UTILIZZO DI UNA SCHEIMPFLUG CAMERA IN BANCA CORNEE PER PACHIMETRIA PRE E POST TAGLIO DURANTE LA PREPARAZIONE DI LEMBI ENDOTELIALI PRE TAGLIATI PER DSAEK
PACHIMETRIA Ø La pachimetria in Banca Cornee per la preparazione dei lembi endoteliali è utile: Ø In fase pre taglio per scegliere la testina più idonea (300, 350 micron ) Ø In fase post taglio per caratterizzare il lembo per poter fornire le informazioni richieste dal chirurgo Ø Pachimetri: ultrasuoni, scheimpflug camera, OCT cornea
SCOPO -Valutare la possibilità di utilizzo di una scheimpflug camera per pachimetria corneale in banca cornee -Conferma istologica della pachimetria
STUDIO OSSERVAZIONALE RETROSPETTIVO Analisi di 15 cornee non idonee al trapianto, per anomalie morfologiche o per donatore non idoneo per anamnesi, secondo il seguente protocollo: 1. Acquisizione della pachimatria corneale con topografo ottico 2. Regolarizzazione della pachimetria ad uno spessore costante di 550 um con laser ad eccimeri 3. Acquisizione della pachimatria corneale con topografo ottico 4. Taglio del lenticolo stromale con microcheratomo per uno spessore pari a 400 um 5. Acquisizione della pachimatria corneale con topografo ottico 6. Analisi istologica della sezione trasversale del lenticolo stromale e del lenticolo endoteliale
STUDIO OSSERVAZIONALE RETROSPETTIVO Strumentazione utilizzata: 1. Tomografo ottico Precisio prodotto da ivis Technologies. 2. Software CLAT per ablazione customizzata di regolarizzazione prodotto da ivis Technologies. 3. Laser ad eccimeri ires prodotto da ivis Technologies. 4. Microcheratomo 5. Microscopio ottico prodotto da Zeiss
STUDIO OSSERVAZIONALE RETROSPETTIVO PRECISIO Ø Dati d elevazione in alta definizione con precisione chirurgica: l l l l l Superficie anteriore Superficie posteriore Pachimetria 3-D Camera anteriore Angolo K Ø Dati refrattivi, diametro correlati, incluse le aberrazioni corneali di ordine elevato. Ø Mappe pachimetriche corneali ad alta ripetibilità con estensione fino a d = 10 mm.
STUDIO OSSERVAZIONALE RETROSPETTIVO PRECISIO Ø Acquisizione in 1 secondo di 50 sezioni Scheimpflug usando una coppia di telecamere per triangolare la posizione di ogni singolo punto rilevato Ø 39,000 + rilevazioni / superficie Main Scheimpflug Camera per rilevare i dati d elevazione Focus 3D tracking camera per registrare i dati d elevazione
STUDIO OSSERVAZIONALE RETROSPETTIVO CLAT Software per la regolarizzazione dello stroma corneale ad uno spessore desiderato mediante ablazione laser customizzata
STUDIO OSSERVAZIONALE RETROSPETTIVO ires Il laser IRES integrato nella IVIS Suite è un sistema ultra veloce, con frequenza di sistema pari a 1KHz e spot di 650 micron, ad elevata risoluzione, supportato da molteplici brevetti innovativi che consentono la customizzazione dei trattamenti, fra i quali il : CF/A = Frequenza costante/ Area
STUDIO OSSERVAZIONALE RETROSPETTIVO OBIETTIVI Ø Valutare l attendibilità della pachimetria corneale durante la realizzazione di lamelle corneali a spessore uniforme di 550 µ mediante ablazione customizzata con laser ad eccimeri e la realizzazione di un lenticolo endoteliale di 150 µ di spessore uniforme
