Andamento plasmatico di progesterone, 17β-estradiolo e IGF-I durante il ciclo estrale della cavalla

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1 Andamento plasmatico di progesterone, 17β-estradiolo e IGF-I durante il ciclo estrale della cavalla Sara Panzani 1, Marco Quartuccio 2, Antonella Comin 3, Umberto Tosi 4, Nadia Govoni 5, Fausto Cairoli 1 1 Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie, Facoltà di Medicina Veterinaria, Università degli Studi di Milano, Via G. Celoria 10, Milano, Italia 2 Dipartimento di Sanità Pubblica Veterinaria, Facoltà di Medicina Veterinaria, Università di Messina, Polo Universitario dell Annunziata, Messina, Italia 3 Dipartimento di Scienze degli Alimenti, Facoltà di Medicina Veterinaria, Università di Udine, Via Sondrio 2/A, Udine, Italia 4 Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie, Facoltà di Medicina Veterinaria, Università di Teramo, V.le Crispi 212, Teramo, Italia 5 Dipartimento di Morfofisiologia Veterinaria e Produzioni Animali, Università di Bologna, Via Tolara di Sopra 50, Ozzano dell Emilia (BO), Italia RIASSUNTO Diversi ormoni entrano in gioco nella regolazione della fisiologia riproduttiva nella cavalla. Tra questi, il progesterone (P4), il 17-β-estradiolo (E2) e il fattore di crescita insulino-simile I (IGF-I) giocano un ruolo fondamentale. Lo scopo di questo studio è stato quello di fornire un quadro completo delle variazioni ormonali durante il ciclo estrale della cavalla, tramite la valutazione dei livelli plasmatici di P4, E2 e IGF-I nel periodo compreso tra due ovulazioni successive. A questo scopo 10 cavalle sono state esaminate ecograficamente ogni 12 ore a partire dall inizio dell estro fino all ovulazione. In seguito l esame ultrasonografico è stato ripetuto ogni giorno fino alla comparsa dell estro successivo, momento dal quale si riprendeva la valutazione ogni 12 ore fino alla seconda ovulazione. Contemporaneamente, da ogni cavalla sono stati raccolti campioni ematici ogni mattina, tra le 8:00 e le 10:00, a partire dal giorno della prima ovulazione quotidianamente fino al giorno dell ovulazione successiva. L analisi del P4, dell E2 e dell IGF-I è stata effettuata tramite metodica RIA. La lunghezza media del ciclo estrale è stata di 22,1 giorni e il diametro follicolare preovulatorio medio è stato di 41,3 mm. Il valore medio di P4 plasmatico all ovulazione è stato di 0,15 ng/ml; nei giorni successivi il P4 è cresciuto progressivamente raggiungendo valori maggiori di 10 ng/ml da 5 a 13 giorni post-ovulazione. La concentrazione plasmatica media di E2 all ovulazione è stata di 6,5 pg/ml. Il calo progressivo di E2 è stato osservato fino al nono giorno post-ovulazione, seguito da un rapido aumento delle concentrazioni plasmatiche di questo ormone. Considerando entrambe le ovulazioni, i valori di IGF-I hanno mostrato un range tra 40,1 e 80 ng/ml. Il valore più alto di questo ormone è stato riscontrato al giorno 19, che corrisponde al primo giorno di estro, anche se durante tutto il periodo di osservazione l IGF-I ha mostrato un andamento altalenante. INTRODUZIONE Il ciclo estrale è l intervallo che si interpone tra due ovulazioni successive e nella cavalla ha una lunghezza media di 21 giorni (19-22 giorni). La fase follicolare del ciclo è caratterizzata dallo sviluppo, dalla selezione e dalla maturazione del follicolo preovulatorio e dalla regressione o dall atresia degli altri follicoli sviluppatisi durante la stessa