U.O.Microbiologia ISTRUZIONE OPERATIVA EMOCOLTURE INDICAZIONI PER I REPARTI OSPEDALIERI IOB12R 11/2/13 EMOCOLTURE INDICAZIONI PER I REPARTI OSPEDALIERI 1. INFORMAZIONI GENERALI L emocoltura costituisce l esame essenziale per la diagnosi microbiologica delle infezioni del torrente sanguigno sostenute da batteri e da funghi ma anche per la diagnosi di polmoniti e meningiti. Il prelievo si effettua, di norma, da vena periferica. Ciascun prelievo, per il paziente adulto, comprende un flacone aerobio (tappo verde) ed uno anaerobio (tappo arancio) e, secondo le ultime linee guida internazionali, sono necessari e sufficienti tre prelievi nell arco delle 24 h (per un totale quindi di sei flaconi). E indispensabile prelevare una corretta quantità di sangue (1 ml per flacone). Per prelievi di bambini utilizzare i flaconi pediatrici (tappo giallo) prelevando 4 ml di sangue. In caso di sospetta infezione da CVC è necessario eseguire un prelievo da vena periferica ed uno da CVC 2. Conservazione ed invio I flaconi devono essere inviati al Laboratorio di Sanremo appena possibile 24 h su 24h (festivi compresi). Se necessario conservarli, mantenerli SOLO a temperatura ambiente per il minor tempo possibile. 3. Processazione dei flaconi I flaconi, una volta giunti allo Smistamento del Laboratorio di Sanremo, vengono inseriti immediatamente nello strumento di incubazione automatico (24 h su 24, 7 giorni su 7) 4. Incubazione dei flaconi I flaconi,una volta caricati sullo strumento, restano in incubazione per 5 giorni. Sarà cura del Clinico segnalare il sospetto di germi difficili, in modo che il tempo di incubazione sia prolungato di conseguenza. Si ricorda che nei sistemi automatici il 97,5% dei microrganismi viene rilevato entro i primi tre giorni di incubazione ISTRUZIONE OPERATIVA PER AREA DI BATTERIOLOGIA
U.O.Microbiologia ISTRUZIONE OPERATIVA EMOCOLTURE INDICAZIONI PER I REPARTI OSPEDALIERI IOB12R 11/2/13 5. Gestione dei flaconi con segnale negativo Se alla fine del prescritto periodo di incubazione non viene rilevato alcun segnale di crescita batterica (produzione di CO2), il flacone viene refertato come Negativo a 5 giorni 6. Gestione dei flaconi con segnale positivo I flaconi in cui viene rilevata produzione di CO2 suggestiva di crescita microbica, vengono segnalati visivamente come positivi dallo strumento. Il personale della S.S.D., negli orari di apertura, provvede ad eseguire su tali flaconi esame microscopico (colorazione di Gram) e subcoltura su terreni solidi. Il risultato dell esame microscopico viene comunicato telefonicamente al Clinico del Reparto richiedente a cura del Responsabile Struttura o suo delegato. Il giorno successivo al segnale di positività, dalle piastre delle subcolture, a fronte di congrua crescita batterica, si appronta identificazione del germe e relativo antibiogramma. Il referto definitivo, comprensivo di test di suscettibilità agli antibiotici, festivi permettendo, è disponibile per il reparto 48 h dopo la rivelazione della positività. ISTRUZIONE OPERATIVA PER AREA DI BATTERIOLOGIA
