Tetanus-Ab ELISA. Saggio immunoenzimatico per la determinazione quantitativa degli anticorpi anti-tetano nel siero e plasma umani.

Transcript

1 Istruzioni per l Uso Tetanus-Ab ELISA Saggio immunoenzimatico per la determinazione quantitativa degli anticorpi anti-tetano nel siero e plasma umani. RE C I B L I N T E R N A T I O N A L G M B H Flughafenstrasse 52a Phone: +49 (0) IBL@IBL-International.com D Hamburg, Germany Fax: +49 (0)

2 1. USO PREVISTO Il saggio immunoenzimatico IBL per il tetano serve alla determinazione quantitativa di anticorpi toxoidi antitetano nel siero umano, nel citrato, nell EDTA, o Eparina- Plasma, quando lo stato immunitario umorale dev essere controllato, se non sono disponibili certificati dei test o se sono stati applicati intervalli erronei tra le vaccinazioni e si deve decidere se è il caso di somministrare un immunizzazione di base o una dose supplementare, o se non è necessaria alcuna vaccinazione. L ELISA si usa quando si deve controllare la risposta immunitaria nel caso di alcuni disturbi soggiacenti (ad es. malignoma, AIDS, malattie ematologiche). Inoltre l ELISA si usa quando quando si deve controllare la risposta immunitaria perché il paziente è sottoposto ad un trattamento per alcuni disturbi soggiacenti (soppressione immune, citostatica,corticosteroidi, raggi X) e per trovare la causa di certe reazioni alle vaccinazioni. 2. SOMMARIO E SPIEGAZIONI Il numero di infezioni da tetano in Europa e negli Stati Uniti è calato considerevolmente come risultato dell aumento del tasso d immunizzazione. Tuttavia l esito di questa malattia infettiva che si può evitare è così pericoloso (letalità del 50 %) che una protezione individuale con anticorpi è richiesta ai fini di garantire la protezione immunitaria. L immunità da vaccino si può garantire solo se chiaramente confermata da un certificato di vaccinazione validop o se i test sierologici verificano la presenza di anticorpi protettivi. La tecnica di ELISA è un indicatore sensibile che rileva se è necessaria un immuniszzazione di base o una dose supplementare. ELISA identifica anche gli intervalli tra vaccinazioni ed offre l opportunità di evitare reazioni negative. L intervallo corretto tra vaccinazioni non sempre viene osservato correttamente e in caso di malattia capita che i certificati di vaccinazione non sono disponibili. E quindi normale considerare gran parte dei pazienti infortunati/feriti come privi di protezione. In questa situazione si somministrano dosi supplementari superflue, frequentemente seguite da reazioni allergiche. La determinazione sierologica di anticorpi toxoidi anti-tetano indicherà se è necessario somministrare un immunizzazione di base o una dose supplementare ( gestione vaccinazioni ) Questo permette al medico di far coincidere lo status immune e l immunizzazione attiva di ogni paziente. Questo riduce la frequenza di effetti collaterali portando ad una maggiore accettazione di dosi supplementari. 3. PRINCIPIO DEL TEST L IBL Tetanus-Ab ELISA è un test ELISA in due fasi. I pozzetti degli strip nel test ELISA sono rivestiti con il toxoide del tetano. Campioni diluiti di siero o di plasma vengono incubati nei pozzetti delle strip del test (incubazione dei campioni) Durante il periodo di incubazione anticorpi specifici contro il toxoide del tetano sono legati alla fase solida. Componenti non-specifiche vengono lavate via. Una reazione coniugata agisce da marcatore per gli anticorpi anti-difterite legati (incubazione coniugato). Il toxoide del tetano coniugato alla perossidasi agisce come marcatore per gli anticorpi anti-tetano legati. Il coniugato libero viene rimosso da una seconda fase di lavaggio. Nella terza fase d incubazione ha luogo la reazione