ondata follicolare (Bergfelt, 2000). Nelle ore precedenti il termine di questa fase si ha l ovulazione, evento che segna il confine con la fase luteinica. Per questo motivo il giorno in cui avviene l ovulazione viene comunemente definito giorno 0. La fase luteinica è dominata dalla presenza e dall attività del corpo luteo. La sua durata nella cavalla è mediamente di giorni (Hughes et al., 1972; McKinnon e Voss, 1993; LeBlanc, 1999). Articolo ricevuto dal Comitato di Redazione il 25/01/2010 ed accettato per la pubblicazione dopo revisione il 26/05/2010. Ippologia, Anno 21, n. 2, Giugno

2 La luteinizzazione prevede la conversione strutturale e funzionale delle cellule della granulosa estrogeno-secernenti a cellule luteiniche che secernono progesterone (McKinnon e Voss, 1993; Bergfelt, 2000). Tra i vari estrogeni prodotti durante la fase follicolare, il più importante è rappresentato dal 17-βestradiolo (E2). Il follicolo ovarico, sotto lo stimolo delle gonadotropine, produce estrogeni, i quali vengono sintetizzati a partire dagli androgeni prodotti dalle cellule della teca interna sotto l influenza dell LH. Questi diffondono poi all interno del follicolo dove, a livello delle cellule della granulosa, subiscono processi di demetilazione ed aromatizzazione sotto l azione dell FSH. Gli estrogeni sono responsabili dei maggiori cambiamenti strutturali del tratto genitale e delle modificazioni comportamentali associate all estro (McKinnon e Voss, 1993; LeBlanc, 1999). A livello ematico il loro picco si registra ore prima dell ovulazione (Noden, 1975; Palmer et al., 1975) con valori che si aggirano intorno a pg/ml (Morel, 2003), mentre ritornano a livelli basali entro i primi 2 giorni del diestro. Ciò sarebbe correlato con il rilascio, durante il processo di ovulazione, delle cellule della granulosa all interno del liquido follicolare, rimanendo presenti pertanto esclusivamente le cellule della teca interna che producono progesterone (Morel, 2003). Il progesterone (P4) viene prodotto dalle cellule del corpo luteo sotto lo stimolo dell LH a partire dal 1 fino al 17 giorno post-ovulazione (Le Blanc, 1999). L azione di preparazione e mantenimento della gravidanza propria del progesterone può avvenire solo a seguito dell azione di sensibilizzazione dei tessuti da parte degli estrogeni (effetto preparatorio degli estrogeni). Durante l estro, la progesteronemia rimane al di sotto di 1 ng/ml, mentre aumenta rapidamente dopo l ovulazione raggiungendo valori compresi tra 1,5 e 2,5 ng/ml a 24 ore e tra 2 e 5 ng/ml a 48 ore. Il picco di 8-20 ng/ml si raggiunge 5-8 giorni dopo l ovulazione e i valori rimangono elevati fino all inizio della luteolisi (Le Blanc, 1999). La cessazione della secrezione di P4 è dovuta alla lisi del corpo luteo ad opera delle PGF2α prodotte dall endometrio e nelle cavalle non gravide avviene giorni dopo l ovulazione e si concretizza dal punto di vista funzionale nell arco di 40 ore circa (Huges, 1972; McKinnon e Voss, 1993; Morel, 2003). Rimuovendo così l inibizione al rilascio delle gonadotropine, un nuovo ciclo ovarico può ricominciare. Un altro ormone che rientra nel complesso processo di regolazione del ciclo estrale, e in particolare nella stimolazione della funzionalità ovarica, è l insulin-like growth factor-i (IGF-I). Una delle azioni principali esercitate da questo ormone è la stimolazione della differenziazione FSH-indotta delle cellule della granulosa e in particolare l acquisizione