presenti istruzioni Premere la casella del punto di regolazione SP dell'aria e, utilizzando il tastierino d'inserimento dati, immettere 0,50 come nuovo punto di regolazione. Press per tornare alla schermata di controllo AIRPUMP. Premere il pulsante N. La pompa dell'aria deve attivarsi e la portata d'aria deve aumentare, stabilizzandosi al punto di regolazione. Verificare che l'allarme di sovrapressione funzioni, provando a stringere con le dita la tubazione Air ut. Risultato: dopo circa 30 secondi deve attivarsi l'allarme di sovrapressione e la pompa dell'aria deve arrestarsi automaticamente. Spegnere la pompa dell'aria premendo il pulsante FF. Se la pompa dell'aria non funziona correttamente, fare riferimento a Sezione 10.1 Problemi generali, a pagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

73 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Impostazione dell'ora Tutti i dati relativi agli allarmi vengono contrassegnati da data e ora correnti. È pertanto importante impostare l'orologio sull'ora locale. Per regolare l'orologio in tempo reale, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo perazione Sulla schermata principale, premere MENU. Sulla schermata MENU, premere SETUP. Inserire la password Sulla schermata SETUP, premere SET CLK. Modificare data e ora in base alle necessità. Premere per confermare ciascun valore inserito. Premere SET per accettare la nuova data e ora, oppure BACK per interrompere l'operazione. Risultato: viene visualizzata la schermata principale. Sensore opzionale del peso La cella di carico opzionale è montata sotto al vassoio di oscillazione e rileva il peso complessivo del kit vassoio di oscillazione più il bioreattore Cellbag. Può essere utilizzata per le misurazioni di peso, riempimento/raccolta e controllo perfusione. I jack collocati sul pannello posteriore dello strumento WAVE Bioreactor 20/50 possono essere utilizzati per controllare le pompe di alimentazione e raccolta. Impostazione del sensore opzionale del peso Se la cella di carico è stata ordinata contestualmente allo strumento WAVE Bioreactor 20/50, dovrebbe essere già installata. Per collegare i sensori del peso allo strumento e verificarne il funzionamento, seguire le istruzioni indicate di seguito: Passo 1 2 perazione Collegare il cavo giallo a 4 pin proveniente dalla LCELL20/50EHT al jack LAD CELL collocato sul retro dello strumento WAVE Bioreactor 20/50. Nella schermata principale, premere WEIGHT. Risultato: vien visualizzata la schermata WEIGHT. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 73

74 4 Installazione 4.2 Installazione di WAVE Bioreactor 20/50 Passo 3 4 perazione Esercitare una pressione con le mani sul vassoio di oscillazione e verificare che il valore visualizzato del peso aumenti. Se la cella di carico non funziona correttamente, vedere Sezione10.2 Problemi specifici del modulo, a pagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

75 4 Installazione 4.3 Trasporto 4.3 Trasporto Spostamento WAVE Bioreactor 20/50 Per spostare il WAVE Bioreactor 20/50 seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo perazione Scollegare lo strumento dall'alimentazione. Rimuovere il vassoio di oscillazione. Quando si sposta lo strumento non ci devono essere liquidi appoggiati sopra. Sollevare lo strumento utilizzando le apposite maniglie di sollevamento. Lo strumento deve essere spostato da due persone. Se lo strumento deve essere installato in un ambiente nuovo, fare riferimento alle istruzioni di sicurezza e alle procedure di installazione indicate di seguito. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 75

76 4 Installazione 4.4 Installazione di WAVEPD II 4.4 Installazione di WAVEPD II Introduzione La presente sezione descrive l'installazione del WAVEPD II nell'uso con WAVE Bioreactor. Nota: WAVEPD II deve essere installato fisicamente accanto a WAVE Bioreactor o il più vicino possibile. Un'eccessiva lunghezza della tubazione di collegamento attiverà gli allarmi di sovrapressione di WAVEPD II. Per informazioni circa l'installazione e il collegamento degli strumenti autonomi da usare con WAVE Bioreactor 20/50, vedere Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/50. AVVERTENZA Scollegamento dell'alimentazione. Scollegare sempre l'alimentazione prima di collegare lo strumento WAVE Bioreactor o WAVEPD II a qualsiasi altro dispositivo. AVVIS Non collocare WAVEPD II in prossimità del registro di riscaldamento, del condotto dell'aria o alla luce diretta del sole dal momento che le funzioni di controllo potrebbero esserne influenzate. Disimballaggio Disimballare l'attrezzatura e posizionarla su una superficie stabile. Prima di iniziare l'installazione, controllare se l'attrezzatura presenta danni visibili. Documentare attentamente gli eventuali danni e contattare il proprio rappresentante GE Healthcare. 76 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

77 4 Installazione 4.4 Installazione di WAVEPD II Panello posteriore WAVEPD II Parte Funzione Connettore BASE PUMP Connettore ACID PUMP Connettore CNVERTER Connettore WAVE 20/50 Connettore AUX Connettore PWER Interruttore di alimentazione Connettore ALARM/ANALG AVVIS Il connettore AUX è destinato esclusivamente all'uso da parte del personale di assistenza di GE Healthcare. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 77

78 4 Installazione 4.4 Installazione di WAVEPD II Collegamento dell'alimentazione elettrica Per collegare WAVEPD II all'alimentazione elettrica, seguire le istruzioni indicate qui di seguito. Passo 1 2 perazione Collegare WAVEPD II a una presa di corrente collegata a terra. Il connettore di alimentazione si trova sul retro dello strumento. Inserire l'alimentazione a WAVEPD II portando l'interruttore di alimentazione situato sul pannello posteriore in posizione I. Risultato: viene visualizzata la schermata MAIN MENU. Fintantoché WAVE Bioreactor è collegato a WAVEPD II viene visualizzato un messaggio d'errore. AVVIS Prima di collegare un'unità esterna, l'interruttore principale del WAVEPD II deve essere disattivato. Collegamento a WAVE Bioreactor 20/50 AVVIS Una volta che WAVEPD II è stato collegato a WAVE Bioreactor 20/50, non collegare nessun altro strumento alla seconda porta dati dello strumento WAVE Bioreactor 20/50, dal momento che ciò violerebbe il protocollo di comunicazione. 78 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

79 4 Installazione 4.4 Installazione di WAVEPD II Per collegare lo strumento WAVEPD II a un WAVE Bioreactor, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo 1 perazione Collegare il cavo di collegamento WAVEPD II- WAVE Bioreactor alla porta contrassegnata con l'indicazione WAVE 20/50 che si trova sul pannello posteriore diwavepd II. La seguente illustrazione mostra il pannello posteriore WAVEPD II a sinistra e il pannello posteriore dell'unità di base WAVE Bioreactor a destra: 2 3 Collegare l'altra estremità del cavo di collegamento al connettore contrassegnato con l'indicazione DATAPRT 1 situato sul pannello posteriore dello strumento WAVE Bioreactor. Sul pannello a sfioramento WAVEPD II, premere SETUP nella schermata MAIN MENU. Risultato: viene visualizzata la schermata della password. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 79

80 4 Installazione 4.4 Installazione di WAVEPD II Passo 4 perazione Per entrare nella schermata SETUP: Premere il pulsante **** e inserire la password tramite il tastierino d'immissione dati visualizzato. La password predefinita è "2050". Premere PRCEED nella successiva schermata. Risultato: viene visualizzata la schermata SETUP. 5 Sulla schermata SETUP, premere PTINS. Risultato: viene visualizzata la schermata PTINS. 80 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

81 4 Installazione 4.4 Installazione di WAVEPD II Passo 6 perazione Sulla schermata PTINS, selezionare il tipo di strumento WAVE Bioreactor: Premere ripetutamente le frecce nel campo relativo al tipo di strumento fino a visualizzare il tipo di strumento corrente Impostare l'acquisizione dati UNICRN Data Acquisition su N quando UNICRN DAQ è collegato Premere BACK Nota: Ciò è richiesto per operare in modalità remota, vedere Comunicazione durante il funzionamento doppio, a pagina Spegnere e riaccendere WAVEPD II per inizializzare la comunicazione con il bioreattore collegato. Risultato: dopo 20 secondi verrà visualizzata la schermata SYSTEM INF. Viene quindi visualizzata la schermata MAIN MENU con i dati dello strumento WAVE Bioreactor 20/50 collegato. 8 Se la comunicazione fallisce, appare un messaggio Communication with WAVE Bioreactor failed sulla schermata MAIN MENU. Verificare che il cavo tra WAVEPD II e WAVE Bioreactor 20/50 sia correttamente collegato. Controllare che l'energia elettrica di (WAVE Bioreactor 20/50) sia attiva. WAVEPD II tenterà automaticamente di ristabilire la comunicazione. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 81

82 4 Installazione 4.4 Installazione di WAVEPD II Comunicazione durante il funzionamento doppio È necessario un WAVEPD II per ciascun bioreattore Cellbag. Pertanto, per funzionamento doppio, sono necessari due WAVEPD II per il singolo controllo di ph e/o D. WAVE Bioreactor 20/50 è dunque controllato dal WAVEPD II collegato al bioreattore Cellbag sinistro. WAVEPD II collegato al bioreattore Cellbag destro, deve avere il tipo di strumento impostato su NNE. Collegamento dell'aerazione Vedere Sezione 8.4 Collegamento dell'aerazione, a pagina 197. Collegamento delle pompe acido/base AVVERTENZA Scollegamento dell'alimentazione. Scollegare sempre l'alimentazione prima di collegare lo strumento WAVE Bioreactor o WAVEPD II a qualsiasi altro dispositivo. Due connettori DB9 per il collegamento delle pompe acido e base PUMP20 sono previsti sul pannello posteriore di WAVEPD II. Se è richiesta la regolazione del ph con acido o base, collegare le pompe come descritto nella tabella indicata di seguito. Usare i cavi forniti in dotazione con i moduli pompa. Collegare... pompa acido pompa base al connettore con l'indicazione... ACID PUMP BASE PUMP Collegamento delle soluzioni acido/base Vedere Sezione 8.3 Montaggio del sistema, a pagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

83 4 Installazione 4.4 Installazione di WAVEPD II Collegamento al monitoraggio opzionale degli allarme WAVEPD II mantiene un registro allarmi, descritto in Sezione 6.4 Allarmi, a pagina 162. WAVEPD II può anche essere collegato ad un sistema di monitoraggio esterno che funzioni da allerta in caso si verifichi una condizione d'allarme. Collegare l'allarme opzionale al contatto secco ALARM/ANALG sul pannello posteriore. Questo contatto cambierà il proprio stato NA (normalmente aperto) e NC (normalmente chiuso) qualora si verifichi un allarme o manchi l'energia elettrica al WAVEPD II. Il collegamento dei jack è fornito in appendice. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 83

84 4 Installazione 4.5 Collegamento a UNICRN DAQ Collegamento a UNICRN DAQ 1.0 Introduzione Questa sezione fornisce una panoramica del collegamento tra UNICRN DAQ 1.0, WAVE Bioreactor 20/50 ed eventualmente WAVEPD II. Il Converter 100 deve essere collegato tra il computer che esegue UNICRN DAQ 1.0 e WAVE Bioreactor. I dati che sono trasferiti alla porta Primary del Converter 100 sono assegnati a Left nell'interfaccia utente UNICRN DAQ, mentre quelli trasferiti alla porta Secondary sono assegnati a Right. Per ulteriori informazioni su... collegamenti, indirizzi IP e reti collegamento tra il computer e il convertitore installare e configurare UNICRN DAQ 1.0 per essere utilizzato con WAVE Bioreactor 20/50 leggere... Appendice C Comunicazioni e collegamenti, a pagina 283 Converter 100 Istruzioni UNICRN DAQ User manual for WAVE Bioreactor Illustrazione della configurazione L'immagine indicata di seguito mostra un collegamento tra uno strumento WAVE Bioreactor e un computer con installato UNICRN DAQ 1.0. UNICRN DAQ 1.0 Converter 100 Primary WAVE Bioreactor 84 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

85 4 Installazione 4.5 Collegamento a UNICRN DAQ 1.0 Illustrazione della configurazione con WAVEPD II L'immagine indicata di seguito mostra un collegamento tra uno strumento WAVE Bioreactor, WAVEPD II e un computer con installato UNICRN DAQ 1.0. Quando il sistema include un regolatore WAVEPD II, UNICRN DAQ è collegato a WAVEPD II e non allo strumento WAVE Bioreactor 20/50. Funzionamento singolo UNICRN DAQ 1.0 Converter 100 Primary Funzionamento doppio WAVEPD II WAVE Bioreactor UNICRN DAQ 1.0 Converter 100 Primary Secondary WAVEPD II WAVEPD II WAVE Bioreactor È necessario un regolatore WAVEPD II per ciascun bioreattore Cellbag. Pertanto, durante il doppio funzionamento, sono utilizzati due regolatori WAVEPD II. Tuttavia, lo strumento WAVE Bioreactor 20/50 può essere collegato mediante il cavo di comunicazione soltanto a un regolatore WAVEPD II. Un regolatore WAVEPD II funziona in modalità remota per controllare lo strumento e uno dei bioreattori Cellbag. Il secondo regolatore WAVEPD II funziona in modalità locale per controllare il secondo bioreattore Cellbag. Collegamento dello strumento al convertitore Collegamento dello strumento WAVE Bioreactor al Converter 100. Se si utilizza WAVEPD II, lo strumento WAVE Bioreactor deve essere collegato a WAVEPD II (vedere Sezione 4.4 Installazione di WAVEPD II, a pagina 76) e WAVEPD II al convertitore (vedere sotto). WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 85

86 4 Installazione 4.5 Collegamento a UNICRN DAQ 1.0 Passo 1 2 perazione Collegare un cavo RJ11 (codice ) alla porta con l'etichetta DATA- PRT 1 sul pannello posteriore dello strumento WAVE Bioreactor. Collegare l'altra estremità del cavo alla porta Primary sul pannello posteriore del Converter 100. Collegamento di WAVEPD II al convertitore Collegare il regolatore WAVEPD II (regolatori in caso di funzionamento doppio) al Converter100. Passo perazione Assicurarsi che la porta di WAVEPD II, WAVE 20/50, e la porta di WAVE Bioreactor 20/50, DATAPRT 1, siano collegate in maniera adeguata, vedere Sezione 4.4 Installazione di WAVEPD II, a pagina 76. Collegare un cavo RJ11 (codice ) alla porta CNVERTER sul pannello posteriore di WAVEPD II. Collegare l'altra estremità del cavo alla porta Primary sul pannello posteriore del convertitore. In caso di funzionamento singolo, il collegamento è terminato. In caso di funzionamento doppio, passare al punto successivo. 5 Collegare un cavo RJ11 (codice ) alla porta CNVERTER sul pannello posteriore del secondo regolatore WAVEPD II. Nota: Il secondo regolatore WAVEPD II non è collegato mediante il cavo di comunicazione allo strumento WAVE Bioreactor. 6 Collegare l'altra estremità del cavo al connettore Secondary sul pannello posteriore del convertitore. Collegamento del convertitore al computer Per le istruzioni sul collegamento del convertitore al computer con installato UNICRN DAQ 1.0, fare riferimento a Converter 100 Istruzioni. 86 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

87 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor Informazioni sul capitolo Il presente capitolo descrive i sistemi di controllo incorporati nello strumento WAVE Bioreactor. Il sistema di controllo del regolatore WAVEPD II è contemplato in Capitolo 6 Sistema di controllo WAVEPD II, a pagina 123. Nota: I sistemi di controllo degli strumenti autonomi C2MIX20, 2MIX20 e PUMP20 non sono contemplati nel presente manuale. Per ulteriori informazioni, vedere Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/50. In questo capitolo Sezione 5.1 Schermata principale e funzioni generali 5.2 Controlli dei parametri 5.3 Allarmi 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 87

88 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.1 Schermata principale e funzioni generali 5.1 Schermata principale e funzioni generali Schermata principale Il sistema WAVE Bioreactor 20/50 è controllato da un pannello a sfioramento. All'avvio dello strumento WAVE Bioreactor 20/50, il pannello a sfioramento si accende automaticamente. Non è necessaria nessuna procedura di login e non esistono dei livelli utente diversi. Le funzioni disponibili sulla schermata principale del pannello a sfioramento variano in base alla configurazione del sistema. Tre esempi sono indicati di seguito: Sistema WAVE Bioreactor 20/50 a doppia opzione con un bioreattore Cellbag di grosse dimensioni. Sistema WAVE Bioreactor 20/50 a doppia opzione con due bioreattori Cellbag di piccole dimensioni. Sistema WAVE Bioreactor 20/50 a opzione singola con controllo della C 2 La schermata principale visualizza due tipi di caselle, come indicato nella seguente tabella. 88 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

89 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.1 Schermata principale e funzioni generali Tipo di casella Casella nera Casella con bordo Funzione Pulsante di funzione per i controlli dei parametri. Premere per raggiungere la corrispondente schermata di dettaglio. Valore dei parametri per il controllo sulla sinistra. Parte RCKER rpm HEATER ºC WEIGHT kg AIR lpm BAG L/R ltr C2 oppure 2 Funzione Controllo velocità di oscillazione Velocità di oscillazione reale Controllo riscaldamento Temperatura reale di una o due Cellbag Peso di controllo bioreattore Cellbag Peso reale dei bioreattori Cellbag Controllo aerazione Portata aria reale di uno o due bioreattori Cellbag Controllo del bioreattore Cellbag Dimensioni selezionate reali del bioreattore Cellbag di sinistra (L) e di destra (R) in litri (ltr) In caso di impostazioni opzionali: Controllo concentrazione di C 2 (C2), o Controllo concentrazione 2 (2) %C2 oppure %2 In caso di impostazioni opzionali: Concentrazione reale della C 2 (%C2) Concentrazione reale dell' 2 (%2) ALARM MENU Nota: Nota: Indicatore allarme Configurazione di sistema e altre funzioni In presenza di condizioni di allarme, il pulsante ALARM viene visualizzato nella parte inferiore della schermata. Se l'allarme è nuovo e non è stato riconosciuto, il pulsante ALARM lampeggia. Ciascuna funzione ha una schermata dettagliata che si apre premendo il relativo pulsante. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 89

90 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.1 Schermata principale e funzioni generali Pulsanti generali I pulsanti descritti di seguito sono disponibili nella maggior parte o in tutte le varie schermate dettagliate delle funzioni. Funzione TREND Descrizione Premere il pulsante TREND per ottenere un grafico del parametro relativo a un periodo di 10 minuti. Un esempio è indicato di seguito. ALARM BACK VedereSezione 5.3 Allarmi, a pagina 109. Premere il pulsante BACK per passare dalla schermata attuale a quella principale. Nota: Il pannello a sfioramento è dotato di una batteria per la cronologia allarmi con una durata di 10 anni. Nel raro caso in cui la batteria si stia scaricando, nell'angolo in basso a destra della schermata sarà visualizzato il simbolo della batteria con una barra. In questo caso, contattare l'assistenza di GE Healthcare. 90 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

91 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri 5.2 Controlli dei parametri Informazioni sulla sezione La presente sezione descrive i controlli dei parametri per lo strumento WAVE Bioreactor 20/50. In questa sezione Sezione Controllo oscillazione Controllo del peso Controllo perfusione Cellbag e selezione modalità singola/doppia Controllo temperatura Controllo aerazione Controllo aerazione/concentrazione di C Controllo aerazione/concentrazione dell' 2 Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 91

92 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo oscillazione Controllo oscillazione Introduzione L'oscillazione è controllata attraverso la schermata RCKER. Vengono inserite le impostazioni per la velocità e l'angolo. Le impostazioni, a prescindere dai punti di regolazione, si trovano nella schermata di SETUP, vedere Sezione 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento, a pagina 112. Istruzioni Passo 1 perazione Nella schermata principale, premere RCKER (Sezione5.1 Schermata principale e funzioni generali, a pagina 88). Risultato: viene visualizzata la schermata RCKER. L'attuale velocità di oscillazione viene mostrata nella casella rpm. 2 Impostare il punto di regolazione della velocità di oscillazione: Premere la casella SP. Inserire il punto di regolazione desiderato (da 2 a 40 giri/min) nel tastierino di inserimento dati visualizzato. Premere il tasto. 3 Impostare l'angolo di oscillazione: Premere la casella angle. Inserire il punto di regolazione desiderato (da 2 a 12 gradi) nel tastierino di inserimento dati visualizzato. Premere il tasto. 4 5 Premere RCK per avviare l'oscillazione. Verificare che lo strumento oscilli correttamente. 92 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

93 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo oscillazione Passo 6 perazione Premere STP (compare nella stessa posizione di RCK) per interrompere l'oscillazione. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 93

94 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo del peso Controllo del peso Introduzione Il controllo del peso richiede uno strumento versione WAVE Bioreactor 20/50EHT-L. Il peso è controllato attraverso la schermata WEIGHT. Vengono inserite le impostazioni per il peso netto desiderato; le pompe di alimentazione e di raccolta sono controllate. Il controllo del peso non è disponibile in caso di funzionamento Dual. Le impostazioni, a prescindere dai punti di regolazione, si trovano nella schermata di SETUP, vedere Sezione 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento, a pagina 112. Istruzioni Passo 1 perazione Nella schermata principale, premere WEIGHT (Sezione 5.1 Schermata principale e funzioni generali, a pagina 88). Risultato: viene visualizzata la schermata WEIGHT. L'attuale peso netto viene mostrato nella casella Kg net. 2 pzionale: Per azzerare il peso netto: Premere TARE. Risultato: viene visualizzata la schermata TARE NW?. Premere TARE NW per azzerare il peso netto. Questo comando non può essere annullato oppure, premere CANCEL per tornare alla schermata WEIGHT. 94 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

95 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo del peso Passo 3 perazione Impostare il punto di regolazione del peso netto: Premere la casella SP. Inserire il punto di regolazione desiderato (da 0,2 a 25 kg) nel tastierino di inserimento dati visualizzato. Premere il tasto. 4 Avviare la pompa di alimentazione premendo il pulsante N sotto a FEED. Nota: La pompa FEED non si aziona se il peso netto è superiore al limite massimo di allarme. Risultato: il pulsante commuta su FF e viene visualizzato l'indicatore Feeding. La pompa di alimentazione funziona fino a quando il peso netto è superiore al punto di regolazione. 5 6 pzionale: per arrestare il controllo di alimentazione in anticipo, premere FF per disabilitare il regolatore FEED. Avviare la pompa di raccolta premendo il pulsante N sotto a HARV. Nota: La pompa di raccolta (HARV) non si aziona se il peso netto è inferiore al limite minimo di allarme. Risultato: il pulsante commuta su FF e viene visualizzato l'indicatore Harvesting. La pompa di raccolta funziona fino a quando il peso netto è inferiore al punto di regolazione. 7 pzionale: per arrestare il controllo di raccolta in anticipo, premere FF per disabilitare il regolatore HARV. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 95

96 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo perfusione Controllo perfusione Introduzione Il controllo della perfusione richiede la versione dello strumento WAVE Bioreactor con cella di carico integrata. Lo scopo del regolatore di perfusione è di alimentare una quantità preimpostata di mezzo al bioreattore Cellbag per un periodo di 24 ore (mandata). L'alimentazione è suddivisa in un determinato numero di dosi. Deve essere raccolta la quantità equivalente di alimentazione. Il regolatore della raccolta mantiene il peso costante (+/- zona morta). La perfusione è controllata attraverso la schermata PERFUSIN (disponibile soltanto con gli strumenti EHT-L e EHTD-L WAVE Bioreactor 20/50). Panoramica sulla schermata di perfusione Il lato sinistro della schermata mostra le informazioni di alimentazione: Stato attuale della pompa di alimentazione: Casella F_PUMPFF o F_PUMPN. Quantitativo di alimentazione aggiunto (shot)/da aggiungere alla dose (gm). Alimentazione cumulativa (L): casella Σ. Il lato destro della schermata mostra le informazioni di raccolta: Stato attuale della pompa di raccolta: Casella H_PUMPFF o H_PUMPN. Quantitativo di raccolta rimosso (shot)/da rimuovere (gm). Raccolta cumulativa (L): casella Σ. Istruzioni Passo 1 perazione Nella schermata principale, premere PERFU (Sezione 5.1 Schermata principale e funzioni generali, a pagina 88). Risultato: viene visualizzata la schermata PERFUSIN. 96 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

97 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo perfusione Passo 2 3 perazione Premere il pulsante RESET per azzerare i quantitativi cumulativi di alimentazione e raccolta. Premere il pulsante DETAIL. Risultato: viene visualizzata la schermata PERFUSIN PARAMETERS. 4 Impostare l'alimentazione totale giornaliera (L/d): Premere la casella FEED. Inserire il punto di regolazione desiderato nel tastierino di inserimento dati visualizzato. Premere il tasto. 5 Impostare il volume di alimentazione per ogni dose: Premere la casella Shot ml. Inserire il punto di regolazione desiderato nel tastierino di inserimento dati visualizzato. Premere il tasto. Risultato: L'intervallo in minuti tra ciascuna dose è calcolato automaticamente in base ai valori impostati per l'alimentazione totale giornaliera e per il volume di alimentazione per dose. 6 7 Premere BACK. Impostare il punto di regolazione del peso netto: Premere la casella SP. Inserire il punto di regolazione desiderato (da 0,2 a 25 kg) nel tastierino di inserimento dati visualizzato. Premere il tasto. 8 Premere N per avviare il controllo di alimentazione e raccolta. Risultato: la pompa di alimentazione si avvia e la pompa di raccolta è attivata quando il peso supera il limite superiore della zona morta ed è stata completata una dose intera. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 97

98 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo perfusione Passo 9 perazione Premere FF per disabilitare il regolatore di perfusione, se necessario. 98 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

99 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Cellbag e selezione modalità singola/doppia Cellbag e selezione modalità singola/doppia Introduzione Il bioreattore Cellbag viene selezionato mediante la schermata BAGSIZE. Vengono inserite le dimensioni della sacca del bioreattore Cellbag. La selezione della modalità "Dual/Single" è eseguita anche mediante la schermata BAGSIZE. In caso di funzionamento "Dual" (disponibile solo se WAVE Bioreactor 20/50 è stato progettato per l'uso doppio), si possono inserire i dati di due bioreattori Cellbag di piccole dimensioni. Se si seleziona un Cellbag di grosse dimensioni, si può utilizzare soltanto una sacca. Istruzioni Passo 1 perazione Nella schermata principale, premere BAG (Sezione 5.1 Schermata principale e funzioni generali, a pagina 88). Risultato: viene visualizzata la schermata BAGSIZE. L'immagine mostra la schermata di configurazione per il funzionamento singolo sulla sinistra e per il funzionamento doppio sulla destra. Nota: Per la modalità Dual si possono selezionare due bioreattori Cellbag di piccole dimensioni. Per il vassoio di oscillazione 20 sono disponibili sacche di due dimensioni, 2 l e 10 l, mentre per il vassoio di oscillazione 50 è disponibile la sacca da 22 l. Se si seleziona un bioreattore Cellbag di grosse dimensioni, le informazioni corrispondenti al bioreattore Cellbag di destra risulteranno nascoste Fare clic su Bag size per selezionare il formato del bioreattore Cellbag desiderato. Il formato della sacca passa a 2L-10L-20L-22L-50L ogni volta che viene premuto il pulsante Bag size. Fare clic su K. Se necessario, ripetere la selezione del secondo bioreattore Cellbag. Fare clic su BACK per tornare alla schermata principale Main. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 99

100 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo temperatura Controllo temperatura Introduzione La temperatura è controllata attraverso la schermata HEATER. Vengono inserite le impostazioni della temperatura desiderata. Le impostazioni, a prescindere dai punti di regolazione, si trovano nella schermata di SETUP, vedere Sezione 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento, a pagina 112. In caso di funzionamento doppio "Dual", ciascun bioreattore Cellbag ha un suo specifico controllo della temperatura. Il funzionamento doppio è possibile se lo strumento ha una configurazione Dual e se vengono utilizzati dei bioreattori Cellbag di piccole dimensioni. Per selezionare la dimensione del bioreattore Cellbag, vederesezione5.2.4 Cellbag e selezione modalità singola/doppia, a pagina99. Nota: Il sistema di controllo della temperatura si spegne automaticamente quando: Il sensore della temperatura è difettoso o scollegato Il riscaldatore è scollegato Il riscaldatore si surriscalda (> 60 C) Lo strumento non oscilla (può essere disabilitato dal menu SETUP) Il sistema di controllo della temperatura riprende automaticamente quando si riavvia l'oscillazione. 100 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

101 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo temperatura Istruzioni Passo 1 perazione Nella schermata principale, premere HEATER (Sezione 5.1 Schermata principale e funzioni generali, a pagina 88). Risultato: viene visualizzata la schermata HEATER (la figura mostra una schermata di configurazione Dual con due serie di comandi, LEFT e RIGHT). L'attuale temperatura del bioreattore Cellbag viene mostrata nella casella con l'indicazione C. Nota: Se si utilizza un bioreattore Cellbag, le informazioni del riscaldatore sono indicate soltanto per tale bioreattore Cellbag e le informazioni corrispondenti a destra del bioreattore Cellbag sono nascoste. 2 3 Se è indicata una configurazione errata (Dual/Single), seguire le istruzioni in Sezione Cellbag e selezione modalità singola/doppia, a pagina 99 per modificare la configurazione. Impostare il punto di regolazione della temperatura: Premere la casella SP. Inserire il punto di regolazione desiderato (da 0 C a 45 C, il raffreddamento non è disponibile) nel tastierino di inserimento dati visualizzato. La temperatura minima consigliata è quella ambiente a + 5 C; la temperatura massima consigliata è di 40 C. Premere il tasto. 4 Premere HEAT per iniziare il riscaldamento. Suggerimento: L'uscita di potenza dei riscaldatori è rappresentata nel grafico a barre all'estrema destra e sinistra della schermata 5 Premere STP (compare nella stessa posizione di HEAT) per interrompere il riscaldamento. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 101

102 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo temperatura Nota: Quando si utilizza il sistema con piccole quantità di liquido, possono verificarsi moderate sovra o sottoscillazioni della temperatura quando si aumenta la temperatura del liquido per raggiungere un nuovo punto di regolazione che risulta notevolmente diverso dalla temperatura corrente. Questo comportamento può essere notato anche quando il nuovo punto di regolazione è vicino o più vicino alla temperatura ambiente rispetto alla temperatura corrente poiché il sistema non è dotato di un raffreddamento attivo. Queste sovra e sottoscillazioni intrinseche all'algoritmo di controllo della temperatura possono avvenire entro un'ora al massimo dall'impostazione del punto di regolazione. Se per l'applicazione specifica non devono avvenire delle sovra e sottoscillazioni, è consigliabile selezionare un punto di regolazione della temperatura intermedio, ad esempio 1 C sopra o sotto la temperatura prestabilita desiderata. Una volta che la temperatura si è stabilizzata in questo punto di regolazione intermedio, sarà necessario selezionare il punto di regolazione finale. 102 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

103 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo aerazione Controllo aerazione Introduzione L'aerazione è controllata attraverso la schermata AIRPUMP. Vengono inserite le impostazioni della portata aria desiderata. Le impostazioni, a prescindere dai punti di regolazione, si trovano nella schermata di SETUP, vedere Sezione 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento, a pagina112. In caso di funzionamento doppio "Dual", ciascun bioreattore Cellbag è dotato di un singolo controllo della pompa dell'aria. AVVERTENZA Gonfiare il bioreattore Cellbag esclusivamente con la pompa dell'aria interna. Essa è dotata di un sistema di arresto automatico per sovrapressione che eviterà possibili superamenti di pressione. Il collegamento diretto a una sorgente di gas o l'utilizzo di qualsiasi altra pompa potrebbe causare la rottura del bioreattore Cellbag. ATTENZINE La pressione sulla porta Air In del WAVE Bioreactor non deve superare 0,1 bar. L'eventuale superamento di questo limite può causare la rottura del bioreattore Cellbag. Prevedere un apparecchio di regolazione della pressione di sicurezza idoneo. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 103