del substrato. La perossidasi del coniugato trasforma il substrato tetrametilbenzidina (TMB) in una sostanza con una colorazione blu. Per fermare la reazione viene aggiunto l acido solforico e il colore diventa giallo. L intensità del colore è direttamente proporzionale alla concentrazione di anticorpi anti-tetano. La densità ottica si misura su una lunghezza d onda di 450 nm usando un lettore ELISA. La concentrazione di anticorpi specifici contro il toxoide del tetano si può calcolare quantitativamente usando la curva standard o la Calibrazione IBL One Point. 4. AVVERTENZE E PRECAUZIONI 1. Solo per uso diagnostico in-vitro. Solo per uso professionale. 2. Leggere attentamente le istruzioni prima di iniziare il test. Utilizzare il manuale fornito nel kit. Assicurarsi di aver compreso tutte le indicazioni. 3. In caso di danneggiamento del kit contattare IBL o il Vostro fornitore entro 1 settimana dal ricevimento della merce. Non utilizzare i componenti danneggiati ma conservarli per fornire prove del danno assieme al reclamo che inoltrerete al produttore/fornitore. 4. Rispettare lotto e scadenze. Non scambiare o mescolare tra loro reagenti di lotti diversi. Non usare i reagenti scaduti. 5. Attenersi alle Buone Pratiche di Laboratorio e alle direttive di sicurezza. Indossare camici, guanti in lattice e occhiali protettivi se necessario. Version / 7

3 6. Alcuni reagenti del kit contengono sostanze pericolose che potrebbero causare irritazioni a pelle ed occhi. Consultare la sezione MATERIALE FORNITO e le etichette per i dettagli precisi. Schede di sicurezza del prodotto sono disponibili sul sito web IBL o su richiesta specifica ad IBL/fornitore. 7. I reagenti preparati e usati e le sostanze chimiche del kit devono essere trattati come rifiuti pericolosi secondo le normative di sicurezza e la legislazione vigente nel Paese in cui il prodotto viene usato. 8. Il personale delle pulizie dev essere informato dal personale specializzato sui possibili rischi e sulle procedure da adottare. 9. Evitare il contatto con la soluzione stop. Può causare irritazioni e ustioni della pelle. 10. Tutti i reagenti del kit contenenti siero umano o plasma sono risultati negativi rispetto a HIV I/II, HBsAg e HCV. Si raccomanda tuttavia di trattarli come potenzialmente pericolosi poiché non si può escludere in maniera assoluta la presenza di questi o di altri agenti infettivi. 5. CONSERVAZIONE E STABILITÀ Il kit viene spedito e trasportato a temperatura ambiente e deve essere conservato a 2-8 C. Non esporre a luce solare diretta e ad alte temperature. I reagenti non aperti sono stabili fino alla data di scadenza indicata La piastra microtitrata aperta è stabile fino a scadenza del kit se conservata nel suo involucro ben chiuso riposta a 2 8 C. Le informazioni relative a conservazione e stabilità di tutti i reagenti e dei campioni sono riportate nel capitolo corrispondente. 6. PRELIEVO E CONSERVAZIONE DEI CAMPIONI Siero, Plasma Osservare le classiche precauzioni durante il prelievo venoso. Conservare l integrità del campione di sangue dal momento del prelievo al momento dell esecuzione del test. Non usare campioni emolizzati, itterici o lipemici. I campioni torbidi devono essere centrifugati per rimuovere il materiale particolato al loro interno. Conservazione: 2-8 C -20 C (Aliquote) Non esporre alla luce solare diretta e al calore. Stabilità: 5 giorni 12 mesi Evitare la ripetizione di cicli di congelamento/scongelamento. 