di recettori per l LH (Hirakawa et al., 1999), la quale potrebbe essere responsabile dello sviluppo del follicolo dominante dalla coorte follicolare (Mihm e Evans, 2008). L IGF-I, infatti, ha un azione di feedback positivo sul rilascio dell ormone della crescita a livello ipotalamico e ipofisario così come agisce regolando l azione delle gonadotropine (Deichsel et al., 2005). Per la specie bovina, in cui sono stati fatti numerosi studi sulle concentrazioni di IGF-I durante il ciclo estrale, esistono dati contrastanti riguardo le variazioni dei livelli di questo ormone (Velasquez et al., 2008). Uno studio condotto da Kawashima e collaboratori (2007) ha riportato un incremento dell IGF-I circolanti durante il periodo preovulatorio e aumenti transitori durante la fase follicolare e decrementi durante la fase luteinica. Altri studi, al contrario, non hanno rilevato variazioni nei livelli di questo ormone né durante il ciclo estrale (Alvarez et al., 2000), né a cavallo del picco di LH e dell ovulazione (Robinson et al., 2002; Burns et al., 2005). Nella cavalla sono stati effettuati alcuni studi sulle concentrazioni intra-follicolari di IGF-I durante il ciclo, dimostrando un aumento dei livelli di questo ormone in associazione con l incremento della steroidogenesi nei follicoli in via di sviluppo (Spicer et al., 2005). Uno studio recente riporta i dati riferiti alle concentrazioni plasmatiche medie dell IGF-I nel plasma in fase estrale precoce (2-3 giorno di estro, P4<0,6 nmol/l), con valori intorno ai 200 ng/ml e in fase luteinica (5 giorni post-ovulazione), con valori intorno ai 177 ng/ml, senza differenze significative fra i due valori (Deichsel et al, 2006). Gli autori non sono a conoscenza di studi relativi alla valutazione dell andamento plasmatico dell IGF-I nei diversi giorni del ciclo estrale nella cavalla. Lo scopo di questo lavoro è quindi quello di dare un quadro più completo relativo alle variazioni ormonali nella cavalla, ed in particolare di E2, P4 e IGF-I durante un ciclo estrale, dall ovulazione a quella successiva. MATERIALI E METODI Lo studio, eseguito tra aprile e luglio 2007, ha coinvolto 10 cavalle da sella di razze diverse, di età compresa tra 3 e 10 anni, clinicamente sane e regolarmente ciclanti. L estro è stato individuato mediante teasing quotidiano, mentre la crescita follicolare è stata monitorata mediante ultrasonografia transrettale (Concept 2000, sonda lineare 7.5 MHz, Dynamic Imaging-Sonomed, Livingston, Scotland). L esame ecografico è stato eseguito ogni 12 ore a partire dall inizio dell estro fino all ovulazione; in seguito ogni giorno prima del prelievo ematico e di nuovo ogni 12 ore dall inizio dell estro successivo fino all ovulazione. L avvenuta ovulazione veniva riscontrata, sempre ecograficamente, dalla scomparsa del follicolo preovulatorio, 38 Andamento plasmatico di progesterone, 17β-estradiolo e IGF-I durante il ciclo estrale della cavalla

3 presente nelle 12 ore precedenti, e dal rilievo del corpo emorragico. Per ogni soggetto sono stati effettuati prelievi ematici ogni mattina tra le ore 8 e le ore 10 a partire dal giorno dell ovulazione fino al giorno dell ovulazione successiva. I campioni di sangue, prelevati dalla vena giugulare con Vacutainer eparinizzati (Venoject TERUMO), sono stati centrifugati a temperatura ambiente entro 30 minuti, a 3000 giri/min per 20 minuti. I campioni di plasma così ottenuti sono stati conservati a 20 C fino al momento della