104 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo aerazione Istruzioni Passo 1 perazione Nella schermata principale, premere AIR (Sezione 5.1 Schermata principale e funzioni generali, a pagina 88). Risultato: viene visualizzata la schermata AIRPUMP (la figura mostra una schermata di configurazione Dual). La portata aria attuale è visualizzata nella casella lpm. Nota: Se si utilizza un bioreattore Cellbag, le informazioni della pompa dell'aria sono indicate soltanto a sinistra e le corrispondenti informazioni a destra sono nascoste. 2 Impostare il punto di regolazione dell'aerazione: Premere la casella SP desiderata. Inserire il punto di regolazione desiderato (da 0 a 0,5 l/min) nel tastierino di inserimento dati visualizzato. Premere il tasto Se si utilizzano due sacche, ripetere l'impostazione per il secondo bioreattore Cellbag. Premere N (a sinistra e/o destra nella configurazione Dual) per avviare la pompa dell'aria. Premere FF (compare nella stessa posizione di N) per arrestare la pompa aria. 104 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

105 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo aerazione/concentrazione di C Controllo aerazione/concentrazione di C 2 Introduzione Il controllo della concentrazione di C 2 da parte del WAVE Bioreactor richiede la configurazione dello strumento WAVE Bioreactor 20/50EHT(-L)-C2. La concentrazione di C 2 è controllata tramite la schermata C2 / AIRPUMP. Vengono inserite le impostazioni della concentrazione desiderata. La portata aria è necessaria per il funzionamento del regolatore della C 2 ; i comandi della portata aria sono situati sul lato destro della schermata. Le impostazioni, tranne i punti di regolazione, si trovano nella schermata di SETUP, vedere Sezione 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento, a pagina 112. Nota: Il gas C 2 deve essere collegato al lato destro dello strumento. La pressione deve essere regolata tra 0,7 e 1,0 bar (10-15 psig). Istruzioni Nota: Suggerimento: Il controllo della concentrazione di C 2 richiede la configurazione dello strumento WAVE Bioreactor 20/50 EHT(-L)-C2. Per le informazioni sul controllo della portata aria, vedere Sezione Controllo aerazione, a pagina 103. Passo 1 perazione Nella schermata principale, premere C2 (Sezione 5.1 Schermata principale e funzioni generali, a pagina 88). Risultato: viene visualizzata la schermata C2 / AIRPUMP. La concentrazione attuale di C 2 è indicata nella casella % C2. 2 Se la pompa aria non è attiva, impostare la portata aria in base asezione5.2.6 Controllo aerazione, a pagina 103. Possono essere utilizzati i comandi sulla destra di questa schermata (AIRPUMP). WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 105

106 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo aerazione/concentrazione di C 2 Passo 3 perazione Impostare il punto di regolazione della concentrazione di C 2 : Premere la casella C2 SP. Inserire il punto di regolazione desiderato (da 0% a 15%) nel tastierino di inserimento dati visualizzato. Premere il tasto. 4 5 Premere N per avviare la pompa aria se è spenta. Premere N per iniziare il controllo della C 2. Premere STP (compare nella stessa posizione di N) per arrestare la pompa aria. 106 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

107 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo aerazione/concentrazione dell' Controllo aerazione/concentrazione dell' 2 Introduzione Il controllo della concentrazione dell' 2 richiede la configurazione dello strumento WAVE Bioreactor 20/50EHT(-L)-2. La concentrazione dell' 2 è controllata attraverso la schermata 2 / AIRPUMP. Vengono inserite le impostazioni della concentrazione desiderata. La portata aria è necessaria per il funzionamento del regolatore dell' 2 e i comandi della portata aria sono situati sul lato destro della schermata. Le impostazioni, a prescindere dai punti di regolazione, si trovano nella schermata di SETUP, vedere Sezione 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento, a pagina 112. Nota: Il gas 2 deve essere collegato al lato destro dello strumento. La pressione deve essere regolata tra 0,7 e 1,0 bar (10-15 psig). Istruzioni Nota: Suggerimento: Il controllo della concentrazione dell' 2 richiede la configurazione dello strumento WAVE Bioreactor 20/50EHT(-L)-2. Per le informazioni sul controllo della portata aria, vedere Sezione Controllo aerazione, a pagina 103. Passo 1 perazione Nella schermata principale, premere 2 (Sezione 5.1 Schermata principale e funzioni generali, a pagina 88). Risultato: viene visualizzata la schermata 2 / AIRPUMP. La concentrazione attuale dell' 2 è indicata nella casella % 2. 2 Se la pompa aria non è attiva, impostare la portata aria in base asezione5.2.6 Controllo aerazione, a pagina 103. Possono essere utilizzati i comandi sulla destra di questa schermata (AIRPUMP). WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 107

108 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.2 Controlli dei parametri Controllo aerazione/concentrazione dell' 2 Passo 3 perazione Impostare il punto di regolazione della concentrazione dell' 2 : Premere la casella 2 SP. Inserire il punto di regolazione desiderato (da 21% a 50%) nel tastierino di inserimento dati visualizzato. Premere il tasto. 4 5 Premere N per avviare la pompa aria se è spenta. Premere N per avviare il controllo dell' 2. Premere STP (compare nella stessa posizione di N) per arrestare la pompa aria. 108 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

109 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.3 Allarmi 5.3 Allarmi Introduzione Gli allarmi vengono gestiti nella schermata ALARMS. La cronologia allarmi è memorizzata nel pannello a sfioramento e viene conservata anche in caso di interruzione dell'alimentazione elettrica o di spegnimento dell'unità. Vengono conservati gli ultimi allarmi. Se il pannello a sfioramento viene scambiato tra gli strumenti WAVE Bioreactor, la cronologia allarmi viene persa. Nota: Di solito l'utente deve riconoscere qualsiasi nuovo allarme premendo il pulsante ALARM per visualizzare la schermata della cronologia allarmi. Se la funzione AUTACK è impostata su N nella schermata SE- TUP:PTINS, tutti gli allarmi vengono riconosciuti automaticamente. Non viene generato alcun messaggio di avviso, ma l'allarme rimane registrato. Indicazione degli allarmi Un nuovo allarme viene segnalato da: Un pulsante ALARM lampeggiante che compare nella parte inferiore della schermata visualizzata. Lo sfondo della schermata diventa rosso. Ciò significa che l'allarme non è stato riconosciuto. Si avverte un segnale acustico. Il cicalino può essere disabilitato dalla schermata SETUP, vedereimpostazione di altre opzioni, a pagina 120. L'allarme viene riconosciuto alla visualizzazione della schermata ALARMS. Lo sfondo della schermata principale ritorna a essere verde e il pulsante ALARM in fondo smette di lampeggiare, ma rimane visibile per tutta la durata della condizione d'allarme. Informazioni sulla schermata degli allarmi Sulla schermata ALARMS vengono registrati tutti gli allarmi. Ciascuno messaggio di allarme comprende: La data e l'ora in cui l'allarme si è verificato o è stato cancellato. Lo stato dell'allarme (Alm = non cancellato, K = cancellato). Codice numerico dell'allarme e breve descrizione, vederemessaggi di allarme, a pagina 257. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 109

110 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.3 Allarmi Come gestire un allarme Tutti gli allarmi hanno un codice specifico, così come un indicatore data e ora per facilitare la risoluzione dei problemi (vederemessaggi di allarme, a pagina 257). Passo 1 perazione Nella schermata principale (vedere Sezione 5.1 Schermata principale e funzioni generali, a pagina 88), premere il pulsante ALARM. Risultato: viene visualizzata la schermata ALARMS. Questa azione riconosce anche l'allarme. 2 3 Premere i pulsanti Up o Down per scorrere l'elenco della cronologia allarmi. Per accedere a una schermata di guida agli allarmi: Premere l'allarme desiderato per evidenziarlo. Premere HELP. 4 Per ottenere un elenco degli allarmi attualmente attivi, premere il pulsante Active Alarms. 5 Verificare l'allarme (per il codice allarme, vedere Messaggi di allarme, a pagina 257) e risolvere il problema che ha generato l'allarme. Visualizzazione della cronologia allarmi Per visualizzazione la cronologia allarmi e l'elenco degli allarmi attivi: Premere il pulsante ALARM nella schermata principale (se visibile) oppure Premere MENU nella schermata principale, quindi ALARM nella schermata MENU. 110 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

111 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.3 Allarmi Allarmi esterni Un allarme unità viene fornito da un jack femmina DB15 sulla parte posteriore dello strumento per gli eventuali registratori opzionali con diagramma degli allarmi e il monitoraggio remoto, vedere Sezione C.2 Porta analogica/allarme, a pagina 286. In presenza di condizioni di allarme, si attiva UNIT ALARM. Si attivano i contatti di allarme. UNIT ALARM è impostato su FF soltanto in mancanza di condizioni di allarme. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 111

112 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Introduzione Le impostazioni, a prescindere dai punti di regolazione, si trovano nella schermata di SETUP. Tra queste, ad esempio, attivazione/disattivazione degli allarmi e posizione campione. Tutte le selezioni vengono inserite in una memoria non volatile e vengono conservate anche in caso di spegnimento dell'alimentazione. Accedere alla schermata delle impostazioni Passo 1 perazione Nella schermata principale, premere MENU. (Sezione 5.1 Schermata principale e funzioni generali, a pagina 88) Risultato: viene visualizzata la schermata MENU. La schermata MENU mostra le informazioni di sistema. 2 Premere il pulsante SETUP. Risultato: viene visualizzata la schermata Access SETUP. 112 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

113 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Passo 3 perazione Fare clic sulla casella Enter Password Inserire la password 2050 Premere il tasto. Risultato: viene visualizzata la schermata SETUP. Nota: L'elenco dei pulsanti di impostazione visualizzati dipende dalla configurazione dello strumento. Impostazione delle opzioni di oscillazione Premere il pulsante RCKER. Viene visualizzata la schermata RCK SETUP. Parte DEV ALM Funzione Questa impostazione abilita o disabilita il monitoraggio degli allarmi di deviazione velocità. L'impostazione predefinita è N e attiva un allarme se la velocità misurata differisce dal punto di regolazione per più di 2 giri/min. Premere la casella per passare da abilitato (N) a disabilitato (FF). WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 113

114 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Parte SAMP PS ACC RCK MDE BACK Funzione Questa impostazione determina l'angolo di oscillazione, in gradi, al quale si sposta la macchina quando viene arrestata l'oscillazione. Il valore predefinito è 12. Premere la casella per visualizzare il tastierino dove può essere immesso un nuovo valore compreso tra 0 e 12 gradi. La macchina si sposta immediatamente alla nuova posizione. Questa impostazione non è utilizzata al momento. Questa impostazione determina se l'oscillazione avviene continuamente o in periodi ciclici. Il valore predefinito è CNT, che corrisponde all'oscillazione continua. Premere la casella vicino a RCK MDE per passare da modalità continua (CNT) a ciclica (CYCLE). In modalità CYCLE, impostare il tempo desiderato per l'accensione e lo spegnimento da 1 a secondi. Premere questa casella per tornare alla schermata SETUP. Impostazione delle opzioni del riscaldatore Premere il pulsante HEATER. Viene visualizzata la schermata HEATER SETUP. Parte DEV ALM Funzione Questa impostazione abilita o disabilita il monitoraggio degli allarmi di deviazione temperatura. Come valore predefinito, questa impostazione è abilitata (N). Se l'impostazione è abilitata e la temperatura misurata è entro 0,5 C dal punto di regolazione, si avvierà il monitoraggio di deviazione temperatura. Un allarme si attiva se la temperatura differisce dal punto di regolazione di più di 1 C per 1 minuto. 114 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

115 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Parte HEATER INTRLK VERRIDE FFSET TEMP L FFSET TEMP R BACK Funzione Questa impostazione abilita o disabilita il riscaldatore all'arresto dell'oscillazione. Come valore predefinito, il riscaldatore è disabilitato (FF). In genere, non deve riscaldare quando l'oscillazione si arresta per evitare il surriscaldamento delle parti. Tuttavia, questo dispositivo di bloccaggio può essere disabilitato impostando l'opzione su N. Questa impostazione può essere utilizzata per compensare la calibrazione della sonda di temperatura. L'impostazione predefinita è quella di fabbrica ed è specifica per le sonde in dotazione allo strumento. La gamma è compresa tra -10,0 C e +10,0 C. Negli strumenti dotati di doppia opzione, questa impostazione influenza il sensore di temperatura sulla sinistra. Questa impostazione è simile a FFSET TEMP L, ma è disponibile soltanto se lo strumento è dotato di opzione DUAL. In questi strumenti, tale impostazione determina l'offset per il sensore di temperatura a destra. Premere questa casella per tornare alla schermata SETUP. Impostazione delle opzioni di aerazione Premere il pulsante AIR. Viene visualizzata la schermata di configurazione dell'aerazione. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 115

116 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Parte DEV ALM L AIR SPAN R AIR SPAN BACK Funzione Questa impostazione abilita o disabilita il monitoraggio degli allarmi di deviazione portata aria. Come valore preimpostato, il monitoraggio è abilitato (N) e attiva un allarme se la portata aria misurata differisce dal punto di regolazione per più di 0,1 l/min. Premere questa casella per abilitare (N) o disabilitare (FF) il monitoraggio. Questa impostazione è un fattore di scala utilizzato da tecnici qualificati per calibrare la portata della pompa dell'aria di sinistra. Il valore predefinito è 1000 ml/min. Questa impostazione è un fattore di scala utilizzato da tecnici qualificati per calibrare la portata della pompa dell'aria di destra. Il valore predefinito è 1000 ml/min. Premere questa casella per tornare alla schermata SETUP. Impostazione delle opzioni di peso Nota: Le opzioni di peso sono utili soltanto se LCELL2050EHT è stato installato e abilitato nella schermata SETUP PTINS. Premere il pulsante WEIGHT. Viene visualizzata la schermata WEIGHT SETUP. Parte DEV ALM Funzione Questa impostazione abilita o disabilita il monitoraggio degli allarmi di deviazione peso. Se l'impostazione è N, si attiva un allarme se il peso misurato differisce dal punto di regolazione di oltre 4 volte il volume della dose di alimentazione. 116 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

117 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Parte FEED/HARV DB LW WT ALM LI- MIT HIGH WT ALM LI- MIT PUMP ACT SPAN Funzione Questa impostazione determina la zona morta attorno al punto di regolazione del peso. Il peso viene mantenuto all'interno della zona morta. Una zona morta di piccole dimensioni fa sì che le pompe di alimentazione e di raccolta si inseriscano più spesso. Una zona morta di grandi dimensioni riduce la precisione del controllo del peso. La gamma è compresa tra 50 e 500 g. Il valore predefinito è 50 g. Determina il valore della soglia inferiore per l'allarme peso. La gamma è compresa tra 0 e 40,00 kg. Il valore predefinito è 1.00 kg. Determina il valore della soglia superiore per l'allarme peso. La gamma è compresa tra 0 e 50,00 kg. Il valore predefinito è kg. N/C significa che il contatto si chiude quando è azionato. N/ significa che il contatto si apre quando è azionato. Nota: Questo valore viene impostato in fabbrica e non deve essere modificato. Questa impostazione indica la tensione di funzionamento della cella di carico ed è compresa tra 1 e 5 V. 40 rappresenta la capacità in kg. BACK Premere questa casella per tornare alla schermata SETUP. Impostazione delle opzioni del regolatore di C 2 Nota: Le opzioni del regolatore di C2 sono disponibili soltanto se lo strumento WAVE Bioreactor è dotato di modulo di controllo della C 2. Premere il pulsante C2. Viene visualizzata la schermata C2 SETUP. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 117

118 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Parte DEV ALM C2 FFSET BACK Funzione Questa impostazione abilita o disabilita il monitoraggio degli allarmi di deviazione C 2. Come valore preimpostato, il monitoraggio è abilitato (N) e attiva un allarme se la concentrazione di C 2 misurata differisce dal punto di regolazione per più di 1% di C 2. Premere questa casella per abilitare (N) o disabilitare (FF) il monitoraggio. Questa impostazione può essere utilizzata per compensare la calibrazione del sensore della C 2. La gamma è compresa tra -10% e +10%. Il valore predefinito è impostato in fabbrica per i sensori in dotazione allo strumento. Premere questa casella per tornare alla schermata SETUP. Impostazione delle opzioni del regolatore di 2 Nota: Le opzioni del regolatore di 2 sono disponibili soltanto se lo strumento WAVE Bioreactor è dotato di modulo di controllo dell' 2. Premere il pulsante 2. Viene visualizzata la schermata 2 SETUP. Parte DEV ALM Funzione Questa impostazione abilita o disabilita il monitoraggio degli allarmi di deviazione 2. Come valore preimpostato, il monitoraggio è abilitato (N) e attiva un allarme se la concentrazione di 2 misurata differisce dal punto di regolazione per più di 1% di 2. Premere questa casella per abilitare (N) o disabilitare (FF) il monitoraggio. 118 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

119 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Parte 2 FFSET BACK Funzione Questa impostazione può essere utilizzata per compensare la calibrazione del sensore dell' 2. La gamma è compresa tra - 10% e +10%. Il valore predefinito è impostato in fabbrica per i sensori in dotazione allo strumento. Premere questa casella per tornare alla schermata SETUP. Impostazione dell'orologio in tempo reale Premere il pulsante SETCLK. Viene visualizzata la schermata SET CLCK. Per le istruzioni di configurazione, vedereimpostazione dell'ora, a pagina 73. Impostazione delle opzioni analogiche Premere il pulsante ANALG. Viene visualizzata la schermata ANALG UTPUT. Parte ANALG Funzione Questa impostazione abilita (N) o disabilita (FF) le uscite analogiche del connettore DB15 posizionato sul retro dello strumento. Questi segnali possono essere utilizzati per registrare i dati e l'interfaccia nei sistemi di allarme/acquisizione dei dati analogici. Il valore predefinito è FF. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 119

120 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Parte UTPUT CH1 - CH6 Funzione Questa impostazione determina se la tensione dell'uscita analogica si trova entro la gamma di 0-5 V o di 1-5 V. Il valore predefinito è 1-5 V. La selezione 1-5 V è più sicura perché tutte le tensioni inferiori a 1 segnaleranno al sistema di acquisizione/allarme che lo strumento ha avuto un calo di potenza o che il modulo dell'uscita analogica è guasto. L'utente può assegnare il segnale per tutti i canali delle uscite analogiche. Tutti i canali possono essere impostati con i seguenti parametri: NNE SPEED NET WT TEMPL AIRL TEMPR AIRR C2 2 L'assegnazione dei pin e dei valori predefiniti ai vari canali è indicata in Sezione C.2 Porta analogica/allarme, a pagina 286. Impostazione di altre opzioni Premere il pulsante PTINS. Viene visualizzata la schermata PTINS. 120 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

121 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Parte freccia ALM BEEPER AUT ACK AUT START LADCELL ADDR Funzione Scorrere per visualizzare le altre opzioni. Questa impostazione abilita (N) o disabilita (FF) il cicalino d'allarme. Il valore predefinito è N. Impostare questa opzione su N per riconoscere automaticamente gli eventuali nuovi allarmi. Il valore predefinito è FF (disabilitato). Se questa impostazione è abilitata (N), lo strumento si avvia nello stesso stato dell'ultimo spegnimento. Il valore predefinito è N. Questa impostazione abilita (N) o disabilita (FF) il sensore peso. Il valore predefinito è FF se in fabbrica non è stata installata l'opzione LCELL20/50EHT su richiesta. Indirizzo MDBUS corrente dello strumento. L'indirizzo predefinito è 10. Nota: Premere RESET per applicare eventuali modifiche. SPEED Velocità corrente (in baud) della porta MDBUS. I valori disponibili sono 9600 (predefinito), 19.2K o 38.4K. ATTENZINE Non modificare questa impostazione. Nota: Premere RESET per applicare eventuali modifiche. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 121

122 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor 5.4 Modifica delle impostazioni di funzionamento Selezione della modalità di funzionamento doppio e singolo Gli strumenti a doppio sistema (WAVE Bioreactor 20/50EHTD) possono essere impiegati per il funzionamento singolo e doppio. Per sacche di piccole dimensioni, sono disponibili le modalità SINGLE e DUAL; per le sacche di grosse dimensioni è disponibile soltanto la modalità SINGLE. Selezionando le sacche, viene impostata la modalità SINGLE e DUAL, vedere Sezione Cellbag e selezione modalità singola/doppia, a pagina 99. Modalità SINGLE Lo strumento si comporta come un EHT solo con i controlli di portata aria e temperatura di sinistra. Il riscaldatore di destra può essere spento o impostato per funzionare in parallelo con quello di sinistra. Modalità DUAL La temperatura e la portata d'aria sono controllate indipendentemente per il lato sinistro e quello destro. 122 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

123 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6 Sistema di controllo WAVEPD II Informazioni sul capitolo Lo strumento esterno opzionale WAVEPD II combina una serie di moduli utilizzabili con il sistema WAVE Bioreactor 20/50. Può essere usato per la misurazione e il controllo dell'ossigeno disciolto, la misurazione e il controllo del ph, il controllo dell'aerazione e la miscelazione dei gas di 2 e/o C 2. Il presente capitolo descrive il software che controlla WAVEPD II. In questo capitolo Sezione 6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali 6.2 Schermata delle informazioni di sistema 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri 6.4 Allarmi 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 123

124 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali 6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali Schermata principale WAVEPD II Lo strumento WAVEPD II è controllato attraverso un pannello a sfioramento. Le funzioni disponibili sulla schermata principale del pannello a sfioramento variano in base alla configurazione corrente. Nella tabella sottostante viene fornita una descrizione dell'interfaccia utente sulla schermata principale, seguita dall'illustrazione della stessa. Tipo/ubicazione Lato sinistro della schermata Lato destro della schermata Cifre rosse in una casella nera Casella grigia Barra verde Barra rossa Funzione Dati provenienti dallo strumento WAVE Bioreactor collegato a WAVEPD II, se lo strumento sta funzionando in modalità di controllo remoto Dati provenienti da WAVEPD II Variabili di processo misurate Pulsante funzione. La schermata di dettaglio è raggiungibile premendo il rispettivo pulsante. La corrispondente funzione di controllo è attiva La corrispondente funzione di controllo non è attiva 124 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

125 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 125

126 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali Parte Descrizione Parte Descrizione 1 Velocità di oscillazione corrente (rpm) 11 C 2 misurata (%C2) 2 WAVE Bioreactor connesso 12 Pulsante C2MIX per il controllo della concentrazione di C 2 3 Valore corrente dell'aerazione di WAVE Bioreactor (lpm) per la sacca destra quando si sta operando in modalità doppia. 13 Valore misurato dell'aerazione per WAVEPD II. 4 Valore corrente della temperatura ( C) per la sacca destra quando si sta operando in modalità doppia. 14 Pulsante SETUP per impostazioni di funzionamento 5 ph misurato 15 Pulsante ALARMS per la gestione allarmi 6 Pulsante phpt per il controllo del ph 16 Pulsante SYSTEM INF sulle informazioni di sistema 7 ssigeno disciolto misurato (% air sat) 17 Pulsante WAVE Bioreactor (2050EHT) connesso 8 Pulsante DPT per il controllo dell'ossigeno disciolto 18 Solo opzione cella di carico: Valore corrente del peso netto (kg) 9 2 misurato (%2) 19 Valore corrente della temperatura ( C) 10 Pulsante 2MIX per il controllo della concentrazione di 2 20 Valore corrente dell'aerazione del WAVE Bioreactor (lpm) Pulsanti generali Funzioni disponibili nella maggior parte o in tutte le schermate di dettaglio: Funzione BACK ALARMS Descrizione Premere il pulsante BACK per tornare alla schermata precedente. Premere il pulsante ALARMS per visualizzare il registro allarmi e per riconoscere gli allarmi. Vedere Sezione 6.4 Allarmi, a pagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

127 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali Funzione TREND Descrizione Premere il pulsante TREND per visualizzare un grafico dei trend del parametro. Trend I valori di ciascun parametro sono salvati per un periodo di 10 ore e possono essere visualizzati premendo il pulsante TREND sulle schermate di controllo dei parametri. WAVEPD II non conserva in memoria i valori trend a lungo termine. Una tipica schermata TREND viene indicata di seguito. La tabella seguente descrive le funzioni dei pulsanti sottostanti il grafico. Parte I< << II / I> >> >I Funzione Visualizzazione dell'intervallo iniziale di misurazione Retrocedere temporalmente (un riquadro per volta) Pausa / riavvia visione corrente Avanzare temporalmente (un riquadro per volta) Visualizzazione dell'ultimo intervallo di misurazione WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 127

128 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.2 Schermata delle informazioni di sistema 6.2 Schermata delle informazioni di sistema Introduzione La schermata SYSTEM INFRMATIN fornisce le informazioni relative al sistema, includendo allarmi e comunicazioni con WAVE Bioreactor 20/50. Alla schermata si accede premendo SYSTEM INFRMATIN nella schermata del menu principale MAIN MENU di WAVEPD II. Schermata delle informazioni di sistema La schermata SYSTEM INFRMATIN in WAVEPD II fornisce: Informazioni sulla configurazione di sistema casella sullo stato allarmi ALARM STATUS: allarmi riguardanti WAVE Bioreactor. I cerchi verdi indicano l'assenza di allarmi, mentre quelli rossi la presenza di allarmi. casella sullo stato delle comunicazioni CMMUNICATIN STATUS: comunicazioni con il WAVE Bioreactor e, opzionalmente, con il software UNICRN DAQ. I cerchi verdi indicano che la comunicazione funziona, mentre quelli rossi che non funziona. Pulsante ALARMS per le informazioni sui singoli allarmi Pulsante BACK. Suggerimento: Gli allarmi sono ulteriormente descritti in Sezione 6.4 Allarmi, a pagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

129 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Informazioni sulla sezione La presente sezione descrive i controlli dei parametri per lo strumento WAVEPD II. In questa sezione Sezione Controllo di ph Controllo dell'ossigeno disciolto Controllo aerazione Controllo della concentrazione di Controllo della concentrazione di C Controllo remoto dello strumento WAVE Bioreactor Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 129

130 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo di ph Controllo di ph Introduzione Il ph è controllato attraverso la schermata phpt CNTRL. Per ulteriori informazioni circa la misurazione e il controllo del ph, leggere Sezione B.2 Misurazione e controllo del ph, a pagina 274. Nota: Quando viene utilizzato UNICRN DAQ, assicurarsi che sia selezionata la configurazione ph WAVEPD affinché vengano registrate le letture del ph (UNICRN Manager:System Setup:Components). Per la risoluzione dei problemi, si raccomanda vivamente di selezionare anche ph Details per registrare il LED, l'ampiezza e l'angolo di fase. Schermata di controllo phpt Layout di base Il lato sinistro della schermata phpt CNTRL fornisce i dati di misurazione: Casella di visualizzazione del ph reale Grafico a barre del sensore phpt che mostra l'ampiezza del segnale Pulsante di misurazione del ph (N/FF) Pulsante DETAIL sulle informazioni del sensore Pulsante CALIB per l'impostazione dei parametri del sensore Pulsante TCMP per la compensazione di temperatura Pulsante FFSET per la calibrazione di offset Il lato destro della schermata phpt CNTRL fornisce i dati di controllo: Casella di visualizzazione del punto di regolazione del ph (ph SP) 130 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

131 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo di ph Pulsante controllo ph (N/FF) Nota: Il controllo del ph richiede che la misurazione del ph sia attiva. Selezione dello schema di controllo ACID/BASE o C2/BASE Nella parte inferiore della schermata phpt CNTRL si trovano: Pulsanti BACK, ALARMS e TREND Stato del sensore phpt Nota: I valori nella tabella sottostante sono a esclusivo titolo esemplificativo. Se la schermata phpt visualizza... allora... il sensore phpt funziona correttamente. perazione e e il segnale proveniente dal sensore phpt è basso. Questa condizione può diminuire l'accuratezza di misurazione del ph. il segnale proveniente dal sensore phpt è troppo basso per essere letto. Verificare che la fibra ottica sia correttamente collegata a entrambe le estremità. Una rotazione di 90 dell'adattatore della sacca può migliorare il segnale. Scambiare la fibra ottica. Eseguire le seguenti azioni nell'ordine dato fino a risolvere il problema: Verificare l'attacco della fibra ottica su entrambe le estremità Sostituire la fibra ottica Sostituire la Cellbag Contattare l'assistenza di GE Healthcare Durante il controllo ph Quando è stato avviato il controllo del ph, vengono fornite informazioni aggiuntive. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 131

132 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo di ph Schema di controllo C2/BASE: Tempo di ciclo (tempo rimanente e tempo totale di ciclo) Attività della pompa base, secondo l'impostazione del regolatore ph Punto di regolazione C2, secondo l'impostazione del regolatore ph C2 N/FF (barra verde quando è on, barra rossa quando è off) ARIA N/FF (barra verde quando è on, barra rossa quando è off) Schema di controllo ACID/BASE: Tempo di ciclo (tempo rimanente e tempo totale di ciclo) Attività della pompa base, secondo l'impostazione del regolatore ph La quantità aggiunta di acido o di base è controllata attivando la pompa (a una velocità prefissata) per una certa percentuale del tempo di ciascun ciclo di controllo. Attività della pompa acido, secondo l'impostazione del regolatore ph La quantità aggiunta di acido o di base è controllata attivando la pompa (a una velocità prefissata) per una certa percentuale del tempo di ciascun ciclo di controllo. Tempo di aggiunta per ciclo (secondi, acido o base) Schemi di controllo I seguenti schemi di controllo sono disponibili per il controllo phpt. Schema Acido/Base C 2 /Base Nota: pzione di controllo Controllo del ph per aggiunta di acido e base. Con valori di ph inferiori al punto di regolazione, viene aggiunta la base. Con valori di ph superiori al punto di regolazione, viene aggiunto l'acido. Controllo del ph per modifica della concentrazione di C 2 nel gas dello spazio superiore della sacca e per aggiunta di base. Con valori di ph inferiori al punto di regolazione selezionato, viene effettuato un primo tentativo di conseguimento del valore di ph richiesto diminuendo il livello di C2. Se il valore di ph richiesto non è conseguito durante il ritardo C2 -> Base, viene aggiunta la base. Con valori di ph superiori al punto di regolazione selezionato, la concentrazione di C 2 viene aumentata. Lo schema di controllo C 2 /Base richiede che la fonte d'erogazione dell'anidride carbonica sia collegata a un modulo di controllo C2MIX. 132 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

133 Compensazione della temperatura 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo di ph Le seguenti selezioni sono disponibili per la compensazione della temperatura con DPT II e phpt: Selezione Modalità di compensazione Posizione Cellbag Valore di compensazione della temperatura Alternative Manuale Automatica Singolo / sinistra Destra Immettere manualmente il valore Non apportare nessuna modifica Commento Nella modalità manuale, la temperatura della soluzione misurata viene inserita manualmente. Nella modalità automatica, la temperatura viene letta dall'apposito sensore nel vassoio sacca di BASE 20/50. Durante il funzionamento doppio, la modalità automatica leggerà la temperatura solo da uno dei sensori di temperatura. Se è richiesto il controllo ph/ossigeno disciolto per l'altro lato, dovrà essere utilizzato un secondo regolatore WAVEPD II assieme alla compensazione manuale della temperatura. Per il funzionamento singolo, selezionare singolo. Per il funzionamento doppio, selezionare sinistra o destra in base alla sacca da sottoporre a misurazione. Durante la modalità manuale, viene utilizzato questo valore. Durante la modalità automatica, viene invece utilizzato il valore misurato. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 133

134 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo di ph Nota: Durante il funzionamento doppio, viene utilizzato un regolatore WAVEPD II per ciascun bioreattore Cellbag. Il regolatore WAVEPD II utilizzato in modalità remota e collegato al WAVE Bioreactor, può impiegare la compensazione automatica o manuale della temperatura. Il regolatore WAVEPD II utilizzato in modalità locale deve impiegare la compensazione manuale della temperatura. Durante il funzionamento doppio, la modalità automatica di compensazione leggerà la temperatura solo dal sensore di temperatura sinistro. Se è richiesto il controllo D e/o ph anche per il lato destro, dovrà essere utilizzato un secondo regolatore WAVEPD II insieme alla compensazione manuale della temperatura. Calibrazione del phpt Passo 1 perazione Premere il pulsante phpt nella schermata MAIN MENU (Sezione 6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali, a pagina 124). Risultato: viene visualizzata la schermata phpt. 134 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

