Università degli Studi di Firenze Dipartimento di Fisiopatologia Clinica Centro Interdipartimentale di Spettrometria di Massa MASTER DI 1 LIVELLO IN APPLICAZIONI CLINICHE DELLA SPETTROMETRIA DI MASSA Firenze febbraio-ottobre 2011 Con il patrocinio della Divisione di Spettrometria di Massa della Società Chimica Italiana Programma delle lezioni
1 INSEGNAMENTO Principi generali di spettrometria di massa Febbraio 2011 10 CFU = 60 ore Mercoledì 9 Introduzione 14.30-15.00 organizzazione e finalità del master Prof. G. Moneti 15.00 18.00 Storia della nascita della spettrometria di massa Prof. M. Bambagiotti Giovedì 10 Aula B DIP: FISIOPATOLOGIA CLINICA Metodi di ionizzazione 09.00 12.00 ionizzazione elettronica, chimica, per desorbimento, a pressione atmosferica, diretta, MALDI Prof. G Giorgi 12.00 13.30 Presentazione della piattaforma e-learning Dr. Jona Shtylla Analizzatori: 14.30 18.00 a settore, quarupolari, trappola ionica, risonanza ionica ciclotronica, tempo di volo, alta risoluzione, ibridi Prof. G. Giorgi Venerdì 11 Novità delle ditte sulle sorgenti 09.00 10.00 Ditta Thermo Dr. Scurati 10.00-11.00 Ditta Agilent Dr. Barbieri 11.00 12.00 Interpretazione spettri 14.00 17.00 cenni accoppiamento GC-MS, caratteristiche dello spettro EI, ioni ioniradicali, formazione ioni e frammentazioni, ionizzazione soft Prof. G. Mellerio Sabaro 12 Spettri e computer 09-00 12.00 Primo approccio alle biblioteche spettri: qualche esercizio insieme Prof. G. Mellerio Febbraio 2011 Mercoledì 16 Accoppiamenti con tecniche separative 09.00 12.00 Ancora Analizzatori Prof. G. Giorgi 15.00 18.00 GC, LC, elettroforesi capillare Prof. A. Raffaelli Giovedì 17 Aula B DIP: FISIOPATOLOGIA CLINICA Tecniche di acquisizione selettiva 09.00 11.00 SIM, SRM, MRM, precursor neutral loss Prof. G. Moneti 11.00 13.00 Esercizi di interpretazione spettri Prof. G. Pieraccini Novità delle ditte sugli analizzatori 14.00 15.00 15.00 16.00 Ditta Agilent Dr. Cimino 16.00 17.00 Ditta Thermo Dr. Scurati Venerdì 18 Aula B DIP: FISIOPATOLOGIA CLINICA Spettri di peptidi e proteine 09.00 11.00 frammentazione peptidi e proteine, data dependent scan, MS e Prof. G. Pieraccini 11.00 13.00 strategie in proteomica: digestioni, top-down e bottom-up Prof. F.R. Dani Imaging 14.00 15.00 l imaging in spettrometria di massa Prof. G. Moneti 15.00 16.00 Ditta Waters Dr. D. Ticozzi Sabaro 19 09.00 11.00 Esempi ed esercizi Prof. G. Pieraccini Prof. F.R. Dani 11.00 12.00 Ditta Bruker Dr. Basso
2 INSEGNAMENTO Principi generali di purificazione di molecole da matrici complesse e quantificazione di molecole in spettrometria di massa Marzo 2011 12 CFU = 72 ore Mercoledì 2 09.00 11.00 Ditta AB Sciex: sorgenti ioniche ed analizzatori Dr. Dossetto Principi generali di cromatografia 11.00 13.00 teoria della cromatografia,fasi stazionarie, fasi mobili 14.00 17.00 GC. LC, ottimizzazione metodi per MS. Giovedì 3 Purificazione del campione 09.00 11.00 Liquid/liquid extraction, SPE, SPME, gel permeation 11.00 13.00 Ditta Dionex: struttura e selettività delle colonne, SPE on line, HPLC fast Dr. F. Abballe Novità delle ditte su purificazione ed automazione 14.00 16.00 Ditta SRA Dr. F. Villanelli 16.00 