7. MATERIALE FORNITO Quantità Simbolo Componente 1 x 12 x 8 MTP 1 x 0.6 ml ENZCONJ CONC 1 x 5 x 0.35 ml CAL x 0.35 ml CONTROL LL CONTROL HL 2 x 75 ml DILBUF 1 x 100 ml WASHBUF CONC 2 x 15 ml TMB SUBS Micropiastra Pronto/a all uso. Strisce separabili. Rivestito con toxoide del Tetano. Coniugato Enzimatico Concentrato (100x) Di colore blu. toxoide del Tetano coniugato a perossidase. Calibratore 1-5 Concentrato Contiene: Siero umano, stabilizzatori, conservativos. Le concentrazioni sono lotto-specifiche come indicato sulle etichette del flacone. Calibrato/a contro WHO International Standard (TE-3). Controllo LL+HL Concentrato Controllo Positivo Siero, LL, Low Level, HL, High Level. Contiene: Siero umano, stabilizzatori, conservativos. Le concentrazioni sono lotto-specifiche come indicato sulle etichette del flacone. Tampone Diluente Pronto/a all uso. Di colore rosso. Contiene: detergenti, % (w/v) Thimerosal, 0.01 M Tris/HCl; ph 7.4. Tampone Lavaggio, Concentrato (10x) Contiene: tampone fosfato. Soluzione Substrato TMB Pronto/a all uso. Contiene: TMB (Tetramethylbenzidine). 1 x 15 ml TMB STOP Soluzione Stop TMB Pronto/a all uso. Contiene: 0.5 M H 2SO 4. 2 x FOIL Pellicola Adesiva Nota: Tampone Lavaggio, Tampone Diluente, Soluzione Substrato TMB, Soluzione Stop può essere sostituito dai seguenti prodotti :: TBE virus IgG (RE57401), TBE virus IgM (RE57411) e Diphtheria-Ab (RE57431). Version / 7

4 8. MATERIALI NECESSARI MA NON FORNITI 1. Micropipette (Multipette Eppendorf o similari, < 3 % CV). Volumi: 5, 20, 100, 500, 1000 µl 2. Vortex mixer 3. Tubi per diluizione dei campioni 4. Micropipetta 8-Canali con contenitori per reagenti 5. Spruzzetta per lavaggi, lavatore per micropiastre automatico o semi automatico 6. Lettore per micropiastre in grado di leggere ad assorbanza di 450 nm (lunghezza d onda di riferimento nm) 7. Acqua bidistillata o deionizzata 8. Carta assorbente, puntali per pipette e timer 9. Il software "IBL One Point Calibration per la valutazione, che usa la versione Microsoft Excel 5.0 o superiori (il software verrà fornito gratuito su richiesta). 9. NOTE PER LA PROCEDURA 1. Qualsiasi manipolazione impropria dei campioni o modifica alla procedura può compromettere i risultati. Rispettare rigorosamente i volumi, i tempi e le temperature di incubazione e i passaggi di pretrattamento dei campioni indicati in metodica. Utilizzare pipette calibrate. 2. Una volta iniziato il test completare tutti i passaggi senza interruzioni. Assicurarsi che tutti i reagenti siano stati precedentemente preparati in tempo utile. Far raggiungere la temperatura ambiente ai campioni e ai componenti del kit (18-25 C) e mescolare delicatamente ciascun reattivo liquido e campione prima dell uso. Non creare schiuma durante il mescolamento. 3. Evitare la contaminazione di reagenti, pipette, pozzetti o provette. Usare puntali di plastica nuovi per ogni reagente, standard e campione. Non scambiare i tappi tra loro. Tappare sempre i flaconi non utilizzati. Non riutilizzare pozzetti/provette o reagenti. 4. Si consiglia di saggiare i campioni in doppio per poter identificare eventuali errori di pipettamento. 5. Usare uno schema di pipettamento per realizzare un appropriata distribuzione sulla piastra. 6. Il tempo di incubazione influisce sui risultati. Tutti i pozzetti dovrebbero essere dispensati nello stesso ordine e sequenza temporale. Si raccomanda una pipetta multicanale a 8 canali per pipettare le soluzioni in tutti i pozzetti. 7. Il lavaggio della micropiastra è importante. Pozzetti lavati in modo inappropriato possono portare a risultati erronei. Si raccomanda una pipetta multicanale o un lavatore automatico per piastre. Non far asciugare i pozzetti tra le varie incubazioni. Non graffiare i pozzetti rivestiti durante risciacqui e aspirazioni. Risciacquare e versare i reagenti con cura. Durante i risciacqui assicurarsi che i pozzetti siano ben riempiti con la soluzione di lavaggio e che non ci siano residui nei pozzetti. 8. L umidità influisce sui pozzetti/tubi rivestiti. Non aprire l involucro finché non ha raggiunto la temperatura ambiente. Riporre immediatamente i tubi/pozzetti non utilizzati nell involucro con il disseccante. Version / 7