U.O.Microbiologia ISTRUZIONE OPERATIVA EMOCOLTURE INDICAZIONI PER I REPARTI OSPEDALIERI IOB12R 11/2/13 Prelievo Emocoltura Invio presso il presidio di Sanremo Inizio incubazione a 37 C Flacone con segnale positivo Esame microscopico (Gram) Flacone con segnale negativo dopo 5 giorni Comunicazione telefonica al Reparto Subcoltura su terreni solidi Identificazione ed antibiogramma Referto finale Refertato come Negativo a 5 gg ISTRUZIONE OPERATIVA PER AREA DI BATTERIOLOGIA
MOMicroSRAll2R 29/8/211 Sistema Qualità in accordo alla norma UNI EN ISO 91:28 Funzione Tipo di operazione Nome e Cognome Assicurazione Qualità Verifica MAGRI Firma e data Responsabile della SSD Approva Dusi P.A. RGQ Compilazione ANDREOTTI M. Il presente documento è di proprietà del AUSL IMPERIESE: Riproduzione vietata pag. 1 di 9
MOMicroSRAll2R 29/8/211 1. SCOPO E CAMPO DI APPLICAZIONE Lo scopo del presente documento è quello di: Fornire ai clinici ed agli addetti ai prelievi una guida semplice e di facile consultazione Fornire informazioni relative all intero pannello di analisi eseguite: contenitore, modalità di invio, tempi di refertazione, metodica usata 2. RIFERIMENTI NORMATIVI E DOCUMENTALI UNI EN ISO 91:28-7.5 "Produzione ed erogazione del servizio Tutti i riferimenti normativi possono essere recepiti nella rete Intranet dell ASL 1 Imperiese e il computer del laboratorio adibito a questa mansione è Win 1.98.32.156 dedicato alla Certificazione & Accreditamento. 3. INFORMAZIONI RELATIVE ALLA S.S.D. MICROBIOLOGIA La S.S.D. Microbiologia è ubicata al piano terra del Padiglione Castello dell Ospedale di Sanremo. Orario di consegna campioni: Dal lunedì al Venerdì dalle ore 8 alle ore 13 Al Sabato dalle ore 8 alle ore 12 Domenica e festivi chiuso 3.2 Interni Telefonici Per chiamate dall esterno anteporre 18453 all interno desiderato Responsabile 643 Consegna campioni/informazioni 6424 Micobatteriologia 64 Fax 6411 4. ORGANIZZAZIONE DEL CATALOGO 4.1 ELENCO DEI CONTENUTI L elenco delle analisi richiedibili è elencato in ordine alfabetico in una tabella così organizzata: Nella prima colonna sono elencati i nomi dei test in ordine alfabetico Nella seconda colonna è indicato il o i materiali biologici sui quali è possibile eseguire l esame Nella terza colonna è indicato il contenitore necessario Nella quarta colonna è indicato il tempo di refertazione max (intesi come gg.lavorativi) Nella quinta colonna è specificato la tipologia di metodica utilizzata Il presente documento è di proprietà del AUSL IMPERIESE: Riproduzione vietata pag. 2 di 9
MOMicroSRAll2R 29/8/211 Nella sesta colonna sono evidenziate eventuali raccomandazioni 4.2 SIGLE E ABBREVIAZIONI Sigla Descrizione Sigla Descrizione EIA Immunoenzimatica BASP Broncoaspirato ELISA Immunoenzimatica Broncolavaggio IF Immunofluorescenza LCR Liquor IC Immunocromatografia CVC Catetere Venoso Centrale IA Immunoagglutinazione PCR Polymerase Chain Reaction WB Western Blot Rt-PCR Real Time PCR EC Esame colturale EF Esame a fresco EM Esame microscopico Analisi Materiale Contenitore Giorni referto Adenovirus Feci C. feci 3 IC (antigene) Anaerobi coltura Aspergillo antigene (galattomannano) Aspergillo coltura