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57 6 0-1!3( 1 C 2/! 2& 0(!"2/0 0(!"2/ (60µg/20µl), alfad11 Mab o alfad11 Fab (12,5µg/20µl). L analisi della varianza metteva in evidenza come non ci fossero differenze significative tra gli animali somministrati con anticorpi Mab e gli animali IgG durante la prima )..N 2.2@[P/228+ e la seconda fase )..N 2/?/ [P.F9P+! 4-1!3( 2 )2/<+ )..F N/8PMPP2+( 7)..F 2FPN[P.2?9+ & !! ! 5< 98! :8! !! &&6(12,5µg/20µl) ed anti-trka MNAC13 Mab (60µg/20µl) 1h prima dell inizio del test, B) 2&& 6 (12,5µg/20µl) ed anti-trka MNAC13 Fab (60µg/20µl) 1h prima dell inizio del test. Un effetto analgesico significatico è osservato esclusivamente nella seconda fase con il trattamento di anticorpi Fab.,-,F&&- α&&,f&(- &.,F&(-4,A-6,F0-α&&6,F&(-&.6,F&(-. HI(($HHI((&=5?5:9=9888<:,5?;5-6 2N 28 & & ) F[P/22.+ 4(0 4-1!

58 0(!"2/ 0 (F 2,24 : 5,129 P<0,01) )28!+ C 2N )28<+ 1)../ P8FN[PF/2N+ )../ PP@8[P?.?/+. &/ !! ! 5< 98! :8! !! &&6(12,5µg/20µl) ed anti-trka MNAC13 Mab (60µg/20µl) 18h prima dell inizio del test, B) 2&& 6 (12,5µg/20µl) ed anti-trka MNAC13 Fab (60µg/20µl) 18h prima dell inizio del test. Un effetto analgesico significatico è osservato esclusivamente nella seconda fase con somministrazione dell anti-trka MNAC13 Mab.,-,F&(- α&&,fb-&.,f0-4,a-6,f&(-α&&6,fb-&.6,fb-. HI(($HHI((&=5?5:9=9888<:,5?;5 - L acitivity ed il grooming osservati per 40 min, durante il test della formalina, non venivano modificati dal trattamento farmacologico come mostrato nella Tab.5. Questi risultati dimostravano che il decremento di licking è ascrivibile esclusivamente al potere analgesico degli anticorpi e non ad effetti delle molecole sul comportamento generale dell animale. 58

59 6$3 -4! :8,59-:5584;! 4<5428!,(/(! - 98! :8! 49=J88! 984=5! 58!! 5 C &$ 3 0(!" 2/ 0 2N " 1 82/8 MPPP2+ (0,9µg/20µl), & C 15µg/20µl 60µg/20µl. ;15µg/20µl )MPP9+ &$3 < :854 &.859&B?:! ! =5<:! MNAC13 mab (0,9µg n=8; 1,875µg n=10; 3,75µg n=10; 7,5µg n=10; 15µg n=10; 30µg n=10; 60µg/20 µl n=9) * P<0.05, ** P<0.01,*** P<0.001 vs IgG (n=12) sc-injected mice (Fisher s PLSD). 59

60 C&) 22 )2.9µ3.Pµ 2.9µ3.Pµ+ " )../ [P.2F/+)../ 2P 7 &) 3 < :85 4 2&& 58!! 58 59&B?:! 4; ! 224<:! F&(K α&&&$µfbkα&&&$µfb. " +,:- &.,59- " &% 0(!" 2/2N 15µg/topo, scelta in base ai risultati ottenuti con il dose/risposta (minima dose con massimo effetto), era in grado di generare un significativo decremento del licking sia nella prima fase) 22F 9/9/MPP9+) 22F 2@P9@ MPPP2+ 0(!"2/ ) 22@ 9?.. MPP9 22@?NFP MPPP9+ & 0(!" 2/ ( 3-1! R 7 60

61 &%3 8!! 5 859,15µg/20µl) vs somministrazioni ip (15µg/topo) 4 &.89<8&B? :! 4; 8del test della formalina. F0 &.F&(K F0 &.F0 HFI(($ HHFI((($ &. C&B 0(!" 2/ 2N )2µ3.Pµ+ ) & )0(!" 2/ 2µ3.PµL )&0(!"2/2µ3.PµL&2µ3.PµL02 31+) 98.?PF?MPPPP2+) / MPPPP2+ D )& [PPP.?U && [PPPP )[PP99.+ )[PPP29+ )9 31+)& MPPPP2&& MPPPP2+ D )[PP

