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1 1 I N D U S T R I A L MICR OBIOLOGY GUIDA AI TERRENI DI COLTURA SECONDO LE NORME UNI EN ISO 2010 Ed. 01 Marzo 2010 Rev. 1.0 LICKSON S.r.l. Uffici Amm.vi e stabilimento: S.S. 189 (PA-AG) - C.da Pettineo, VICARI (PA) - ITALY Casella Postale Lercara Friddi (PA) Tel Fax: SECONDO LE NORME UNI EN ISO 1

2 2 INDICE ANALISI DELLE ACQUE ANALISI DEGLI ALIMENTI SECONDO LE NORME UNI EN ISO 2

3 3 ANALISI DELLE ACQUE CARICA MICROBICA TOTALE A 22 E 37 C (UNI EN ISO 6222: 2001) Qualità dell acqua - Valutazione quantitativa dei microrganismi vitali. Conteggio delle colonie per inoculo su terreno agarizzato. CONTEGGIO YEAST EXTRACT AGAR CLOSTRIDIUM PERDFRINGENS (DL n. 31 del 020/02/2001) National Standard Method. Enumeration of Clostridium perfringens by membrane filtration. W 5 Issue 3 (Rev. May 2005). ISOLAMENTO E CONTEGGIO M-CP (Membrane Clostridium Perfringens) MEDIUM M-CP (Membrane Clostridium Perfringens) AGAR BASE M-CP Selective Supplemen M-CP Soluzione A (1/) M-CP Soluzione B (1/) M-CP Soluzione C (1/) 1 Fiala (750 mg) 1 Fiala (700 mg) 1 Fiala (450 mg) M-CP (Membrane Clostridium Perfringens) AGAR 2x10 Piastre ø 60 mm /20 COLIFORMI TOTALI / E. COLI (UNI EN ISO : 2002) Qualità dell acqua - Ricerca ed enumerazione di Escherichia coli e batteri coliformi. Metodo di filtrazione su membrane. TERGITOL-7 MEDIA TERGITOL-7 AGAR BASE TTC Soluzione 0.5 % (0,025 g/l) TERGITOL-7 AGAR + TTC 10 Flaconi x 5 ml (1/1000 ml) 2x10 Piastre ø 60 mm /20 SECONDO LE NORME UNI EN ISO 3

4 4 COLIFORMI TOTALI / E. COLI (UNI EN ISO : 2002) PROVE DI CONFERMA TRYPTOPHANE BROTH TRYPTONE BILE AGAR TRYPTONE (TRYPTIC) SOY AGAR 10 Tubi x 3 ml 2x10 Piastre ø 60 mm / /20 ENTEROCOCCHI (UNI EN ISO : 2003) Qualità dell acqua - Ricerca ed enumerazione degli enterococchi intestinali. Metodo di filtrazione su membrana. SLANETZ AND BARTLEY AGAR SLANETZ AND BARTLEY (m-enterococcus) AGAR BASE TTC Soluzione 1 % SLANETZ AND BARTLEY (m-enterococcus) AGAR + TTC 5x10 ml 2x10 Piastre ø 60 mm /20 PROVA DI CONFERMA BILE AESCULIN AZIDE AGAR Terreno selettivo per l'isolamento degli streptococchi di gruppo D. 2x10 Piastre ø 60 mm / /20 SECONDO LE NORME UNI EN ISO 4

5 5 LEGIONELLA (UNI EN ISO : 2004) Qualità dell acqua - Ricerca e conteggio di Legionella attraverso la filtrazione su membrana. PREPARAZIONE CAMPIONE PAGE S SALINE LEGIONELLA SELECTIVE MEDIUM (GVPC) LEGIONELLA CYE AGAR BASE Legionella (BCYE) α-growth Supplement Legionella (GVPC) Selective Supplement LEGIONELLA SELECTIVE AGAR (GVPC) 6 Flaconi x180 ml 10 Fiale x 100 ml 2x10 Piastre ø 60 mm / /20 PROVA DI CONFERMA LEGIONELLA BCYE MEDIA (Buffered Charcoal Yeast Extract Agar) LEGIONELLA CYE AGAR BASE Legionella (BCYE) α-growth Supplement Legionella (BCYE) α-growth Supplement (W/O L-CYSTEINE) 10 Fiale x 100 ml 10 Fiale x 100 ml LEGIONELLA BCYE AGAR /20 LEGIONELLA BCYE AGAR (W/O L-CYSTEINE) /20 PSEUDOMONAS (UNI EN ISO 12780: 2002) Qualità dell acqua - Ricerca e conteggio di Pseudomonas aeruginosa attraverso la filtrazione su membrana. PSEUDOMONAS SELECTIVE MEDIA (CN) PSEUDOMONAS AGAR BASE Pseudomonas (C.N.) Selective Supplement PSEUDOMONAS SLECTIVE AGAR (CN) 2x10 Piastre ø 60 mm /20 PROVE DI CONFERMA ACETAMIDE BROTH KINGS B MEDIUM NUTRIENT AGAR / AGAR COMUNE 10 Tubi x 5 ml 10 Tubi x 22 ml /20 SECONDO LE NORME UNI EN ISO 5