17.00 --------- Venerdì 4 Come migliorare le prestazioni di un metodo 09.00 13.00 derivatizzazione in GC, derivatizzazione in LC,effetto matrice Prof. G. Pieraccini Principi di analisi quantitativa 14.00-16.00 Internal standard, isotopi stabili come IS, curva di taratura in matrice, Prof. G. Pieraccini curve lineari e non lineari, braketing,metodi di riferimento 16.00 18.00 Ditta Labservice: automazione nella purificazione del campione Dr. Di Pinti Sabato 5 9.00-11.00 Esercitazioni e analisi dati Prof. G. Pieracini Marzo 2011 Martedì 15 Riconoscimento molecolare e biblioteche spettri 11.00 13.00 Strategie di riconoscimento molecolare Prof. G. Pieraccini 14.00 17.00 Biblioteche spettri: GC-MS, GC-MS/MS, biblioteche per la metabolomica Prof. G. Mellerio Mecoledì 16 9.00 11.00 Biblioteche LC-MS/MS ed in alta risoluzione Prof. G. Mellerio 11.00 13.00 Metabolomica in LC Prof. G. Pieraccini 14.00 15.00 Ditta Thermo: presentazione biblioteche spettri Dr. Vago 15.00-16.00 Ditta Thermo: problematiche analitiche e soluzioni Dr. Vago 16.00 18.00 Esercitazioni sulle biblioteche Prof. G. Pieraccini Giovedì 17 Festa nazionale per i 150 anni dell unità d Italia Venerdì 18 Sviluppo di un metodo quantitativo 09.00 13.00 problematica analitica, raccolta e conservazione del campione, parametri Prof. G. Pieraccini pre-analitici, purificazione, performances cromatografiche, scelta dello ione, ottimizzazione strumentale, range curva di taratura. 14.00 16.00 Validazione di un metodo Prof. G. Pieraccini Sabato 19 09.00 12.00 Esercitazioni su biblioteche e quantificazioni Prof. G. Pieraccini
3 INSEGNAMENTO Ambiti clinici e biomedici di applicazione della spettrometria di massa Maggio 2011 20 CFU = 120 ore Mercoledì 4 Applicazioni in farmacologia 11.00 12.00 Ditta Agilent: Presentazione biblioteche spettri Dr. Cimino 12.00 13.00 La MS in farmacologia: dalla sintesi del farmaco alla clinica Prof. MG. Giovannini 14.00 18.00 La spettrometria di massa nella sintesi di nuovi farmaci Prof. A. Triolo Giovedì 5 09.00 13.00 La spettrometria di massa negli studi preclinici Prof. MG. Giovannini 14.00 18.00 I farmaci immunosoppressori, monitoraggio terapeutico Prof. F. Luceri Venerdì 6 Applicazioni in tossicologia 09.00 11.00 Aspetti procedurali e analitici del laboratorio di tossicologia clinica: indagini Prof. A Fratini per fini diagnostici e legali 11.00 13.00 Aspetti procedurali e analitici del laboratorio di tossicologia clinica: attività Prof. Baronti del laboratorio regionale antidoping 14.00 18.00 Ricerca farmaco-tossicologica in urgenza e applicazioni Prof. F. Luceri Sabato 7 09-00 12.00 Esempi Prof. F. Luceri Prof. Fratini Prof. Baronti Maggio 2011 Mercoledì 18 Applicazioni in endocrinologia 11.00 13.00 Endocrinologia come materia interdisciplinare Prof. G Danza 14.00 17.00 Gli ormoni ed il loro dosaggio: storia del connubio tra endocrinologia e biochimica clinica Giovedì 19 09-00 13.00 Dosaggi ormonali: quando serve la MS? Di ghiandola in ghiandola: analisi delle patologie dove serve o servirebbe la MS Prof. G Danza Prof. G Danza 14.00 16.00 Metodi esistenti e problemi ancora irrisolti Prof. G Danza 16.00 18.00 Ditta A.B. sciex: analisi