5 10. ISTRUZIONI PRE-TEST Preparazione di componenti concentrati (Esempio per 32 pozzetti) Diluire / Componente con Diluente Rapporto Note Conservazione Stabilità dissolvere ENZCONJ Mischiare delicatamente. 80 µl 8 ml DILBUF 1:101 (Preparare immediatamente C 1 ora CONC prima dell uso.) 10 ml WASHBUF CONC 90 ml acqua bidist Diluizione dei Standard, Controlli e Campioni CAL 1-5 CONTROL LL CONTROL HL da diluire 1:10 Mischiare delicatamente. 2-8 C 8 settimane con Rapport o Note sempre DILBUF 1:101 p.e. 10 µl CAL/Control µl Siero / Plasma sempre DILBUF 1:101 p.e. 10 µl Campione µl Per la determinazione con curva standard calibratori 1-5 e sieri di controllo sono necessari. Per la determinazione per mezzo di una calibratura ad un punto invece dei calibratori 1-5, usare solo il calibratore 4 ed i sieri di controllo. Campioni con concentrazioni superiori allo standard più alto devono essere ulteriormente diluiti. 11. PROCEDURA DEL TEST 1. Pipettare 200 µl di Calibratore, Controllo e campione diluiti nei rispettivi pozzetti del vassoio per Microprovette (i Calibratori devono essere messi nelle strip 1 e 2). 2. Coprire la piastra con pellicola adesiva. Incubare 60 min a TA (18-25 C). 3. Rimuovere la pellicola adesiva. Eliminare la soluzione d incubazione. Lavare la piastra 3 x con 250 µl di Tampone Lavaggio diluito. Rimuovere l eccesso di soluzione picchiettando la piastra capovolta su una salvietta di carta. 4. Pipettare in ogni pozzetto 200 µl di Conjugato Enzimatico diluito. 5. Coprire la piastra con pellicola adesiva. Incubare 60 min a TA (18-25 C). 6. Rimuovere la pellicola adesiva. Eliminare la soluzione d incubazione. Lavare la piastra 3 x con 250 µl di Tampone Lavaggio diluito. Rimuovere l eccesso di soluzione picchiettando la piastra capovolta su una salvietta di carta. 7. Per aggiungere le Soluzioni Substrato e Stop usare, possibilmente, una micropipetta 8-canali. Pipettare con intervalli di tempo costanti per le Soluzioni Stop e Substrato. Usare uno spostamento positivo ed evitare la formazione di bolle d aria. 8. Pipettare 200 µl di Soluzione Substrato TMB in ogni pozzetto. 9. Incubare 30 min a TA (18-25 C). 10. Fermare la reazione substrato aggiungendo 100 µl di Soluzione Stop TMB in ogni pozzetto. Mescolare delicatamente il contenuto agitando leggermente la piastra. 11. Misurare la densità ottica con un fotometro a 450 nm entro 10 min dopo aver pipettato la Soluzione Stop (Lunghezza d onda di riferimento: nm). Version / 7

6 12. CONTROLLO DI QUALITA I risultati del test sono validi solo se il test è stato eseguito seguendo le istruzioni per l uso. L utente deve inoltre attenersi rigorosamente ai principi della BPL (Buona Pratica di Laboratorio) o a norme equivalenti. Gli utenti e il laboratorio devono avere un sistema di formulazione della diagnosi conforme alle Buone Pratiche di Laboratorio. Tutti i controlli devono risultare compresi entro gli intervalli accettabili indicati sulle etichette e il Certificato QC. Se i criteri non sono soddisfatti il test non è valido e dovrebbe essere ripetuto. Ogni laboratorio dovrebbe usare campioni noti come ulteriori controlli. Si consiglia la partecipazione a programmi di controllo qualità periodici. In caso di deviazioni devono essere forniti i seguenti dati: Scadenza dei reagenti (preparati), condizioni di conservazione, pipette, strumenti, condizioni d incubazione e metodi di lavaggio. 