determinazione delle concentrazioni di P4, E2 e IGF-I. DETERMINAZIONI ORMONALI La concentrazione plasmatica del progesterone è stata determinata mediante saggio radioimmunologico (RIA), secondo la metodica descritta da Seren e collaboratori (1974), parzialmente modificata. I parametri di validità sono risultati: sensibilità 2,5 pg/tubo, variabilità nel saggio 7,8% e tra saggio 10,3%. La concentrazione plasmatica di 17β-estradiolo è stata valutata mediante dosaggio radioimmunologico (RIA) secondo la metodica di Tamanini e collaboratori (1985), parzialmente modificata. I parametri di validità dell analisi sono risultati: sensibilità 0,6 pg/tubo, variabilità nel saggio 6,8% e tra saggi 9,3%. I livelli plasmatici di IGF-I sono stati valutati tramite tecnica RIA modificata (Renaville et al., 1993), utilizzando un anticorpo distribuito dalla Novozymes Biopharma (Thebarton, SA 5031 Australia). L IGF-I ricombinante umana (rhigf-i, Roche S.p.A, Italy) è stata usata come standard e per la preparazione dell antigene marcato. La dose minima rilevabile di IGF-I è stata di 1,8 ng/ml. I coefficienti di variazione intra e inter-saggio sono stati rispettivamente di 8,5 e 12,7%. RISULTATI In Tabella 1 sono riportati i dati relativi alla razza, all età, alla durata del ciclo estrale, al diametro del follicolo ovulatorio del primo ciclo e di quello successivo e all intervallo tra l inizio dell estro e l ovulazione delle 10 cavalle in esame. In Tabella 2 sono riportati invece gli andamenti medi nelle 10 cavalle delle concentrazioni plasmatiche di P4, E2 e IGF-I durante il ciclo estrale. Il Grafico 1 rappresenta l andamento medio di P4, E2 e IGF-I durante il ciclo estrale. DISCUSSIONE La durata del ciclo estrale delle 10 cavalle prese in esame variava tra i 20 e i 24 giorni, con una durata media di 22,1±1,20 giorni, e una lunghezza di giorni nell 80% delle cavalle, in accordo con i dati riportati in letteratura (LeBlanc,1999). Il follicolo nell ultimo rilievo ecografico pre-ovulatorio (12 ore precedenti alla prima ovulazione) ha raggiunto un diametro medio pari a 40,6±4,20 mm rispetto ai 41,9±5,44 mm del follicolo preovulatorio riscontrati all ovulazione del ciclo successivo. Considerando quindi complessivamente i follicoli pre-ovulatori sia del primo, sia del secondo ciclo, il diametro medio è di 41,3±4,78 mm, in accordo con quanto riportato in letteratura (Le- Blanc, 1999; England, 2004; Bergfelt e Adams, 2007; Samper et al., 2007). L ovulazione si è verificata 6,8±1,22 giorni dopo l inizio dell estro, leggermente in anticipo rispetto a quanto affermato da Bergfelt e Adams (2007). In nessun caso sono state riscontrate doppie ovulazioni, anche se in 3 cavalle è stato individuato un secondo follicolo, andato incontro però ad atresia 2-4 giorni prima dell ovulazione del follicolo ovulatorio. Allo stesso modo non sono stati rilevati TABELLA 1 Razza, età, durata del ciclo estrale, diametro del follicolo ovulatorio del primo ciclo e di quello successivo ed intervallo estro/ovulazione delle 10 cavalle in esame Cavalla Razza Età Ciclo (gg) Follicolo Follicolo Estro/ 1 ciclo (mm) 2 ciclo (mm) ovulazione (gg) 1 PSI San Fratellana Maremmana Avelignese Quarter Horse Sella Inglese Sella Inglese Sella Italiana Quarter Horse Sella Francese Ippologia, Anno 21, n. 2, Giugno