135 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo di ph Passo 2 perazione Inserire i parametri del sensore ph: Premere il pulsante CALIB. Risultato: viene visualizzata la schermata ph SENSR PARAMETERS. Inserire i cinque valori di calibrazione indicati nell'etichetta Cellbag. Premere SET. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 135

136 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo di ph Passo 3 perazione Se necessario, visualizzare le informazioni di segnale: Premere DETAIL per verificare la qualità del segnale. Risultato: una finestra a comparsa visualizza i parametri del sensore: ampiezza, fase del segnale e corrente del LED. Nota: Se il valore dell'ampiezza cade all'esterno della gamma di misurazione consigliata ( ), il LED corrente verrà automaticamente regolato, riportando in breve tempo l'ampiezza nei limiti della gamma di misurazione consigliata. Nota: Inizialmente, il LED avrà un elevato valore di partenza (160). In pochi minuti, verrà regolato al suo valore operativo. 4 Premere il pulsante N/FF a sinistra per avviare la misurazione del ph. Risultato: il pulsante diventa verde e visualizza N. Nota: Se i mezzi presenti nella sacca non hanno ancora raggiunto approssimativamente la temperatura ambiente, il valore di misurazione del ph potrebbe non essere visibile sul display. Il sensore phpt deve essere immerso nella sostanza almeno un'ora prima perché si possa ottenere una buona misurazione. 136 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

137 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo di ph Passo 5 perazione Modificare il punto di regolazione del ph: Fare clic sulla casella di visualizzazione SP Inserire un nuovo punto di regolazione (gamma ph 6-8) utilizzando il tastierino d'inserimento dati visualizzato. Premere il tasto ENT per confermare il nuovo punto di regolazione, CLR per cancellare la visualizzazione o ESC per annullare l'immissione dei dati. 6 Selezionare lo schema di controllo premendo la casella accanto alla modalità desiderata: ACID/BASE C2/BASE WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 137

138 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo di ph Passo 7 perazione Impostare la compensazione di temperatura: Premere il pulsante TCMP. Risultato: viene visualizzata una schermata di compensazione della temperatura. Selezionare la compensazione manuale (Manual temp) o automatica (Auto temp) della temperatura. Selezionare la posizione della sacca: Single or left oppure Right Se è stata selezionata la compensazione manuale della temperatura, passare al punto successivo. Altrimenti, premere BACK e continuare con l'avvio del controllo del ph. 8 Impostare il valore manuale della temperatura: Premere il pulsante della temperatura nella schermata di compensazione. Inserire il nuovo valore sul tastierino di inserimento dati visualizzato. Premere il tasto ENT per confermare il nuovo valore, CLR per cancellare la visualizzazione e ESC per annullare l'immissione dei dati. Premere BACK per tornare alla schermata di controllo phpt. 138 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

139 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo di ph Passo 9 perazione Premere il pulsante N/FF a destra per avviare il controllo del ph. Risultato: il pulsante diventa verde e visualizza N. Le informazioni circa il controllo sono visualizzate sulla schermata. Nota: Il controllo del ph non deve essere avviato fino a quando la temperatura non è stabile e al livello desiderato e, inoltre, finché la misurazione del ph non indica un valore stabile e affidabile. 10 Calibrazione di offset del sensore ph: Premere FFSET. Risultato: viene visualizzata la schermata FFSET CALIBRATIN. Immettere il valore misurato, quindi premere SET. Per ulteriori dettagli, vedere Calibrazione di offset del phpt, a pagina 222. Premere BACK al termine della calibrazione Se necessario, premere il pulsante N/FF a destra per arrestare il controllo del ph. Risultato: il pulsante diventa rosso e visualizza FF. Se necessario, premere il pulsante N/FF a sinistra per arrestare la misurazione del ph. Risultato: il pulsante diventa rosso e visualizza FF. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 139

140 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo dell'ossigeno disciolto Controllo dell'ossigeno disciolto Introduzione L'ossigeno disciolto (D) è controllato tramite la schermata DPT CNTRL. Schermata DPT CNTRL Il lato sinistro della schermata DPT fornisce i dati di misurazione: Casella di visualizzazione D reale Grafico a barre del sensore DPT che mostra l'ampiezza del segnale Pulsante di misurazione dell'ossigeno disciolto (N/FF) Pulsante DETAIL sulle informazioni del sensore Pulsante CALIB per l'impostazione dei parametri del sensore Pulsante TCMP per la compensazione di temperatura Pulsante FFSET per la calibrazione di offset Casella di visualizzazione temperatura Comp temp Il lato destro della schermata DPT fornisce i dati di controllo: Casella di visualizzazione del punto di regolazione dell'ossigeno disciolto (D SP) Pulsante di controllo ossigeno disciolto (N/FF) Nota: Il controllo D richiede che la misurazione dell'ossigeno disciolto sia attiva. Selezione di schema di controllo SPEED, 2 o 2/SPEED Nella parte inferiore della schermata DPT si trovano: Pulsanti BACK, ALARMS e TREND 140 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

141 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo dell'ossigeno disciolto Condizione del sensore DPT II Se la schermata DPT visualizza... allora... il sensore DPT II funziona correttamente perazione e e il segnale proveniente dal sensore DPT II è basso. Questa condizione può ridurre il grado di precisione di misurazione del D. La causa può essere dovuta a un sensore deteriorato o alla perdita di segnale dovuta a un cavo in fibra danneggiato o a un collegamento errato. il segnale proveniente dal sensore DPT II è troppo basso per ottenere una lettura D. Verificare che la fibra ottica sia correttamente collegata a entrambe le estremità. Una rotazione di 90 dell'adattatore della sacca può migliorare il segnale. Scambiare la fibra ottica. Eseguire le seguenti azioni nell'ordine dato fino a risolvere il problema: Verificare l'attacco della fibra ottica su entrambe le estremità Sostituire la fibra ottica Sostituire la Cellbag Contattare l'assistenza di GE Healthcare Durante il controllo D Quando è stato avviato il controllo D, vengono fornite informazioni aggiuntive: Tempo di ciclo (tempo rimanente e tempo totale di ciclo) Punto di regolazione 2, secondo l'impostazione del regolatore D 2 N/FF (barra verde quando è on, barra rossa quando è off) ARIA N/FF (barra verde quando è on, barra rossa quando è off) WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 141

142 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo dell'ossigeno disciolto Schemi di controllo Modalità Velocità Concentrazione dell'2 Velocità/concentrazione 2 pzione di controllo Controllo dell'ossigeno disciolto modificando la velocità di oscillazione. Se il valore dell'ossigeno disciolto è basso, la velocità di oscillazione aumenta, se il valore dell'ossigeno disciolto è elevato, la velocità diminuisce. Controllo dell'ossigeno disciolto mediante modifica della concentrazione di 2 nel gas dello spazio superiore. A bassi valori di D, la concentrazione di 2 aumenta, mentre a elevati valori di D, la concentrazione di 2 diminuisce. Controllo dell'ossigeno disciolto mediante modifica della concentrazione 2 e della velocità di oscillazione fino al valore impostato (definito dall'utente). Quando l'ossigeno disciolto è troppo basso, per prima cosa viene incrementata la concentrazione di 2. Se l'aumento della concentrazione di 2 non è sufficiente, viene incrementata la velocità di oscillazione. Nota: La modalità % di 2 richiede che la fonte d'erogazione dell'ossigeno sia collegata al modulo di controllo di WAVEPD II e che la pompa dell'aria sia stata attivata. 142 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

143 Compensazione della temperatura 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo dell'ossigeno disciolto Le seguenti selezioni sono disponibili per la compensazione della temperatura con DPT II e phpt: Selezione Modalità di compensazione Posizione Cellbag Valore di compensazione della temperatura Alternative Manuale Automatica Singolo / sinistra Destra Immettere manualmente il valore Non apportare nessuna modifica Commento Nella modalità manuale, la temperatura della soluzione misurata viene inserita manualmente. Nella modalità automatica, la temperatura viene letta dall'apposito sensore nel vassoio sacca di BASE 20/50. Durante il funzionamento doppio, la modalità automatica leggerà la temperatura solo da uno dei sensori di temperatura. Se è richiesto il controllo ph/ossigeno disciolto per l'altro lato, dovrà essere utilizzato un secondo regolatore WAVEPD II assieme alla compensazione manuale della temperatura. Per il funzionamento singolo, selezionare singolo. Per il funzionamento doppio, selezionare sinistra o destra in base alla sacca da sottoporre a misurazione. Durante la modalità manuale, viene utilizzato questo valore. Durante la modalità automatica, viene invece utilizzato il valore misurato. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 143

144 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo dell'ossigeno disciolto Nota: Durante il funzionamento doppio, viene utilizzato un regolatore WAVEPD II per ciascun bioreattore Cellbag. Il regolatore WAVEPD II utilizzato in modalità remota e collegato al WAVE Bioreactor, può impiegare la compensazione automatica o manuale della temperatura. Il regolatore WAVEPD II utilizzato in modalità locale deve impiegare la compensazione manuale della temperatura. Durante il funzionamento doppio, la modalità automatica di compensazione leggerà la temperatura solo dal sensore di temperatura sinistro. Se è richiesto il controllo D e/o ph anche per il lato destro, dovrà essere utilizzato un secondo regolatore WAVEPD II insieme alla compensazione manuale della temperatura. Calibrazione DPT Passo 1 perazione Premere il pulsante DPT nella schermata principale (Sezione6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali, a pagina 124). Risultato: viene visualizzata la schermata DPT. 144 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

145 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo dell'ossigeno disciolto Passo 2 perazione Inserire i valori di calibrazione per il sensore DPT II: Premere il pulsante CALIB. Risultato: Si apre la schermata D SENSR PARAMETERS. Inserire i cinque valori di calibrazione DPT II indicati sull'etichetta Cellbag. Nota: I valori nella figura sopra riportata sono a esclusivo titolo esemplificativo e non devono essere utilizzati. Premere SET per salvare i valori inseriti e chiudere la schermata. Il pulsante BACK chiuderà la schermata senza salvare le modifiche. Premere il pulsante N/FF a sinistra per avviare la misurazione dell'ossigeno disciolto. Risultato: il pulsante diventa verde e visualizza N. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 145

146 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo dell'ossigeno disciolto Passo 3 perazione Se necessario, visualizzare le informazioni di segnale: Premere DETAIL per verificare la qualità del segnale. Risultato: Una finestra a comparsa visualizza le informazioni del segnale ricevuto dal sensore (ampiezza ed angolo di fase) nonché un misura della resistenza della sorgente della luce LED di illuminazione. Nota: Se il valore dell'ampiezza cade all'esterno della gamma di misurazione consigliata ( ), la corrente del LED verrà automaticamente regolata, riportando in breve tempo l'ampiezza nei limiti della gamma di misurazione consigliata. 4 Modificare il valore del punto di regolazione dell'ossigeno disciolto: Premere il pulsante D SP. Inserire un nuovo punto di regolazione (tra 0% e 100,0% di sat. aria) attraverso il tastierino d'inserimento dati visualizzato. Premere il tasto ENT per confermare il nuovo punto di regolazione, CLR per cancellare la visualizzazione e ESC per annullare l'immissione dei dati. 146 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

147 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo dell'ossigeno disciolto Passo 5 perazione Impostare la compensazione di temperatura: Premere il pulsante TCMP. Risultato: viene visualizzata una schermata di compensazione della temperatura. Selezionare la compensazione manuale (Manual temp) o automatica (Auto temp) della temperatura. Selezionare la posizione della sacca: Single or left oppure Right Se è stata selezionata la compensazione manuale della temperatura, passare al punto successivo. Altrimenti, continuare con la calibrazione. 6 Impostare il valore manuale della temperatura: Premere il pulsante della temperatura nella schermata di compensazione. Inserire il nuovo valore sul tastierino di inserimento dati visualizzato. Premere il tasto ENT per confermare il nuovo valore, CLR per cancellare la visualizzazione e ESC per annullare l'immissione dei dati. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 147

148 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo dell'ossigeno disciolto Passo 7 perazione Calibrare l'offset del sensore DPT II: Premere FFSET Risultato: viene visualizzata la schermata di calibrazione. Seguire le istruzioni sullo schermo. Per i dettagli, vedere Calibrazione dell'ossigeno disciolto, a pagina 222. Premere BACK al termine della calibrazione. 8 Selezionare lo schema di controllo premendo la casella accanto alla modalità desiderata: Speed 2 concentration Speed/ 2 concentration 9 10 Premere il pulsante N/FF a destra per iniziare il controllo dell'ossigeno disciolto (D). Risultato: il pulsante diventa verde e visualizza N. Le informazioni circa il controllo sono visualizzate sulla schermata. Se necessario, premere il pulsante N/FF a destra per terminare il controllo dell'ossigeno disciolto (D). Risultato: il pulsante diventa rosso e visualizza FF. 148 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

149 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo dell'ossigeno disciolto Passo 11 perazione Se necessario, premere il pulsante N/FF a sinistra per terminare la misurazione dell'ossigeno disciolto (D). Risultato: il pulsante diventa rosso e visualizza FF. Suggerimento: Al fine di aumentare la durata di vita del sensore, durante la fase di calibrazione il tempo del ciclo di controllo dovrebbe essere breve, anche se, durante quella di coltura, è lungo. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 149

150 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo aerazione Controllo aerazione Aerazione Il controllo dell'aerazione con WAVEPD II è utilizzato per fornire miscele d'aria contenenti ossigeno o anidride carbonica. L'aria non miscelata può essere fornita dal WAVE Bioreactor 20/50, ma anche dal WAVEPD II. Ubicazione del controllo Il controllo dell'aerazione nel regolatore WAVEPD II è effettuabile sulle schermate 2MIX CNTRL e C2MIX CNTRL. Le informazioni relative all'aerazione e al controllo sono disposte sul lato destro di ciascuna di queste schermate. Nota: C'è una sola pompa dell'aria. Modificando la portata aria sulla schermata di controllo dell'ossigeno, si modificano anche i valori sulla schermata di controllo dell'anidride carbonica, e viceversa. Vedere Sezione6.3.4 Controllo della concentrazione di 2, a pagina151 oppure Sezione6.3.5 Controllo della concentrazione di C 2, a pagina 154. Allarme La pressione d'uscita dell'aria dalla WAVEPD II è monitorata e, se supera 12 mbar, si innesca un segnale d'allarme. Ciò permette di evitare un eccessivo gonfiaggio del bioreattore Cellbag. 150 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

151 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo della concentrazione di Controllo della concentrazione di 2 Introduzione La concentrazione dell'ossigeno è controllata attraverso la schermata 2MIX CNTRL. Controllo della sovrapressione Se la pressione presente sulla porta MIX UT supera i 7,5 mbar a causa di un blocco o per ostruzione del flusso dell'aria diretto verso Cellbag, l'allarme di sovrapressione inizierà a lampeggiare. Se la condizione di sovrapressione si protrae per oltre 1-2 minuti, la pompa dell'aria si arresta, impedendo l'ulteriore aumento della pressione. Quando viene eliminata la condizione di sovrappressione, la pompa aria riprende il normale funzionamento. Schermata di controllo dell'ossigeno La schermata 2MIX CNTRL fornisce le impostazioni del controllo di miscelazione dell'ossigeno a sinistra, e a destra del controllo dell'aerazione: Controllo della miscelazione dell'ossigeno: Casella di visualizzazione della concentrazione corrente di 2 ( 2 %). Riquadro di visualizzazione del punto di regolazione 2 (SP) con l'indicazione del valore del punto di regolazione della concentrazione di 2. Indicatore 2 supply pressure Un cerchio verde indica che la pressione d'alimentazione è sufficiente, un cerchio rosso indica che la pressione d'alimentazione è insufficiente. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 151

152 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo della concentrazione di 2 Il pulsante CNTRL N/FF, avvia/arresta il controllo dell'ossigeno. Pulsante TREND. Controllo aerazione: Casella di visualizzazione portata aria corrente (lpm). Casella di visualizzazione punto di regolazione portata aria corrente (SP). Indicatore di portata aria (PR lpm). Un cerchio verde indica pressione sufficiente MIX UT, un cerchio rosso indica pressione insufficiente MIX UT. Il pulsante N/FF, avvia/arresta la pompa aria e il controllo dell'aria. Pulsante TREND. Pulsanti comuni: Pulsante ALARMS. Pulsante BACK. pzioni avanzate: Il punto di regolazione 2 può essere impostato attraverso il controllo DPT (RSP, Remote Set Point). Quando l'opzione è attiva, viene visualizzato un messaggio lampeggiante, ad es. RSP from D. Istruzioni Nota: Nota: Passo 1 perazione La portata aria è necessaria per il corretto funzionamento del regolatore 2. I comandi della portata aria sono situati sul lato destro della schermata 2MIX CNTRL. C'è una sola pompa dell'aria. Modificando la portata aria sulla schermata di controllo dell'ossigeno, si modificano anche i valori sulla schermata di controllo dell'anidride carbonica, e viceversa. Premere il pulsante 2MIX nella schermata principale (Sezione6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali, a pagina 124). Risultato: viene visualizzata la schermata 2MIX CNTRL. 152 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

153 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo della concentrazione di 2 Passo 2 perazione Modificare il punto di regolazione dell' 2 : Premere la casella di visualizzazione SP. Inserire un nuovo punto di regolazione (compreso tra il 21% e il 50%) attraverso il tastierino d'inserimento dati visualizzato. Premere il tasto ENT per confermare il nuovo punto di regolazione, CLR per cancellare la visualizzazione e ESC per annullare l'immissione dei dati. 3 4 Premere il pulsante CNTRL N/FF per avviare il controllo dell' 2. Risultato: il pulsante diventa verde e visualizza N. Modificare il punto di regolazione della portata aria: Premere la casella di visualizzazione MIX UT: SP. Inserire un nuovo punto di regolazione (gamma tra 0,05 e 0,5 l/min) attraverso il tastierino d'inserimento dati visualizzato. Premere il tasto ENT per confermare il nuovo punto di regolazione, CLR per cancellare la visualizzazione e ESC per annullare l'immissione dei dati Premere AIR N/FF per avviare il controllo dell'aerazione. Risultato: il pulsante diventa verde e visualizza N. Se necessario, premere il pulsante CNTRL N/FF per interrompere il controllo dell' 2. Risultato: il pulsante diventa rosso e visualizza FF. Se necessario, premere il pulsante AIR N/FF per interrompere il controllo dell'aerazione. Risultato: il pulsante diventa rosso e visualizza FF. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 153

154 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo della concentrazione di C Controllo della concentrazione di C 2 Introduzione La concentrazione dell'anidride carbonica è controllata attraverso la schermata C2MIX CNTRL. Controllo della sovrapressione Se la pressione presente sulla porta MIX UT supera i 12 mbar a causa di un blocco o per ostruzione del flusso dell'aria diretto verso Cellbag, l'allarme di sovrapressione inizierà a lampeggiare. Se la condizione di sovrapressione si protrae per oltre 1-2 minuti, la pompa dell'aria si arresta, impedendo l'ulteriore aumento della pressione. Quando viene eliminata la condizione di sovrappressione, la pompa aria riprende il normale funzionamento. Schermata di controllo dell'anidride carbonica La schermata C2MIX CNTRL fornisce, a sinistra, le impostazioni per il controllo della miscelazione dell'anidride carbonica e, a destra, per il controllo dell'aerazione: Controllo miscelazione dell'anidride carbonica: Casella di visualizzazione dell'attuale concentrazione di C 2 (C 2 %). Casella di visualizzazione del punto di regolazione C 2 (SP) che mostra il punto di regolazione della concentrazione di C WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

155 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo della concentrazione di C 2 Indicatore C 2 supply pressure Un cerchio verde indica che la pressione d'alimentazione è sufficiente, un cerchio rosso indica che la pressione d'alimentazione è insufficiente. Il pulsante CNTRL N/FF, avvia/arresta il controllo dell'anidride carbonica. Pulsante TREND. Controllo aerazione: Casella di visualizzazione portata aria corrente (lpm). Casella di visualizzazione punto di regolazione portata aria corrente (SP). Indicatore di portata aria (PR lpm). Un cerchio verde indica pressione sufficiente MIX UT, un cerchio rosso indica pressione insufficiente MIX UT. Il pulsante N/FF, avvia/arresta la pompa aria e il controllo dell'aria. Pulsante TREND. Pulsanti comuni: Pulsante ALARMS. Pulsante BACK. pzioni avanzate: Il punto di regolazione C 2 può essere impostato attraverso il controllo phpt (RSP, Remote Set Point). Quando l'opzione è attiva, viene visualizzato un messaggio lampeggiante, ad es. RSP from ph. Istruzioni Nota: Nota: Passo 1 perazione Per il corretto funzionamento del regolatore C 2 occorre che la portata aria sia attiva. I comandi di portata aria sono situati sul lato destro della schermata C2MIX CNTRL. C'è una sola pompa dell'aria. Modificando la portata aria sulla schermata di controllo dell'ossigeno, si modificano anche i valori sulla schermata di controllo dell'anidride carbonica, e viceversa. Premere il pulsante C2MIX nella schermata principale (Sezione 6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali, a pagina 124). Risultato: viene visualizzata la schermata C2MIX CNTRL. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 155

156 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo della concentrazione di C 2 Passo 2 perazione Modificare il punto di regolazione della C 2 : Premere la casella di visualizzazione SP. Inserire un nuovo punto di regolazione (compreso tra lo 0% e il 15%) attraverso il tastierino d'inserimento dati visualizzato. Premere il tasto ENT per confermare il nuovo punto di regolazione, CLR per cancellare la visualizzazione e ESC per annullare l'immissione dei dati. 3 4 Premere il pulsante CNTRL N/FF per iniziare il controllo della C 2. Risultato: il pulsante diventa verde e visualizza N. Modificare il punto di regolazione della portata aria: Premere la casella di visualizzazione MIX UT: SP. Inserire un nuovo punto di regolazione (gamma tra 0,05 e 0,5 l/min) attraverso il tastierino d'inserimento dati visualizzato. Premere il tasto ENT per confermare il nuovo punto di regolazione, CLR per cancellare la visualizzazione e ESC per annullare l'immissione dei dati Premere AIR N/FF per avviare il controllo dell'aerazione. Risultato: il pulsante diventa verde e visualizza N. Se necessario, premere il pulsante CNTRL N/FF per interrompere il controllo della C 2. Risultato: il pulsante diventa rosso e visualizza FF. Se necessario, premere il pulsante AIR N/FF per interrompere il controllo dell'aerazione. Risultato: il pulsante diventa rosso e visualizza FF. 156 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

157 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo remoto dello strumento WAVE Bioreactor Controllo remoto dello strumento WAVE Bioreactor Introduzione WAVEPD II controlla i moduli WAVEPD II, come descritto precedentemente in questo capitolo. Inoltre, lo strumento WAVE Bioreactor 20/50 può essere controllato in remoto da WAVEPD II. Se lo strumento WAVE Bioreactor è collegato e operativo, i dati generali vengono visualizzati sul lato sinistro della schermata principale WAVEPD II (Sezione 6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali, a pagina 124). Utilizzando questa funzione, molte delle impostazioni effettuate per WAVE Bioreactor 20/50 e tutte le impostazioni per il WAVEPD II vengono realizzate sul pannello a sfioramento del WAVEPD II. Il pannello a sfioramento del WAVE Bioreactor sarà utilizzato solo per le impostazioni avanzate. Visualizzazione della schermata di controllo dello strumento Passo 1 perazione Collegare lo strumento WAVE Bioreactor a WAVEPD II come descritto in Sezione 4.4 Installazione di WAVEPD II, a pagina 76. Risultato: A sinistra, nella schermata principale del WAVEPD II, vengono visualizzate le informazioni dei parametri e un pulsante con indicazione dello strumento. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 157

158 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo remoto dello strumento WAVE Bioreactor Passo 2 perazione Premere il pulsante dello strumento WAVE Bioreactor 20/50 (2050EHT) sulla schermata principale per arrivare alla schermata di controllo. Risultato: viene visualizzata la schermata di controllo dello strumento. In questo esempio, è collegato uno strumento doppio. Nota: I parametri visualizzati nella schermata di controllo dello strumento dipendono dalla configurazione dello stesso. Nota: Il controllo del peso è presente solo se lo strumento WAVE Bioreactor è configurato con una cella di carico. Tuttavia, viene mostrato solo il valore del peso, mentre il controllo di perfusione deve avvenire attraverso lo strumento WAVE Bioreactor. 158 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

159 Schermata di controllo dello strumento 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo remoto dello strumento WAVE Bioreactor WAVEPD II può controllare in remoto l'oscillazione, la portata aria e la temperatura del WAVE Bioreactor 20/50. Il peso viene visualizzato in remoto, ma non può essere controllato. Pulsante/casella di controllo SPEED rpm, AIR lpm, TEMP ºC, WEIGHT kg SP ANGLEº FF/N TREND BACK BAG Funzione Valore corrente Valore del punto di regolazione Valore del punto di regolazione dell'angolo di oscillazione Controllo dello stato Visualizzazione del grafico a 10 min Ritorno alla schermata generale Impostazione dei formati Cellbag WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 159

160 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo remoto dello strumento WAVE Bioreactor Intervalli dei valori dei parametri Parametro velocità angolo portata aria temperatura Intervallo 2-40 giri/min 2-12º 0-1,0 l/min 0 C - 45 C. Nota: Raffreddamento non disponibile. La temperatura minima consigliata è quella ambiente a + 5 C; la temperatura massima consigliata è di 40 C. peso 0,2-25 kg Nota: Il peso non può essere controllato dal WAVEPD II. Il valore è solamente visualizzato. Selezione della sacca Premere il pulsante BAG sulla schermata di controllo dello strumento. Premere le frecce per selezionare il formato (i formati) della sacca attualmente utilizzata. Premere il pulsante BACK. Nota: In modalità Dual, si possono selezionare due bioreattoricellbag di piccole dimensioni. Per il vassoio di oscillazione 20 in modalità Dual, sono disponibili sacche di due dimensioni, 2 l e 10 l, mentre per il vassoio di oscillazione 50 in modalità Dual è disponibile la sacca da 22 l. Se si seleziona un bioreattore Cellbag di grosse dimensioni, saranno visualizzate soltanto le informazioni corrispondenti al lato sinistro. 160 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

161 Istruzioni per il controllo in remoto 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri Controllo remoto dello strumento WAVE Bioreactor Per il controllo dei parametri in remoto, seguire le istruzioni generali elencate di seguito. Passo 1 perazione Se è necessario, cambiare il valore del punto di regolazione (non l'angolo): Premere la casella SP nella sezione desiderata. Inserire il valore desiderato sul tastierino d'inserimento dati visualizzato. Premere il pulsante ENT per impostare il nuovo valore e tornare alla schermata INSTRUMENT CNTRL. 2 Se è necessario, cambiare il valore del punto di regolazione: Premere la casella ANGLEº nella sezione desiderata. Inserire il valore desiderato sul tastierino d'inserimento dati visualizzato. Premere il pulsante ENT per impostare il nuovo valore e tornare alla schermata INSTRUMENT CNTRL Per attivare il controllo, premere il pulsante FF nella sezione desiderata. Per disattivare il controllo, premere il pulsante N nella sezione desiderata. Se si desidera visionare un grafico dei parametri della sezione desiderata, relativo agli ultimi 10 minuti, premere il pulsante TREND. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 161

162 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.4 Allarmi 6.4 Allarmi Introduzione Gli allarmi sono gestiti nella schermata di registro allarmi ALARM LG. La cronologia allarmi viene conservata fino allo spegnimento dell'unità o in caso di interruzione dell'alimentazione elettrica. Indicazione degli allarmi Un nuovo allarme viene segnalato da: Il pulsante rosso ALARMS lampeggia nella parte inferiore della schermata visualizzata. Si avverte un segnale acustico. L'allarme viene riconosciuto alla visualizzazione della schermata ALARM LG e il pulsante degli allarmi ALARMS diventa giallo smettendo di lampeggiare. Suggerimento: L'avvisatore acustico può essere disabilitato (ALM BEEPER FF) attraverso la schermata SETUP PTINS, vedere Sezione6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento, a pagina 165. Informazioni sulla schermata del registro allarmi Sulla schermata ALARM LG vengono registrati tutti gli allarmi. Ciascuno messaggio di allarme comprende: La data e l'ora in cui l'allarme si è verificato o è stato cancellato. Numero allarme Descrizione allarme Stato dell'allarme (rosso= allarme non riconosciuto, blu= allarme esaminato e riconosciuto, verde= allarme cancellato) Tutti gli allarmi hanno un codice specifico, così come un indicatore data e ora per facilitare la risoluzione dei problemi (vederemessaggi di allarme, a pagina 257). 162 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

163 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.4 Allarmi Come gestire un allarme Per visualizzare e riconoscere un allarme, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo 1 perazione Nella schermata del menu principale MAIN MENU, premere il pulsante allarmi ALARMS Risultato: viene visualizzata la schermata ALARM LG. Questa azione riconosce anche l'allarme Usare le frecce di scorrimento su e giù per scorrere la cronologia allarmi. Per riesaminare un allarme, premere il relativo messaggio. Risultato: viene visualizzata una finestra con maggiori informazioni sull'allarme. Il messaggio d'allarme diventa blu indicando che l'allarme è stato visualizzato. Il registro allarmi ALARM LG può essere riesaminato in qualsiasi momento premendo il pulsante ALARMS nella schermata principale (Sezione 6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali, a pagina 124) oppure premendo il pulsante di revisione REVIEW ALARMS nella schermata delle informazioni di sistema SYSTEM INFRMATIN. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 163

164 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.4 Allarmi Visualizzazione del registro allarmi Per visualizzare il registro allarmi: Premere il pulsante ALARMS sulla schermata principale o Premere il pulsante REVIEW ALARMS nella schermata SYSTEM INF. Cancellazione del registro allarmi È possibile cancellare permanentemente il registro allarmi, vedere Sezione 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento, a pagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

165 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Introduzione Le impostazioni d'allarme, la zona morta per i controlli dei parametri, ecc., possono essere modificati dalla schermata SETUP. Accedere alla schermata SETUP Passo 1 perazione Premere il pulsante SETUP nella schermata MAIN MENU (Sezione 6.1 Schermata principale WAVEPD II e funzioni generali, a pagina 124). Risultato: viene visualizzata la schermata d'inserimento password. La password impedisce al personale non autorizzato di accedere ai parametri di SETUP. La password predefinita è Premere il pulsante ****. Inserire la password. Premere ENT. Risultato: viene visualizzata la schermata SETUP. Le opzioni disponibili nella schermata SETUP dipendono dalla specifica configurazione del sistema. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 165

166 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Schermata SETUP Premere PTINS SET CLK CLEAR ALARM LG DPT phpt 2MIX C2MIX per impostare il tipo WAVE Bioreactor 20/50, l'avvio automatico dopo un'interruzione di corrente (on/off), il riconoscimento automatico degli allarmi (on/off) e il cicalino di allarme (on/off). impostare l'ora dello strumento. cancellare il registro allarmi memorizzato. Se si cancella il registro degli allarmi non potrà essere recuperato. impostare i vari parametri dell'ossigeno disciolto. impostare i vari parametri ph. impostare i vari parametri dell' 2. impostare i vari parametri della C WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