13. CALCOLO DEI RISULTATI La determinazione di anticorpi contro il toxoide del tetano si può eseguire sia con la curva standard, sia con la calibrazione ad un punto (one point calibration) Determinazione della curva standard La DO ottenute per gli standard (asse y, lineare) sono messe in grafico rispetto alla loro concentrazione (asse x, logaritmico) sia su carta per grafico semilogaritmico che con metodo automatico. Buoni risultati si ottengono con grafici cubic spline, 4 Parametri Logistica o Logit-Log. Per il calcolo della curva standard utilizzare ogni segnale degli standard (omettere ovviamente i valori dei duplicati molto al di fuori dei risultati attesi e impiegare il valore singolo più plausibile). La concentrazione dei campioni può essere ricavata dalla curva standard. La diluizione iniziale consigliata in queste istruzioni è stata tenuta in considerazione per l evaluazione descritta sopra. I risultati dei campioni con prediluizioni superiori devono essere moltiplicati per il fattore di diluizione. I campioni con concentrazioni superiori al più alto degli standard devono essere diluiti come descritto nel paragrafo ISTRUZIONI PRE-TEST e ritestati Determinazione con Calibrazione One Point Il software "IBL One Point Calibration per la valutazione, che usa la versione Microsoft Excel 5.0 o superiori, verrà fornito su richiesta. Dopo aver aperto il file Excel IBL One Point Calibration, premere enter - il valore nominale dell assorbanza del calibratore 4, - l assorbanza misurata del calibratore 4 (valori medi) - il range di assorbanza del calibratore 4 e - i coefficienti A, B, C e D della curva di riferimento nelle celle preparate. L assorbanza del calibratore 4 deve rientrare nel range indicato (vedi certificato QC) Collocare i valori medi d identificazione ed assorbanza dei sieri e dei campioni di controllo nel foglio di calcolo preparato. La correzione dell assorbanza e il calcolo delle concentrazioni verrà eseguito automaticamente. Criteri di validazione Il saggio è valido se l assorbanza del calibratore 4 rientra nel range indicato e se le concentrazioni nei sieri di controllo vengono letti all interno del range stabilito Controllo delle Concentrazioni di Campioni Calcolate Campioni con un assorbanza superiore a quella della curva di standard devono essere prediluiti (1+4) con tampone da incubazione. Le concentrazioni così ottenute devono essere moltiplicate per il fattore 5. La conversione del plasma citrato in valori sierologici si ottiene moltiplicando le concentrazioni registrate per il fattore 1.1. Version / 7

7 14. INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI La classificazione in range di titoli specifici per la valutazione della protezione immunitaria si basa su considerazioni sia teoriche, sia pratiche. Nella letteratura [2, 10, 11] per una protezione individuale sicura nell immunizzazione dal tetano, è dato un valore di 0.01 IU/mL; studi clinici dimostrano tuttavia che questo titolo di antitossina non sempre costituisce una protezione sufficiente e l obiettivo sarebbe di ottenere un titolo di protezione più alto. Per motivi di sicurezza, nella profilassi del tetano, è stato raccomandato un valore dieci volte superiore (0.1 IU/mL) rispetto al minimo specificato a livello internazionale. Il vero titolo di protezione umana non si conosce con precisione; tutte le ricerche inerenti all argomento si basano su risultati da esperimenti su animali, quindi ci si devono aspettare differenze nel meccanismo di difesa immunologica individuale. Per la valutazione del test, nella tabella qui di seguito si forniscono le seguenti raccomandazioni Sulla base sdei dati forniti dal WHO, del RKI e di letteratura tecnica medica [3]. Il ridulktato del test dev essere giudicato dal medico per ogni singolo caso prendendo in considerazione la