ITER DELLO STUDIO Fase 1 Valutazione al microscopio ottico della cornea secondo i criteri tradizionali della Banca (densità cellulare,margini, morfologia e of corneal endothelium mortalità) Morphological evaluation Density Mortality Mean σ Interval Cell/mm2 N =13 % N =13 1461.538 3.53% 94.23 1000 1900 0.07 0 30 Morphological evaluation of corneal endothelium Morphology N=13 Polymorphism Moderate 7/13 46.67% (19.22 74.87 ) 6/13 Polymorphism CI 95% 53.33% (25.13 80.78 ) CI 95% Morphological evaluation of corneal endothelium Margins N=13 Homogenous CI 95% Partially Homogenous CI 95% Irregular CI 95% 3/13 26.67% (5.04 53.81 ) 9/13 66.67% ( 38.57 90.91) 1/13 13.33 % ( 0.19 36.03)
ITER DELLO STUDIO Fase 2 Tomografia della cornea con Precisio e conseguente determinazione della mappa pachimetrica ad elevata ripetibilità Optical pachimetry examination of the cornea Min Pachimetry [ µ ] Max Pachimetry [ µ ] N=13 N=13 Mean σ Interval 612.08 13.17 568 680 697,08 21.78 629 767
ITER DELLO STUDIO Fase 3 Progettazione dell ablazione customizzata con il software CLAT per regolarizzare lo stroma ad uno spessore residuo costante pari a 550 micron
ITER DELLO STUDIO Fase 4 Ablazione customizzata con il laser ires per regolarizzare lo stroma corneale ad uno spessore costante di 550 micron.
ITER DELLO STUDIO Fase 5 Tomografia della cornea con Precisio per determinare la mappa pachimetrica dello stroma dopo l ablazione laser. Optical Pachimetry after the laser regularization of the Cornea Pachimetry [ µ ] N=13 Mean σ CI 95% Left point 549.77 4.78 547.17 552.37 Center point 561.61 5.62 558.56 564,67 Right point 573,46 7,21 569.54 577.38 Target 550 ±25 µ
ITER DELLO STUDIO Fase 6 Taglio con microcheratomo di un lenticolo stromale pari a 400 micron per ottenere un lenticolo endoteliale di spessore pari a 150 micron.
ITER DELLO STUDIO Fase 7 Topografia della cornea con Precisio per determinare lo spessore del lenticolo endoteliale. Lo spessore del lenticolo stromale è ottenuto per differenza tra la pachimetria ottica post-ablazione e la pachimetria ottica post-taglio. Optical Pachimetry after the 400 microns cut with microcheratomy of the endothelium lenticule Target Pachimetry[ µ ] N=13 Pachimetry of stromal lenticule after the 400 microns cut (Difference between optical corneal pachimetry and optical endothelium optical pachimetry ) Target Pachimetry [ µ ] N=13 Mean Mean σ Left point 142.1 Center point 156.05 Right point 170 150 ±50 µ Left point 549.77 142.1 = 407.67 Center point 561.61 156.05 = 405, 56 Right point 573,46-156.05 = 417,41 400 ± 25 µ
ITER DELLO STUDIO Fase 8 Valutazione al microscopio ottico del lenticolo endoteliale secondo i criteri tradizionali della Banca (densità cellulare,margini, morfologia e mortalità) Morphological evaluation of corneal endothelium Density [Cell/mm2] Mortality [ % ] N =13 N =13 Mean σ Delta (Mean pre Mean post) Target 1353.85 122.69 Reduction 107.69 7.37 % Reduction < 10% 16.68% 0.48 Increase 13.15 % Not Defined Morphological evaluation of corneal endothelium Delta (Mean pre Mean post) Morphology N=13 Polymorphic CI 95% Moderate Polymorphic CI 95% 7/13 46.67% (19.22 74.87 ) 6/13 53.33% (25.13 80.78 ) No change No change Morphological evaluation of corneal endothelium Delta (Mean pre Mean post) Margins N=13 Homogenous CI 95% Partially Homogenous CI 95% Irregular CI 95% 3/13 26.67% (5.04 53.81 ) 9/13 66.67% ( 38.57 90.91) 1/13 13.33 % ( 0.19 36.03) No change No change No change