167 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Impostazione di: tipo di strumento, avvio automatico e opzioni d'allarme La schermata di configurazione è raggiungibile premendo il pulsante PTINS. Nella schermata PTINS è possibile impostare: Tipo di strumento WAVE Bioreactor 20/50 (opzioni disponibili; 2050EHT_SINGLE, 2050EHT_DUAL, 2050EHT_C2, 2050EHT_2 e NNE). Fare clic nel campo Instrument type per visualizzare il tipo di strumento desiderato. Il valore predefinito è NNE. Auto Start N/FF sia per lo strumento WAVEPD II (WAVEPD) sia per WAVE Bioreactor 20/50 (WAVE Bioreactor). Per modificare l'impostazione, fare clic sul simbolo dell'impostazione desiderata. Se questa impostazione è abilitata (N), lo strumento si avvia nello stesso stato dell'ultimo spegnimento o caduta di potenza. Il valore predefinito è N. Ricon. auto N/FF sia per WAVEPD II (WAVEPD) sia per lo strumento WAVE Bioreactor 20/50 (WAVE Bioreactor). Per modificare l'impostazione, fare clic sul simbolo dell'impostazione desiderata. Normalmente l'utente deve riconoscere qualsiasi nuovo allarme premendo il pulsante ALARMS per visualizzare la schermata della cronologia allarmi. Se la funzione Auto Ack è impostata su N, tutti gli allarmi vengono automaticamente riconosciuti. Non viene generato alcun messaggio di avviso, ma l'allarme rimane registrato. Il valore predefinito è FF. UNICRN DAQ Data Acquisition N/FF. Per modificare l'impostazione, fare clic sul simbolo dell'impostazione desiderata. Deve essere abilitata per l'installazione del Converter 100 e quando si utilizza UNICRN DAQ durante la coltura. Alarm beeper per WAVEPD II. Per modificare l'impostazione, fare clic sul simbolo dell'impostazione desiderata. Il valore predefinito è N. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 167

168 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Impostazione dell'ora La schermata di configurazione è raggiungibile premendo il pulsante SET CLCK. Sulla schermata SET CLCK è possibile impostare l'ora delle strumento WAVEPD II (Hour:Minute e Month/Day/Year). L'ora corrente è visualizzata a destra. Premere la casella del parametro desiderato dell'ora per modificarlo. Fare clic su BACK quando l'ora è stata impostata. Cancellazione del registro allarmi Premere il pulsante CLEAR ALARM LG per cancellare il registro allarmi memorizzato. Evitare di premere accidentalmente il pulsante CLEAR ALARM LG poiché così facendo il registro allarmi non potrà essere successivamente ripristinato. Configurazioni dei parametri di controllo comuni Nelle schermate di configurazione di controllo per l'ossigeno disciolto, il ph, l'2 e la C2 si trovano diversi controlli comuni che sono spiegati nella tabella indicata di seguito. Controllo Allarme DEV Descrizione Allarme deviazione. Se questo parametro è impostato su FF, la deviazione dal punto di regolazione non verrà monitorata. Valore predefinito: N. Disponibile per ossigeno disciolto, ph, 2 e C WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

169 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Controllo Limite DEV DBAND Descrizione Limite di deviazione. Imposta i limiti d'allarme per la deviazione di ossigeno disciolto/ph/2mix/c2mix. Viene attivato un allarme deviazione quando il valore del parametro differisce dal punto di regolazione di +/- questo valore. L'allarme di deviazione è attivo solo se DEV alarm è su N e il regolatore desiderato è N. Disponibile per ossigeno disciolto, ph, 2 e C 2. Zona morta. Se il valore del parametro si trova entro questa zona morta, non si attua nessuna azione di controllo. Aumentando la zona morta, il controllo risulterà più approssimativo. Disponibile per ossigeno disciolto e ph. Per il controllo del ph tramite C 2, la zona morta è definita come unità di ph +/- il punto di regolazione. Per il controllo di ph tramite il sistema acido/base, è definita come % del tempo di ciclo. La quantità aggiunta di acido o di base è controllata attivando la pompa (a una velocità prefissata) per una certa percentuale del tempo di ciascun ciclo di controllo. Impostando un valore percentuale per la zona morta, viene impostato un limite inferiore su tutte le aggiunte di acido/base, in modo che se la richiesta di aggiunta del controllo del ph è inferiore al valore della zona morta, l'aggiunta non verrà effettuata. Quando si applica lo schema di controllo C 2 /base, devono essere inseriti entrambi i valori della zona morta. Per ulteriori informazioni, vedere Sezione B.2 Misurazione e controllo del ph, a pagina 274. Pulsanti di configurazione del controllo per ossigeno disciolto e ph I seguenti pulsanti servono alla regolazione di ossigeno disciolto e ph sulle rispettive schermate di configurazione. Premerli per raggiungere le schermate di dettaglio. Impostazione dei tempi di controllo Ritardo di transizione Info/Help WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 169

170 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Impostazione dei tempi di controllo Sulle schermate ciclo di controllo, è impostato l'intervallo di campionamento. È uguale al tempo del ciclo di controllo. Dopo ogni azione di controllo, il regolatore deve attendere un ciclo di controllo predefinito per consentire che il passaggio dall'ultima azione di controllo porti a una nuova misurazione stabile. Se il tempo di campionamento, e quindi il tempo impostato per il controllo, è troppo breve, il regolatore potrebbe effettuare una sovracompensazione. Se, invece, l'impostazione è su un tempo troppo lungo, il parametro potrebbe non essere controllato correttamente e registrare una deviazione. Vedere anche Impostazione dei parametri di controllo ph, a pagina 203. Schermata per l'ossigeno disciolto Schermata del ph Ritardo di transizione Nella schermata del ritardo di transizione, viene impostato il ritardo utile ad evitare commutazioni non necessarie tra diverse modalità di controllo. Per ulteriori informazioni, vedere Sezione B.2 Misurazione e controllo del ph, a pagina 274 e Sezione B.3 Misurazione e controllo dell'ossigeno disciolto, a pagina 278. Nota: Si consiglia di impostare i tempi di ritardo della transizione su valori 15 volte maggiori rispetto a quelli del ciclo di controllo. Notare che i tempi di ritardo della transizione sono impostati in minuti, mentre quelli del ciclo di controllo in secondi. 170 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

171 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Schermata per l'ossigeno disciolto Ritardo tra 2 e velocità Ritardo tra velocità e 2 Schermata del ph Ritardo tra C2 e base Ritardo tra base e C2 Info/Help Questa schermata fornisce informazioni circa gli schemi di controllo. I pulsanti addizionali sulla schermata info del ph aprono nuove schermate con informazioni dettagliate su singoli parametri di controllo. Schermata per l'ossigeno disciolto Schermata del ph WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 171

172 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Schermata di configurazione per il controllo dell'ossigeno disciolto La schermata di configurazione del controllo è raggiungibile premendo il pulsante DPT sulla schermata di SETUP. Nella schermata D CNTRL SETUP si può impostare un allarme, il controllo velocità, il controllo ossigeno e i parametri di controllo comuni. Lo schema di controllo (velocità, ossigeno o velocità/ossigeno) è selezionato nella schermata DPT, vedere Sezione6.3.2 Controllo dell'ossigeno disciolto, a pagina 140. Il lato sinistro prevede: Allarme deviazione (DEV alarm), N/FF Limiti deviazione (DEV limit), gamma da 0% a 10% (valore predefinito: 10%) Pulsante Set control cycle times, gamma da 10 a 999 secondi Pulsante 2/Speed Transition delay, parametri di commutazione tra i meccanismi di controllo Pulsante Info/Help Pulsante BACK Il centro della schermata fornisce le impostazioni utilizzate quando si controlla l'ossigeno disciolto tramite la velocità di oscillazione: Gamma di zona morta per D (DBAND), gamma da 0% a 100% sat. aria STEP (giri/min) definisce la velocità con cui il regolatore modifica la velocità di oscillazione per ciclo, gamma fino a 10,0 giri/min-ciclo limite inferiore di velocità durante la regolazione (min SPEED), gamma da 2 a 40 giri/min limite superiore di velocità durante la regolazione (max SPEED), gamma da 2 a 40 giri/min Il lato destro fornisce le impostazioni utilizzate quando si controlla l'ossigeno disciolto tramite l'2: Gamma di zona morta per D (DBAND), gamma da 0% a 100% sat. aria 172 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

173 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento I valori del regolatore PID (P, I e D) definiscono come il regolatore debba modificare l'impostazione della concentrazione dell' 2 per ciclo. limite inferiore di concentrazione durante la regolazione (2 min), gamma dell' 2 da 0,0% a 50,0% limite superiore di concentrazione durante la regolazione (2 max), gamma dell' 2 da 0,0% a 50,0% Valori predefiniti I valori predefiniti dei parametri di controllo sono pre-impostati in fase d'assemblaggio e vengono forniti nella tabella indicata di seguito. Parametro DEV ALARM DEV limit SPEED 2 D Control cycle 2/SPEED Transition delay DBAND STEP min SPEED max SPEED DBAND P I D 2 min 2 max 2 SPEED 2->SPEED SPEED->2 Valore predefinito FF ,0 1, WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 173

174 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Schermata di configurazione del controllo ph La schermata di configurazione del controllo è raggiungibile premendo il pulsante phpt sulla schermata SETUP. Nella schermata ph CNTRL SETUP si può impostare un allarme, le impostazioni di controllo acido/base, le impostazioni di controllo anidride carbonica e i parametri di regolazione comuni. Lo schema di controllo (acido/base o C2/base) è selezionato nella schermata phpt, vedere Sezione Controllo di ph, a pagina 130. Il lato sinistro prevede: Allarme deviazione (DEV alarm), N/FF Limiti deviazione (DEV limit), gamma da 0,0 a 1,0 in unità di ph Pulsante Set control cycle times. Pulsante C2/base Trans. Delay, parametri di commutazione tra i meccanismi di controllo Pulsante Pump Calibration, vedere Calibrazione della portata della pompa, a pagina 206 Pulsante BACK Pulsante Info/Help Il centro della schermata fornisce le impostazioni utilizzate quando si controlla il ph tramite il meccanismo dell'acido/base: Gamma della zona morta per aggiunte di acido/base (DBAND), gamma da 0% a 10% del tempo di ciclo I valori del regolatore PID (P, I e D) definiscono come il controller debba modificare le aggiunte di acido/base per ciclo. Guadagno acido (ACID GAIN), moltiplicatore che influenza il tempo di attività della pompa come parte del tempo di ciclo, gamma da 0 a WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

175 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Guadagno base (BASE GAIN), moltiplicatore che influenza il tempo di attività della pompa come parte del tempo di ciclo, gamma da 0 a 10 Il lato destro fornisce le impostazioni utilizzate quando si controlla il ph tramite il meccanismo della C2: Gamma di zona morta per ph (DBAND), gamma da 0,0 a 1,0 unità di ph. Si consiglia di impostare questo valore su 0,0. I valori del regolatore PID (P, I e D) definiscono come il regolatore debba modificare l'impostazione della concentrazione della C 2 per ciclo. limite inferiore di concentrazione durante la regolazione (C2 min), gamma della C 2 da 0,0% a 15,0% limite superiore di concentrazione durante la regolazione (C2 max), gamma della C 2 da 0,0% a 15,0% Valori predefiniti I valori predefiniti dei parametri di controllo sono pre-impostati in fabbrica e vengono forniti nella tabella indicata di seguito. Parametro DEV ALARM DEV limit ACID/BASE C2 DBAND P I D Acid gain Base gain DBAND P I D C2 min C2 max Valore predefinito FF 0, ,0 1, , WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 175

176 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Parametro ph Control cycle C2/BASE Transition delay Acid/Base C2 C2->BASE BASE->C2 Valore predefinito Nota: Per ridurre l'effetto di fotodecadimento, è consigliabile selezionare l'intervallo di campionatura in maniera tale che il numero totale delle misurazioni di campionatura del ph sia pari a circa massimo. Schermata di configurazione di controllo dell' 2 La schermata di configurazione del controllo è raggiungibile premendo il pulsante 2 MIX sulla schermata SETUP. Nella schermata 2MIX CNTRL SETUP è possibile: Impostare l'allarme di deviazione della concentrazione di 2 (DEV alarm), N/FF. Impostare i limiti di deviazione dell' 2 (DEV limit), gamma da 0,0% a 5,0%. Visualizzare la reale concentrazione di 2 (2 PV). Impostare 2 FFSET, lievi regolazioni delle impostazioni della concentrazione di 2 possono essere effettuate modificando l'offset. Impostare l'allarme deviazione della portata aria (AIRFLW DEV alarm), N/FF Il limite di allarme deviazione è fissato a 0,02 l/min. Impostare SCALING (ml/min): lievi regolazioni della portata aria sono possibili modificando il fattore di scala. Impostare il punto di regolazione della portata aria (AIR SP)), gamma da 0,0 a. 176 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

177 6 Sistema di controllo WAVEPD II 6.5 Modifica delle impostazioni di funzionamento Nota: Se necessario, contattare GE Healthcare per il servizio di regolazione. Schermata di configurazione di controllo della C 2 La schermata di configurazione del controllo è raggiungibile premendo il pulsante C2MIX sulla schermata SETUP. Nella schermata C2MIX CNTRL SETUP è possibile: Impostare l'allarme di deviazione della concentrazione di C 2 ((DEV alarm), N/FF. Impostare il limite di deviazione della concentrazione C 2 (DEV limit), gamma da 0,0% a 5,0%. Visualizzare l'attuale concentrazione di C 2 (C2 PV). Impostare C2 FFSET, lievi regolazioni delle impostazioni della concentrazione di C 2 possono essere effettuate modificando l'offset. Impostare l'allarme deviazione della portata aria (AIRFLW DEV alarm), N/FF Il limite di allarme deviazione è fissato a 0,02 l/min. Visualizzare la portata aria corrente (AIR PV). Impostare SCALING (ml/min): lievi regolazioni della portata aria sono possibili modificando il fattore di scala. Impostare la portata aria (AIR SP). Nota: Se necessario, contattare GE Healthcare per il servizio di regolazione. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 177

178 7 Software UNICRN DAQ Software UNICRN DAQ 1.0 Informazioni sul capitolo Questo capitolo descrive il software UNICRN DAQ 1.0 utilizzato per l'acquisizione dei dati provenienti dalla coltura celle. In questo capitolo Sezione 7.1 Introduzione UNICRN DAQ Moduli UNICRN DAQ Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

179 7 Software UNICRN DAQ Introduzione UNICRN DAQ Introduzione UNICRN DAQ 1.0 Introduzione Questa sezione fornisce un breve panoramica di UNICRN DAQ 1.0: un software per l'acquisizione di dati, la registrazione e la valutazione della colture. Descrive inoltre come accedere all'utility di guida compresa in UNICRN DAQ. Per informazioni dettagliate sul software, leggere UNICRN DAQ User manual for WAVE Bioreactor. Descrizione generale dei moduli UNICRN DAQ UNICRN DAQ 1.0 è composto da tre moduli: Administration, System Control e Evaluation. Le principali funzioni di ciascun modulo sono descritte nella tabella seguente. Modulo UNICRN Manager System Control Evaluation Funzioni principali Esegue la configurazione del sistema e dell'utente, amministra e gestisce i file. Avvia e visualizza i cicli. Consente di aprire i risultati, di valutare le colture e di creare resoconti. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 179

180 7 Software UNICRN DAQ Introduzione UNICRN DAQ 1.0 Accesso ad un modulo UNICRN DAQ Per accedere ad un modulo: cliccare sul pulsante Taskbar del modulo interessato, oppure fare clic sulla corrispondente icona sull barra degli strumenti del modulo UNICRN Manager: Modulo Evaluation Modulo System Control oppure selezionare il modulo d'interesse dal menu Tools nel modulo UNICRN Manager. 180 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

181 7 Software UNICRN DAQ Moduli UNICRN DAQ 7.2 Moduli UNICRN DAQ Modulo UNICRN Manager Il modulo UNICRN Manager è utilizzato principalmente per realizzare la configurazione del sistema e dell'utente, e l'amministrazione di file e cartelle. I risultati possono essere aperti anche con un doppio clic sul nome del file nella finestra Results Il modulo Manager non sarà descritto nel presente manuale. Per informazioni, leggere UNICRN DAQ User manual for WAVE Bioreactor. Modulo di controllo del sistema Introduzione Il modulo System Control è utilizzato per monitorare e memorizzare i dati provenienti dal processo di coltura celle. Questa sezione fornisce una breve panoramica delle funzioni. Per ulteriori informazioni, leggere UNICRN DAQ User manual for WAVE Bioreactor. Riquadri System Control Nel modulo System Control possono essere visualizzati fino a quattro riquadri. Il riquadro Run Data (1) indica i dati correnti espressi in valori numerici, mentre il riquadro Curves (2) illustrata i dati sotto forma di curve durante l'intera coltura. Il riquadro Flow Scheme visualizza la configurazione del sistema e lo stato dei suoi componenti (3). Gli eventi registrati, quali l'avvio e il termine dell'acquisizione di dati, le istruzioni manuali e gli errori vengono presentati nel riquadro Run Log (4) Icone della barra strumenti System Control La tabella seguente mostra le icone della barra strumenti System Control. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 181

182 7 Software UNICRN DAQ Moduli UNICRN DAQ Icona Funzione Icona Funzione Run: avvia l'esecuzione di un metodo Connect System: collega un sistema WAVE Bioreactor End: termina definitivamente l'esecuzione del metodo Disconnect System: scollega il sistema WAVE Bioreactor Customize Panes: apre la finestra dei riquadri Customize Take Control of System: abbandona la modalità di visualizzazione e passa a quella di controllo, in modo che possano essere applicate le istruzioni manuali View Documentation: apre le pagine di documentazione ciclo Leave Control of System: abbandona la modalità controllo e passa a quella di visualizzazione View Properties: apre la finestra di dialogo Properties Nota: L'icona Run può essere usata solo se Guida rapida d'avvio è stato precedentemente selezionato un metodo modello con File:Instant Run e UNICRN non è stato chiuso dopo la precedente acquisizione Le istruzioni indicate di seguito descrivono la via più semplice per avviare la raccolta di dati da WAVE Bioreactor e stampare un resoconto. Per maggiori dettagli sull'acquisizione di dati e sulla valutazione dei dati di ciclo, fare riferimento a UNICRN DAQ User manual for WAVE Bioreactor. Passo 1 perazione Nel modulo System Control, selezionare File:Instant Run. Risultato: viene visualizzata la finestra di dialogo Instant run 182 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

183 7 Software UNICRN DAQ Moduli UNICRN DAQ Passo 2 perazione Selezionare un sistema (se sono disponibili diversi sistemi WAVE Bioreactor) Assicurarsi che Template sia selezionato Selezionare il metodo modello nella lista Template Fare clic sul pulsante Run Risultato: inizia l'acquisizione di dati che può essere monitorata nel modulo System Control, riquadro Curves Per terminare l'acquisizione dei dati, fare clic sull'icona End nel modulo System Control. Risultato: si apre una finestra di dialogo che richiede conferma prima di salvare il risultato parziale. Fare clic sul pulsante K per salvare il risultato. Quando lo si desidera, fare clic su End per terminare l'acquisizione di dati. Nel modulo Evaluation: Collocare e selezionare il file del risultato nella lista Recent Runs. Fare clic sull'icona Report: Selezionare un formato per resoconto e fare clic su K. Risultato: il resoconto preformattato viene visualizzato nel modulo Evaluation. 7 Fare clic sull'icona Print: Risultato: il resoconto viene stampato. Monitoraggio della coltura La seguente tabella contiene brevi istruzioni per alcune comuni operazioni nel modulo System Control. Per ulteriori informazioni, fare riferimento a UNICRN DAQ User manual for WAVE Bioreactor. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 183

184 7 Software UNICRN DAQ Moduli UNICRN DAQ Se si desidera... selezionare le curve da visualizzare visualizzazione di una linea indicatrice verticale cambiare la scala dell'asse Y Quindi... Selezionare View:Properties Selezionare la scheda Curves nella finestra di dialogo Properties Selezionare le curve da visualizzare nella lista Display curves Fare clic su K Fare clic col tasto destro del mouse sul riquadro Curves, quindi selezionare Marker. Trascinare la linea indicatrice con il mouse Selezionare View:Properties Selezionare la scheda Y-axis Selezionare la curva appropriata Selezionare Fixed e inserire una gamma nei campi cambiare la scala dell'asse X Selezionare View:Properties Selezionare la scheda X-axis Selezionare la Axis scale desiderata ingrandire la visualizzazione nel riquadro Curves Mantenere premuto il pulsante sinistro del mouse e trascinare il rettangolo sopra l'area da visualizzare Rilasciare il pulsante del mouse per ingrandire Per tornare indietro o resettare lo zoom, fare clic col tasto destro del mouse nel riquadro Curves, quindi selezionare Undo Zoom o Reset Zoom Modulo Evaluation Introduzione Il modulo Evaluation è utilizzato per aprire i risultati, valutare le colture e creare dei resoconti. Questa sezione fornisce solo una breve panoramica delle funzioni. Per ulteriori informazioni, leggere UNICRN DAQ User manual for WAVE Bioreactor. 184 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

185 7 Software UNICRN DAQ Moduli UNICRN DAQ Icone della barra strumenti Evaluation La tabella seguente mostra le icone della barra strumenti Evaluation. Icona Funzione Icona Funzione pen: visualizza tutte le cartelle e i file disponibili dei risultati nella finestra di dialogo pen Result. Report: visualizza la finestra di dialogo Generate report in cui è possibile creare un resoconto del risultato. pen Curves to Compare: viene visualizzata la finestra di dialogo pen Curves to Compare nella quale si possono selezionare varie curve da confrontare. View Documentation: viene visualizzata la finestra di dialogo Documentation contenente la documentazione completa di una certa coltura. Save: salva le modifiche apportate al risultato attuale. Chromatogram Layout: viene visualizzata la finestra di dialogo Chromatogram Layout nella quale si possono selezionare e formattare le curve. Print: viene visualizzata la finestra di dialogo Print chromatograms nella quale si possono stampare le curve. Visualizzazione dei risultati della coltura Leggere UNICRN DAQ User manual for WAVE Bioreactor per informazioni su come: visualizzare un risultato cambiare i dettagli di visualizzazione (zumare su una curva, cambiare l'unità di misura dell'asse y, selezionare le curve da visualizzare, ecc.) creare un resoconto stampare un resoconto WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 185

186 8 Funzionamento 8 Funzionamento Informazioni sul capitolo Il presente capitolo descrive come utilizzare il WAVE Bioreactor 20/50. In questo capitolo Sezione 8.1 Generalità di funzionamento 8.2 Avvio del sistema 8.3 Montaggio del sistema 8.4 Collegamento dell'aerazione 8.5 Preparazione di WAVEPD II 8.6 Impostazione delle condizioni di monitoraggio e del controllo di funzionamento 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione 8.8 Effettuazione della coltura 8.9 pzioni di coltura 8.10 Coltura finale Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

187 8 Funzionamento 8.1 Generalità di funzionamento 8.1 Generalità di funzionamento Sistema di controllo di WAVE Durante la coltura cellulare, il controllo di funzionamento, monitoraggio e dei principali parametri del sistema WAVE Bioreactor 20/50 dipende dalla configurazione del sistema stesso nonché dalla presenza opzionale di WAVEPD II e degli strumenti autonomi. Le funzioni principali dei sistemi di controllo sono descritte in Capitolo 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor, a pagina 87 e Capitolo 6 Sistema di controllo WAVEPD II, a pagina 123. Per informazioni circa i sistemi di controllo dei moduli autonomi, vedere Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/50. Flusso di lavoro Fase 1 Descrizione Montaggio dei componenti del sistema Montaggio di protezione riscaldatore, vassoio di oscillazione e sensore di temperatura pzionale: collegamento di WAVEPD II e/o degli strumenti autonomi Assemblare la Cellbag e collegare le fibre ottiche se necessario Collegare l'aerazione (includendo la sorgente di alimentazione opzionale di gas 2 e/o C 2 ) ed, eventualmente, la tubazione acido/base o quella di alimentazione/raccolta al(i) bioreattore(i) Cellbag ed eventualmente alle fibre ottiche. 2 Preparazione del sistema alla coltura Avviare i componenti di sistema, incluso il modulo WAVEPD II opzionale e/o gli strumenti autonomi. Gonfiaggio della Cellbag Riempire la Cellbag col mezzo di coltura Impostazione delle condizioni di coltura Bilanciamento della Cellbag Calibrare e regolare i sensori WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 187

188 8 Funzionamento 8.1 Generalità di funzionamento Fase 3 Descrizione Avvio della coltura Inoculazione della Cellbag Monitoraggio e controllo delle condizioni di coltura Calibrare e regolare i sensori 4 Azioni opzionali durante la coltura Prelievo di campioni dalla coltura Calibrazione dell'offset dei sensori ottici Scambio del mezzo di coltura Progressivo aumento della coltura 5 Coltura finale Raccolta Procedure dopo il ciclo di funzionamento 188 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

189 8 Funzionamento 8.2 Avvio del sistema 8.2 Avvio del sistema Istruzioni ATTENZINE Durante l'inizializzazione, la piastra di oscillazione si inclina avanti e indietro. Tenersi a distanza di sicurezza. Per avviare il sistema seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo 1 2 perazione Accertarsi che tutti gli strumenti autonomi siano installati correttamente. Azionare l'interruttore d'alimentazione elettrica dello strumento WAVE Bioreactor (I). L'interruttore si trova nella parte posteriore dello strumento. Risultato: lo strumento WAVE Bioreactor entra in fase d'inizializzazione. La piastra di oscillazione dello strumento WAVE Bioreactor comincia a inclinarsi lentamente verso il retro. fino ad incontrare l'interruttore di sicurezza posteriore (barra a sfioramento bianca), quindi si sposta in avanti fino a quando colpisce l'interruttore di sicurezza anteriore. La piastra di oscillazione si sposta dunque alla posizione di campionamento e si arresta. Dopo l'inizializzazione, la schermata principale viene visualizzata sul pannello a sfioramento. Suggerimento: Il pannello a sfioramento può essere angolato per facilitare la visione, oppure staccato e montato in posizione remota. Il cavo del pannello a sfioramento è di tipo telefonico standard. Nota: Se l'interruttore di sicurezza viene premuto, l'oscillazione si arresta e l'unità di oscillazione si porta a livello. Nota: Se gli interruttori di sicurezza sono stati premuti, è necessario spegnere () e riaccendere (I) il sistema per resettare l'interruttore stesso. 3 pzionale: Portare gli interruttori di alimentazione desiderati degli strumenti autonomi installati in posizione (I). WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 189

190 8 Funzionamento 8.2 Avvio del sistema Passo 4 perazione pzionale: Accendere UNICRN DAQ 1.0: Accendere il computer su cui è installato UNICRN DAQ 1.0. Accendere il Converter 100. Avviare il software dal menu d'avvio di Microsoft Windows o facendo doppio clic sull'icona nel desktop. Effettuare il log-in al software. 190 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

191 8 Funzionamento 8.3 Montaggio del sistema 8.3 Montaggio del sistema Montaggio di protezione riscaldatore, vassoio di oscillazione e sensore di temperatura Se la protezione riscaldatore, il vassoio di oscillazione e il sensore di temperatura non sono presenti, seguire le istruzioni per montarli ininstallazione del vassoio di oscillazione e del sistema di controllo della temperatura, a pagina 63. Per ulteriori informazioni sulle dimensioni disponibili per il vassoio di oscillazione, fare riferimento a Vassoio di oscillazione e bioreattore Cellbag, a pagina 54. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 191

192 8 Funzionamento 8.3 Montaggio del sistema Predisporre il controllo ossigeno disciolto e/o ph AVVIS La sacca deve essere aperta soltanto dopo essere entrati nell'area di produzione. Rimuovere la confezione protettiva interna di colore nero immediatamente prima dell'uso. Parti del sensore ottico L'adattatore della sacca per l'accoppiamento alla relativa porta (phpt o DPT II) si trova a un'estremità del cavo a fibra ottica. L'obiettivo ottico del cavo a fibra ottica si trova al centro dell'adattatore della sacca. Vedere l'immagine seguente. A seguire è riportata l'immagine di una porta dell'adattatore ottico che si trova nella parte inferiore di un bioreattore Cellbag configurato con sensori ottici. Il sensore è il puntino al centro (1) della porta della sacca (bianco per phpt, rosa/nero per DPT II). L'adattatore della sacca è fissato alla porta della sacca a sensori mediante quattro spine (2) WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

193 8 Funzionamento 8.3 Montaggio del sistema Collegamento della fibra ottica al bioreattore Cellbag. AVVIS Una luce intensa può danneggiare i sensori ottici. Rimuovere la sacca nera protettiva poco prima dell'utilizzo per evitare l'illuminazione dei sensori ottici. Passo perazione Accendere il bioreattore Cellbag e posizionarlo su una superficie solida con la parte inferiore rivolta verso l'alto. Localizzare le porte delle sacche a sensori phpt e/o DPT II. Il sensore phpt è bianco, mentre quello DPT II è rosa. Per facilitare l'identificazione, sono anche presenti etichette poste in posizione adiacente alle porte delle sacche. Se si utilizzano entrambi i sensori phpt e DPT II, è necessario un cavo a fibra ottica per ciascun sensore. Controllare che i cavi in fibra (p.es., con un pezzo di nastro) siano collegati all'apposito monitor di WAVEPD II. Fissare l'adattatore della sacca, con l'obiettivo rivolto verso la porta della sacca a sensori, inserendo le quattro spine della porta della sacca nei fori corrispondenti dell'adattatore della sacca. Nota: L'adattatore sacca può essere fissato in una qualsiasi delle quattro direzioni ortogonali. Selezionare una direzione che consenta il passaggio più diretto possibile della fibra quando si posiziona la sacca sul vassoio. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 193

194 8 Funzionamento 8.3 Montaggio del sistema Passo 4 perazione Ruotare l'adattatore della sacca in senso orario per fissare le spine sulla relativa porta dell'adattatore. Quando si sente chiaramente un "clic" significa che l'adattatore è stato fissato saldamente. Indirizzare i cavi a fibra ottica lateralmente all'esterno del piatto verso l'unità WAVEPD II. Nota: Quando si ruota l'adattatore della sacca, evitare di esercitare forza sul cavo a fibra ottica. Fissare i bioreattori Cellbag Per fissare i bioreattori Cellbag sul vassoio di oscillazione, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo perazione Selezionare la dimensione di Cellbag in base alle esigenze dell'esperimento e all'impostazione dello strumento. Per il funzionamento Dual si possono utilizzare due bioreattori Cellbag. Estrarre i bioreattori Cellbag monouso selezionati dalle confezioni protettive in plastica. Aprire le guide sul vassoio di oscillazione sollevando le leve delle camme situate su entrambi i lati del vassoio. 194 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

195 8 Funzionamento 8.3 Montaggio del sistema Passo 4 perazione Inserire il bioreattore Cellbag nel vassoio di oscillazione e premere ciascuna delle due aste in plastica nella corrispondente guida aperta. Assicurarsi di posizionare il bioreattore Cellbag con le porte di campionamento verso il lato anteriore. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 195

196 8 Funzionamento 8.3 Montaggio del sistema Passo 5 perazione Girare e premere le leve delle camme per bloccare il bioreattore Cellbag nel vassoio di oscillazione. Nota: L'eventuale impiego di sacche diverse dai bioreattori GE Healthcare Cellbag sull'attrezzatura WAVE comporta la perdita di validità della garanzia e la mancata accettazione di eventuali reclami di assistenza. AVVIS Durante la coltura, si raccomanda vivamente di proteggere i bioreattori Cellbag dotati di sensori ottici integrati con una copertura non trasparente, ad es. un coperchio o la confezione nera nella quale viene consegnato il bioreattore Cellbag, per ridurre il degrado del sensore causato dall'esposizione alla luce. pzionale: collegamento di WAVEPD II e/o degli strumenti autonomi Alcune configurazioni degli strumenti WAVE Bioreactor 20/50 sono prive di alcune funzioni di controllo. WAVEPD II e altri strumenti autonomi possono essere utilizzati per le funzioni di controllo desiderate. Collegare strumenti adatti che non sono ancora presenti nel sistema. Per le istruzioni su come collegare WAVEPD II a WAVE Bioreactor 20/50, vedere Sezione 4.4 Installazione di WAVEPD II, a pagina 76. Per le istruzioni su come collegare la tubazione, ecc. a WAVEPD II, vederesezione8.5 Preparazione di WAVEPD II, a pagina200. Per le istruzioni su come collegare gli strumenti autonomi, vedere Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/ WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