6 6 STAFILOCOCCHI (UNI EN ISO 10678: 1998) Qualità dell acqua - Ricerca e conteggio di Stafilococchi attraverso la filtrazione su membrana BAIRD PARKER MEDIA BAIRD PARKER AGAR BASE Eggy Yolk Tellurite Emulsion BAIRD PARKER AGAR PROVA DI CONFERMA NUTRIENT AGAR / AGAR COMUNE BRAIN HEART INFUSION BROTH 2 Flaconi x 50 ml 3 Flaconi x 100 ml (+3 Suppl. x 10 ml) 2x10 Piastre ø 60 mm 10 Tubi x 22 ml 20 Provette x 10 ml / / / /20 SECONDO LE NORME UNI EN ISO 6

7 7 ALIMENTI PREPARAZIONE DEL CAMPIONE (UNI EN ISO :2000) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Preparazione dei campioni di prova, sospensione iniziale e diluizioni decimali per l'analisi microbiologica - Regole generali per la preparazione della sospensione iniziale e delle diluizioni decimali. BUFFERED PEPTONE WATER MAXIMUM RECOVERY DILUENT PEPTONE WATER PEPTONE WATER 1 % (w/o NaCl) 10 Tubi x 9 ml 6 Flaconi x 90 ml 10 Tubi x 9 ml 20 Provette x 9 ml 100 Provette x 9 ml 6 Flaconi x 90 ml 10 Tubi x 9 ml / /A PEPTONE (TRYPTONE) WATER 0,1 % (w/o NaCl) 6 Flaconi x 90 ml RINGER SOLUTION 1/ BACILLUS CEREUS (ISO 7932: 2005) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Metodo orizzontale per la conta di Bacillus cereus presunto - Tecnica della conta delle colonie a 30 C PREPARAZIONE DEL CAMPIONE MAXIMUM RECOVERY DILUENT BACILLUS CEREUS SELECTIVE MEDIUM (PEMBA) (ISO 7932: 1993) BACILLUS CEREUS AGAR BASE Bacillus Cereus Selective Supplement Eggy Yolk Emulsion 2 Flaconi x 50 ml BACILLUS CEREUS SELECTIVE AGAR (PEMBA) /20 PROVE DI CONFERMA BLOOD AGAR N. 2 MEDIA BLOOD AGAR BASE N. 2 Sangue di montone defibrinato 1 Flacone x 100 ml BLOOD AGAR N. 2 (SANGUE DI MONTONE 5%) /20 MOTILITY TEST MEDIUM 5067 SECONDO LE NORME UNI EN ISO 7

8 8 CAMPYLOBACTER SPP. (ISO : 2006) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Metodo orizzontale per ricerca e la conta di Campylobacter spp. - Parte 1: Metodo per la ricerca PREPARAZIONE CAMPIONE CAMPYLOBACTER ENRICHMENT BROTH (BOLTON) CAMPYLOBACTER ENRICHMENT BROTH BASE (BOLTON) Campylobacter Selective Supplement (Bolton) ISOLAMENTO CAMPYLOBACTER BLOOD FREE SELECTIVE AGAR (CCDA BOLTON) CAMPYLOBACTER BLOOD FREE AGAR BASE (CCDA BOLTON) Campylobacter Selective Supplement (CCDA Bolton) CAMPYLOBACTER SELECTIVE MEDIA (PRESTON) CAMPYLOBACTER AGAR BASE Siero di cavallo laccato (Laked horse blood) Campylobacter Growth Supplement Campylobacter Selective Supplement (Preston) 1 Flacone x 100 ml CAMPYLOBACTER SELECTIVE AGAR (PRESTON) + Laked Hose Blood 5 % /20 PREPARAZIONE COLTURE PURE / ESAME MOROFOLGICO A 25 C E 41,5 C COLUMBIA MEDIA COLUMBIA BLOOD AGAR BASE Sangue di montone defibrinato 1 Falcone x 100 ml COLUMBIA BLOOD AGAR + SANGUE DI MONTONE 5% /20 TEST MOTILITA' BRUCELLA BROTH BASE Brucella Selective Supplement Siero di cavallo (Horse serum) 1 Flaconi x 100 ml SECONDO LE NORME UNI EN ISO 8