4 TABELLA 2 Andamento medio±ds delle concentrazioni plasmatiche di P4, E2 e IGF-1 durante il ciclo estrale delle 10 cavalle (0 = ovulazione; 0bis = seconda ovulazione) Giorni P4 (ng/ml) E2 (pg/ml) IGF-1 (ng/ml) 0 0,1±0,13 7,0±1,99 58,5±7,68 1 1,2±0,95 5,0±1,26 58,8±6,54 2 3,3±1,30 4,6±1,37 62,1±5,44 3 7,3±3,08 4,2±1,20 66,0±13,47 4 9,9±3,12 3,8±0,96 70,3±17, ,9±4,97 3,7±0,99 76,7±12, ,7±3,57 3,6±1,32 72,8±8, ,2±3,46 3,1±0,90 73,1±16, ,8±3,12 3,1±0,73 72,6±9, ,5±4,29 3,0±0,48 78,6±24, ,2±4,08 3,0±0,79 71,7±24, ,2±4,94 3,4±0,99 66,2±23, ,6±5,36 3,7±1,37 67,4±27, ,7±4,92 4,2±1,64 62,4±26, ,2±8,28 4,9±1,95 58,2±11, ,2±7,38 5,9±2,40 62,8±17, ,2±5,27 7,2±3,27 73,7±20, ,9±4,36 8,6±3,50 63,7±22, ,3±0, ±3,55 75,5±25, ,1±0,17 12,1±4,20 81,1±16, ,1±0,24 12,8±4,25 69,5±15, ,3±0,34 13,1±4,14 64,2±12, ,0±0,10 13,9±5,81 60,0±12, ,0±0,02 12,2±2,07 54,0±16,01 0bis 0,0±0,01 6,0±1,23 57,8±14,24 follicoli dominanti ( 30 mm), ad eccezione di quelli andati incontro ad ovulazione, durante il ciclo, suggerendo l assenza di una seconda onda maggiore durante il ciclo (Donadeu e Ginther, 2004). La progesteronemia alla prima ovulazione risulta pari a 0,2±0,13 ng/ml, con un valore minimo di 0,1 ng/ml nella maggior parte dei soggetti (8/10) e un valore massimo di 0,5 ng/ml. Anche all ovulazione successiva le concentrazioni medie risultano ampiamente inferiori a 1 ng/ml, con un range variabile tra 0 e 0,7 ng/ml. Analizzando i tassi di P4 all ovulazione sul totale delle 20 ovulazioni considerate, la concentrazione plasmatica media risulta perciò pari a 0,15±0,19 ng/ml. Questo dato conferma quanto riportato da LeBlanc e collaboratori (1999) e da Gastal e collaboratori (2007), i quali hanno riscontrato in questa fase del ciclo una concentrazione plasmatica di P4 inferiore a 1 ng/ml. Al primo giorno post-ovulazione si rileva già un incremento della progesteronemia (1,2±0,95 ng/ml), indice di una pronta attività steroidogenica del corpo luteo, la cui entità non appare costante in tutti i soggetti. Infatti anche se nella maggior parte delle fattrici (70%) i valori ematici oscillano da 0,9 a 3,7 ng/ml, nelle restanti 3 variano da 0,3 a 0,8 ng/ml. Il tasso medio di P4 al giorno successivo l ovulazione è in linea, anche se inferiore, ai valori riportati da LeBlanc (1999) (1,5-2,5 ng/ml). Successivamente il P4 tende ad aumentare in maniera progressiva, raggiungendo stabilmente concentrazioni medie maggiori di 10 ng/ml dal 5 al 13 giorno post-ovulatorio. In tale trend positivo viene raggiunto il valore medio più elevato, pari a 13,5±4,29 ng/ml, 9 giorni dopo l ovulazione. Questo parametro è caratterizzato da una variabilità non solo per il momento di comparsa, ma anche per l entità; si estende infatti dal 6 al 14 giorno con valori compresi tra 6,6 e 22,7 ng/ml. Tale dato è in linea con quanto riportato dalla bibliografia, in cui il picco massimo, pari a 8-20 ng/ml, corrisponde invece al 5-8 giorno post-ovulazione (Sato et al., 1977; LeBlanc, 1999). Il P4 segue poi una fase di decremento fino a raggiungere nuovamente valori inferiori a 1 ng/ml in media al 18 giorno post-ovulazione. Ne emerge che la fase luteinica, ovvero il periodo durante il quale le concentrazioni plasmatiche di P4 permangono superiori od uguali a 1 ng/ml, ha una durata media di 17 giorni con un range di giorni, così come riportato da McKinnon (1993). La concentrazione plasmatica media di E2 alla prima ovulazione risulta pari a 7,0 pg/ml, con valori minimi e massimi di 3,6 e 9,3 pg/ml, rispettivamente, pressoché identici a quelli registrati all ovulazione del ciclo successivo (6,0±1,23 pg/ml). Nel complesso, ovvero su 20 campioni, il