197 8 Funzionamento 8.4 Collegamento dell'aerazione 8.4 Collegamento dell'aerazione Introduzione I bioreattori Cellbag necessitano di aerazione per rimanere gonfiati e garantire un'adeguata ventilazione. L'aria di ventilazione può essere l'aria ambiente, l'aria prodotta da una stufa termostatica o una speciale miscela di gas in base alla linea cellulare e al sistema di tamponi impiegati. Lo strumento WAVE Bioreactor 20/50 dispone di una pompa aria interna (due nella versione doppia) che serve per aerare i bioreattori Cellbag. Il gas viene aspirato dalla porta Air In dello strumento WAVE Bioreactor 20/50 mediante una pompa interna e alimentato dalla porta Air ut al bioreattore Cellbag. L'aerazione può essere fornita anche da uno strumento WAVEPD II o di tipo autonomo. Per alcune configurazioni è possibile impostare la concentrazione di C 2 e/o di 2 in abbinamento all'aerazione. Seguire le istruzioni indicate di seguito per collegare l'aerazione tra WAVEPD II e Cellbag. Per le istruzioni su come collegare l'aerazione tra lo strumento autonomo e Cellbag, vedere Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/50. Illustrazione di ingresso/uscita aria Le porte Air In e Air ut di WAVE Bioreactor 20/50 si trovano sul pannello di sinistra. In caso di strumenti doppi, le porte si trovano anche sul lato destro. Parte Funzione Connettore Temp Air ut Air In WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 197

198 8 Funzionamento 8.4 Collegamento dell'aerazione Impostazione del sistema di aerazione del bioreattore Per impostare il sistema di aerazione del bioreattore seguire le istruzioni indicate di seguito: Collegare l'ingresso e l'uscita dell'aria secondo la seguente tabella. Accertarsi che i morsetti delle tubazioni dei filtri di ingresso e uscita siano aperti. Per... ingresso aria ambiente ingresso aria di processo Ingresso dell'aria arricchita di C 2 o 2 mediante WAVE Bioreactor 20/50 dotato di configurazione C 2 o 2 Ingresso dell'aria arricchita di C 2 o 2 mediante i moduli C2MIX o 2MIX di WAVEPD II Ingresso dell'aria arricchita di C 2 o 2 mediante i regolatori esterni C2MIX20, 2MIX20, C2MIX20-R o 2MIX20-R Quindi... Collegare il tubo dell'aria in dotazione tra la porta Air ut situata sul lato sinistro del bioreattore e il filtro d'ingresso del bioreattore Cellbag. Lasciare scollegata la porta Air In. Collegare il tubo dell'aria in dotazione tra la porta Air ut situata sul lato sinistro del bioreattore e il filtro d'ingresso del bioreattore Cellbag. Collegare l'alimentazione dell'aria di processo (< 0,2 bar) alla porta Air In. Collegare il tubo dell'aria in dotazione tra la porta Air ut situata sul lato sinistro del bioreattore e il filtro d'ingresso del bioreattore Cellbag. VedereCollegare la C 2 o l' 2 allo strumento configurato, a pagina 199. VedereSezione 8.5 Preparazione di WAVEPD II, a pagina 200. Vedere il manuale Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/ WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

199 8 Funzionamento 8.4 Collegamento dell'aerazione Collegare la C 2 o l' 2 allo strumento configurato Per collegare il gas dell'anidride carbonica allo strumento WAVE Bioreactor quando è dotato di configurazione per la C 2, seguire le istruzioni indicate di seguito. Lo strumento controlla l'aerazione. Passo perazione Impostare l'alimentazione esterna del gas (100% di C 2 o 2 ) tra 0,7 e 1,0 bar (da 10 a 15 psig). Collegare l'alimentazione del gas al connettore d'ingresso C2 IN o 2 IN sul lato dello strumento WAVE Bioreactor. Se occorre miscelare l'aria ambiente con il flusso di gas, lasciare scollegata la porta Air In. In alternativa, l'aria di processo (< 0,2 bar) può essere collegata alla porta Air In. La miscela di gas/aria viene pompata dalla porta Air ut sul pannello laterale. Collegarla direttamente al filtro d'ingresso del bioreattore Cellbag. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 199

200 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II 8.5 Preparazione di WAVEPD II Layout delle porte di controllo di WAVEPD II Il regolatore WAVEPD II è fornito in diverse configurazioni. L'illustrazione sottostante mostra un esempio delle porte presenti sul pannello frontale di un WAVEPD II totalmente equipaggiato Parte Nome del connettore phpt C2 IN 2 IN AIR IN MIX UT DPT Controllo del parametro ph C2MIX 2MIX Aerazione Aerazione, C2MIX, 2MIX SSIGEN DISCILT 200 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

201 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II Preparazione del controllo del ph Introduzione Sono previste due modalità di controllo del ph, acido/base e C 2 /base. Durante la preparazione vengono collegate le soluzioni desiderate e il gas, e viene selezionata la modalità di controllo. Nota: Nota: Il controllo del ph richiede che il phpt faccia parte della configurazione WAVEPD II. Lo schema di controllo C 2 /base richiede anche la presenza di un modulo C2MIX nella configurazione. Quando viene utilizzato UNICRN DAQ, assicurarsi che sia selezionata la configurazione ph WAVEPD affinché le letture del ph vengano registrate (UNICRN Manager:System Setup:Components). Si consiglia anche di selezionare ph Details per registrare il LED, l'ampiezza e l'angolo di fase Illustrazione del controllo del ph con l'utilizzo di acido e base BASE ACID WAVEPD II Controller pompa acido pompa base Cellbag on WAVE Bioreactor fibra ottica ph Collegare il sensore ph L'estremità distale del cavo a fibre ottiche associato al sensore phpt deve essere già collegata al bioreattore Cellbag, vedere Collegamento della fibra ottica al bioreattore Cellbag., a pagina 193. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 201

202 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II Passo 1 2 perazione Accendere l'alimentazione allo strumento. Collegare il cavo a fibre ottiche alla porta PHPT nella parte anteriore di WAVEPD II. Per quanto riguarda la calibrazione iniziale del sensore phpt, vedere Calibrazione di offset del phpt, a pagina 222. Collegamento della tubazione dell'acido e della base Quando si utilizza la modalità acido/base o C 2 /base, collegare la soluzione contenente la base. Se si sta utilizzando la modalità acido/base, collegare la soluzione contenente l'acido. Per collegare le soluzioni contenenti acido o base attraverso le pompe e al bioreattore Cellbag, seguire i passaggi indicati di seguito. Passo perazione Se le pompe dell'acido e della base non sono state ancora collegate, vedere Collegamento delle pompe acido/base, a pagina 82. Collegare l'alimentazione elettrica al regolatore WAVEPD II. Interruttore in posizione N. Nella schermata MAIN MENU, premere phpt. Risultato: viene visualizzata la schermata phpt CNTRL. I parametri di controllo sono visibili sul lato destro. Selezionare lo schema di controllo di ph desiderato. Impostare il punto di regolazione del ph ph SP. Premere SET ma non iniziare la lettura del ph finché la sacca non è piena e il suo contenuto non si bilancia. Accertarsi che il senso di rotazione della pompa base sia corretto, quindi accendere tutti gli interruttori della pompa. Disporre la tubazione della base attraverso la pompa. 202 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

203 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II Passo 8 perazione Collegare, con tecnica asettica, la tubazione della base al bioreattore Cellbag utilizzando un dispositivo di termoretrazione per tubi o un raccordo maschio Luer/MPC. AVVIS Utilizzare sempre una tecnica asettica quando si collega la tubazione al bioreattore Cellbag o la si scollega dallo stesso. 9 Qualora sia stata selezionata la modalità acido/base, ripetere i passaggi 5 e 6 per la tubazione dell'acido. Nota: Suggerimento: Si consiglia di non mettere in funzione il sensore del ph ed eseguire la calibrazione offset iniziale finché il contenuto della sacca non si è bilanciato alla temperatura desiderata. Il controllo del ph non deve essere avviato prima che si possa rilevare una misura stabile del ph e prima che sia stata effettuata una calibrazione offset, vale a dire non prima che la temperatura del contenuto della Cellbag si sia bilanciata. Se viene usata la stessa porta per l'inoculo e l'aggiunta di acido o base, collegare l'acido o la base successivamente all'inoculo. Collegamento della C 2 a WAVEPD II Se si sta utilizzando la modalità C 2 /base, collegare la C 2. Per il collegamento della C 2, vedere Collegare il gas C 2 o 2 a WAVEPD II, a pagina 209. Impostazione dei parametri di controllo ph I parametri del controllo di ph sono impostati nella schermata ph CNTRL SETUP, vedere Schermata di configurazione del controllo ph, a pagina 174. Ulteriori informazioni circa la misurazione e il controllo del ph sono fornite in SezioneB.2 Misurazione e controllo del ph, a pagina 274. Le tabelle sottostanti suggeriscono tempi di ciclo per il ph, valori P e I di alcune combinazioni tipiche per formati e portata aria del bioreattore Cellbag. Le impostazioni devono essere sempre ottimizzate secondo le applicazioni correnti poiché la risposta di regolazione del ph è influenzata, ad esempio, dal volume di riempimento e dalla capacità tampone dei mezzi di coltura celle. Nota: Il valore D normalmente è impostato a zero nel controllo del ph. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 203

204 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II Impostazioni per il controllo di ph tramite C2 Dimensioni della Cellbag Portata aria (l/min) Cicli di controllo P I 50 l 0, , , , , Dimensioni della Cellbag Portata aria (l/min) Cicli di controllo P I 20 l 0, , , , , , , , , Dimensioni della Cellbag Portata aria (l/min) Cicli di controllo P I 10 l 0, , , , , , WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

205 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II Dimensioni della Cellbag Portata aria (l/min) Cicli di controllo P I 2 l 0, , , , Suggerimento: Una porta aria elevata produce un controllo più rapido, e viceversa. Utilizzando una Cellbag da 50 l con portata aria bassa si avrà una Cellbag sgonfia e un controllo molto lento. Più elevata sarà la portata aria minore sarà il tempo speso nella sub-modalità di controllo con base. Tuttavia, una portata aria immotivatamente elevata, produrrà un incremento dell'evaporazione nella coltura. Impostazioni per il controllo di ph con ACID/BASE I valori nella tabella sottostante si basano sull'utilizzo di sistemi acido/base composti da soluzioni 0,5 M di HCl e 0,5 M di NaH. Volume liquido (l) Portata pompa (ml/min.) Cicli di controllo P I Nota: Impostazioni della zona morta Se si utilizzano delle soluzioni acide/basiche con molarità diversa da 0,5, compensare modificando la portata della pompa. In caso di mezzi caratterizzati da una maggiore capacità del tampone, può essere necessario aumentare la portata della pompa. In caso di mezzi caratterizzati da una bassa capacità del tampone, può essere necessario ridurre la portata della pompa. Per le istruzioni su come calibrare la portata della pompa, vederecalibrazione della portata della pompa, a pagina 206. Nella modalità di controllo C2/BASE, si consiglia vivamente di utilizzare la zona morta C 2 = 0. Impostando un valore superiore, si riduce la precisione del controllo della C 2. I risultati migliori si ottengono quando il valore della zona morta è impostato a 0. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 205

206 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II Nella modalità di controllo ACID/BASE, utilizzare una zona morta > 0: è data come percentuale del ciclo di controllo e imposta il tempo pompa più breve possibile. Ad esempio, se la zona morta è impostata a 2,0% (cioè al valore predefinito), il tempo pompa più breve sarà 0,02 tempo del ciclo di controllo. Non saranno eseguiti tempi pompa inferiori. In caso di commutazione non necessaria tra l'iniezione di acido e base nella modalità di controllo ACID/BASE, aumentare l'impostazione della zona morta. Calibrazione della portata della pompa Come indicato di seguito, la portata della pompa deve essere calibrata da WAVEPD II. Passo 1 2 perazione Assicurarsi che il controllo di ph sia spento, vedere Schermata di controllo phpt, a pagina 130. Visualizzare la schermata di configurazione del controllo di ph, vedere Schermata di configurazione del controllo ph, a pagina Fare clic sul pulsante Pump Calibration per aprire la schermata di calibrazione pompe acido/base. 4 Utilizzando i controlli nella schermata di calibrazione pompe acido/base, avviare la pompa e lasciarla lavorare per un periodo preimpostato, ad es. 60 s. 206 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

207 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II Passo 5 perazione Calcolare la portata della pompa corrente al secondo e regolare la velocità della pompa in base alle necessità. Nota: Guadagno Se è impossibile ottenere la portata pompa desiderata, le impostazioni del guadagno per l'acido o la base possono essere regolate nella schermata di configurazione del controllo di ph per la compensazione, vedere di seguito. Il guadagno è un moltiplicatore che regola la scala dell'uscita del regolatore. Il valore predefinito del guadagno è pari a 1,0. Impostando il guadagno a 2,0 raddoppierà il tempo pompa richiesto dal regolatore di ph. Impostando il guadagno a 0,5 si dimezzerà il tempo pompa richiesto. La modifica del guadagno ha lo stesso impatto totale della modifica della portata della pompa. Si consiglia innanzitutto di tentare di calibrare la portata della pompa in quanto un guadagno eccessivo potrebbe troncare l'uscita del regolatore. Preparazione del controllo 2MIX o C2MIX Introduzione Il modulo C 2 è utilizzato per gonfiare e ventilare i bioreattori Cellbag monouso con aria contenente concentrazioni variabili di C 2, mentre il modulo 2 serve a variare la concentrazione di 2. I sensori dell'anidride carbonica e dell'ossigeno all'interno di WAVEPD II misurano e controllano la miscelazione del gas. Aria, C 2 e 2 sono collegati a WAVEPD II, mentre l'aria arricchita è collegata al bioreattore Cellbag. Nota: Il controllo dell'anidride carbonica e dell'ossigeno richiede che C2MIX e 2MIX, rispettivamente, facciano parte della configurazione di WAVEPD II Illustrazione del controllo C2MIX In questa illustrazione, il gas di anidride carbonica è fornito a WAVEPD II per il controllo C2MIX. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 207

208 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II C2 IN 2 IN AIR IN MIX UT CELLBAG WAVEPD WAVE BIREACTR 20/50 Parte Funzione Aria ambiente o aria di processo Fonte di gas C 2 Miscela d'aria alla Cellbag Gas espulso Illustrazione del controllo 2MIX In questa illustrazione, il gas di ossigeno è fornito a WAVEPD II per il controllo 2MIX C2 IN 2 IN AIR IN MIX UT CELLBAG WAVEPD WAVE BIREACTR 20/50 Parte Funzione Aria ambiente o aria di processo Fonte del gas 2 Miscela d'aria alla Cellbag Gas espulso Collegamento dell'aria a WAVEPD II Se WAVEPD II è utilizzato per il controllo della concentrazione di ossigeno o di anidride carbonica nello spazio di testa della Cellbag, l'aria verrà aspirata e miscelata col gas. 208 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

209 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II Per... ingresso aria ambiente ingresso aria di processo Quindi... Lasciare scollegata la porta AIR IN. Collegare la porta AIR IN alla fonte dell'aria di processo (< 0,2 bar o 2,9 psig). Suggerimento: È possibile produrre una miscela di ossigeno con concentrazioni inferiori al 21% (aria) collegando l'azoto alla porta AIR IN (< 0,2 bar). Si noti che ciò renderà necessario impostare il limite min. di 2 nella schermata di configurazione del controllo D su un valore inferiore a quello predefinito del 21,0%. Schermata di configurazione per il controllo dell'ossigeno disciolto, a pagina 172. AVVERTENZA Se l'azoto è collegato alla presa AIR IN, potrebbe verificarsi una perdita di azoto all'interno di WAVEPD II durante l'uso normale, anche se non è presente alcun flusso di gas verso lo strumento. Accertarsi che la stanza sia ben ventilata e che l'erogazione di azoto sia chiusa quando non è necessaria. Collegare il gas C 2 o 2 a WAVEPD II Seguire le istruzioni indicate di seguito per collegare l'aerazione arricchita di C 2 o 2 a WAVEPD II, quando l'aerazione è controllata da WAVEPD II. Queste istruzioni si applicano anche quando la C 2 è utilizzata per il controllo del ph. ATTENZINE Accertarsi che il gas collegato all'apparecchiatura sia quello corretto. Adeguata qualità e pressione del gas immesso evitano situazioni pericolose o il rischio di effetti indesiderati sulla coltura. AVVERTENZA Per prevenire eventuali perdite di gas dallo strumento autonomo C2MIX20, interrompere sempre l'erogazione della C 2 quando non è in uso. Nel corso di colture che richiedano l'uso di C2MIX20, assicurarsi che la stanza sia ben ventilata. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 209

210 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II AVVERTENZA Per prevenire eventuali perdite di gas dallo strumento autonomo 2MIX20, interrompere sempre l'erogazione della C 2 quando non è in uso. Nel corso di colture che richiedano l'uso di 2MIX20, assicurarsi che la stanza sia ben ventilata. Passo 1 2 perazione Collegare l'alimentazione elettrica al regolatore WAVEPD II. Interruttore in posizione N. Attendere 5 minuti per consentire allo strumento di scaldarsi e di stabilizzarsi. Impostare l'alimentazione esterna del gas (C 2 o 2 ) tra 0,7 e 1,0 bar (da 10 a 15 psig). Collegare la fonte del gas alla porta d'ingresso C2 IN o 2 IN presente su WAVEPD II. WAVEPD II è equipaggiato con un regolatore interno di pressione che non richiede regolazioni da parte dell'utente. Nota: Se la pressione d'ingresso del gas è sufficiente al funzionamento, la schermata C2 CNTRL/ 2 CNTRL visualizzerà un indicatore verde. Un indicatore rosso indica che la pressione del gas è troppo bassa per un adeguato controllo. 3 Se occorre miscelare l'aria ambiente con il flusso di gas, lasciare scollegata la porta AIR IN di WAVEPD II. In alternativa, può essere collegata l'aria di processo. La pressione del gas di processo deve essere regolata tra 0,1 e 0,2 bar (da 1 a 3 psig). AVVIS Non è ancora necessario attivare il controllo dell'aerazione. I controlli di C 2, 2 e/o ph non devono ancora essere attivati, ma soltanto immediatamente prima di avviare la coltura. Collegare l'aria arricchita a WAVE La miscela di gas/aria è estratta attraverso la porta MIX UT sul WAVEPD II. Collegarla direttamente al filtro in ingresso della Cellbag. AVVIS Il controllo C2MIX o 2MIX deve essere attivato soltanto immediatamente prima di avviare la coltura. 210 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

211 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II Preparazione del controllo dell'ossigeno disciolto Nota: Il controllo D richiede che DPT II faccia parte della configurazione WAVEPD II. Illustrazione del controllo dell'ossigeno disciolto Le seguenti illustrazioni forniscono una panoramica dei collegamenti per il controllo dell'ossigeno disciolto. DPT CELLBAG WAVEPD WAVE BIREACTR 20/50 Cellbag Sensore DPT II Cavo a fibra ottica Collegamento del sensore DPT II e impostazione dei parametri L'estremità distale del cavo a fibre ottiche associato al sensore DPT II deve essere già collegata al bioreattore Cellbag, vedere Collegamento della fibra ottica al bioreattore Cellbag., a pagina 193. Passo 1 2 perazione Accendere l'alimentazione allo strumento. Collegare il cavo a fibre ottiche alla porta DPT nella parte anteriore di WAVEPD II. Per quanto riguarda la calibrazione iniziale del sensore phpt, vedere Calibrazione di offset del phpt, a pagina 222. Collegare l' 2 a WAVEPD II Collegare l' 2 se si sta usando l' 2 per il controllo D, vedere Collegare il gas C 2 o 2 a WAVEPD II, a pagina 209. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 211

212 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II Impostazione dei parametri di controllo per l'ossigeno disciolto I parametri per D sono impostati nella schermata D CNTRL SETUP, vedere Schermata di configurazione per il controllo dell'ossigeno disciolto, a pagina172. Ulteriori informazioni circa la misurazione e il controllo dell'ossigeno disciolto sono consultabili in Sezione B.3 Misurazione e controllo dell'ossigeno disciolto, a pagina 278. Le tabelle sottostanti mostrano i tempi di ciclo, i valori P e I da utilizzare per il controllo dell'ossigeno disciolto per i diversi valori di portata. I valori in elenco rappresentano quelli consigliati. Le impostazioni devono sempre essere ottimizzate secondo l'applicazione corrente. Nota: Nel controllo dell'ossigeno disciolto, il valore D è normalmente impostato a zero. Anche il valore della zona morta per il controllo dell' 2 può essere normalmente impostato a zero. Impostazioni per il controllo dell'ossigeno disciolto utilizzando l'2 Dimensioni della Cellbag Portata aria (l/min) Cicli di controllo P I 50 l 0, , , , , , Dimensioni della Cellbag Portata aria (l/min) Cicli di controllo P I 20 l 0, , , , , , , , WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

213 8 Funzionamento 8.5 Preparazione di WAVEPD II Dimensioni della Cellbag Portata aria (l/min) Cicli di controllo P I 10 l 0, , , , , , , , , Dimensioni della Cellbag Portata aria (l/min) Cicli di controllo P I 2 l 0,5 38 0, ,4 42 0, , , , WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 213

214 8 Funzionamento 8.6 Impostazione delle condizioni di monitoraggio e del controllo di funzionamento 8.6 Impostazione delle condizioni di monitoraggio e del controllo di funzionamento Impostazione delle condizioni di funzionamento Impostare il controllo e il monitoraggio dei parametri relativi a oscillazione, temperatura e aerazione e (in base alla configurazione di sistema) relativi a ph, ossigeno disciolto, C 2 e 2. Il sistema di controllo dello strumento WAVE Bioreactor è descritto in Capitolo 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor, a pagina 87. Se si utilizzano del strumenti autonomi opzionali per il controllo e il monitoraggio dei parametri, il sistema di controllo WAVEPD II è descritto in Capitolo6 Sistema di controllo WAVEPD II, a pagina123 e i sistemi di controllo degli strumenti autonomi WAVE sono descritti in Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/50. Consigli sulle condizioni di funzionamento È necessario ottimizzare le condizioni operative per ciascuna linea di celle e mezzo. Le tipiche velocità di oscillazione e aerazione sono specificate nella tabella seguente. Volume coltura (litri) Dimensioni della Cellbag (litri) Velocità di oscillazione (giri/min) Velocità di aerazione (l/min) 0, , ,1 Da 0,5 a , Da 15 a 20 Da 0,1 a 0, o 22 Da 20 a 25 0, Da 20 a 25 Da 0,2 a 0,3 214 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

215 8 Funzionamento 8.6 Impostazione delle condizioni di monitoraggio e del controllo di funzionamento Consigli per la velocità di oscillazione Per ottimizzare la velocità di oscillazione, seguire i consigli indicati di seguito. La velocità di oscillazione deve essere impostata al valore minimo che consenta la miscelazione e il trasferimento di ossigeno senza eccessiva schiumosità. Se non si rilevano onde nel bioreattore Cellbag, aumentare la velocità di oscillazione. Se la schiuma è ancora eccessiva, ridurre la velocità di oscillazione. La concentrazione di celle e la velocità di assorbimento dell'ossigeno determinano la velocità di oscillazione necessaria per il trasferimento dell'ossigeno. La misurazione dell'ossigeno disciolto è il metodo migliore per determinare la velocità di oscillazione necessaria. Questo può avvenire mediante la misurazione off-line o on-line con DPT. Consigli per l'angolo di oscillazione L angolo di oscillazione tipico è di 6-8 gradi. Per celle con elevate esigenze di ossigeno, l'angolo di oscillazione può essere aumentato a 10 gradi. In caso di mezzi particolarmente schiumosi, l'angolo di oscillazione deve essere ridotto. Consigli per la velocità di aerazione La velocità di aerazione (attraverso il filtro aria in ingresso) produce un effetto minimo sul trasferimento dell'ossigeno. Le velocità di aerazione devono essere tenute al minimo per ridurre l'evaporazione; tuttavia, delle velocità di aerazione troppo basse porteranno a un gonfiaggio insufficiente del bioreattore Cellbag e a un controllo lento con l'utilizzo del gas C 2 e 2. Consigli per limitare la schiumosità Per ridurre la schiuma nel bioreattore Cellbag, seguire i consigli indicati di seguito. In caso di mezzi particolarmente schiumosi, l'angolo di oscillazione deve essere ridotto. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 215

216 8 Funzionamento 8.6 Impostazione delle condizioni di monitoraggio e del controllo di funzionamento Se vengono generate quantità eccessive di schiuma, ridurre la velocità di oscillazione. Si osservi tuttavia che è importante che la velocità di oscillazione sia sufficiente a generare un'onda visibile in superficie. Un'eccessiva schiumosità avviene se il bioreattore Cellbag non è adeguatamente gonfiato. Controllare che la portata aria sia sufficiente e che la valvola di sovrappressione funzioni. Aggiungere un agente antischiumogeno al mezzo di coltura. Consigli generali È consuetudine aggiungere al mezzo di coltura 1 g/litro di pluronico F-68 come protettivo alla tensione d'attrito. Molti mezzi di coltura celle in commercio contengono già pluronico. AVVIS Durante la coltura, si raccomanda vivamente di proteggere i bioreattori Cellbag dotati di sensori ottici integrati con una copertura non trasparente, ad es. un coperchio o la confezione nera nella quale viene consegnato il bioreattore Cellbag, per ridurre il degrado del sensore causato dall'esposizione alla luce. 216 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

217 8 Funzionamento 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione Introduzione Questa sezione fornisce la descrizione delle procedure. Non sono contemplati i comandi del pannello a sfioramento. Per istruzioni su come monitorare e impostare le condizioni di funzionamento per l'attuale configurazione del sistema, fare riferimento ai relativi paragrafi di Capitolo 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor, a pagina 87. Il sistema di controllo WAVEPD II è descritto in Capitolo6 Sistema di controllo WAVEPD II, a pagina 123 mentre i sistemi di controllo degli strumenti autonomi WAVE sono descritti in Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/50. Verifica della preparazione del sistema Per preparare il sistema prima del riempimento del bioreattore Cellbag, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo perazione Per una Cellbag configurata con sensori ottici, accertarsi che i cavi di fibra siano saldamente fissati al bioreattore della Cellbag e che i valori di calibrazione vengano inseriti dalla schermata phpt/dpt CNTRL. Se si utilizza contemporaneamente phpt e DPT, assicurarsi che i cavi in fibra non vengano erroneamente scambiati. Coprire la Cellbag per proteggere i sensori ottici da una luce eccessiva. Avviare l'oscillazione e l'aerazione, vedere Sezione 6.3 WAVEPD II Controlli dei parametri, a pagina 129 o Sezione 5.2 Controlli dei parametri, a pagina 91. Verificare che il vassoio di oscillazione sia fissato saldamente alla piastra di oscillazione. Verificare che il bioreattore Cellbag sia adeguatamente gonfiato e fissato al vassoio di oscillazione. Il bioreattore Cellbag deve essere teso e privo di pieghe. Ciò è importante per ridurre la formazione di schiuma e diminuire il rischio che la fase liquida penetri lungo le condutture del filtro d'uscita. Controllare che l'aria possa fuoriuscire liberamente dallo sfiato di sovrapressione premendo delicatamente con una mano sulla sacca e verificando la fuoriuscita d'aria dalla valvola di sovrapressione con l'altra mano. Si noti che ciò può causare una allarme temporaneo di sovrapressione in WAVEPD II. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 217

218 8 Funzionamento 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione Riempimento della Cellbag con il mezzo AVVERTENZA ggetto pesante. Il bioreattore Cellbag pieno ha un peso considerevole e deve essere sollevato con cautela. 1 persona può portare 15 kg di peso, quindi per un peso dai 30 a 45 kg sono necessarie 3 persone. Il sollevamento e lo spostamento deve avvenire conformemente alle norme locali. Per riempire il bioreattore Cellbag con il mezzo di coltura, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo 1 2 perazione Arrestare l'oscillazione. Ridurre la portata aria onde evitare l'allarme di alta pressione. Nota: Mantenere l'alimentazione della portata aria alla parte superiore per mantenere gonfio il bioreattore Cellbag. Ciò è importante per evitare eccessi di schiuma. 3 Collegare con una tecnica asettica la tubazione proveniente dal recipiente del fluido al bioreattore Cellbag usando la tubazione di ingresso con un dispositivo di termoretrazione per tubi oppure collegando un raccordo Luer maschio o MPC rispettivamente a una delle porte Luer o MPC. AVVIS Utilizzare sempre una tecnica asettica quando si collega la tubazione al bioreattore Cellbag o la si scollega dallo stesso. Nota: Si consiglia di trasferire il bioreattore Cellbag in un armadio biosicuro. Per prevenire perdite, chiudere con un morsetto ogni tubazione aperta prima di effettuare il trasferimento della sacca. 4 Ripristinare il peso della tara come descritto in Sezione Controllo del peso, a pagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

219 8 Funzionamento 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione Passo 5 6 perazione Trasferire il volume desiderato di mezzo nel bioreattore Cellbag tramite una pompa, per gravità, o per accresciuta pressione. Aumentare la portata aria fino ai valori operativi. ATTENZINE Per evitare una sollecitazione eccessiva sulle pieghe del bioreattore Cellbag, non avviare l'oscillazione se il bioreattore Cellbag non è completamente gonfiato. 7 8 Una volta che il bioreattore Cellbag è stato completamente gonfiato, riavviare l'oscillazione. Se richiesto, regolare la velocità di oscillazione modificando il valore del punto di regolazione. Se non si rilevano onde, aumentare la velocità di oscillazione. In presenza di schiuma eccessiva, ridurre la velocità di oscillazione. Per i consigli sulla velocità di oscillazione, vedere Consigli sulle condizioni di funzionamento, a pagina 214. Bilanciamento del mezzo di coltura Durante la fase di bilanciamento, il mezzo raggiunge valori operativi di temperatura e ph, il bioreattore Cellbag raggiunge i corretti valori di pressione e composizione di gas; la concentrazione dell'anidride carbonica presente nello spazio di testa e il mezzo di coltura si bilanciano. Tutto ciò richiede alcune ore. Nota: Nota: La visualizzazione del valore ph e/o D, si stabilizzerà e risulterà affidabile solo dopo il bilanciamento della temperatura del contenuto della Cellbag. I bioreattori phpt Cellbag standard sono calibrati per misurazioni a 37 C. Tuttavia, per misurazioni al di fuori della temperatura di calibrazione, si deve prevedere una minore accuratezza. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 219

220 8 Funzionamento 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione Analogamente, i bioreattori DPT II Cellbag standard sono calibrati alla pressione atmosferica indicata sull'etichetta DPT II ("calp"). Poiché è probabile che la pressione atmosferica si discosti dal "calp" nel corso della coltura, ciò causerà una differenza nella misurazione del D. Tale differenza è approssimativamente dell'1% aria sat./10 mbar. Per bilanciare il mezzo di coltura, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo perazione Avviare l'oscillazione con angolo e velocità desiderati. Avviare l'aerazione con la portata aria desiderata. Se possibile, utilizzare la miscela di C 2 appropriata alla coltura. Avviare il controllo di temperatura alla temperatura appropriata. Lasciare il sistema WAVE Bioreactor fintantoché il mezzo di coltura non si è bilanciato. Prima di effettuare l'inoculo, assicurarsi che i principali parametri della coltura relativi a ph, ossigeno disciolto e temperatura, si siano stabilizzati. Se è necessario ottimizzare l'onda, regolare la velocità e l'angolo di oscillazione. Vedere Sezione 8.6 Impostazione delle condizioni di monitoraggio e del controllo di funzionamento, a pagina 214. AVVIS Durante la coltura, si raccomanda vivamente di proteggere i bioreattori Cellbag dotati di sensori ottici integrati con una copertura non trasparente, ad es. un coperchio o la confezione nera nella quale viene consegnato il bioreattore Cellbag, per ridurre il degrado del sensore causato dall'esposizione alla luce. 220 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

