assonema collo tratto intermedio tratto 23 cromosomi terminale 5x3 mm lunghezza mm fibre dense flagello tratto principale

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1 La fecondazione

2 Lo spermatozoo Lo spermatozoo è una cellula specializzata per portare i suoi 23 cromosomi all interno dell ovocita. E formato da una testa, un collo e una coda o flagello che muovendosi in modo ondulatorio ne assicura la progressione alla velocità di circa cm/ora

3 assonema tratto intermedio collo testa 23 cromosomi 5x3 mm tratto terminale lunghezza mm fibre dense flagello tratto principale

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5 Ovocita maturo 23 cromosomi cromosomi in metafase II Pb granuli corticali 0.15 mm zona pellucida (rivestimento esterno 16 mm, formato da glicoproteine) cromosomi in metafase II membrana plasmatica

6 La zona pellucida

7 ZP1 (90-110KD), ZP2 (64-78KD), ZP3 (57-73KD) e ZP4 (65KD) /ZP4

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9 A cosa serve la ZP? Legame specie-specifico degli spermatozoi all ovocita Protegge l ovocita dalla polispermia Protezione meccanica dell embrione dalla fecondazione all impianto Impedisce l adesione dell embrione alla mucosa dell ovidutto durante la discesa verso l utero

10 I granuli corticali I granuli corticali vengono rilasciati per esocitosi pochi minuti dopo la fusione della membrane spermatozoo/ovocita alla fecondazione. Il contenuto dei granuli modifica la ZP e la rende impenetrabile da altri spermatozoi (reazione zonale)

11 Durante l accoppiamento gli spermatozoi (tra i 100 e 250 milioni) vengono deposti sul fondo della vagina; nelle vie genitali femminili gli possono vivere per alcuni giorni vescichette seminali prostata vescica utero uretra deferente ovaio testicolo tuba vagina pene

12 Gli spermatozoi risalgono le vie genitali femminili. Durante la risalita, ha luogo la loro capacitazione, ovvero modificazioni della membrama plasmatica necessarie al loro passaggio attraverso la zona pellucida che circonda l ovocita.

13 CAPACITAZIONE

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15 Solo uno spermatozoo riuscirà a penetrare nell ovocita

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17 ZP1 ZP3 ZP4 ZP1 ZP1 ZP3 ZP3 ZP4 ZP4 ZP1 ZP1 ZP3 ZP3 ZP4 ZP4 ZP1 ZP1 ZP3 ZP3 ZP4 ZP4 ZP1 ZP1 ZP3 ZP3 ZP4 ZP4 ZP1 ZP1 ZP3 ZP3 ZP4 ZP4 ZP1 ZP1 ZP3 ZP4 -ZP1, ZP3 e ZP4 recettori per spermatozoi inducono reazione acrosomiale -ZP2 recettore secondario per spermatozoi dopo la reazione acrosomiale

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20 La reazione acrosomiale zona pellucida La reazione acrosomiale (esocitosi dll acrosoma) avviene quando uno spermatozoo si lega alla ZP

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22 green=sbti Red=anti CD46

23 Izumo Juno CD9

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29 PM ER CaMKII CaMKII ER PLCz IP3 Ca 2+

30 L aumento di Ca 2+ in un ovocita alla fecondazione, osservato mediante una sostanza fluorescente rossa, inizia nel punto di fusione dello spermatozoo e si propaga in pochi secondi al citoplasma; diverse

31 Attivazione dell ovocita Reazione corticale (min) Reazione zonale (min) Degradazione del fattore citostatico (2-3 ore) Ripresa e completamento della meiosi II (6-8 ore), formazione due pronuclei, emissione PB2 Duplicazione del DNA (10-12 ore) nel pronucleo maschile e femminile I divisione mitotica (24-30 ore)

32 I granuli corticali I granuli corticali vengono rilasciati per esocitosi pochi minuti dopo la fusione della membrane spermatozoo/ovocita alla fecondazione. Il contenuto dei granuli modifica la ZP e la rende impenetrabile da altri spermatozoi (reazione zonale)

33 Reazione corticale e la reazione zonale

34 ZP3 Fecondaizone Dopo fecondazione

35 MAPK P P MOS P CDC2 CiclinaE Emi2 CSF CaMKII MPF CDC2 P CiclinaB2 P Wee1b APC CaMKII

36 Metodologie di fecondazione assistita FIVET + Embrione a 4-8 cellule

37 ICSI