9 9 CLOSTRIDIUM (ISO 7937: 2005) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Metodo orizzontale per la conta di Clostridium perfringens - Tecnica della conta delle colonie PERFRINGENS SELECTIVE MEDIUM (TSC) PERFRINGENS AGAR BASE (TSC/SFP) Eggy Yolk Emulsion Perfringens (TSC) Selective Supplement 2 Flaconi x 50 ml PROVE DI CONFERMA THIOGLYCOLLATE (Fluid) MEDIUM (USP) LACTOSE SULPHATE MEDIUM MOTILITY NITRATE BROTH LACTOSE GELATIN MEDIUM COLIFORMI TOTALI (ISO 4832: 2006) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Coliformi a 30 e 37 C PREPARAZIONE DEL CAMPIONE PEPTONE WATER 10 Tubi x 9 ml 20 Provette x 9 ml 100 Provette x 9 ml / /A VIOLET RED BILE (LACTOSE) AGAR /20 PROVE DI CONFERMA BRILLIANT GREEN BILE BROTH 2% BRILLIANT GREEN BILE BROTH 2% + CAMPANELLA 5025 SECONDO LE NORME UNI EN ISO 9

10 10 CONTA BATTERICA MESOFILA A 30 C (ISO 4833: 2004) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Metodo orizzontale per la conta di microrganismi - Tecnica della conta delle colonie a 30 C ISOLAMENTO E CONTEGGIO PLATE COUNT AGAR (APHA) MILK PLATE COUNT AGAR GELATIN PEPTONE AGAR (AGAR GELISATO) 10 Provette x 22 ml 2x10 Piastre ø 60 mm 10 Tubix 22 ml / / /20 E. COLI 0157: H7 (ISO 16654: 2003) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Metodo orizzontale per la ricerca di Escherichia coli O157 PREPARAZIONE DEL CAMPIONE m-tsb (MODIFIED TRYPTONE SOY BROTH) m-tsb (MODIFIED TRYPTONE SOY BROTH) BASE NOVOBIOCINA Selective Supplement (20 mg) 10 Flaconi x 500 ml CT-SMAC (MAC CONKEY SORBITOL AGAR + TELLURITO + CEFIXIME) MAC CONKEY SORBITOL AGAR O157 Selective Supplement 10 Flaconi x 500 ml PROVA DI CONFERMA NUTRIENT AGAR / AGAR COMUNE 10 Tubi x 22 ml /20 SECONDO LE NORME UNI EN ISO 10

11 11 E. COLI BETA GLUCORONIDASI (ISO :2001) Horizontal method for the enumeration of beta-glucuronidase-positive Escherichia colibeta-d-glucuronide. Part 2: Colony-count technique at 44 degrees C using 5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta-d-glucuronide TBX (Tryptone Bile X-Glucuronide) AGAR /20 ENTEROBACTERIACEAE (ISO : 2004) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Metodo orizzontale per la ricerca di Enterobacteriaceae - Tecnica della conta delle colonie PREPARAZIONE DEL CAMPIONE PEPTONE WATER VIOLET RED BILE GLUCOSE AGAR. NUTRIENT AGAR / AGAR COMUNE 10 Tubi x 9 ml 20 Pv Plastica x 9 ml 100 Pv Plastica x 9 ml 10 Tubi x 22 ml / /A / /20 PROVE DI CONFERMA PURPLE GLUCOSE AGAR (GLUCOSE AGAR) SECONDO LE NORME UNI EN ISO 11

12 12 LIEVITI E MUFFE (ISO/FDIS : 2008) DICHLORAN-GLYGEROL (DG18) AGAR DICHLORAN-GLYGEROL (DG18) AGAR BASE Chloramphenicol Selective Supplement (50 mg) DICHLORAN-GLYGEROL (DG18) AGAR DICHLORAN ROSE-BENGAL CHLORAMPHENICOL (DRBC) AGAR DRBC AGAR BASE Chloramphenicol Selective Supplement (50 mg) DICHLORAN ROSE-BENGAL CHLORAMPHENICOL (DRBC) AGAR LIEVITI E MUFFE (UNI EN ISO 7954: 1987) YEAST GLUCOSE CHLORAMPHENICOL AGAR /20 SECONDO LE NORME UNI EN ISO 12