62 &B &.! !! 88 8!! 5 8 4;98:8 &.8 59&B?:! 4; ! µ3.Pµ) & L*[N0(!"2/L[?& L0 2[?& L0.9[@& L0 9[F0(!"2/L0 2[? `[MPPP9``[MPPPP9```[MPPPP2 62

63 /.3 59<558 6 ( 3-1! 7-1!! (!" 2/5C RC (-1! C ( 7 $ ( ) 2??.U O 2??8+! D ( ( 7 0(!" 2/ 22! 0(!"2/ " 4 4-1!!7 7 * 7 0 I2N 0(!"2/0 6 7 )

64 )O.PPP+ C 0 C 7 2 D 7 4 " 2N 0(!"2/ ; 7 )+ )+ 29µ0(!"2/0 7 & ) :+ 4-1! 4-1! 7 0(!" 2/ 7 & 64

65 D - ; 0(!" 2/! 0(!"2/ *7-1! =1> )GTIZB.PP/+( 0 B ).PP8+ $ ( - 1!&7 ( )!.PP.+C ( & D -1! 65

66 !$C &*$).PP.+Y; B EB >:(UFF)/+2F?4@. "!$<")2?NN+=-: 4 B B >X(9P2PP/42P2P "!"* 0 ; )2???+ = 1 : 1! :4 :>X(2??FN@4?@?@ " *"!C ).PP2+=: :H4:: 0(!"2/ 4: 1! :>!":<":9@2/P@42/P? X*$*")2??.+ =& 4:: B >(8?F?/4F?N GGZB 0 ).PP/+=(4 : B ::>X(0 29./)F+.P@9,.PN9 0 B -*).PP8+ =;E B 4 4 <.L:>(2.9)8+2P.?4/@ O <B 0*O <(A0 ).PPP+=-& )$+ 1:$&$&& :$!>X&2F89/2/49/2N O "X*4 <0 6 )2??8+=(B ::::>(F./.@4//2 66

67 $3 ""&. 2&& $&3894< :! " 2 )" $ C " &:+ /948P * E )..L2K" + )FP] +3 2.! -?PP28PP C =" $;&&!*>)!&(_ 2?N/2F2P?422P+ )C22F3?. " ; NF3FP?3;;" + & 7 * + 4( 22)" 2?NN+ )0 + ".PP8U + 4-1!0(!" 2/)" 2???+ )0 +".PP2U+ & )& *&0!+ 0 & -!+8 /89F 0 220(!" 2/9P3 - <+ N / 8 9 F@ N? 2P 0 0(!" 2//P@P322@P3 67

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70 0(!" 2/ (!" 2/ 4-1! < AA- "&. & < N 0(!"2/ (.P 0(!" 2//Pµ3)/4F 22@ 2P?. [ ) 22@ 98288MPPPP2+ C 0(!" 2/)@P µ3+ )8+ ) 2.2 N@9@.MPPPP2+ (3! 85<69898A-B58!! 5 8:,.&(-4&..(%(µ18:8! 98<4=85998 F&& &..(FB &.%(F& &2?/2)..N 9P82F MPPPP2+ 4-1!! 70

71 )2.+ & )..N.8PP MPPPP2+ ) 29.N 2F2/FMPPPP2+ ) /P.N 8N89MPPPP2+ $.3 59<558 & ( 3-1! * ( 7 & 4-1!) + ( ; C )+! $ 4B 4. ( * ( 3-1! & * 7 4( 3-1! 71

72 ! C (0!!0!!<! 7 *(" ( U 7 6 D 7 ) + 8 N! 7 * 0(!" 2/7 2@K D 7 ". ( 7 => & 7 R 72

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74 295 "!$<")2?NN+=-: 4 B B >X(9P2PP/42P2P "!"* 0 ; )2???+ = 1 : 1! :4 :>X(2??FN@4?@?@ " *"!C ).PP2+=: :H4:: 0(!"2/ 4: 1! :>!":<":9@2/P@42/P? C!" S I0 CB X</ ).PP/+ Y" B >((U2N8)2+.?94/P/ 74

75 )3 & 4( 224-1!0(!" 2/A -1! ( & &R 0(!" 2/ 22 0(!" 2/ 2N7 0(!" 2/7 0(!" 2/ 22 0(!" 2/! D D 7 * 3 ( 3U C => 7 7 % 75

76 D 5C & C C ; 4( 3-1! & 76

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