Diagnosi eziologica - polmoniti

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All.4 Percorso Diagnostico Polmoniti rev.2015 Diagnosi eziologica - polmoniti Emocoltura Urine Aspirato rino-faringeo Coltura materiale respiratorio Siero Da effettuare di routine Ag Legionella/ Ag S. pneumoniae da effettuare di routine Ricerca Antigeni RSV-Adenovirus: da riservare a casi particolari Da effettuare di routine per i casi di HAP. Da riservare ad altri casi particolari Ricerca Anticorpi: da riservare a casi particolari 1 2 3 4 5

1: emocoltura Emocoltura * in tutti i casi Prelievo: * n campioni:2-3 set * modalità: prelievi ad intervallo di 5-15 minuti * ricerca: aerobi + anaerobi Incubazione: * 5 giorni ( 7 giorni, se manuali) * 7/7 giorni, 2 volte al giorno Esame microscopico Test di identificazione diretta Antibiogramma diretto (KB) preliminare preliminare Sottocoltura Identificazione Antibiogramma, MIC Ceppoteca Dato per il laboratorio

2: urina Urine * in tutti i casi * n campioni:1 * invio: entro 15-120 minuti * ricerca: Antigene Legionella pneumophila (ser. 1 e 2-14) Antigene Streptococus pneumoniae definitiva commentata Richiedere materiale respiratoria per coltura

3: aspirato rino-faringeo Tampone nasale o faringeo * in tutti i casi di: * soggetti ospedalizzati per bronchiolite * soggetti con Fibrosi Cistica * soggetti di età < 2 anni * soggetti provenienti da RSA * numero campioni: 1 * prelievo: con tampone floccato Ricerca:Antigeni di RSV / Adenovirus * tecnica: EIA Inviare a Centro di Referenza * se Ag RSV /Adenovirus NEG * se soggetti di età < 2 anni Ricerca: Metapneumo-, Echo-, Parainfluenza-virus, * Biologia Molecolare * se sospetta pertosse Ricerca: Bordetella pertussis * tecnica: coltura * terreno: Bordet Gengou Agar * incubazione: 35-37 C in CO2 (5-10%) per 7 giorni * se Ag RSV /Adenovirus NEG * se periodo epidemico (influenza) Ricerca: Influenza-virus * Biologia Molecolare

4: materiali respiratori protetti Materiale a basso rischio di contaminazione salivare,blind o sotto guida broncoscopia: aspirato bronchiale; lavaggio broncoalveolare (BAL); BAL con cateterino; spazzolato bronchiale (PSB); PTC in tutti i casi di: * HAP (se VAP BAL) * Fibrosi Cistica (in Centri di Referenza) Prelievo: * n campioni: 1 * invio: entro 15-120 minuti * ricerca: 1. routine protocollo minimo + miceti filamentosi 2. immunodepressi routine + Nocardia 3. Fibrosi Cistica routine + B. cepacia 4. Stroke Unic/ RSA/ ab ingestis routine + anaerobi Semina: * terreni: 1. (AS+MC+CNAoptochina) + CIOCCbacitracina + SabC 2. BCYE 3. AS + BCSA o analoghi 4. AS + PEA o analoghi * quantità: BAL 10 l BALcat 100 l PSB 100 l * tecnica: tre quadranti Antibiogramma preliminare: * indicazione: 1. VAP 2. Fibrosi Cistica * tecnica: Etest preliminare Incubazione: * 1. (24-48 ore 35 C, AE) + ( 5 giorni; 35C, CO2) + (48 ore, 35 C, AE poi 5 giorni, 30 C,AE) * 2. 1 +15 giorni,35 C,CO2 * 3. 1 + 5 giorni,35 C,AE * 4. 1 + 72 ore,35 C,AN Citocentrifugazione: * vortex (30-60 secondi) * citocentrifugazione (100 l 500 rpm per 5 minuti) < 10 2 CF/ml < 10 3 CF/ml < 10 4 CF/ml Ceppoteca PSB/PTC/BALcateterino BAL ProBAL / asp. bronchiale Identificazione: *antibiogramma (KB) *MIC > 10 3 CF/ml > 10 4 CF/ml > 10 5 CF/ml Dosaggio concentrazione sierico: *Glicopeptidi *Aminoglucosidi Determinazione: *rapporto MIC/[ ] (Aminoglucosidi) *AUC247/MIC (Glicopeptidi) Colorazione: * Gram obbligatoria * MGG / ZN / GG / IF / a fresco facoltativo * batteri extracellulari (+ +++) * batteri intracellulari (%) * batteri: descrizione morfotipi * cellularità: cellule epiteliali squamose (+ +++) cellule cigliate (+ +++) leucociti (+ +++; neutrofili;%)

Dato per il laboratorio Prelievo: * n campioni: 1 * invio: entro 15-120 minuti * ricerca: 1. routine protocollo minimo + miceti filamentosi 2. immunodepressi Nocardia 3. Fibrosi Cistica B. cepacia 4. Stroke Unic/ RSA/ ab ingestis anaerobi Semina: * terreni: 1. (AS+MC+CNAoptochina) + CIOCCbacitracina + SabC 2. BCYE 3. AS + BCSA o analoghi 4. AS + PEA o analoghi * quantità: BAL l BALcat 100 l PSB 100 l * tecnica: tre quadrati Incubazione: * 1. (24-48 ore 35 C, AE) + ( 5 giorni; 35C, CO2) + (48 ore, 35 C, AE poi 5 giorni, 30 C,AE) * 2. 15 giorni,35 C,CO2 * 3. 5 giorni,35 C,AE * 4. 48 ore,30 C,AN Citocentrifugazione: * vortex (30-60 secondi) * citocentrifugazione (100 l 500 rpm per 5 minuti) Colorazione: * Gram obbligatoria * MGG / ZN / GG / IF / a fresco facoltativo * batteri extracellulari (+ +++) * batteri intracellulari (%) * batteri: descrizione morfotipi * cellularità: cellule epiteliali squamose (+ +++) cellule cigliate (+ +++) leucociti (+ +++; neutrofili;%)

5: siero Siero *in tutti i casi di: * CAP ricoverata e grave * HAP Ab anti-mycoplasma pneumoniae Ab anti-chlamydia pneumoniae Ab anti-legionella pneumophila *in età pediatrica Ab anti-chlamydia trachomatis * a seconda del Paese di soggiorno Ab anti-histoplasma capsulatum Ab anti-coccidioides immitis * contatti con animali Uccellini:Ab anti-chlamydia psittaci Roditori: Ab anti-leptospira interrogans Ovini/da cortile: Ab anti-coxiella burnetii