221 8 Funzionamento 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione AVVIS Le bolle di gas sui sensori ottici phpt e DPT II possono causare misurazioni errate (ph) e una minore efficienza nel controllo del gas (ph, D). Le bolle di gas possono formarsi sul fondo del bioreattore Cellbag durante il riempimento e il bilanciamento, soprattutto se il fluido viene riempito a bassa temperatura e con basse velocità di oscillazione. Controllare che i sensori siano privi di bolle di gas in condizioni di bilanciamento ed eventualmente eliminarle dai sensori con dei colpetti sulla parte inferiore del bioreattore Cellbag. AVVERTENZA Per prevenire eventuali perdite di gas dallo strumento autonomo C2MIX20, interrompere sempre l'erogazione della C 2 quando non è in uso. Nel corso di colture che richiedano l'uso di C2MIX20, assicurarsi che la stanza sia ben ventilata. AVVERTENZA Per prevenire eventuali perdite di gas dallo strumento autonomo 2MIX20, interrompere sempre l'erogazione della C 2 quando non è in uso. Nel corso di colture che richiedano l'uso di 2MIX20, assicurarsi che la stanza sia ben ventilata. Calibrazione iniziale del ph Dopo aver installato e riempito una Cellbag nuova ed aver bilanciato il suo contenuto, si devono inserire i valori di calibrazione iniziali del sensore phpt. Passo perazione Premere phpt nella schermata MAIN MENU. Premere CALIB nella schermata phpt CNTRL. Inserire i cinque valori di calibrazione indicati nell'etichetta phpt della Cellbag presente nella schermata a comparsa ph SENSR PARAMETERS, quindi premere SET. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 221

222 8 Funzionamento 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione Calibrazione di offset del phpt Calibrare l'offset del sensore phpt prima della coltura e poi ogni volta che sia necessario utilizzando un indicatore di ph esterno, secondo le istruzioni indicate di seguito. Passo perazione Accendere l'alimentazione allo strumento. Accertarsi che il cavo della fibra ottica ph sia collegato a WAVEPD II e a Cellbag. Assicurarsi che il bioreattore Cellbag sia riempito con mezzi bilanciati. Misurare il ph prelevando un campione dalla Cellbag e usando un indicatore di ph esterno calibrato. Premere phpt nella schermata MAIN MENU. Premere FFSET nella schermata phpt CNTRL. Inserire il valore misurato nella schermata a comparsa FFSET CALIBRATIN e premere SET. Premere BACK. Eseguendo una calibrazione offset, si modifica il valore cph0 value nella finestra a comparsa PARAMETRI SENSRE ph. Calibrazione dell'ossigeno disciolto Calibrazione iniziale D Dopo aver installato e riempito un bioreattore Cellbag nuovo ed aver bilanciato il suo contenuto, si devono inserire i valori di calibrazione iniziali del sensore DPT II. Passo perazione Premere DPT CNTRL nella schermata MAIN MENU. Premere CALIB nella schermata DPT. Inserire i cinque valori di calibrazione indicati nell'etichetta DPT II della Cellbag presente nella schermata a comparsa D SENSR PARAMETERS, quindi premere SET. 222 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

223 8 Funzionamento 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione Calibrazione D (offset) Per eseguire correzioni conseguenti a variazioni delle condizioni della coltura in corso, l'offset del sensore DPT II può essere calibrato allo 0% e al 100% di saturazione dell'aria. La necessità di effettuare tale intervento deve essere valutata di volta in volta. Calibrazione offset ossigeno zero AVVERTENZA Se l'azoto è collegato alla presa AIR IN, potrebbe verificarsi una perdita di azoto all'interno di WAVEPD II durante l'uso normale, anche se non è presente alcun flusso di gas verso lo strumento. Accertarsi che la stanza sia ben ventilata e che l'erogazione di azoto sia chiusa quando non è necessaria. Per eseguire una calibrazione dell'ossigeno zero mediante WAVEPD II, seguire le istruzioni indicate di seguito. Preparare il bioreattore Cellbag riempiendolo con il mezzo, vedere Riempimento della Cellbag con il mezzo, a pagina 218. Passo perazione Collegare l'n 2 al 100% alla presa AIR IN (< 0,2 bar). Avviare l'oscillazione ad angolo e velocità medi, per esempio, 25 giri/min e 8. Prima della calibrazione offset, è possibile utilizzare altre impostazioni per regolare il tempo di raggiungimento di condizioni stabili. Consentire al mezzo di equilibrarsi alla temperatura di coltura. Verificare l'eventuale presenza di bolle di gas sul sensore. In presenza di bolle di gas sulla superficie del sensore, eliminarle picchiettando sulla porta della sacca dalla parte inferiore. Aprire il menu DPT CNTRL. Premere il pulsante CALIB per aprire la finestra a comparsa PARAMETRI SENSRE D. Accertarsi che i valori di calibrazione DPT siano stati correttamente inseriti conformemente a quanto indicato sull'etichetta della Cellbag (vedere Collegamento del sensore DPT II e impostazione dei parametri). Nota: Se è già stata stata effettuata una calibrazione offset al 100%, i valori di calibrazione differiranno da quelli dell'etichetta. Tornare al menu DPT CNTRL. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 223

224 8 Funzionamento 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione Passo perazione Premere Comp temp per selezionare la lettura automatica della temperatura o per inserire manualmente la temperatura ambiente. Attendere fino a quando la lettura D è stabile al livello più basso. Premere il pulsante FFSET. Nella finestra a comparsa, premere il pulsante SET 0%. Tornare al menu DPT CNTRL usando il pulsante BACK. L'alimentazione del gas N 2 può ora essere staccata dalla presa AIR IN. La calibrazione offset allo 0% modifica i valori clzp e clzt nella finestra a comparsa PARAMETRI SENSRE D. In questa finestra comparirà un messaggio per segnalare che è stato apportato un cambiamento. Calibrazione offset della saturazione dell'aria al 100% Per eseguire una calibrazione della saturazione aria al 100% mediante WAVEPD II, seguire le istruzioni indicate di seguito. Preparare il bioreattore Cellbag riempiendolo con il mezzo, vedere Riempimento della Cellbag con il mezzo, a pagina 218. Passo perazione Utilizzare l'aria sull'ingresso AIR IN. Assicurarsi che i comandi C 2 e 2 siano chiusi. Avviare l'oscillazione ad angolo e velocità medi, per esempio, 25 giri/min e 8. Prima della calibrazione offset, è possibile utilizzare altre impostazioni per regolare il tempo di raggiungimento di condizioni stabili. Consentire al mezzo di equilibrarsi alla temperatura di coltura. Verificare l'eventuale presenza di bolle di gas sul sensore. In presenza di bolle di gas sulla superficie del sensore, eliminarle picchiettando sulla porta della sacca dalla parte inferiore. Aprire il menu DPT CNTRL. Premere il pulsante CALIB per aprire la finestra a comparsa PARAMETRI SENSRE D. Accertarsi che i valori di calibrazione DPT siano stati correttamente inseriti conformemente a quanto indicato sull'etichetta della Cellbag (vedere Collegamento del sensore DPT II e impostazione dei parametri). Nota: Se è già stata stata effettuata una calibrazione offset al 100%, i valori di calibrazione differiranno da quelli dell'etichetta. Tornare al menu DPT CNTRL. 224 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

225 8 Funzionamento 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione Passo perazione Premere TCMP per selezionare la lettura automatica della temperatura o per inserire la temperatura ambiente manualmente. Attendere fino a quando la lettura D è stabile. Premere il pulsante FFSET. Nella finestra a comparsa, premere il pulsante SET 100%. Tornare al menu DPT CNTRL usando il pulsante BACK. La calibrazione offset al 100% modifica i valori clzp e clzt nella finestra a comparsa PARAMETRI SENSRE D. In questa finestra comparirà un messaggio per segnalare che è stato apportato un cambiamento. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 225

226 8 Funzionamento 8.8 Effettuazione della coltura 8.8 Effettuazione della coltura Introduzione Questa sezione descrive i concetti base per l'effettuazione di una coltura. Dopo l'inoculo, sono applicate le condizioni operative impostate desiderate e la coltura viene avviata.durante la coltura, vengono monitorati i parametri principali e le impostazioni possono essere regolate. Inoculazione del bioreattore Cellbag Per inoculare asetticamente il bioreattore Cellbag, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo 1 perazione Arrestare il movimento di oscillazione. Nota: Proseguire l'alimentazione della portata aria alla parte superiore per mantenere il gonfiaggio del Cellbag. 2 3 Assicurarsi che la tubazione collegata al contenitore d'inoculo sia serrata con un morsetto. Collegare, usando una tecnica asettica, la tubazione proveniente dal contenitore dell'inoculo al tubo di entrata usando un dispositivo di termoretrazione per tubi o un raccordo ReadyMate. AVVIS Utilizzare sempre una tecnica asettica quando si collega la tubazione al bioreattore Cellbag o la si scollega dallo stesso Liberare la tubazione d'ingresso e quella del contenitore dell'inoculo. Trasferire il volume d'inoculo desiderato nella sacca tramite un pompa, per gravità o per accresciuta pressione. Riavviare l'oscillazione. 226 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

227 8 Funzionamento 8.8 Effettuazione della coltura Nota: Assicurarsi che il bioreattore Cellbag non si sovrapressurizzi quando viene riempito con l'inoculo. Avvio della coltura Per avviare la coltura seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo perazione Assicurarsi che siano impostate le condizioni operative desiderate: velocità di oscillazione, angolo di oscillazione, aerazione e temperatura. Per talune configurazione del sistema, è anche possibile controllare l'ossigeno disciolto, il ph, la concentrazione di C 2 e di 2, e i parametri di perfusione. I valori del punto di regolazione vengono immessi nelle rispettive schermate di controllo, raggiungibili dalla schermata principale del WAVE Bioreactor 20/50 o del WAVEPD II. Per ulteriori informazioni, vedere Consigli sulle condizioni di funzionamento, a pagina 214 e Capitolo 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor, a pagina 87. Avviare l'oscillazione, l'aerazione e, quando sia necessario, le altre funzioni di monitoraggio e/o di controllo attraverso le rispettive schermate. Per avviare il monitoraggio della coltura con UNICRN DAQ 1.0, seguire le istruzioni fornite in Guida rapida d'avvio, a pagina 182. Nota: Per il controllo della C 2 e dell' 2 è richiesta l'aerazione. Per tenere sotto controllo il ph, tramite la concentrazione di C 2 e la base, è richiesto il controllo della C 2. Nota: È necessario il controllo 2 per il controllo D tramite 2. Eventuali problemi ai sistemi o nelle condizioni di coltura impostate vengono riconosciuti da allarmi. Le indicazioni d'allarme dipendono dalla configurazione del sistema e se la coltura è controllata dallo strumento WAVE Bioreactor 20/50 o da WAVEPD II. Sullo strumento WAVE Bioreactor 20/50, un nuovo allarme è indicato da un pulsante ALARM lampeggiante sulla schermata principale del pannello a sfioramento, vedere Capitolo 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor, a pagina 87 per la gestione degli allarmi. Sullo strumento WAVEPD II, un nuovo allarme è indicato da un pulsante ALARMS lampeggiante sulla schermata principale del pannello a sfioramento, vedere Capitolo 6 Sistema di controllo WAVEPD II, a pagina 123 per la gestione degli allarmi. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 227

228 8 Funzionamento 8.8 Effettuazione della coltura AVVIS Durante la coltura, si raccomanda vivamente di proteggere i bioreattori Cellbag dotati di sensori ottici integrati con una copertura non trasparente, ad es. un coperchio o la confezione nera nella quale viene consegnato il bioreattore Cellbag, per ridurre il degrado del sensore causato dall'esposizione alla luce. Monitoraggio dei parametri di coltura Nota: Per tutto il tempo dell'oscillazione, verificare che il bioreattore Cellbag sia sempre sufficientemente gonfio. Una sacca non perfettamente gonfia aumenta il rischio di rotture e perdite. La superficie superiore di Cellbag deve essere ben tesa. Sui pannelli a sfioramento di WAVE Bioreactor o WAVEPD II è possibile monitorare la velocità di oscillazione, l'angolo di oscillazione, l'aerazione e la temperatura. Le schermate principali forniscono i dati correnti, mentre la registrazione dei dati si trova sulle schermate dei trend, accessibili da quelle dei dettagli dei parametri. Per talune configurazione del sistema, è anche possibile monitorare e/o controllare l'ossigeno disciolto, il ph, la concentrazione di C 2 e di 2, e i parametri di perfusione. Per configurazioni del sistema prive del controllo on-line, è possibile il prelievo di campioni per l'effettuazione di misurazioni esterne, vedere Campionamento del bioreattore Cellbag, a pagina 230. UNICRN DAQ 1.0 è un software opzionale che consente l'acquisizione dei dati con relativa registrazione durante l'intero ciclo della coltura e la valutazione degli stessi a fine processo. Per informazioni relative al monitoraggio dei dati dei parametri tramite UNICRN DAQ, vedere sotto. Monitoraggio della coltura con UNICRN DAQ 1.0 Il modulo UNICRN DAQ di System control fornisce gli strumenti di visualizzazione della coltura. L'intero ciclo della coltura viene registrato in memoria. Vedere Capitolo 7 Software UNICRN DAQ 1.0, a pagina 178 per informazioni su come: avviare l'acquisizione di dati cambiare i dettagli di visualizzazione (zumare su una curva, cambiare l'unità di misura dell'asse y, selezionare le curve da visualizzare, ecc.) 228 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

229 8 Funzionamento 8.8 Effettuazione della coltura visualizzare le informazioni registrate (allarmi, ecc.) interrompere l'acquisizione di dati Per ulteriori informazioni su UNICRN DAQ 1.0, fare riferimento a UNICRN DAQ User manual for WAVE Bioreactor. Quando viene utilizzato UNICRN DAQ, assicurarsi che sia selezionata la configurazione ph WAVEPD affinché vengano registrate le letture del ph (UNICRN Manager:System Setup:Components). Per la risoluzione dei problemi, si raccomanda vivamente di selezionare anche ph Details per registrare il LED, l'ampiezza e l'angolo di fase. Regolazione delle impostazioni durante la coltura Se necessario, modificare le impostazioni della velocità e dell'angolo di oscillazione attraverso RCKER sulla schermata principale, o tramite il pulsante dello strumento WAVE Bioreactor sulla schermata WAVEPD II MAIN MENU. Ulteriori istruzioni per regolare le impostazioni si trovano in Capitolo 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor, a pagina87 e Capitolo6 Sistema di controllo WAVEPD II, a pagina123. Fare riferimento ai consigli in Sezione 8.6 Impostazione delle condizioni di monitoraggio e del controllo di funzionamento, a pagina 214. Se si vuole, possono essere regolate altre funzioni di monitoraggio e/o controllo. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 229

230 8 Funzionamento 8.9 pzioni di coltura 8.9 pzioni di coltura Calibrazione dei sensori Se necessario, calibrare l'offset del phpt come descritto in Calibrazione di offset del phpt, a pagina 222. Suggerimento: Nota: Per un controllo più accurato del ph se ne raccomanda la verifica quotidiana e l'effettuazione di una calibrazione di offset quando la differenza tra il valore ph letto e il valore di riferimento off-line è superiore a un ph di 0,05. L'offset del sensore DPT II deve essere calibrato prima dell'inoculo. Campionamento del bioreattore Cellbag È possibile il ripetuto prelievo di campioni utilizzando lo stesso raccordo di campionamento, senza rischi di compromissione della sterilità. Il rischio connesso alla produzione di aerosol è basso. Per campionare il bioreattore Cellbag, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo 1 2 perazione Arrestare l'oscillazione. Rimuovere il cappuccio dal connettore blu di campionamento (vedere Sezione 3.3 Bioreattore Cellbag, a pagina 43 per una descrizione della Cellbag). 230 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

231 8 Funzionamento 8.9 pzioni di coltura Passo 3 perazione Pulire la parte superiore del connettore di campionamento con alcol al 70% (o equivalente). 4 Con tecnica asettica, fissare una siringa sterile monouso con connettore Luer nel raccordo di campionamento Nota: Nota: Sganciare il morsetto della tubazione e prelevare un campione con la siringa. Potrebbe essere necessario premere sul bioreattore Cellbag per indurre forzatamente il liquido attraverso il tubo di campionamento. Estrarre la siringa e pulire nuovamente l'estremità del connettore di campionamento con etanolo al 70%, quindi sostituire il cappuccio. Pizzicare alcune volte il tubo del connettore di campionamento per assicurarsi che il liquido eventualmente rimasto nella tubazione sia scaricato nuovamente nel bioreattore Cellbag. Chiudere il morsetto della tubazione. Una siringa standard o un connettore Luer possono essere usati senza necessità di ago. Il connettore di campionamento è dotato di un orifizio piuttosto piccolo. Se si lavora con grandi microsupporti o grandi aggregati di cellule non usare il raccordo di campionamento. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 231

232 8 Funzionamento 8.9 pzioni di coltura Progressivo aumento della coltura I bioreattori Cellbag consentono un'ampia gamma di volumi operativi. Ciò consente un efficiente aumento progressivo, evitando fastidiosi trasferimenti sequenziali. Iniziare con volume ridotto e, progredendo con la crescita delle celle, aggiungere del mezzo fresco al bioreattore Cellbag. In una singola sacca è possibile un'espansione fino a un rapporto massimo 1:10. Una tipica sequenza d'inoculo è: Passo perazione Avvio con 200 ml di mezzo in una Cellbag da 2 l. Aggiungere l'inoculo. Quando le celle raggiungono una conta compresa tra e celle/ml, aggiungere 300 ml di mezzo al bioreattore Cellbag. Quando le celle raggiungono una conta compresa tra e celle/ml, aggiungere dell'altro mezzo, portando il volume totale a 1 litro. Quando queste celle raggiungono celle/ml, trasferirle, utilizzando un dispositivo di termoretrazione per tubi, a una Cellbag da 20 l contenente 2 litri di mezzo. Quando le cellule nella Cellbag da 20 l raggiungono nuovamente cellule/ml, portare il volume a 10 litri e continuare la coltura a pieno volume. In questa sequenza, un unico trasferimento porta la coltura da 200 ml a 10 litri. Ciò consente di risparmiare tempo e di ridurre il rischio di contaminazioni. Questo schema può anche essere usato per aumentare progressivamente l'inoculo per i tradizionali bioreattori più grandi Scambio del mezzo di coltura Per istruzioni su come monitorare e impostare le condizioni di funzionamento per l'attuale configurazione del sistema, fare riferimento ai relativi paragrafi di Capitolo 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor, a pagina 87. Per la descrizione dei componenti della sacca di coltura, vedere Sezione 3.3 Bioreattore Cellbag, a pagina 43. Nota: Per evitare il possibile esaurimento dell'ossigeno, l'operazione di scambio del mezzo di coltura deve essere effettuata in meno di un'ora. Passo 1 perazione Interrompere l'oscillazione e l'aerazione e chiudere con un morsetto i filtri di ingresso e uscita. 232 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

233 8 Funzionamento 8.9 pzioni di coltura Passo perazione Rimuovere il vassoio di oscillazione dallo strumento WAVE Bioreactor e disporlo in posizione verticale appoggiandolo a un supporto. Lasciare sedimentare il particolato (incluse celle e microsupporti, se applicabile) per 10/15 minuti. Collegare la tubazione alla linea di raccolta sul bioreattore Cellbag. L'altra estremità della tubazione deve essere collegata ad un recipiente sterile di raccolta. Usando una pompa peristaltica, o per gravità, rimuovere il quantitativo desiderato di liquido di coltura supernatante manipolando manualmente la parete flessibile del bioreattore Cellbag. Scollegare la tubazione e ricollegarla al mezzo fresco per ricaricare il bioreattore Cellbag. Disporre di nuovo il vassoio di oscillazione sullo strumento WAVE Bioreactor. Aprire i morsetti di blocco dei filtri d'ingresso e d'uscita, quindi riavviare l'oscillazione e l'aerazione. Coltura in perfusione Durante la coltura in perfusione, è possibile prelevare il raccolto privo di cellule e aggiungere il mezzo nuovo in modo continuo o a più riprese. Requisiti: Bioreattori Cellbag con filtro interno di perfusione o collegati a filtri di ritenzione esterni Pompe di alimentazione e raccolta (PUMP20 o esterne) Configurazione BASE20/50EHT Contattare uno specialista di applicazioni GE Healthcare per una consulenza sull'impostazione della coltura in perfusione. Per istruzioni su come impostare le condizioni operative della coltura in perfusione sul sistema corrente, fare riferimento ai relativi paragrafi di Capitolo 5 Sistema di controllo WAVE Bioreactor, a pagina 87 per trovare le istruzioni sul sistema di controllo. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 233

234 8 Funzionamento 8.10 Coltura finale 8.10 Coltura finale AVVERTENZA Per prevenire eventuali perdite di gas dallo strumento autonomo C2MIX20, interrompere sempre l'erogazione della C 2 quando non è in uso. Nel corso di colture che richiedano l'uso di C2MIX20, assicurarsi che la stanza sia ben ventilata. AVVERTENZA Per prevenire eventuali perdite di gas dallo strumento autonomo 2MIX20, interrompere sempre l'erogazione della C 2 quando non è in uso. Nel corso di colture che richiedano l'uso di 2MIX20, assicurarsi che la stanza sia ben ventilata. AVVERTENZA Se l'azoto è collegato alla presa AIR IN, potrebbe verificarsi una perdita di azoto all'interno di WAVEPD II durante l'uso normale, anche se non è presente alcun flusso di gas verso lo strumento. Accertarsi che la stanza sia ben ventilata e che l'erogazione di azoto sia chiusa quando non è necessaria. Interruzione della coltura e raccolta Per interrompere la coltura ed effettuare la raccolta, seguire le istruzioni indicate di seguito. Suggerimento: La raccolta può anche essere effettuata per gravità intervenendo manualmente sulla parete flessibile del bioreattore Cellbag. È possibile prevedere un flusso d'aria attraverso il bioreattore Cellbag per generare una pressione che faciliti lo svuotamento. Passo 1 perazione Arrestare l'oscillazione, l'aerazione e gli altri sistemi di controllo e monitoraggio. 234 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

235 8 Funzionamento 8.10 Coltura finale Passo 2 perazione Interrompere la registrazione dati del UNICRN DAQ, se utilizzata: Fare clic su End sul modulo System Control Confermare e salvare il file risultante facendo clic su K nella finestra di conferma Collegare il connettore della pompa di raccolta alla porta HARVEST PUMP sul pannello posteriore dello strumento WAVE Bioreactor. Instradare la tubazione di raccolta dal recipiente di raccolta, attraverso la pompa, connettendola alla porta di raccolta sul bioreattore Cellbag (vedere Sezione 3.3 Bioreattore Cellbag, a pagina 43 per una descrizione di Cellbag). Svuotare il contenuto del bioreattore Cellbag per ulteriori lavorazioni utilizzando la pompa di raccolta. Premere il pulsante WEIGHT nella schermata principale WAVE Bioreactor. Risultato: viene visualizzata la schermata di controllo WEIGHT, vedere Sezione Controllo del peso, a pagina 94. Premere la casella SP e inserire il valore del punto di regolazione del peso netto equivalente a una sacca vuota. Avviare la pompa di raccolta premendo il pulsante N sotto a HARV. Risultato: il pulsante commuta su FF e viene visualizzato l'indicatore Harvesting. La pompa di raccolta funziona fino a quando il peso netto è inferiore al punto di regolazione. Nota: La pompa di raccolta non entra in funzione se il valore del peso netto è inferiore al limite più basso d'allarme. Nota: Questa procedura richiede che sia installata una cella di carico. Un pompa di raccolta può anche essere gestita separatamente, senza il sistema di controllo del WAVE Bioreactor Chiudere con un morsetto i filtri di ingresso e uscita del bioreattore Cellbag. Scollegare il tubo d'ingresso dell'aria del bioreattore Cellbag. Scollegare tutti gli altri tubi e i sensori ancora collegati al bioreattore Cellbag. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 235

236 8 Funzionamento 8.10 Coltura finale Passo 9 perazione Rimuovere il bioreattore Cellbag vuoto dallo strumento: Aprire le guide sul vassoio di oscillazione sollevando le leve delle camme situate su entrambi i lati del vassoio. Liberare la sacca dal vassoio di oscillazione. Rimuovere la sacca dal vassoio di oscillazione. Suggerimento: Il sistema WAVE Bioreactor richiede un tempo di preparazione minimo. Basta rimuovere la Cellbag vuota e installarne una nuova sullo strumento. Procedure successive al completamento della coltura Dopo aver ultimato un ciclo e aver rimosso il bioreattore Cellbag, seguire le istruzioni indicate di seguito. Passo perazione Spegnere () gli interruttori dell'alimentazione elettrica di tutte le unità dello strumento utilizzate. Gli interruttori dell'alimentazione elettrica sono di solito situati sul retro dei rispettivi strumenti. Chiudere tutte le fonti d'erogazione di gas a monte, in modo da prevenire perdite durante il periodo di non utilizzo. Se necessario, pulire i componenti del sistema. Per le istruzioni di pulizia, vedere Sezione 9.3 Pulizia dello strumento, a pagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

237 9 Manutenzione 9 Manutenzione Informazioni sul capitolo Il presente capitolo descrive come effettuare la manutenzione di WAVE Bioreactor 20/50 e di WAVEPD II. In questo capitolo Sezione 9.1 Informazioni generali 9.2 Programma di manutenzione 9.3 Pulizia dello strumento 9.4 Procedura di ispezione dell'interruttore di sicurezza 9.5 Calibratura 9.6 Regolazione temperatura 9.7 Manutenzione di WAVEPD II Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 237

238 9 Manutenzione 9.1 Informazioni generali 9.1 Informazioni generali AVVERTENZA Rischio di shock elettrico Tutte le riparazioni devono essere eseguite da personale di assistenza autorizzato GE Healthcare. Non aprire i coperchi e non sostituire componenti se non diversamente specificato nella documentazione dell'utente. AVVERTENZA Scollegamento dell'alimentazione. Scollegare sempre l'alimentazione dallo strumento prima di eseguire qualsiasi intervento o procedura di manutenzione. Manutenzione degli strumenti autonomi Per informazioni sulla manutenzione degli strumenti autonomi, fare riferimento a Istruzioni di funzionamento strumenti autonomi per WAVE Bioreactor 2/10 e 20/ WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

239 9 Manutenzione 9.2 Programma di manutenzione 9.2 Programma di manutenzione Introduzione Questa sezione fornisce l'elenco delle attività di manutenzione periodica cui è tenuto l'utilizzatore del sistema WAVE Bioreactor, come pure delle attività manutentive da realizzare all'occorrenza. La manutenzione si divide in: Prima di ciascuna coltura Dopo ciascuna coltura Manutenzione annuale Manutenzione ogni due anni Manutenzione secondo necessità Programma di manutenzione periodica I seguenti interventi di manutenzione periodica devono essere eseguiti dall'utente di WAVE Bioreactor. Intervallo Prima di ciascuna coltura Prima di ciascuna coltura Dopo ciascuna coltura gni settimana Intervento di manutenzione Calibrazione del sensore phpt Calibrazione del sensore DPT II Pulizia della superficie dello strumento Ispezione dell'interruttore di sicurezza Vedere la sezione Sezione 9.5 Calibratura, a pagina 244 Sezione 9.5 Calibratura, a pagina 244 Sezione9.3 Pulizia dello strumento, a pagina 241 Sezione9.4 Procedura di ispezione dell'interruttore di sicurezza, a pagina 242 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 239

240 9 Manutenzione 9.2 Programma di manutenzione Manutenzione secondo necessità I seguenti interventi di manutenzione devono essere eseguiti dall'utente di WAVE Bioreactor quando necessario. Intervento di manutenzione Pulizia esterna dello strumento Regolazione della temperatura Ripristino degli interruttori automatici o sostituzione dei fusibili Vedere la sezione Sezione 9.3 Pulizia dello strumento, a pagina 241 Sezione 9.6 Regolazione temperatura, a pagina 245 Sostituzione dei fusibili, a pagina 248 Manutenzione effettuata dall'assistenza di GE Healthcare Intervallo Secondo necessità 6000 ore di funzionamento o annualmente Intervento di manutenzione Regolazione dei controlli 1 Manutenzione preventiva 1 Angolo, velocità, aerazione, celle di carico, C 2, 2, temperatura. 240 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

241 9 Manutenzione 9.3 Pulizia dello strumento 9.3 Pulizia dello strumento Norme generali Prima di iniziare la pulizia, spegnere e scollegare lo strumento. ATTENZINE Non versare acqua direttamente sullo strumento. ATTENZINE Non collegare l'alimentazione allo strumento prima che si sia asciugato completamente. Istruzioni Pulire la parte esterna dello strumento con uno straccio inumidito con acqua e, se necessario, alcol. Non usare detergenti abrasivi. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 241

242 9 Manutenzione 9.4 Procedura di ispezione dell'interruttore di sicurezza 9.4 Procedura di ispezione dell'interruttore di sicurezza Materiali richiesti Tubazione C-Flex o di tipo analogo, d.i. 3/8" d.e. 5/8", 300 mm (12") di lunghezza Istruzioni Ispezionare gli interruttori di sicurezza secondo le seguenti istruzioni: Passo 1 2 perazione Accendere l'alimentazione allo strumento. Accendere l'oscillazione: impostare la velocità di oscillazione dello strumento su 10 giri/min, impostare l'angolo su 12 gradi, premere il pulsante RCK per iniziare l'oscillazione. 3 Durante l'oscillazione dello strumento, inserire un'estremità del tubo da 300 mm di lunghezza e d.e. di 5/8" tra l'interruttore di sicurezza e la piattaforma di oscillazione sul lato anteriore dello strumento. Risultato: lo strumento deve comprimere leggermente la tubazione, ritornare in piano e quindi interrompere l'oscillazione. Entro 30 secondi la luce di sfondo del pannello a sfioramento deve diventare rossa e lampeggiare. Deve essere visualizzato il seguente messaggio: SAFETY BUMPER SWITCH HIT CYCLE PWER T RESET. 242 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

243 9 Manutenzione 9.4 Procedura di ispezione dell'interruttore di sicurezza Passo 4 perazione Eseguire un ciclo di alimentazione: Spegnere lo strumento Accendere lo strumento 5 Nota: Ripetere la procedura per sottoporre a prova l'interruttore di sicurezza posteriore. Se lo strumento reagisce diversamente da come indicato, interrompere l'ispezione e contattare l'assistenza tecnica. Non usare l'attrezzatura perché gli interruttori di sicurezza potrebbero non funzionare correttamente. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 243

244 9 Manutenzione 9.5 Calibratura 9.5 Calibratura Intervalli di manutenzione Prima di utilizzare il controllo del ph, si devono inserire i valori di calibrazione del sensore phpt specifici per la Cellbag corrente. Prima di iniziare una coltura e quando necessario nel corso della stessa, deve essere effettuata una calibrazione dell'offset del sensore phpt. Analogamente, prima di utilizzare il controllo dell'ossigeno disciolto (D), si devono inserire i valori di calibrazione del sensore DPT specifici per la Cellbag corrente. Prima di iniziare la coltura, si deve eseguire una calibrazione dell'offset del sensore DPT II. Calibrazione del ph Per... impostazione dei parametri del sensore phpt calibrazione di offset per phpt Vedere... Sezione 8.5 Preparazione di WAVEPD II, a pagina 200. Sezione 8.7 Procedure che precedono l'inoculazione, a pagina 217. Calibrazione dell'ossigeno disciolto La calibrazione del sensore DPT è descritta in Calibrazione dell'ossigeno disciolto, a pagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

245 9 Manutenzione 9.6 Regolazione temperatura 9.6 Regolazione temperatura Introduzione Il sensore di temperatura SRTDX è un termometro a resistenza di platino PT100 che deve essere calibrato in base all'elettronica all'interno dello strumento WAVE Bioreactor 20/50 per garantire le massime prestazioni. Se si sposta un sensore a un diverso WAVE Bioreactor, o si rileva che la lettura della temperatura non è affidabile, il sensore deve essere ricalibrato come indicato qui. Materiali richiesti Bioreattore di servizio Cellbag Nota: Standard di temperatura I bioreattori Cellbag di servizio non sono sterili e non devono essere utilizzati per la coltura celle. - Sonda di temperatura RTD, diametro 1/8" (0,32 cm) con asta lunga > 16 cm, precisione di 0,1 C o superiore Nastro in PTFE Da 1 a 5 litri d'acqua, in base alle dimensioni del bioreattore Cellbag WAVE Bioreactor 20/50 con installato il KIT20 o il KIT50 Selezione della temperatura di calibrazione Il sensore della temperatura è stato indicato per fornire un'ottima linearità di risposta nella gamma 20 C-45 C, che è adatta alla maggior parte delle colture. Pertanto, normalmente è sufficiente una calibrazione a punto singolo. La temperatura di calibrazione deve essere selezionata per simulare quella della coltura. La seguente procedura utilizza una temperatura di calibrazione di 37,0 C. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 245