ITER DELLO STUDIO Fase 9 Valutazione istologica del lenticolo endoteliale (spessore e morfologia) e del lenticolo stromale (spessore e morfologia.) Histological Thickness evaluated at 4 months after procedure execution Endothelium lenticule [ µ ] Stromal lenticule [ µ ] N=13 N=13 Target Measured value Mean σ CI 95% Left point 139.4 8.80 134.62 144.18 Center point 161.7 14.89 153.60 169.80 Target Measured value Right point 204 26.52 189.58 218.42 150 ±50 µ Left point 508,7 23.67 495.83 521,57 Center point 522,7 25.25 508.97 536,43 Right point 540,1 18.28 530.16 550.04 400 ±25 µ
Misurazione anatomo patologica Ø Inclusione in paraffina Ø Colorazione con ematossilina eosina Ø Scanner dei vetrini digitali Ø Misurazione con morfometro
Lembo endoteliale e stromale
CONCLUSIONI Endpoint 1 Regolarizzazione Stromale: La pachimetria ottica eseguita immediatamente dopo la regolarizzazione corneale con il laser ad eccimeri IRES mostra che il valore medio di 550 ± 25 micron di spessore è stato raggiunto.
CONCLUSIONI Endpoint 2 - Lenticolo Endoteliale: La pachimetria ottica eseguita, immediatamente dopo la procedura di taglio, mostra che il valore medio di 150 ± 50 μm di spessore è stato raggiunto. In aggiunta alla pachimetria ottica, l'analisi istologica, eseguita presso l Anatomia Patologica dell Ospedale Maggiore di Bologna, ha fornito una ulteriore conferma dei risultati raggiunti.
CONCLUSIONI Endpoint 2 - Lenticolo Stromale: La differenza tra la pachimetria ottica eseguita immediatamente dopo la regolarizzazione corneale con il laser ad eccimeri IRES e la pachimetria ottica eseguita immediatamente dopo la procedura di taglio mostrano che il valore medio di 400 ± 50 μm di spessore è stato raggiunto. L'analisi istologica effettuata presso la Anatomia Patologica dell Ospedale Maggiore di Bologna ha mostrato, in questo ultimo caso, un risultato fuori dei target attesi per il lenticolo pari a 508,7 μm a sinistra, a 522,7 μm nel centro e a 540,1 μm a destra. Si ipotizza che la causa di incoerenza dei dati è dovuta al ritardo di oltre quattro mesi tra la data di esecuzione della procedura e la data di esecuzione delle analisi istologica.
Lembi EK con un singolo taglio Banca delle Cornee dell Emilia Romagna Ø Trasferimento in carry 24 ore prima del taglio
Controlli microbiologici Ø Prelievo per microbiologia dal carry prima del taglio
Pachimetria corneale Ø Fasi Ø Posizionamento della cornea sulla camera anteriore artificiale Ø Pachimetria corneale (<>550 micron) Ø Pachimetria taglio pre
TAGLIO Ø Portare il sistema ad elevata pressione Ø Utilizzo di testina da 300 o 350 micron a seconda della pachimetria Ø Tagliare la cornea
Pachimetria corneale Ø Fasi Ø Posizionamento della cornea sulla camera anteriore artificiale Ø Pachimetria corneale (<>550 micron) Ø Pachimetria taglio pre
Caratterizzazione del lembo EK Ø Ø Ø Ø Ø Ø Pachimetria post taglio Misura dell ampiezza del taglio in mm Marcatura con trypan blu del bordo del taglio e disegnare una F sul lato stromale Copertura col cap Cornea claw Posizionamento in carry
Controlli microbiologici Ø Prelievo dal carry post taglio prima della spedizione
GRAZIE