GLI SCREENING NEONATALI

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1 GLI SCREENING NEONATALI Paolo Giliberti Tabarka luglio 2009

2 MALATTIA IDEALE PER LO SCREENING: STORIA NATURALE STADIO ASINTOMATICO STADIO SINTOMATICO INIZIO INDIVIDUABILITA CON SCREENING PERIODO OTTIMALE TRATTAMENTO PIENA ESPRESSIONE CLINICA INIZIO BIOLOGICO INTERVALLO DI SCREENING PERIODO CONVENZIONALE DI INDIVIDUAZIONE

3 CRITERI DI SELEZIONE DI UN PROGRAMMA SCREENING Che riguardano la malattia: Gravità Frequenza Efficaci possibilità terapeutiche Miglioramento della prognosi a seguito della diagnosi precoce

4 CRITERI DI SELEZIONE DI UN PROGRAMMA SCREENING Che riguardano il metodo: Accettabilità Semplicità Riproducibilità Economicità Sensibilità Specificità

5 SENSIBILITA = Numero dei veri positivi Numero dei veri positivi X 100 Numero dei falsi negativi

6 SPECIFICITA = Numero dei veri negativi X 100 Numero dei veri negativi Numero dei falsi positivi

7 100% SENSIBILITA 41% 18% 0 FALSI NEGATIVI SOGGETTI SANI SOGGETTI AMMALATI FALSI POSITIVI A B C 0 30% SPECIFICITA 80% 100% BASSO SCALA DI SCREENING ALTO

8 Deficienza di B Gene alterato Enzima inattivo Abnorme milieu chimico a livello cellulare Danno dei tessuti sensibili In 1 settimana 4-5 mesi Sintomi clinici Metaboliti alternativi Accumulo di A

9 ENZYME AUXOTROPH TEST APPLICATO ALL ARGININOSUCCINURIA B. SUBTILIS 6051 auxotroph JP 3 Mezzo di coltura privo di arginina contenente Ac. argininosuccinico Assenza di crescita B. SUBTILIS 6051 auxotroph JP 3 Mezzo di coltura con Ac. argininosuccinico privo di arginina Campione di sangue con argininosuccinasi arginina Crescita batterica B. SUBTILIS 6051 auxotroph JP 3 Mezzo di coltura con Ac. argininosuccinico privo di arginina Campione di sangue privo di argininosuccinasi Ac. argininosuccinico Assenza di crescita

10 TEST DI INIBIZIONE BATTERICA Robert Guthrie

11 TEST DI INIBIZIONE BATTERICA (Guthrie) BATTERI Mezzo di coltura Crescita batterica BATTERI Mezzo di coltura con un inibitore per competizione con un aminoacido Assenza di crescita BATTERI Mezzo di coltura con inibitore Campione di sangue contenente l aminoacido Crescita batterica

12 TEST DI INIBIZIONE BATTERICA FENILCHETONURIA

13 TEST SCREENING IN ETA NEONATALE Condizione PKU Tirosinemia Istidinemia Metionina (omocistinurie) Leucina (MSUD) ASU Galattosemie Ipotiroidismo Altre aminoacidopatie ed acidosi organiche Iperlipidemie Mucovoscidosi Tipo di materiale biologico Sangue essiccato meconio Siero Urine /- Guthrie Tests disponibili Altri M.F. M.C. M.F. M.C. M.F. M.C. M.C. test di Brand M.C. E.A.T. Test di Beutler RIA M.C. M. Chimici BM test

14 SPETTROMETRIA DI MASSA TANDEM Settore magnetico Settore elettrostatico m = e H 2 γ 2 2 V Camera di ionizzazione γ = 2 V B Rivelatore ioni

15 SPETTROMETRIA DI MASSA TANDEM Sorgente ionica MS1 Cella di MS2 Detector collisione

16 ERRORI CONGENITI IDENTIFICATI DALLA SPETTROMETRIA DI MASSA TANDEM MST Aminoacidi Coniugati della carnitina Fenilalanina Tirosina AA ramificati Difetti del ciclo dell urea Difetti dell AA solforati Disordini del trasporto degli AA Iperglicinemia non chetotica Prolinemia Deficit di ornitina - δ-aminotransferasi Disordini del trasporto della carnitina e delle acilcarnitine Disordini della β-ossidazione Disordini del metabolismo comune alla valina e leucina Etc.

17 SPETTROMETRIA DI MASSA TANDEM: PROFILO DELLE ACIL-CARNITINE Normale Octanoilcarnitina MCAD

18 LIMITI DELLA SPETTROMETRIA DI MASSA TANDEM INCAPACITÀ A RICONOSCERE: Difetti alti del ciclo dell urea (ornitina transcarbamilasi, carbamilfosfatosintetasi) Difetti del metabolismo del piruvato Difetti della fosforilazione ossidativa Disordini da accumulo lisosomiale Difetti del metabolismo dei metalli (malattia di Wilson, deficit del fattore molibdenico)

19 POTENZIALITA DELLA SPETTROMETRIA DI MASSA TANDEM POSSIBILITÀ DI INDIVIDUARE: Disordini da accumulo lisosomiale (malattia di Fabry, malattia di Gaucher, malattia di Pompe) Disordini perossisomiali (malattia di Zellweger, condrodistrofia puntata rizomelica, adrenoleucodistrofia X-linked) Malattia di Wilson Sindrome dell X fragile Sordità congenite