degli steroidi in LC-MS/MS Dr. B. Casetta Venerdì 20 09.00 11.00 Massa e routine: come adattare i metodi, costi e benefici, volume di analisi e necessità di automazione 11.00 13.00 Ditta Perkin Elmer: kit per MS: dosaggio di 10 ormoni steroidei e dosaggio della vitamina D 14.00 18.00 Applicazioni MS oltre i dosaggi ormonali: proteomica, metabolomica, imaging e quant altro Prof. G Danza Dr. R. Bozic Prof. G. Danza Sabato 21 09-00 12.00 Discussione su recenti lavori scientifici apparsi in letteratura Prof. G Danza
Giugno 2011 Mercoledì 8 Applicazioni in biomedicina 11.00 13.00 I difetti del ciclo dell urea e la loro identificazione mediante LC-MS/MS 14.00 15.00 Dosaggio dell omocisteina plasmatica per malattie aterotrombotiche 15.00 17.00 Purine e pirimidine Giovedì 9 09.00 10.00 Studio di farmaci in età pediatrica 10.00 13.00 Messa a punto di un metodo analitico da dried blood spot (DBS). Trasponibilità dell analisi DBS ad analisi su siero o plasma. Esempi 14.00 15.00 Identificazione di molecole attive da omogenato d organo. 15.00-16.00 La SM nei casi di intossicazione e in urgenza metabolica 16.00 18.00 Ditta Perkin Elmer: screening neonatale e LIMS per lo screening neonatale Dr. R. Bozic Venerdì 10 Lo screening neonatale 09.00 13.00 La storia degli screening neonatali. Gli screening obbligatori per legge. Procedure di preparazione del campione. 14.00 18.00 Dal campione all analisi. Patologie sottoposte a screening e possibili terapie a disposizione. Valutazione dei risultati analitici: aspetti positivi e negativi. I second triers test e analisi dei costi. Sabato 11 09.00 12.00 Introduzione ai nuovi test di screening. Malattie da accumulo lisosomiale. Immunodeficienze severe combinate (SCIDs) Giugno - Luglio 2011 Mercoledì 29 Applicazioni in tossicologia forense 11.00 13.00 La spettrometria di massa nella tossicologia forense Prof. Favretto 14.00 16.00 La spettrometria di massa nella tossicologia forense Prof. Favretto 16.00-17.00 Ditta Dionex : moderne tecniche HPLC fast e SPE on line Dr F. Abballe Giovedì 30 L antidoping 09.00 11.00 I controlli antidoping Prof. G. Pieraccini 11.00-13.00 Le procedure analitiche nell antidoping Prof. G. Pieraccini 14.00 16.00 Il fenomeno doping Dr. D ottavio 16.00 18.00 Il doping ematico Dr. Ronci Venerdì 1 Controllo di qualità e accreditamento 09.00 13.00 La massa nel controllo di qualità e il controllo di qualità per la massa Prof. M. Pazzagli 14.00 17.00 L accreditamento del laboratorio Prof. G. Messeri
1 TIROCINIO Conoscenza delle macchine, principali operazioni di manutenzione ordinaria, ottimizzazione dei parametri strumentali, cromatogrammi e spettri. Aprile 2011 Lunedì 4 venerdì 8 Dalle 9.00 alle 17.30 (45 ore) Tirocinio primo gruppo 3 CFU = 45 0re Lunedì 11 venerdì 15 Dalle 9.00 alle 17.30 (45 ore) Tirocinio secondo gruppo 2 TIROCINIO Esperienza di applicazione di un metodo analitico in spettrometria di massa ad una problematica clinica Settembre 2011 Lunedì 5 venerdì 16 Dalle 9.00 alle 17.30 (75 ore) Tirocinio primo gruppo 5 CFU = 75 0re Lunedì 19 venerdì 30 Dalle 9.00 alle 17.30 (75 ore) Tirocinio secondo gruppo Ottobre 2011 Preparazione e discussione tesi 10 CFU