precisione specifica del test. Se la vaccinazione è controllata da un test sierologico ci si raccomanda di certificare la concentrazione di anticorpi anti-tetano nel certificato di vaccinazione. IU/mL Interpretazione nessuna protezione ; a seconda dello storico del paziente sarà necessaria l immunizzazione di < 0.01 base o la dose supplementare; controllo sierologico dopo 4-8 settimane protezione incerta ; dose supplementare necessaria ; controllo sierologico dopo 4-8 settimane protezione solo per breve tempo; si raccomanda dose supplementare ; la dose supplementare protegge a lungo termine La protezione esiste; si raccomanda una dose supplementare o un controllo sierologico dopo anni avviso : somministrare dosi supplementari con concentrazioni di anticorpi >0.5 IU/ml puo causare effetti collaterali indesiderati! esiste una protezione a lungo termine ; si raccomanda una dose supplementare o un controllo sierologico dopo 5 anni esiste una protezione a lungo termine ; si raccomanda una dose supplementare o un controllo sierologico dopo 8 anni esiste una protezione a lungo termine ; si raccomanda una dose supplementare o un controllo > 10.0 sierologico dopo 10 anni 15. LIMITI DELLA PROCEDURA I seguenti componenti del sostanze non hanno effetto significativo sui risultati del test fino ai livelli di concentrazione riportati in tabella. 16. PERFORMANCE Emoglobina Bilirubina Trigliceridi 5.0 mg/ml 2.5 mg/ml 91 mg/ml Precisione Intervallo (IU/mL) Intervallo CV (%) Intra-Saggio (n = 20) Inter-Saggio (n = 10) Sensibilità Analitica 0.03 IU/mL Media (Zero-Standard) + 2SD (n = 20) Linearità Intervallo (IU/mL) Recupero (%) (Gli standard sono stati calibrati secondo il standard TE-3 della OMS.) Version / 7

8 17. RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI SUL PRODOTTO 1. Ambrosch, F., Balda, B.R., Dietze, H., Hagedorn, H.J., Hingst, V., Holzer, R.B., Kuhlmann, W.D., Kunze, M., Lossen-Geißler, E., Lundershausen, R., Möst, J., Pietsch, M., Schröder, J.P., Zielen, S.: Infektionsschutz durch Impfprophylaxe. Impfempfehlungen des Arbeitskreises Immunprophylaxe, pp. 1-25, Storck Medien & Verlag, Bruchsal, (1999) 2. Ambrosch, F., Wiedermann, G., Müller, H.: Eine neue Mikro-ELISA-Methode zur Bestimmung der Tetanus-Antikörper. Zbl. Bakt. Hyg. A 258, 173 (1984) 3. Arbeitskreis Immunprophylaxe: Tetanus-Impfung. Allgemeinarzt 10, 1018 (1996) 4. Cook, T.M., Protheroe R.T., Handel J.M., Tetanus: a review of the literature, Br. J. Anaesth. 87(3): (2001) 5. Centers for Disease Control: Tetanus surveillance. United States, MMWR 46: 15-25, (1997) 6. Centers for Disease Control. Diphtheria, tetanus, and pertussis: recommendations for vaccine use and other preventive measures: recommendations of the Immunization Practices, Advisory Committee (ACIP), MMWR; 40: 1-28 (1991) 7. Centers for Disease Control. Tetanus. surveillance United States, MMWR 52 (2003) 8. Hayney, M.S., Love, G.D., Carlberg, B.M., Buck, J.M., Muller, D., Tetanus seroprevalence among farmers: a preliminary study. J. Rural Health. 19(2): (2003) 9. Mai, K., Bartelheimer, H. K., Rosin, H.: Über den Stand und die Dauer des Impfschutzes gegen Tetanus bei Kindern. Dtsch. med. Wschr. 95, 1044 (1970) 10. Müller, H.E., Müller, M., Schiek, W.: Tetanus-Schutzimpfung - Indikation und Kontraindikation. Dtsch. med. Wschr. 113, 1326 (1988) 11. Schröder, J. P., Kuhlmann, W. D.: Tetanus-Immunität bei Männern und Frauen in der Bundesrepublik Deutschland. Immun. Infekt. 19, 14 (1991) 12. Reiter, S., Poethko-Müller C., Aktuelle Entwicklung von Impfquoten und Impflücken bei Kindern und Jugendlichen in Deutschland, Bundesgesundheitsblatt 52: (2009) 13. RKI-Ratgeber, Merkblätter für Ärzte. Ratgeber Infektionskrankheiten - Merkblätter für Ärzte, Akt. Fassung v. März 2010; Erstveröffentlichung im Epid. Bull. 27/ RKI: Impfempfehlungen der Ständigen Impfkommission am Robert Koch-Institut/Juli Epid. Bull. 30: (2010) 15. World Health Organization. State of the world s vaccines and immunization. Publication WHO/GPV/ Geneva, (1996) Version / 7