tasso medio di E2 al giorno dell evento ovulatorio corrisponde quindi a 6,5±1,59 pg/ml. Valutando sempre le concentrazioni medie si assiste ad un decremento dell estradiolo ematico già a partire dal giorno 1 (5,0±1,26 pg/ml), indice della cessata attività estrogenica per la presenza delle sole cellule tecali, in accordo con i valori (circa 4 pg/ml) registrati da Ginther e collaboratori (2008). Tale progressivo decremento prosegue poi fino al nono giorno post-ovulazione, momento in cui si registra il valore più basso (3,0±0,48 pg/ml). Successivamente si assiste ad una veloce ascesa della curva plasmatica, corrispondente alla produzione di estrogeni da parte delle cellule della granulosa dei nuovi follicoli in accrescimento, la quale raggiunge il suo apice al giorno 22, ovvero ore prima dell evento ovulatorio, così come riscontrato da Noden (1975) e da Palmer (1975). Anche il valore massimo da noi registrato (13,9±5,81 pg/ml) rientra nei valori (10-15 pg/ml) riportati da Morel (2003). È inoltre da notare che nell intervallo tra il 4 ed il 12 giorno, le concentrazioni plasmatiche medie di estradiolo rimangono inferiori a 4 pg/ml, mentre contemporaneamente il progesterone si mantiene stabilmente superiore a 10 ng/ml, evidenzian- 40 Andamento plasmatico di progesterone, 17β-estradiolo e IGF-I durante il ciclo estrale della cavalla

5 16 90 Concentrazioni plasmatiche di P4 (ng/ml) ed E2 (pg/ml) bis Concentrazioni plasmatiche di IGF-I (ng/ml) Giorni del ciclo estrale E2 P4 IGF-I GRAFICO 1 - Andamento medio delle concentrazioni plasmatiche di P4, E2 e IGF-I durante il ciclo estrale delle 10 cavalle (0 = 1 a ovulazione; 0bis = 2 a ovulazione). do così l alternante andamento dei due ormoni. La concentrazione plasmatica media di IGF-I alla prima ovulazione è risultata pari a 58,5±7,68 ng/ml, mentre alla seconda valutazione era di 57,8±14,24 ng/ml. Considerando il totale delle ovulazioni prese in esame, il valore medio di IGF- I è oscillato tra i 40 e gli 80 ng/ml. Il valore massimo è stato rilevato al giorno 19, con un valore medio intorno agli 81 ng/ml, momento che corrisponde al primo giorno di estro. Dopo questo giorno, l IGF-I sembra mostrare un trend decrescente fino al momento dell ovulazione, anche se purtroppo, visto l esiguo numero di soggetti considerati, non è stato possibile effettuare un analisi statistica. Successivamente, sembrerebbe possibile osservare un aumento transitorio dell IGF-I, sebbene i valori medi continuino a mostrare un andamento oscillante per tutto il ciclo estrale. L assenza di un andamento chiaro per questo ormone durante il ciclo estrale nella cavalla potrebbe essere spiegato in diversi modi. Innanzitutto, l azione principale dell IGF-I sull attività follicolare potrebbe essere esercitata prevalentemente a livello ovarico, come indicato tra l altro dalle alte concentrazioni di questo ormone in relazione alla stimolazione della proliferazione delle cellule della granulosa e all aumento della steroidogenesi. Questa azione locale potrebbe essere evidente solo parzialmente a livello del circolo ematico. Inoltre, anche nella specie bovina sono stati trovati risultati contrastanti nei diversi studi effettuati (Velasquez et al., 2008). In particolare, Alvarez e collaboratori (2000), in seguito alla raccolta a giorni alterni di campioni plasmatici, hanno rilevato valori costanti di IGF-I durante il ciclo estrale della bovina. Anche Burns e collaboratori (2005), grazie a un campionamento