246 9 Manutenzione 9.6 Regolazione temperatura Procedura Per regolare il sensore della temperatura, seguire la procedura indicata di seguito. Passo perazione Installare il bioreattore di servizio Cellbag sul vassoio, quindi collegare le tubazioni dell'aria e i riscaldatori dei filtri allo stesso modo del funzionamento normale, come descritto in Capitolo 8 Funzionamento, a pagina 186. Riempire il bioreattore Cellbag con almeno 1 l d'acqua. Avvolgere il nastro in PTFE attorno alla sonda standard della temperatura e inserirla nella porta della temperatura del bioreattore di sevizio Cellbag. Il nastro in PTFE deve essere avvolto in maniera sufficiente per evitare che il bioreattore Cellbag perda acqua o aria. Assicurarsi che la punta della sonda sia immersa nell'acqua. Accendere il WAVE Bioreactor, attivare la pompa di aerazione e lasciare che il bioreattore Cellbag si riempia d'aria. Impostare la temperatura prevista a 37,0 C e abilitare i riscaldatori. Lasciare che la temperatura aumenti e si stabilizzi al valore previsto fino a quando la lettura della temperatura smette di cambiare. Questa operazione può impiegare almeno un'ora. Accedere alla schermata di SETUP di WAVE Bioreactor, come descritto in Accedere alla schermata delle impostazioni, a pagina 112, quindi premere il pulsante HEATER. Risultato: viene visualizzata la schermata di configurazione HEATER. 8 Confrontare le letture del pannello a sfioramento di WAVE Bioreactor con il valore standard di temperatura. Se la lettura è inferiore a ±0,2 C, il sensore di temperatura è calibrato entro i limiti di tolleranza e non è necessaria alcuna azione supplementare. 246 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

247 9 Manutenzione 9.6 Regolazione temperatura Passo 9 10 perazione Se la temperatura indicata differisce dalla lettura oltre 0,2 C, si può inserire un valore di offset per calibrare il sensore di temperatura. L'offset da inserire è la differenza tra la visualizzazione standard e quella del pannello a sfioramento. Utilizzare dei valori negativi se il valore standard mostra una temperatura inferiore a quella del pannello a sfioramento. Esempio: Se il pannello a sfioramento indica 37,0 C e il valore standard 37,5 C, l'offset da inserire è pari a 0,5. Se il pannello a sfioramento indica 37,0 C e il valore standard 36,5 C, l'offset da inserire è pari a -0,5. Inserire i valori di offset necessari sfiorando il campo nero che contiene il valore di offset e inserire un nuovo valore. Nota: In caso di sistemi doppi, i riscaldatori di destra e di sinistra devono essere calibrati nel modo descritto Verificare che la temperatura sia visualizzata correttamente nel pannello a sfioramento WAVE Bioreactor. Per garantire la linearità per le condizioni della coltura nei casi di variazione della temperatura, testare il controllo della temperatura alle temperature richieste. Informazioni su come effettuare gli ordini I bioreattori Cellbag di servizio possono essere ordinati come indicato nella seguente tabella. Codice Descrizione CB, 10L, BC10, personalizzato CB, 20L, BC10, personalizzato CB, 22L, BC10, personalizzato CB, 50L, BC10, personalizzato Uso previsto per Mezzo vassoio KIT20 Vassoio intero KIT20 Mezzo vassoio KIT50 Vassoio intero KIT50 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 247

248 9 Manutenzione 9.7 Manutenzione di WAVEPD II 9.7 Manutenzione di WAVEPD II Pulizia La pulizia del WAVEPD II si effettua come per il WAVE Bioreactor 20/50, vedere Sezione 9.3 Pulizia dello strumento, a pagina 241. Regolazioni Vi invitiamo a contattare GE Healthcare per la manutenzione semestrale. Sostituzione dei fusibili Due fusibili sono collocati all'interno del modulo d'ingresso dell'alimentazione elettrica: Tipo dei fusibili: T 2AL 250V (5x20) AVVERTENZA Sostituire i fusibili sempre con altri di medesimo tipo e qualità. Per sostituire i fusibili, seguire le istruzioni indicate di seguito: Passo perazione Scollegare l'alimentazione elettrica e disinserire il cavo d'ingresso d'alimentazione. Localizzare il modulo d'ingresso dell'alimentazione e fare leva sul coperchio dei fusibili per aprirlo. Rimuovere e sostituire i fusibili. Sostituire il coperchio dei fusibili. Ricollegare il cavo d'alimentazione e accendere lo strumento. 248 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

249 10 Eliminazione dei guasti 10 Eliminazione dei guasti Informazioni sul capitolo Questo capitolo si occupa della risoluzioni problemi del WAVE Bioreactor 20/50. In questo capitolo Sezione 10.1 Problemi generali 10.2 Problemi specifici del modulo 10.3 WAVEPD II Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 249

250 10 Eliminazione dei guasti 10.1 Problemi generali 10.1 Problemi generali Gonfiaggio della Cellbag AVVIS Il bioreattore Cellbag deve essere gonfiato in modo che per comprimerlo occorra esercitare una certa pressione. Non deve comunque essere così pressurizzata da formare pieghe in prossimità dei punti di attacco. AVVIS Un bioreattore Cellbag insufficientemente gonfio determina un'eccessiva schiumosità e una miscelazione inadeguata. Ciò determinerà un rapido deterioramento del bioreattore Cellbag e possibili perdite. 250 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

251 10 Eliminazione dei guasti 10.1 Problemi generali Sintomo dell'errore Il bioreattore Cellbag risulta essere eccessivamente gonfio. Causa possibile Portata aria troppo elevata Valvola di sovrappressione difettosa Il filtro di uscita è chiuso o bloccato Bioreattore Cellbag difettoso Azione correttiva Verificare che la portata aria alimentata al bioreattore non superi 0,5 l/min. Verificare che l'aria fuoriesca dalla valvola di controllo della pressione: collegare un piccolo pezzo di tubazione allo sfiatatoio in uscita Immergere la tubazione in 1 cm d'acqua. Risultato: la comparsa di bolle è indicativa di un flusso d'aria. In assenza di bolle, rimuovere la valvola di controllo della pressione. La valvola di controllo della pressione potrebbe essere ostruita e rimuovendola potrebbe essere possibile proseguire il funzionamento. Accertarsi che il filtro di uscita non sia chiuso o bloccato. Se la schiuma ostruisce il filtro di uscita, ridurre la velocità o l'angolo di oscillazione. Se il bioreattore Cellbag continua a gonfiarsi eccessivamente, trasferire il contenuto in un altro bioreattore Cellbag. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 251

252 10 Eliminazione dei guasti 10.1 Problemi generali Sintomo dell'errore Il bioreattore Cellbag risulta essere insufficientemente gonfio. Causa possibile Portata aria troppo bassa Errato collegamento dell'alimentazione aria in entrata Valvola di controllo della pressione mancante Filtro d'ingresso otturato Azione correttiva Verificare che la portata d'aria al filtro d'ingresso sia sufficiente. Verificare che il circuito di alimentazione aria in entrata sia collegato al filtro d'ingresso (senza la valvola di controllo della pressione). Verificare la presenza della valvola di controllo della pressione sul filtro d'uscita. Verificare che il percorso dell'aria in ingresso non sia ostruito. Suggerimento: Una piccola quantità di condensa nel filtro in ingresso è da considerarsi normale. Tuttavia, se dovesse formarsi un'eccessiva condensa: Diminuire la portata d'aria Verificare le prestazioni del riscaldatore del filtro Isolare la tubazione diretta alla valvola di controllo della pressione Formazione di schiuma Nota: Una certa quantità di schiuma è tipica e in molti casi si esaurirà poche ore dopo l'inizio delle operazioni. La schiuma non deve coprire più del 50% dell'area di superficie. 252 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

253 10 Eliminazione dei guasti 10.1 Problemi generali Sintomo dell'errore Eccessiva schiuma nel bioreattore Cellbag. Causa possibile Il bioreattore Cellbag non è sufficientemente gonfio. Eccessiva velocità di oscillazione Angolo di oscillazione eccessivo Elevato tenore proteico nel mezzo Azione correttiva Verificare che il bioreattorecellbag sia adeguatamente gonfiato. Una sacca gonfiata in modo insufficiente produce rapidamente schiuma. Se dopo alcune ore di funzionamento la schiumosità rimane eccessiva, ridurre la velocità di oscillazione. Accertarsi che la nuova velocità di oscillazione fornisca una sufficiente concentrazione di ossigeno disciolto. Ridurre l'angolo di oscillazione. Le unità di base del bioreattore sono impostate in fabbrica a ± 6 dall'asse orizzontale. Quest'angolo si è dimostrato ottimale per la maggior parte delle linee di celle. Aggiunta dell'agente antischiuma Controllo temperatura Nota: Nota: Il riscaldatore è progettato per riscaldare in modo graduale. Per portare 10 litri di liquido dalla temperatura ambiente ai 37 C occorre più di 1 ora. Il valore di processo PV deve ricadere entro ± 0,2 C del punto di regolazione SV. Sintomo dell'errore Viene visualizzato il messaggio di errore FAIL. Nessun riscaldamento e nessun messaggio di errore. Causa possibile Il sensore di temperatura non è collegato o è difettoso La temperatura non rientra nell'intervallo della temperatura ambiente da + 5 C a 40 C Lo strumento WAVE Bioreactor non oscilla Azione correttiva Verificare che il sensore di temperatura sia collegato correttamente. Se il problema persiste, sostituire il sensore di temperatura. Regolare la temperatura. Verificare che lo strumento sia in oscillazione. Il riscaldatore si spegne automaticamente quando lo strumento non oscilla. Questo comando può essere disabilitato dal menu SETUP:HEATER. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 253

254 10 Eliminazione dei guasti 10.1 Problemi generali Sintomo dell'errore Riscaldamento lento Il controllo di temperatura non funziona oppure la temperatura visualizzata sembra sbagliata. Causa possibile Il cavo del riscaldatore è scollegato Il riscaldatore non è acceso Punto di regolazione sbagliato Il sensore di temperatura o il riscaldatore non sono installati correttamente. Il bioreattore Cellbag non copre il sensore di temperatura. Il sensore di temperatura non è stato calibrato correttamente. Azione correttiva Accertarsi che il cavo del sensore sia inserito nel pannello e posizionato correttamente nella sacca. Accendere il riscaldatore. Controllare che l'indicatore HTR N lampeggi. Controllare che le barre che indicano la potenza del riscaldatore aumentino o siano al massimo. Se si usano dei bioreattori Cellbag da 20 litri o più grandi, accertarsi che entrambi i riscaldatori siano in funzione (impostazione LEFT+RGHT) sulla schermata di controllo HEATER. Verificare che il punto di regolazione sia impostato correttamente. Accertarsi che il sensore di temperatura sia correttamente posizionato sotto al bioreattore Cellbag. Verificare che il riscaldatore sia correttamente posizionato e che il vassoio di oscillazione sia saldamente bloccato. Verificare che la quantità di mezzo nel bioreattore Cellbag sia sufficiente a coprire il sensore di temperatura e che nessuna piega, risultante nella formazione di una tasca d'aria, si sia formata sulla pellicola del bioreattore Cellbag coprendo il sensore. Calibrare il sensore di temperatura. 254 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

255 10 Eliminazione dei guasti 10.1 Problemi generali Sintomo dell'errore L'allarme HTR FAIL è attivato Causa possibile La temperatura è superiore a 60 C Azione correttiva AVVERTENZA Non toccare il vassoio di oscillazione. Il riscaldatore è scollegato dallo strumento. Verificare che il sensore sia correttamente installato e che sia presente un bioreattore Cellbag. In condizioni di surriscaldamento, il sistema si ripristina automaticamente dopo che il riscaldatore si è sufficientemente raffreddato. Collegare il riscaldatore al WAVE Bioreactor. scillazione Sintomo dell'errore Lo strumento WAVE Bioreactor non è stato inizializzato correttamente Lo strumento non oscilla Lo strumento si arresta e viene attivato l'allarme SAFETY SWITCH TRIPPED. Causa possibile Interruttori di sicurezza difettosi Messaggi di allarme Un'ostruzione meccanica impedisce il movimento dell'unità di oscillazione Azione correttiva Provare a riavviare il sistema alcune volte. Se il sistema non si inizializza ancora correttamente, arrestarlo e contattare l'assistenza tecnica. Verificare gli allarmi correnti nella finestra Alarm sul pannello a sfioramento. Spegnere e riaccendere l'unità riaccendendo lo strumento. Se vengono ancora segnalati gli allarmi al motore, richiedere l'intervento dell'assistenza tecnica di GE Healthcare. Localizzare e rimuovere l'oggetto che causa l'ostruzione. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 255

256 10 Eliminazione dei guasti 10.1 Problemi generali Sintomo dell'errore La velocità di oscillazione cambia Angolo errato Causa possibile Il regolatore opzionale dell'ossigeno disciolto è attivato. Se l'ossigeno disciolto si scosta dal punto di regolazione, varia la velocità di oscillazione. Un'ostruzione meccanica impedisce il movimento dell'unità di oscillazione Azione correttiva Nel caso del controllo dell'ossigeno disciolto (D), ciò è normale. Se non è richiesto il controllo D, spegnere il relativo regolatore ponendo l'interruttore in posizione FF. Localizzare e rimuovere l'oggetto che causa l'ostruzione. Spegnere e riaccendere lo strumento per reinizializzare la misurazione dell'angolo. Regolatore aerazione La portata aria deve rimanere costante entro ± 0,02 l/min. Sintomo dell'errore Assenza di portata aria e attivazione di un allarme di alta pressione La pompa aria è in funzione ma la portata aria indica zero scillazione della portata aria e attivazione di un allarme di alta pressione. Causa possibile La pompa aria si è spenta a causa della pressione eccessiva Tubazione aria intasata WAVEPD II è collegato e la sorgente di gas non è selezionata in modo corretto. Un sorgente di gas esterna è collegata, ma il regolatore del tubo non è aperto. struzione nella tubazione aria Il filtro di sfiato in uscita dal bioreattore Cellbag è ostruito Azione correttiva Scollegare la tubazione Air In e Air ut e individuare l'ostruzione. Scollegare i raccordi in entrata e uscita sui pannelli laterali. Se viene ripristinata la portata aria, controllare se la tubazione Air In o Air ut è ostruita. Selezionare la sorgente di gas corretta. (WAVE Bioreactor 20/50 o WAVEPD II) Aprire il regolatore del tubo della sorgente di gas esterna. Scollegare i raccordi in entrata e uscita sui pannelli laterali. Se viene ripristinata la portata aria, controllare se la tubazione Air In o Air ut è ostruita. Trasferire il contenuto a un altro bioreattore Cellbag. 256 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

257 10 Eliminazione dei guasti 10.1 Problemi generali Sintomo dell'errore Portata aria assente (PV=0) Causa possibile La sacca è eccessivamente pressurizzata o l'ingresso al bioreattore Cellbag è chiuso. Il flusso di uscita è ridotto o otturato. Tale inconveniente è indicato dall'allarme di pressione alta. Azione correttiva Assicurarsi che tutte le linee d'ingresso e d'uscita siano aperte. Tale operazione comporta la ripresa della portata di aria. Utilizzare FLTHTR2 per riscaldare il filtro d'uscita del bioreattore Cellbag. In tal modo si impedisce la condensa e l'otturazione. Se il flusso di uscita è bloccato dalla schiuma, ridurre l'angolo o diminuire la velocità di oscillazione. Messaggi di allarme La tabella che segue elenca i messaggi di errore che possono essere visualizzati sul pannello a sfioramento di WAVE Bioreactor 20/50. Allarme E1 E2 E3 E4 E5 E6 E7 E8 E9 E10 E11 E12 Messaggio INIT FAIL SPEED DEV AIR DEV TEMP DEV WEIGHT DEV TEMPFAIL HTR FAIL RCKFAIL CMMFAIL MTRFAIL HIPRALM_L EMERSTP Descrizione All'accensione la macchina non viene inizializzata La velocità di oscillazione reale non corrisponde al punto di regolazione La portata aria reale (sinistra) non corrisponde al punto di regolazione La temperatura reale (sinistra) non corrisponde al punto di regolazione Il peso reale non corrisponde al punto di regolazione Il sensore di temperatura (sinistro) è difettoso o scollegato Il riscaldatore non è collegato oppure è surriscaldato L'unità di oscillazione non oscilla Errore di comunicazione interna. Spegnere e riaccendere per riprovare. Il motore di oscillazione non funziona La pressione della sacca (sinistra) è alta. La protezione di sicurezza è attivata e l'unità di oscillazione è ferma WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 257

258 10 Eliminazione dei guasti 10.1 Problemi generali Allarme E13 E14 E15 E16 E17 E18 E19 E20 E21 E22 E23 E24 E25 E27 E28 E29 E30 Messaggio C2FAIL PANFAIL RTEMPFAIL RTEMPDEV RAIRDEV C2DEV HIPRALM_R LADFAIL LWWTALM HIWTALM HARVALM FEEDALM LC2PR 2FAIL L2PR 2DEV LAD_VRG Descrizione Il sensore C 2 è difettoso (solo 2050EHT-C2) Non utilizzato per il bioreattore Il sensore di temperatura lato destro non funziona o non è collegato (2050EHTD) La temperatura reale (destra) non corrisponde al punto di regolazione (2050EHTD) La portata aria reale (destra) non corrisponde al punto di regolazione Deviazione C 2 (solo 2050EHT-C2) La pressione nella sacca (destra) è alta (solo 2050EHTD) Il sensore peso è difettoso (solo quando è installata una cella di carico) Allarme peso insufficiente (solo quando è installata una cella di carico) Allarme peso eccessivo (solo quando è installata una cella di carico) Allarme raccolta (solo quando è installata una cella di carico) Allarme alimentazione (solo quando è installata una cella di carico) Pressione alimentazione C 2 insufficiente (solo 2050EHT- C2) Il sensore 2 è difettoso (solo 2050EHT-2) Pressione alimentazione 2 insufficiente (solo 2050EHT- 2) Deviazione 2 (solo 2050EHT-2) Peso superiore alla gamma del sensore 258 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

259 10 Eliminazione dei guasti 10.2 Problemi specifici del modulo 10.2 Problemi specifici del modulo Regolatore peso Sintomo dell'errore Mancata lettura peso Visualizzazione peso irregolare Causa possibile La cella di carico non è installata L'opzione peso non è abilitata struzione meccanica dell'unità di oscillazione Azione correttiva Verificare che sia installata l'opzione Cella di carico e che il cavo del sensore sia correttamente collegato sul retro dello strumento WAVE Bioreactor. Verificare che l'opzione WEIGHT sia abilitata (schermata SETUP:PTINS). Passare alla schermata TARE e controllare che il peso lordo sia positivo. Verificare che il vassoio di oscillazione sia saldamente bloccato in posizione. Assicurarsi che non vi siano tubi che pongano in trazione il bioreattore Cellbag durante l'oscillazione. Verificare che il movimento dello strumento WAVE Bioreactor non sia ostruito. Regolatore C 2 Sintomo dell'errore Mancata lettura della C 2 Controllo C 2 irregolare Causa possibile Nessun modulo C 2 installato Gas C 2 non correttamente collegato Azione correttiva Verificare che l'unità di base del bioreattore sia del tipo 20/50EHT-C2 Verificare che il gas C 2 sia collegato all'unità e alla pressione corretta. Regolatore 2 Sintomo dell'errore Mancata lettura 2 Controllo 2 irregolare Causa possibile Nessun modulo 2 installato Gas 2 non correttamente collegato Azione correttiva Verificare che l'unità di base del bioreattore sia del tipo 20/50EHT-2 Verificare che il gas 2 sia collegato all'unità e alla pressione corretta. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 259

260 10 Eliminazione dei guasti 10.3 WAVEPD II 10.3 WAVEPD II Problemi generali La seguente tabella fornisce una breve guida alla risoluzione dei problemi generali che si potrebbero incontrare durante l'utilizzo di WAVEPD II. Sintomo dell'errore Nessuna visualizzazione sul display Il messaggio: BASE NT FUND è visualizzato ripetutamente Causa possibile L'unità non è accesa. Questo messaggio viene visualizzato momentaneamente all'avvio e in caso di interruzione delle comunicazioni con la base collegata. Se la visualizzazione del messaggio permane, indica che si sono interrotte le comunicazioni interne con i moduli di controllo WAVEPD II. Azione correttiva Verificare il cavo di alimentazione elettrica. Verificare che il cavo tra WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II sia correttamente collegato. Qualora il problema persista, contattare l'assistenza tecnica di GE Healthcare. MISCELA DI C 2 La seguente tabella fornisce una breve guida alla risoluzione dei problemi che si potrebbero verificare quando si usa il regolatore di C 2. Sintomo dell'errore Il display evidenzia una concentrazione di C 2 nell'aria che devia dal valore atteso (0,0%). La lettura della C2 diminuisce costantemente Causa possibile Minori deviazioni dal valore atteso non sono insolite. La pressione di alimentazione del gas C 2 è troppo bassa Azione correttiva Se la deviazione è ampia, si può regolare l'offset della C 2. Contattare l'assistenza di GE Healthcare. Controllare che la spia verde della pressione in ingresso della C 2 sia accesa. La pressione di alimentazione della C 2 deve essere compresa tra 0,7 e 1,0 bar (tra 10 e 15 psig). 260 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

261 10 Eliminazione dei guasti 10.3 WAVEPD II Sintomo dell'errore Controllo C2 difettoso Mancata lettura portata aria Il bioreattore Cellbag non rimane gonfio Causa possibile L'alimentazione della C 2 non è collegata correttamente Punto di regolazione sbagliato Portata aria ostruita Portata aria assente Portata aria assente Valvola di non ritorno difettosa Azione correttiva Verificare che la C 2 sia collegata alla porta d'ingresso corretta. Controllare che la pompa aria sia in funzione e che la portata sia compresa tra 0,05 e 0,5 litri/minuto. Controllare che l'interruttore C 2 sia inserito. Controllare il punto di regolazione sul regolatore. Verificare che la portata aria diretta al bioreattore Cellbag non sia ostruita. Verificare che la pompa funzioni scollegando il raccordo MIX UT sullo strumento. Verificare che vi sia portata d'aria al bioreattore Cellbag. Controllare che la valvola di non ritorno sul bioreattore Cellbag sia installata correttamente. Chiudere l'uscita del bioreattore Cellbag usando un morsetto e verificare che il bioreattore Cellbag si gonfi. Verificare quindi che la valvola di non ritorno funzioni collegando un corto spezzone di tubo all'uscita della valvola e immergendolo in acqua. Il tubo deve essere immerso a una profondità di 5-10 mm. Aprendo il morsetto sull'uscita, la valvola deve provocare la formazione di bolle d'aria che devono continuare man mano che la portata aria e la pressione si stabilizzano. MISCELA DI 2 La seguente tabella fornisce una breve guida alla risoluzione dei problemi che si potrebbero verificare quando si usa il regolatore di 2. Sintomo dell'errore Il display evidenzia una concentrazione di 2 nell'aria che devia dal valore atteso (21,0%). Causa possibile Minori deviazioni dal valore atteso non sono insolite. Azione correttiva Se la deviazione è ampia, si può regolare l'offset dell' 2. Contattare l'assistenza di GE Healthcare. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 261

262 10 Eliminazione dei guasti 10.3 WAVEPD II Sintomo dell'errore La lettura di 2 diminuisce costantemente Controllo 2 difettoso Mancata lettura portata aria Causa possibile La pressione di alimentazione del gas 2 è troppo bassa L'alimentazione dell' 2 non è collegata correttamente Punto di regolazione sbagliato Portata aria ostruita Portata aria assente Azione correttiva Controllare che la spia verde della pressione in ingresso dell' 2 sia accesa. La pressione di alimentazione dell' 2 deve essere compresa tra 0,7 e 1,0 bar (tra 10 e 15 psig). Verificare che l' 2 sia collegato alla porta d'ingresso corretta. Controllare che la pressione di alimentazione dell' 2 sia impostata ad almeno 0,7 bar (10 psig). Controllare che la pompa aria sia in funzione e che la portata sia compresa tra 0,1 e 0,5 litri/minuto. Controllare che l'interruttore 2 sia inserito. Controllare il punto di regolazione sul regolatore. Verificare che la portata aria diretta al bioreattore Cellbag non sia ostruita. Verificare che la pompa funzioni scollegando il raccordo MIX UT sullo strumento. Regolatore ph Sintomo dell'errore La lettura iniziale del ph è instabile e si discosta notevolmente (cioè approssimativamente di oltre 0,5 unità di ph da una misurazione off-line). scillazione di ph La variazione di ph, riconducibile al movimento di oscillazione, deve essere inferiore a 0,05 unità di ph. Causa possibile Una bolla di gas può essere intrappolata sul sensore phpt. Il movimento di oscillazione disturba i rilevamenti di ph. Azione correttiva Battere leggermente sul sensore phpt dalla parte inferiore per eliminare la bolla. Verificare che i cavi non siano schiacciati o che si muovano eccessivamente. Arrestare l'oscillazione e osservare le rilevazioni di ph. Verificare che il volume presente nel bioreattore Cellbag non sia inferiore a quello minimo specificato. 262 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

263 10 Eliminazione dei guasti 10.3 WAVEPD II Sintomo dell'errore Errata lettura del ph Causa possibile 1 I valori di calibrazione del phpt inseriti non sono rappresentativi della sacca utilizzata. 2 Il sensore phpt si deteriora per l'uso prolungato, l'esposizione alla luce o la presenza di sostanze dannose, come basi forti o etanolo. Azione correttiva 1 Verificare l'etichetta del phpt sulla sacca, inserire i valori corretti ed effettuare una calibrazione di offset. Nota: Se la lettura iniziale phpt si discosta molto da una misurazione off-line (p.es., di oltre 0,5 unità di ph), significa che è presente una condizione anomala. Verificare le diverse soluzioni suggerite in questa tabella per trovare la causa dello scarto. Una coltura deve essere avviata solo quando le condizioni sono normali per evitare la perdita di cellule. 2 Il sensore non è più utilizzabile per la misura del ph. Il controllo automatico del ph non può più essere eseguito. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 263

264 10 Eliminazione dei guasti 10.3 WAVEPD II Sintomo dell'errore Nessuna misurazione di ph Causa possibile 1 La misurazione del ph non è stata attivata nel menu di controllo phpt CNTRL 2 Il cavo della fibra ottica ph non è collegato correttamente o è difettoso 3 La temperatura dei mezzi non ha raggiunto quella di processo 4 Il valore di ph all'interno del bioreattore Cellbag è fuori dai limiti della scala di lettura (circa ph 5-9) Azione correttiva 1 Premere il pulsante alla destra della finestra di misurazione del menu di controllo phpt CNTRL. 2 Verificare entrambe le estremità del cavo in fibra, cioè, che tutte e quattro le spine della porta della sacca fissino l'adattatore della sacca e che il connettore sia correttamente avvitato sulla porta PHPT nella parte anteriore di WAVEPD II. Se si utilizza contemporaneamente sia il phpt sia il DPT, assicurarsi che i cavi in fibra non vengano scambiati. Se così fosse, rifare i collegamenti di phpt e DPT. Notare che potrebbe essere necessario un ciclo di controllo prima che vengano visualizzati i valori corretti. 3 Disattivare la misurazione del ph finché il mezzo di coltura non è bilanciato. Attivare la misurazione del ph e se necessario eseguire una calibrazione offset. 4 Se possibile, regolare le condizioni di Cellbag su un ph che rientri nell'intervallo di lavoro previsto. Nota: Il danneggiamento del sensore del PH rappresenta un rischio, soprattutto se il ph supera un valore di circa ph 10. Quando si usa UNICRN DAQ, è possibile registrare alcuni parametri aggiuntivi che sono utili soprattutto per la ricerca guasti di phpt. Selezionare ph Details nella configurazione ph WAVEPD (UNICRN Manager:System Setup:Components). 264 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

265 10 Eliminazione dei guasti 10.3 WAVEPD II Regolatore dell'ossigeno disciolto Sintomo dell'errore L'N 2 è collegato all'ingresso AIR IN, ma la regolazione D non riduce il livello D quando il punto di regolazione è inferiore al 100% di sat. aria. La lettura iniziale di D è molto superiore al previsto (per esempio approssimativamente il 300% di sat. aria invece del 100% previsto). La lettura iniziale di D si discosta dal valore previsto, tipicamente di circa il 10% di sat. aria. Causa possibile Il limite min. di 2 nella schermata di configurazione del controllo D è impostato sul valore predefinito del 21,0%, o qualsiasi altro valore che sia troppo elevato per creare il livello D desiderato. Questo può accadere quando si utilizzano entrambi i sensori phpt e DPT con cavi in fibra scambiati. Questo è normale e può essere causato da differenze di temperatura, pressione atmosferica e composizione della mezzo di coltura. Azione correttiva Regolare il limite min. di 2 nella schermata di configurazione del controllo D, per esempio su 0. Se così fosse, rifare i collegamenti di phpt e DPT. Notare che potrebbe essere necessario un ciclo di controllo prima che vengano visualizzati i valori corretti. 1 Controllare che sia stata inserita la corretta calibrazione. 2 Qualora il problema persista, eseguire una calibrazione offset al 100% di sat. aria e opzionalmente allo 0% di sat. aria. Messaggi di allarme La tabella che segue elenca i messaggi di errore che possono essere visualizzati sul pannello a sfioramento di WAVEPD II. N. allarme Messaggio BAY1&3 FAIL BAY2&4 FAIL BASE CM FAIL, Communication with WAVE Bioreactor failed Descrizione Interruzione delle comunicazioni con le postazioni 1 e 3 Interruzione delle comunicazioni con le postazioni 2 e 4 Interruzione delle comunicazioni con WAVE Bioreactor WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 265

266 10 Eliminazione dei guasti 10.3 WAVEPD II N. allarme Messaggio PH_DEV PH_FAIL PHCM_FAIL D_DEV D_FAIL INIT_FAIL AIR_DEV UTHIPRALM 2_DEV C2_DEV 2_FAIL C2_FAIL LW2PR LWC2PR 2MINLMT 2MAXLMT C2MAXLMT C2MINLMT RPMMINLMT RPMMAXLMT Descrizione Deviazione del ph dal punto di regolazione Sensore ph difettoso o scollegato Mancata risposta dall'amplificatore ph Deviazione dell'ossigeno disciolto dal punto di regolazione Sensore D difettoso o scollegato Errore di inizializzazione PLC Deviazione della portata aria dal punto di regolazione Pressione MIX UT troppo alta Deviazione del valore 2 dal punto di regolazione Deviazione del valore C 2 dal punto di regolazione Sensore 2 difettoso Sensore C 2 difettoso Pressione alimentazione ossigeno insufficiente Pressione alimentazione C 2 insufficiente Punto di regolazione remoto 2 al limite minimo Punto di regolazione remoto 2 al limite massimo Punto di regolazione remoto C 2 al limite massimo Punto di regolazione remoto C 2 al limite minimo Punto di regolazione remoto velocità al limite minimo Punto di regolazione remoto velocità al limite massimo 266 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

267 10 Eliminazione dei guasti 10.3 WAVEPD II N. allarme Messaggio BAY 2 DPT N TYPE SWITCHED FIBRES Descrizione Il tipo di scheda DPT (DPT o DPT II) non è stato rilevato Segnalazione di possibile scambio dei cavi ottici WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 267

268 A Informazioni di riferimento Appendice A Informazioni di riferimento Informazioni sull'appendice Questa appendice contiene dati tecnici, informazioni normative e di altro tipo. In questa appendice Sezione A.1 Specifiche A.2 Parti di ricambio, accessori e informazioni per gli ordini Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