9 Symbols / Symbole / Symbôles / Símbolos / Símbolos / Σύµβολα REF LOT Cat.-No.: / Kat.-Nr.: / No.- Cat.: / Cat.-No.: / N.º Cat.: / N. Cat.: / Αριθµός-Κατ.: Lot-No.: / Chargen-Bez.: / No. Lot: / Lot-No.: / Lote N.º: / Lotto n.: / Αριθµός -Παραγωγή: Use by: / Verwendbar bis: / Utiliser à: / Usado por: / Usar até: / Da utilizzare entro: / Χρησιµοποιείται από: No. of Tests: / Kitgröße: / Nb. de Tests: / No. de Determ.: / N.º de Testes: / Quantità dei tests: / Αριθµός εξετάσεων: CONC Concentrate / Konzentrat / Concentré / Concentrar / Concentrado / Concentrato / Συµπύκνωµα LYO IVD Lyophilized / Lyophilisat / Lyophilisé / Liofilizado / Liofilizado / Liofilizzato / Λυοφιλιασµένο In Vitro Diagnostic Medical Device. / In-vitro-Diagnostikum. / Appareil Médical pour Diagnostics In Vitro. / Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro. / Equipamento Médico de Diagnóstico In Vitro. / Dispositivo Medico Diagnostico In vitro. / Ιατρική συσκευή για In-Vitro ιάγνωση. Evaluation kit. / Nur für Leistungsbewertungszwecke. / Kit pour évaluation. / Juego de Reactivos para Evaluació. / Kit de avaliação. / Kit di evaluazione. / Κιτ Αξιολόγησης. Read instructions before use. / Arbeitsanleitung lesen. / Lire la fiche technique avant emploi. / Lea las instrucciones antes de usar. / Ler as instruções antes de usar. / Leggere le istruzioni prima dell uso. / ιαβάστε τις οδηγίες πριν την χρήση. Keep away from heat or direct sun light. / Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. / Garder à l abri de la chaleur et de toute exposition lumineuse. / Manténgase alejado del calor o la luz solar directa. / Manter longe do calor ou luz solar directa. / Non esporre ai raggi solari. / Να φυλάσσεται µακριά από θερµότητα και άµεση επαφή µε το φως του ηλίου. Store at: / Lagern bei: / Stocker à: / Almacene a: / Armazenar a: / Conservare a: / Αποθήκευση στους: Manufacturer: / Hersteller: / Fabricant: / Productor: / Fabricante: / Fabbricante: / Παραγωγός: Caution! / Vorsicht! / Attention! / Precaución! / Cuidado! / Attenzione! / Προσοχή! Symbols of the kit components see MATERIALS SUPPLIED. Die Symbole der Komponenten sind im Kapitel KOMPONENTEN DES KITS beschrieben. Voir MATERIEL FOURNI pour les symbôles des composants du kit. Símbolos de los componentes del juego de reactivos, vea MATERIALES SUMINISTRADOS. Para símbolos dos componentes do kit ver MATERIAIS FORNECIDOS. Per i simboli dei componenti del kit si veda COMPONENTI DEL KIT. Για τα σύµβολα των συστατικών του κιτ συµβουλευτείτε το ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΥΛΙΚΑ. IBL AFFILIATES WORLDWIDE IBL International GmbH Flughafenstr. 52A, Hamburg, Germany IBL International Corp. 194 Wildcat Road, Toronto, Ontario M3J 2N5, Canada Tel.: + 49 (0) Fax: IBL@IBL-International.com WEB: Tel.: +1 (416) Fax: Sales@IBL-International.com WEB: LIABILITY: Complaints will be accepted in each mode written or vocal. Preferred is that the complaint is accompanied with the test performance and results. Any modification of the test procedure or exchange or mixing of components of different lots could negatively affect the results. These cases invalidate any claim for replacement. Regardless, in the event of any claim, the manufacturer s liability is not to exceed the value of the test kit. Any damage caused to the kit during transportation is not subject to the liability of the manufacturer Symbols Version 3.5 /