giornaliero effettuato nel periodo periovulatorio, non hanno trovato differenze significative nei livelli plasmatici di IGF-I. In uno studio recente (Deichsel et al., 2006) le concentrazioni plasmatiche di IGF-I sono state determinate in cavalle in lattazione e non, durante i primi giorni dell estro (diametro follicolare 35 mm, 2-3 giorni di estro) e all inizio della fase luteinica (5 giorni dopo l ovulazione). Sia le cavalle in lattazione che non, non hanno mostrato differenze significative nelle concentrazioni di IGF-I tra i diversi tempi di prelievo. In ogni caso, confrontando i valori ottenuti nel loro studio con quelli rilevati in questo lavoro, Deichsel e collaboratori hanno trovato livelli plasmatici di IGF-I molto più alti. Infatti, Deichsel e collaboratori, durante i primi giorni dell estro, hanno trovato valori intorno ai 200 ng/ml, mentre nel nostro studio si aggiravano intorno ai ng/ml; allo stesso modo, all inizio della fase luteinica loro hanno registrato valori intorno ai 177 ng/ml, più alti rispetto a quelli da noi rilevati nello stesso periodo (76 ng/ml). Queste differenze potrebbero essere correlate con la differente tecnica di analisi utilizzata nei due studi. In conclusione, questo studio fornisce un quadro completo dell andamento del P4, dell E2 e dell IGF-I durante l intero ciclo estrale della cavalla, confermando l andamento opposto del progesterone e degli estrogeni, e completando le scarse informazioni presenti in letteratura riguardanti l IGF-I nella cavalla. Parole chiave Progesterone, estrogeni, IGF-I, ciclo estrale, cavalla. Ippologia, Anno 21, n. 2, Giugno

6 Progesterone, 17β-estradiol, and IGF-I plasma concentrations during the estrus cycle in the mare Summary The physiology of reproduction in the mare is regulated by the action of several hormones. Among these, progesterone (P4), 17β-estradiol (E2) and the insulin-growth factor I (IGF-I) play major roles. The aim of this study is to give a complete picture about the hormonal variation during the estrus cycle in the mare, evaluating P4, E2, and IGF-I plasma levels between two subsequent ovulations. Ten mares were enrolled and were ultrasonographically examined every 12 hours starting from the beginning of estrus until ovulation; then ultrasound examination was performed every day before the blood sampling and again every 12 hours from the beginning of the following estrus until the second ovulation. Blood samples were collected from each mare every morning between 8 and 10 a.m. from the day of the first ovulation until the following ovulation. P4, E2 and IGF-I were analyzed by RIA. The mean estrus cycle length was 22,1 days and the mean preovulatory follicle diameter was 41,3 mm. The mean P4 value at ovulation was 0,15 ng/ml; the following days P4 progressively increased, reaching values higher than 10 ng/ml from 5 to 13 days after ovulation. The mean plasmatic concentration of E2 in the day of ovulation was 6,5 pg/ml. The decrease of E2 concentrations progressively continued until 9 days post-ovulation, then a rapid increase of plasmatic concentrations could be observed. Considering both the ovulations, IGF- I ranged between 40,1 and 80 ng/ml. The higher value was recorded at day 19, corresponding at the first day of estrus, even if values continue to jump during the whole estrus cycle. Key words Progesterone, estrogens, IGF-I, estrus cycle, mare. BIBLIOGRAFIA 1. 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