13 13 MICROBIOLOGIA SELETTIVA LISTERIA MONOCYTOGENES (UNI EN ISO : 2005) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Metodo orizzontale per laricerca e la conta di Listeria monocytogenes - Parte 1: Metodo per la ricerca. Parte 2: Metodo per la conta. ARRICCHIMENTO PRIMARIO LISTERIA HALF FRASER MEDIUM LISTERIA FRASER BROTH BASE Listeria Half Fraser Selective Supplement (½ conc.) LISTERIA HALF FRASER BROTH ½ Conc 10 Fiale x 225 ml ARRICCHIMENTO SECONDARIO LISTERIA FRASER MEDIUM LISTERIA FRASER BROTH BASE Listeria Fraser Selective Supplement LISTERIA FRASER BROTH ISOLAMENTO LISTERIA CHROMOGENIC MEDIUM A.O. LISTERIA CHROMOGENIC AGAR AGAR BASE LISTERIA LIPASE C SUPPLEMENT LISTERIA CHROMOGENIC SELECTIVE SUPPLEMENT LISTERIA CHROMOGENIC AGAR A.O. LISTERIA SELECTIVE MEDIUM (OXFORD) LISTERIA SELECTIVE AGAR BASE (OXFORD) Listeria Selective Supplement (Oxford) (con cicloeximide) * 4 LISTERIA SELECTIVE AGAR (OXFORD) / /20 LISTERIA SELECTIVE MEDIUM (PALCAM) LISTERIA PALCAM AGAR BASE Listeria (PALCAM) Selective Supplement LISTERIA SELECTIVE AGAR (PALCAM) /20 PROVA DI CONFERMA TRYPTONE (TRYPTIC) SOY EXTRACT AGAR 6Flaconi x 200 ml TRYPTONE (TRYPTIC) SOY EXTRACT BROTH SECONDO LE NORME UNI EN ISO 13

14 14 MICROBIOLOGIA SELETTIVA LISTERIA MONOCYTOGENES (UNI EN ISO : 2005) BLOOD AGAR N. 2 MEDIA BLOOD AGAR BASE N. 2 Sangue di montone defibrinato 1 Flacone x 100 ml BLOOD AGAR N. 2 (SANGUE DI MONTONE 5%) /20 MOTILITY TEST MEDIUM Terreno per la determinazione della mobilità batterica SALMONELLA SPP. (UNI EN ISO 6579: 2008) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Metodo orizzontale per la ricerca di Salmonella spp. PREPARAZIONE CAMPIONE BUFFERED PEPTONE WATER ARRICCHIMENTO RAPPAPORT VASSILIADIS SOYA (RVS) PEPTONE BROTH MULLER KAUFFMAN TETRATHIONATE-NOVOBIOCINE (MKTT-n) BROTH MULLER KAUFFMAN TETRATHIONATE BROTH BASE Iodine Soluzione Novobiocine Selective Supplement (20 mg) 10 x 10 ml MULLER KAUFFMAN TETRATHIONATE-NOVOBIOCINE (MKTT-n) BROTH 5069 ISOLAMENTO SELETTIVO BRILLIANT GREEN AGAR MODIFIED X.L.D. AGAR / /20 PROVE DI CONFERMA NUTRIENT AGAR / AGAR COMUNE T.S.I. (TRIPLE SUGAR IRON) AGAR / SECONDO LE NORME UNI EN ISO 14

15 15 MICROBIOLOGIA SELETTIVA SALMONELLA SPP. (UNI EN ISO 6579: 2008) UREA MEDIA UREA AGAR BASE UREA Soluzione 40 % 10 Fiale x 5 ml UREA (CHRISTENSEN) AGAR (BECCO DI CLARINO) 5138 NUTRIENT AGAR SEMI-SOLID STAFILOCOCCHI COAGULASI POSITIVI (UNI EN ISO : 2004) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Metodo orizzontale per la conta di stafilococchi coagulasipositivi (Staphylococcus aureus e altre specie) - Tecnica che utilizza il terreno agar Baird-Parker. BAIRD PARKER MEDIA BAIRD PARKER AGAR BASE Eggy Yolk Tellurite Emulsion BAIRD PARKER AGAR 2 Flaconi x 50 ml 3 Flaconi x100 ml (+3 Suppl. x 10 ml) /20 PROVE DI CONFERMA BRAIN HEART INFUSION BROTH 20 Pv Plastica x 10 ml /20 STAFILOCOCCHI COAGULASI POSITIVI (UNI EN ISO : 2004) Microbiologia di alimenti e mangimi per animali - Metodo orizzontale per la conta di stafilococchi coagulasipositivi (Staphylococcus aureus e altre specie) - Tecnica che utilizza il terreno agar al plasma di coniglio e al fibrinogeno. BAIRD PARKER MEDIA BAIRD PARKER AGAR BASE RFP Supplement BAIRD PARKER AGAR + RFP 10 Flaconi x 500 ml 6 Flaconi x 90 ml /20 SECONDO LE NORME UNI EN ISO 15

16 16 NOTE AGENTE DI ZONA DISTRIBUTORE DI ZONA LICKSON S.r.l. Uffici amministrativi e Stabilimento: S.S. 189 (PA-AG) C.da Pettineo VICARI (PA) - ITALY Casella Postale Lercara Friddi (PA) Telefono: Fax: Amministrazione: Commerciale: Sito web: SECONDO LE NORME UNI EN ISO 16

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