269 A Informazioni di riferimento A.1 Specifiche A.1 Specifiche WAVE Bioreactor 20/50 Parametro Protezione da ingressione Tensione di alimentazione Potenza Dimensioni (a l p) Valore IP V ~ o V ~ Da 50 a 60 Hz 630 VA mm Con KIT20EHT: Con KIT50EHT: Peso Livello acustico Temperatura ambiente Temperatura di stoccaggio Tolleranza umidità relativa Specifiche ingressi 16 kg < 70 db A da 4 C a 40 C Da -25 C a +60 C < 95%, senza condensa Aria, gas di processo: 0,1-0,2 bar (portata minima 1,0 l/min per la specifica della portata aria totale) C 2 : 0,7-1,0 bar (portata minima 0,2 l/min per la specifica della C 2 totale) 2 : 0,7-1,0 bar (portata minima 0,6 l/min per la specifica della C 2 totale) WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 269

270 A Informazioni di riferimento A.1 Specifiche WAVEPD II Parametro Protezione da ingressione Tensione di alimentazione Potenza Fusibili (2) Dimensioni (a l p) Peso Livello acustico Temperatura ambiente Temperatura di stoccaggio Tolleranza umidità relativa Specifiche ingressi Valore IP V ~ o V ~, Da 50 a 60 Hz 200 VA T 2AL 250 V (5x20) mm 12,6 kg < 60 db A da 4 C a 40 C Da -20 a +60 Da 10% a 90%, senza condensa Aria, gas di processo: 0,1-0,2 bar (portata minima 1,0 l/min per la specifica della portata aria totale) C 2 : 0,7-1,0 bar (portata minima 0,2 l/min per la specifica della C 2 totale) 2 : 0,7-1,0 bar (portata minima 0,6 l/min per la specifica della C 2 totale) 270 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

271 A Informazioni di riferimento A.2 Parti di ricambio, accessori e informazioni per gli ordini A.2 Parti di ricambio, accessori e informazioni per gli ordini WAVE Bioreactor Per informazioni aggiornate e corrette sui pezzi di ricambio e gli accessori per lo strumento WAVE Bioreactor, visitare il sito oppure contattare il rappresentante GE Healthcare di zona. Moduli WAVEPD II I moduli WAVEPD II disponibili sono elencati di seguito. Per informazioni aggiornate e corrette sui pezzi di ricambio e gli accessori per il regolatore WAVEPD II, visitare il sito oppure contattare il rappresentante GE Healthcare di zona. Modulo phpt Modulo di controllo dell'ossigeno disciolto Modulo pompa aria Modulo di controllo della concentrazione di 2 Modulo di controllo della concentrazione di C 2 Modulo di controllo di combinazione 2 + C 2 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 271

272 B Teoria del controllo dei parametri Appendice B Teoria del controllo dei parametri Informazioni sull'appendice Questa appendice contiene le informazioni relative ai controlli e alla misurazione dei parametri del WAVEPD II. In questa appendice Sezione B.1 Generalità B.2 Misurazione e controllo del ph B.3 Misurazione e controllo dell'ossigeno disciolto B.4 Misurazione e controllo dell'ossigeno B.5 Misurazione e controllo dell'anidride carbonica Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

273 B Teoria del controllo dei parametri B.1 Generalità B.1 Generalità Funzioni di controllo I moduli di controllo del WAVEPD II presentano le seguenti funzioni: Parametro ph SSIGEN DISCILT Portata aria Regolatore C 2 Regolatore 2 Controllo misurazione: sensore ottico regolazione: aggiunta di acido/base attraverso le pompe esterne e/o il segnale al regolatore della C 2 misurazione: sensore ottico regolazione: velocità di oscillazione e/o segnale al regolatore dell' 2 misurazione: sensore di flusso a massa termica regolazione: regolatore interno misurazione: sensore NDIR regolazione: regolatore interno misurazione: sensore all'ossido di zirconio regolazione: regolatore interno WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 273

274 B Teoria del controllo dei parametri B.2 Misurazione e controllo del ph B.2 Misurazione e controllo del ph Misurazione del ph, modulo phpt Il modulo phpt consente la misurazione in tempo reale del valore del ph all'interno dei bioreattori Cellbag tramite un sensore monouso integrato nel fondo della Cellbag. Una fibra ottica collega il bioreattore Cellbag al modulo phpt. La fibra ottica è provvista di un adattatore sacca appositamente progettato per l'abbinamento di sicurezza a una porta ph presente sul fondo della sacca del bioreattore Cellbag. La porta ph della sacca ancora il sensore di ph, un punto luminescente da 2 mm sensibile alle variazioni del ph. Il principio della misurazione ottica riduce la sensibilità di rilevazione a causa di interferenze elettromagnetiche. Principio di misurazione del phpt Tecnologia del sensore ottico La tecnologia del sensore ottico si basa sull'utilizzo di un colorante composto da due sostanze luminescenti e immobilizzato sul corpo del sensore. Per lo stato d'eccitazione provocato dalla luce incidente, le sostanze luminescenti emettono luce. Una delle due sostanze luminescenti possiede un tempo di decadimento costante all'interno della gamma utile di valori di ph in cui opera il sensore, mentre il tempo di decadimento dell'altra sostanza dipende dal valore di ph presente nella soluzione circostante. Misurazione del ph Per misurare il ph di una soluzione, il sensore ph ben impregnato è illuminato da un LED che emette luce a modulazione di impulsi. L'impulso luminoso ecciterà il sensore risultando una risposta similmente modulata ed emessa dalle due sostanze luminescenti. A causa dei diversi tempi di decadimento delle sostanze luminescenti, i segnali di risposta delle due sostanze saranno ritardati l'uno rispetto all'altro. Ciò si manifesta con una differenza dell'angolo di fase. Dal momento che il tempo di decadimento di una delle due sostanze luminescenti varia in funzione all'ambiente circostante del ph, l'angolo di fase tra i segnali di risposta può essere utilizzato per il calcolo del ph. Viene quindi utilizzata una funzione di trasferimento per convertire l'angolo di fase in una lettura di ph. La funzione di trasferimento ingloba una serie di parametri (valori di calibrazione) specifici per lotto di sensori: cmin, cmax, cph0 e cdph. Un quinto valore di calibrazione è ctemp, la temperatura alla quale il sensore è stato calibrato e alla quale deve essere utilizzato per ottenere prestazioni ottimali. Tutti i valori di calibrazione sono inseriti su un'etichetta presente nel bioreattore Cellbag. 274 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

275 B Teoria del controllo dei parametri B.2 Misurazione e controllo del ph Compensazione della sensibilità a luce e temperatura Il sensore è soggetto a fotodecadimento, vale a dire che la luce ne influenza le proprietà. Ciò include anche la luce proveniente dal LED utilizzata per le misurazioni. Il fotodecadimento determina una perdita d'intensità (ampiezza) e un aumento dell'angolo di fase (diminuzione del valore di ph letto). L'uscita del LED è regolata automaticamente in modo da fornire l'ampiezza adeguata ad assicurare una prestazione ottimale e la durata del sensore. Il sensore è anche sensibile alla temperatura. Il modulo phpt include una funzione di compensazione della temperatura che risulta efficace nell'ambito di pochi C dalla temperatura di calibrazione. Calibrazione di offset Una calibrazione di offset secondo Sezione6.3.1 Controllo di ph, a pagina130 modificherà il valore di calibrazione cph0. Nel corso della coltura, gli altri valori di calibrazione resteranno costanti. Controllo di ph Il ph è controllato in uno dei seguenti modi: aggiunta di acido e base aggiunta di gas C 2 e di base Sono previsti un algoritmo per il controllo di acido/base e un altro algoritmo per il controllo della C 2, entrambi con impostazioni PID. La ragione di ciò sta nella diversa dinamica presente rispettivamente nella fase liquida e in quella gassosa. Quando viene utilizzata la regolazione combinata C 2 /base, le impostazioni relative alla base sono le stesse immesse nel controllo acido/base (con regolazione dell'acido disattivata) Una tabella dei valori PID consigliati è fornita in Impostazione dei parametri di controllo ph, a pagina 203. La base della regolazione del ph è il ciclo di controllo, vale a dire l'intervallo di tempo tra le diverse azioni di regolazione del ph. All'inizio del ciclo di controllo, il regolatore determina il tempo (come percentuale del tempo del ciclo di controllo) durante il quale una pompa acido/base deve restare attiva per controbilanciare la deviazione del ph. Nel caso della C 2, il livello di C 2 necessario a regolare il ph durante il successivo ciclo di controllo, è determinato dal regolatore. Il tempo del ciclo di controllo può essere impostato dall'utente. Tale tempo può essere lo stesso degli intervalli del campione, vale a dire il tempo che intercorre tra due letture consecutive del ph. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 275

276 B Teoria del controllo dei parametri B.2 Misurazione e controllo del ph Utilizzo della zona morta Generalmente, l'utilizzo della zona morta è un modo per limitare l'attivazione del regolatore in modo da non sprecare mezzi o energia senza conseguire regolazioni notevolmente migliorate. Il modulo phpt ha le funzioni necessarie a impostare la zona morta per il controllo acido/base e C 2 /base. Zona morta acido/base Talvolta viene utilizzata una gamma di ph per definire la zona morta di controllo. Tuttavia, se il volume e le caratteristiche chimiche del sistema controllato non sono ben definiti, o oscillano nel tempo, la correlazione tra ph e regolazione non è stabile. Questo è il caso che si verifica tipicamente in una coltura di celle durante il controllo acido/base. La quantità aggiunta di acido o di base è controllata attivando le pompe per una certa percentuale del tempo di ciascun ciclo di controllo. Con il phpt, una buona regolazione del ph è invece conseguita tramite la definizione di una soglia temporale al di sotto della quale le pompe acido/base non sono attive. Normalmente, anche in presenza di condizioni stabili, il ph varia di pochi centesimi di unità ph vicino al punto di regolazione. Se le pompe acido/base risultano attive per controbilanciare tali minime deviazioni, dovrebbero immettere acido/base più o meno costantemente senza conseguire una regolazione notevolmente migliorata. Questo risulterebbe in un inutile consumo di acido/base e in un eccessivo riempimento del bioreattore Cellbag. Impostazione della zona morta acido/base phpt Nella configurazione phpt, la zona morta acido/base è implementata come percentuale del ciclo di controllo definito dall'utente. Ad esempio, supponiamo che il ciclo di controllo sia impostato a 50 secondi e la zona morta a 2,0%. Dipendentemente dall'entità rilevata della deviazione del ph dal suo punto di regolazione selezionato, il regolatore calcola il tempo durante il quale la pompa deve restare attiva per controbilanciare la deviazione. Se l'entità della deviazione è tanto piccola che il tempo calcolato è inferiore al 2% dei 50 secondi (1 secondo), il regolatore non attiverà la pompa durante questo ciclo di controllo. Di conseguenza, la pompa non sarà attivata fintantoché la deviazione del ph all'inizio del ciclo di controllo non richieda un'azione della pompa protratta per più di 1 secondo. L'impostazione predefinita è 2,0%. Un'impostazione della zona morta su valori percentuali più bassi, comportando una regolazione poco meno oscillante, causerebbe un maggiore consumo di acido/base. 276 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

277 B Teoria del controllo dei parametri B.2 Misurazione e controllo del ph Zona morta C 2 La regolazione della C 2 comprende anche una zona morta impostabile dall'utente. La zona morta della C 2 definisce l'intervallo di ph vicino al punto di regolazione selezionato per il quale la regolazione è inattiva, indicando che il livello di C 2 è costante. Impostazione della zona morta C 2 phpt Impostando nel modulo phpt la zona morta della C 2 a un ph 0,0 si conseguirà una regolazione ottimale. Tale valore è quello preimpostato e andrebbe sempre utilizzato, a meno di speciali applicazioni che richiedano modifiche d'impostazione della zona morta. Ritardo di transizione Nel caso di regolazione C 2 /base, la C 2 sarà aggiunta fino a quando il valore del ph sarà superiore allo specifico punto di regolazione, mentre la base sarà aggiunta per aumentare un valore di ph troppo basso. Per una regolazione stabile, queste due modalità di regolazione non dovrebbero essere commutate troppo frequentemente. Questo è il caso che si verifica quando il valore misurato del ph si colloca molto vicino al punto di regolazione. Pertanto, può essere impostato un ritardo di transizione per la commutazione dalla regolazione con C 2 a quella con la base, e un secondo ritardo simile per la commutazione dalla regolazione con la base a quella con C 2. La commutazione dalla regolazione con C 2 a quella con la base ha luogo solo quando il valore del ph è inferiore a quello del punto di regolazione per il ritardo impostato e, contemporaneamente, il regolatore di C 2 sia al valore minimo che è stato selezionato per la C 2. Analogamente, la regolazione con base viene commutata a quella con C 2 solo quando il valore del ph è superiore al punto di regolazione e nessuna base è stata aggiunta per il ritardo impostato. Guadagno Il parametro di guadagno per le pompe dell'acido e della base consente all'utente di regolare l'uscita di acido/base per tenere conto delle differenze di forza dell'acido e della base utilizzati. Il fattore di guadagno è un numero adimensionale. Aumentando il guadagno di acido e base aumenta l'effetto in uscita dal regolatore. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 277

278 B Teoria del controllo dei parametri B.3 Misurazione e controllo dell'ossigeno disciolto B.3 Misurazione e controllo dell'ossigeno disciolto Misurazione di D, modulo DPT II Il modulo DPT II consente la misurazione in tempo reale del valore di ossigeno disciolto all'interno dei bioreattori Cellbag tramite un sensore D monouso integrato nella pellicola del fondo della Cellbag. Una fibra ottica collega il bioreattore Cellbag al modulo DPT II. La fibra ottica è provvista di un adattatore sacca appositamente progettato per il collegamento in sicurezza ad una porta di sacca DPT II presente sul fondo di un bioreattore Cellbag configurato per DPT II. La porta della sacca ph trattiene il sensore DPT II, che è un disco luminescente da 3 mm, sensibile alle variazioni nell'ossigeno disciolto. Il principio della misurazione ottica riduce la sensibilità di rilevazione a causa di interferenze elettromagnetiche. Principio di misurazione del DPT La tecnologia del sensore ottico per DPT II, si basa sull'utilizzo di uno strato a disco del sensore che comprende una sostanza luminescente immobilizzata su un disco. Il disco è incollato sul corpo del sensore. Il modulo DPT II misura il tempo di decadimento della luminescenza della sostanza luminescente immobilizzata. La sostanza luminescente è costituita tipicamente da un complesso metallico di transizione. Durante lo stato d'eccitazione provocato dalla luce incidente, la sostanza luminescente emette luce. In presenza di un quencher, quale l'ossigeno molecolare, la sostanza luminescente viene disattivata cessando così l'emissione luminosa, pertanto il tempo di decadimento dipende dalla concentrazione dell'ossigeno circostante. Il tempo di decadimento della luminescenza è misurato con una tecnica a modulazione di fase. La sostanza luminescente è eccitata quando colpita da luce a modulazione sinusoidale. Il tempo di decadimento della sostanza luminescente causa un ritardo nell'emissione del segnale luminoso. Il ritardo si manifesta con uno spostamento dell'angolo di fase tra il segnale luminoso emesso e quello di eccitazione. Il modulo DPT II consente la compensazione della temperatura. 278 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

279 B Teoria del controllo dei parametri B.3 Misurazione e controllo dell'ossigeno disciolto Panoramica sui principi del controllo L'ossigeno disciolto è controllabile in uno dei seguenti modi: cambiando velocità di oscillazione modificando la concentrazione di 2 combinando la velocità di oscillazione alla concentrazione dell' 2 Esiste un algoritmo che sovrintende al controllo dell' 2 con impostazioni PID accessibili all'utente, mentre i parametri relativi alla velocità di oscillazione sono preimpostati. Non verranno effettuate azioni di controllo all'interno della zona morta. Quando si seleziona la modalità combinata, viene principalmente utilizzato il controllo dell' 2. Se ciò fosse insufficiente al conseguimento del punto di regolazione, verrà applicato il controllo della velocità di oscillazione. Per ridurre al minimo l'eventualità indesiderata di commutazione quando il valore misurato è prossimo al punto di regolazione, viene impostato un valore di ritardo della transizione. Zona morta La zona morta relativa a velocità di oscillazione e 2 è espressa come la differenza tra il punto di regolazione dell'ossigeno disciolto e il relativo valore misurato. La zona morta definisce l'intervallo circostante il punto di regolazione dell'ossigeno disciolto dove la regolazione è inattiva. Se l'ossigeno disciolto misurato è... superiore al punto di regolazione inferiore al punto di regolazione Quindi... per conseguire il punto di regolazione del D, i valori di velocità e/o concentrazione di 2 vengono ridotti fino a un valore minimo impostato. Quando è utilizzata una combinazione, per primo viene controllato l' 2 fino al suo valore minimo, quindi la velocità diminuisce. per conseguire il punto di regolazione dell'ossigeno disciolto, i valori di velocità e/o concentrazione di 2 vengono aumentati fino a un valore massimo impostato. Quando è utilizzata una combinazione, per primo viene controllato l' 2 fino al suo valore massimo, quindi entra in gioco l'aumento della velocità. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 279

280 B Teoria del controllo dei parametri B.3 Misurazione e controllo dell'ossigeno disciolto Velocità di oscillazione Quando il valore dell'ossigeno disciolto misurato ricade all'interno della zona morta, non viene effettuata alcuna modifica sulla velocità di oscillazione. 2 Impostando la zona morta dell' 2 sul valore 0,0 fornirà una regolazione ottimale. Tale valore è quello preimpostato e andrebbe sempre utilizzato, a meno di speciali applicazioni che richiedano modifiche d'impostazione della zona morta. Ritardo di transizione Il ritardo di transizione si applica allo schema di controllo combinato. Quando il valore dell'ossigeno disciolto misurato è inferiore al punto di regolazione, nonostante l' 2 massimo, viene utilizzato anche il controllo della velocità di oscillazione. Il ritardo di transizione è impostato in modo tale da evitare che il controllo della velocità venga attivato/disattivato frequentemente quando il valore dell'ossigeno disciolto oscilla intorno al punto di regolazione al massimo di 2. Perché il controllo si attivi, deve essere presente una costante necessità di controllo della velocità. Il controllo sarà disattivato anche se, nel corso dell'intervallo impostato, non sia stato necessario il suo intervento. Saturazione dell'aria e pressione atmosferica Con WAVEPD II, il D viene misurato come percentuale di saturazione dell'aria (% sat. aria). Una sat. aria del 100% corrisponde al contenuto di ossigeno di una determinata soluzione alla temperatura e pressione atmosferica attuali dopo essere stata bilanciata in un ambiente pieno d'aria. La saturazione dell'aria è una misura relativa. Il contenuto di ossigeno, misurato per esempio in mg/l, dipende da fattori quali la composizione della soluzione, la temperatura e la pressione atmosferica (dovuta alle diverse condizioni climatiche o di altitudine). Perciò, deve essere chiaro che se un sensore DPT II viene calibrato per una sat. aria del 100% in condizioni bilanciate ad una pressione atmosferica p.es. di 1030 mbar, esso non indicherà il 100% di aria se lo stesso contenuto viene successivamente bilanciato a un'altra pressione atmosferica, p.es di 950 mbar. Tale differenza è approssimativamente dell'1% aria sat./10 mbar. Alla consegna, i bioreattori Cellbag configurati per DPT II, sono provvisti di sensori che sono calibrati in fabbrica a una determinata pressione atmosferica. Tale pressione è riportata sull'etichetta DPT II come "calp" e può essere inserita nel WAVEPD II. Tuttavia, dato che il WAVEPD II non comprende un barometro, non è disponibile alcun algoritmo di compensazione della pressione. 280 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

281 B Teoria del controllo dei parametri B.4 Misurazione e controllo dell'ossigeno B.4 Misurazione e controllo dell'ossigeno Funzione L'erogazione di 2 proveniente da una conduttura o da una bombola è collegata al modulo 2. L'aria viene aspirata dalla porta Air In/AIR IN (modulo pompa aria) e miscelata all' 2 (collegata a 2 IN). Un sensore di 2 misura la concentrazione di 2 nell'aria e la controlla in base a qualsiasi valore specificato dall'utente compreso tra 21% e 50%. L'aria condizionata viene pompata dalla porta Air ut/mix UT nella parte superiore della Cellbag in modo da mantenere la pressione della sacca e fornire ossigeno alla coltura. Principio della misurazione La concentrazione d'ossigeno nel gas è misurata attraverso un sensore interno all'ossido di zirconio. La specifica reazione chimica con l'ossigeno produce un segnale proporzionale all'ossigeno presente nella cella a flusso continuo e il circuito del microprocessore fornisce un segnale lineare e stabile. Il regolatore interno regola la miscelazione del gas 2 con l'aria, in modo da produrre la concentrazione di 2 desiderata nel gas presente nella parte superiore della Cellbag. Il sensore dell' 2 è a compensazione di temperatura (da 0 C a 50 C). I cambiamenti di pressione possono influenzare la lettura; tuttavia, il flusso del gas viene attentamente regolato al fine di mantenere costante il valore della pressione nella cella del sensore dell' 2 indipendentemente dalla pressione di mandata Air ut/mix UT o da oscillazioni minime della pressione in ingresso dell' 2. Durata del sensore Il sensore di 2 non si deteriora quando è inutilizzato. In condizioni operative tipiche, il sensore dovrebbe durare almeno 10 anni. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 281

282 B Teoria del controllo dei parametri B.5 Misurazione e controllo dell'anidride carbonica B.5 Misurazione e controllo dell'anidride carbonica Funzione L'erogazione della C 2 proveniente da una conduttura o da una bombola viene collegata al modulo C 2. L'aria viene aspirata dalla porta Air In/AIR IN (modulo pompa aria) e miscelata alla C 2 (collegata a C2 IN). Un sensore di C 2 misura la concentrazione di C 2 e la controlla in base a qualsiasi valore specificato dall'utente compreso tra 0% e 15%. L'aria condizionata con la C 2 viene pompata dalla porta Air ut/mix UT nella parte superiore della Cellbag in modo da mantenere la pressione della sacca e fornire l'anidride carbonica per il controllo del ph. Principio della misurazione La C 2 viene misurata attraverso un sensore a infrarossi non dispersivo (NDIR) di C 2 che utilizza una cella a flusso continuo. Il regolatore interno e la valvola regolano la miscelazione del gas C 2 con l'aria, in modo da produrre la concentrazione di C 2 desiderata nel gas presente nella parte superiore della Cellbag. Il sensore della C 2 è a compensazione di temperatura (da 0 C a 50 C). I cambiamenti di pressione possono influenzare la lettura; tuttavia, il flusso del gas viene attentamente regolato al fine di mantenere costante il valore della pressione nella cella del sensore della C 2 indipendentemente dalla pressione di mandata Air ut/mix UT o da oscillazioni minime della pressione in ingresso della C WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

283 C Comunicazioni e collegamenti Informazioni sull'appendice La presente appendice descrive come collegare WAVE Bioreactor 20/50 a WAVEPD II e agli altri strumenti WAVE autonomi e a UNICRN DAQ 1.0, e il modo in cui comunicano. In questa appendice Sezione C.1 Panoramica sulla comunicazione dei dati C.2 Porta analogica/allarme C.3 Contatto di allarme C.4 Collegamento di PUMP20 a WAVEPD II C.5 Porta di comunicazione MDBUS C.6 Collegare WAVE Bioreactor a UNICRN DAQ 1.0 Appendice C Comunicazioni e collegamenti Vederepagina WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 283

284 C Comunicazioni e collegamenti C.1 Panoramica sulla comunicazione dei dati C.1 Panoramica sulla comunicazione dei dati pzioni di comunicazione dati Due opzioni di comunicazione dati sono integrate in WAVE Bioreactor e WAVEPD II: analogica e digitale. Tipo Logica dei relè Analogico Digitale Contatto/protocollo Contatto a secco Uscite analogiche MDBUS (RTU) Comunicazione con Sistemi di monitoraggio allarmi Registratori di dati Software di controllo Software di acquisizione dati, ad es. UNICRN DAQ 1.0 WAVE Bioreactor: WAVEPD II, WAVEPD II: WAVE Bioreactor Connessione a margherita di WAVE Bioreactor e strumenti autonomi Comunicazione analogica Allarme Un allarme unità è disponibile sul jack del pannello posteriore in WAVE Bioreactor (ALARM ANALG UTPUT) e WAVEPD II (ALARM/ANALG). È un contatto secco normalmente chiuso o normalmente aperto che si aziona in caso di attivazione di un allarme. Se si utilizza un contatto normalmente chiuso, viene fornito un allarme anche in caso di mancanza di alimentazione allo strumento. Il contatto dell'allarme può essere utilizzato come interfaccia per i sistemi di monitoraggio degli allarmi forniti dall'utente. pzioni supplementari degli strumenti WAVE Bioreactor ltre a quanto detto sopra, i seguenti parametri possono essere misurati dal pannello posteriore degli strumenti WAVE Bioreactor come tensioni separate: velocità temperatura 284 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

285 C Comunicazioni e collegamenti C.1 Panoramica sulla comunicazione dei dati portata aria peso Comunicazione digitale Le porte per la comunicazione digitale sono presenti sul pannello posteriore di WAVE Bioreactor (DATAPRT 1 e 2) e WAVEPD (CNVERTER, WAVE 20/50) per l'acquisizione di dati multipunto RS485 attraverso il protocollo MDBUS standard per l'industria. Queste porte sono utilizzate per collegare altri strumenti WAVE con un unico cavo RS485, per l'acquisizione di dati e il controllo di supervisione. Nota: gni WAVEPD II può controllare solo uno strumento WAVE Bioreactor e un bioreattore Cellbag. Tuttavia, si possono utilizzare due controller WAVEPD II per uno strumento WAVE Bioreactor a doppia modalità, in cui uno WAVEPD II controlla lo strumento WAVE Bioreactor e una Cellbag, e l'altro WAVEPD II controlla unicamente l'altra Cellbag. Entrambi i WAVEPD II possono essere collegati a un Converter100 e a un computer per l'acquisizione di dati. Vari controller WAVEPD II possono essere collegati in rete utilizzando router Ethernet standard tra i convertitori e un computer per l'acquisizione di dati, vedere Sezione C.6 Collegare WAVE Bioreactor a UNICRN DAQ 1.0, a pagina 293. AVVIS Il connettore AUX è destinato esclusivamente all'uso da parte del personale di assistenza di GE Healthcare. WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 285

286 C Comunicazioni e collegamenti C.2 Porta analogica/allarme C.2 Porta analogica/allarme AVVIS Utilizzare soltanto cavi schermati. Nota: La lunghezza massima del cavo è pari a 3 m. Jack connettore di WAVE Bioreactor e WAVEPD II WAVE Bioreactor e WAVEPD II sono dotati di un jack femmina DB15 sul pannello posteriore che fornisce i segnali analogici e i contatti degli allarmi. Un connettore maschio DB15 standard è utilizzato per il collegamento a questa porta. I canali analogici possono essere impostati ai seguenti valori Da 0 a 5 V Da 1 a 5 V nella schermata SETUP > ANALG. I collegamenti predefiniti sono indicati nelle tabelle seguenti, assieme alle gamme. Porta DB15: collegamento e gamme Collegamento di WAVE Bioreactor Specifiche relative ai contatti degli allarmi: 30 Vrms / 70 marms PIN Parametro predefinito Segnale Gamma 1 Velocità Can. analogico 1 Da 0 a 50 giri/min 2 Peso (opzionale) Can. analogico 2 Da 0 a 40 kg 3 Portata aria (sinistra) Can. analogico 3 Da 0 a 1,0 l/min 286 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

287 C Comunicazioni e collegamenti C.2 Porta analogica/allarme PIN Parametro predefinito Segnale Gamma 4 Temperatura (sinistra) Can. analogico 4 Da 0 C a 50 C 5 Portata aria (destra) o % di C 2 o % di 2 Can. analogico 5 Da 0 a 1 l/min o Da 0% a 15% di C 2 o Da 0% a 50% di 2 6 Temperatura (destra) Can. analogico 6 Da 0 C a 50 C 7 Analogico, comune 8 Analogico, comune 9 Solo per uso di fabbrica 10 Solo per uso di fabbrica 11 Solo per uso di fabbrica 12 Allarme unità + contatto che si chiude in caso di allarme Contatto a secco 13 Allarme unità + contatto che si chiude in caso di allarme Contatto a secco 14 Allarme unità + contatto che si apre in caso di allarme Contatto a secco 15 Allarme unità + contatto che si apre in caso di allarme Contatto a secco Collegamento di WAVEPD II Specifiche relative ai contatti degli allarmi: 30 Vrms / 70 marms PIN Da 1 a Parametro predefinito Riservato per usi futuri Riservato per uso di fabbrica Allarme unità + contatto che si chiude in caso di allarme Allarme unità + contatto che si chiude in caso di allarme Allarme unità + contatto che si apre in caso di allarme Contatto Contatto a secco Contatto a secco Contatto a secco WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 287

288 C Comunicazioni e collegamenti C.2 Porta analogica/allarme PIN 15 Parametro predefinito Allarme unità + contatto che si apre in caso di allarme Contatto Contatto a secco 288 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

289 C Comunicazioni e collegamenti C.3 Contatto di allarme C.3 Contatto di allarme Generalità Un allarme unità è disponibile su WAVEPD II e WAVE Bioreactor come contatto secco. L'allarme unità scatta in varie condizioni d'allarme, in base alla configurazione impostata nel pannello a sfioramento. pzioni di cablaggio Il contatto secco può essere collegato nei seguenti modi: Si apre in caso di allarme: il contatto si apre in caso di allarme o caduta di potenza. Si chiude in caso di allarme: il contatto si chiude in caso di allarme o caduta di potenza. Specifiche relative ai contatti degli allarmi Parametro Tensione di carico, max. Corrente di carico, max. Valore 30 Vrms 70 marms WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 289

290 C Comunicazioni e collegamenti C.4 Collegamento di PUMP20 a WAVEPD II C.4 Collegamento di PUMP20 a WAVEPD II Introduzione Una pompa peristaltica è necessaria per il controllo del ph con WAVEPD II. La presente sezione descrive la comunicazione di WAVEPD II con PUMP20. Descrizione del connettore Due connettori DB9 per il collegamento delle pompe acido e base PUMP20 sono previsti sul pannello posteriore di WAVEPD II. Marcatura del connettore ACID PUMP BASE PUMP Uso previsto per Pompa acido Pompa base Connettori, cavi e collegamenti ACID PUMP BASE PUMP Utilizzare il cavo DB9-DB9 fornito con PUMP20 PUMP20 Collegare il contatto remoto al pin 9 e al pin 5. Valore massimo 150mA. Contatto di avvio/arresto in remoto della pompa utente Parametro Tipo di connettore Tipo di cavo Valore Femmina DB9 DB9-DB9 (fornito con PUMP20) 290 WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC

291 C Comunicazioni e collegamenti C.5 Porta di comunicazione MDBUS C.5 Porta di comunicazione MDBUS Generalità Le porte di comunicazione MDBUS sono presenti in WAVEPD II e in WAVE Bioreactor. Due jack RJ11-6 di tipo telefonico sono installati sul pannello posteriore del regolatore WAVEPD II per il collegamento a uno strumento WAVE Bioreactor (WAVE 20/50) e a un convertitore (CNVERTER) collegati al PC dove è installato UNICRN DAQ 1.0. Due jack RJ11 (DATAPRT 1 e 2) sono installati sul pannello posteriore degli strumenti WAVE Bioreactor per il collegamento a WAVEPD II, agli strumenti autonomi o a un Converter 100 collegati al PC dove è installato UNICRN DAQ 1.0. Parametri di collegamento Parametro Protocollo di comunicazione Indirizzo MDBUS predefinito Parità Bit di dati Bit di arresto Valore MDBUS RTU WAVE Bioreactor:10 WAVEPD II: 11 Nessuna parità 8 1 Collegamento del jack RJ-11 Nota: È necessario un Converter 100 tra il jack RJ11 e il PC dove è installato UNICRN DAQ 1.0. Questo tipo di jack è utilizzato anche per il collegamento a WAVEPD II. 1 6 UNICRN collegamento jack RJ11 visualizzato guardando verso il jack WAVE Bioreactor 20/50 e WAVEPD II Istruzioni di funzionamento AC 291