L.pleurico,gastrico,sinoviale, ascitico,peritoneale,colecistico, Mat.bioptico,Ferita,Pus, Ulcera Siero BASP,Espettorato, Metodo Flaconcino Port-a-cul 6 EC Provetta t.rosso Cont. 6 ELISA 7 EC Note Aspergillo coltura T.orecchio,nasale,faringeo E-swab tappo rosa 7 EC Bacillo di Loeffeler coltura Bacillo di Hansen microscopico T.nasale,faringeo E-swab tappo rosa EC T.nasale,Cute E-swab tappo rosa 4 EM Il presente documento è di proprietà del AUSL IMPERIESE: Riproduzione vietata pag. 3 di 9
MOMicroSRAll2R 29/8/211 Bartonella Anticorpi IgG/IgM Batterioscopico Bordetella pertussis coltura Bordetella pertussis (ric. Dna) Bordetella pertussis anticorpi IgG/IgM Borrelia anticorpi IgG/IgM (screening) Borrelia anticorpi IgG/IgM (Western Blot) Campylobacter antigene Campylobacter coltura Chlam.pneumoniae (ric. Dna) Chlam.pneumoniae anticorpi IgG/IgM Chlam.trachomatis anticorpi IgG/IgA Chlam.trachomatis (ricerca Dna) Siero Provetta t.rosso 14 IF T.congiuntivale,vaginale, Vedi contenitori 3 EM LCR,Espettorato,,BASP coltura T.nasale,nasofaringeo E-swab tappo rosa 5 EC T.nasofaringeo Tampone floccato + provetta UTM Siero Provetta t.rosso 8 IF Siero Provetta t.rosso 14 IF Siero Provetta t.rosso 14 WB Feci C.feci 3 IC Feci C.feci 4 EC T.nasofaringeo Tampone floccato + UTM Siero Provetta t.rosso 14 ELISA Siero Provetta t.rosso 8 ELISA T.cervicale,uretrale, oculare Tampone floccato + UTM 5 PCR Parte del test Pneumobacter 5 PCR Parte del test Pneumobacter 7 Rt- PCR Chlam.trachomatis (ricerca Dna) Urina primo mitto, L.seminale,peritoneale 7 Rt- PCR Il presente documento è di proprietà del AUSL IMPERIESE: Riproduzione vietata pag. 4 di 9
MOMicroSRAll2R 29/8/211 C.difficile Tossina A/B Feci C.feci 3 IC+ PCR CMV anticorpi IgM Siero Provetta t.rosso 8 IF Coltura standard Coltura standard Coltura standard T.faringeo,nasale,auricolare, pus, ferita,ulcera,bocca, vaginale,vulvare,glande,retto, tonsillare,lingua,perianale, cute T.lacrimale, congiuntivale, uretrale, nasofaringeo L.peritoneale, pleurico, sinoviale,ascitico amniotico,articolare,drenaggio, pericardico,colecistico,scrotale, gastrico,protesi,punta CVC,Cannula tracheale,bile,mat.bioptico,mat.fistola,emodrenaggio,acqua,b ASP,,L.seminale, Espettorato E-swab tappo rosa 5 EC E-swab tappo arancio 5 EC 5 EC Coltura Liquor LCR Provetta tappo a vite 7 EC rossa Coprocoltura per Feci C.feci 5 EC Salmonella/Shigella Coproleucociti Feci C.feci 2 EF Criptococco antigene Criptococco antigene Siero Provetta t.rosso 7 ELISA LCR Provetta tappo a vite rossa 7 ELISA Cryptosporidium Feci C.feci 4 IC/IF Dermatofiti coltura Unghie,Cute, Capelli Piastra DTM 33 EC Emocoltura Sangue, Sangue da CVC Flaconi FA/FN 7 EC Entamoeba histol.(anticorpi) Siero Provetta t.rosso 14 IF Il presente documento è di proprietà del AUSL IMPERIESE: Riproduzione vietata pag. 5 di 9
MOMicroSRAll2R 29/8/211 Entamoeba histol. (antigene) Feci C.feci 6 ELISA E.coli EHEC tossine Feci C.feci 3 IC E.coli O157 coltura Feci C.feci 4 EC/IC Gardnerella vaginalis T.vaginale, uretrale L.seminale E-swab tappo rosa rosso 4 EC Giardia lamblia Feci C.feci 4 IC Haemophilus influenzae coltura Haemophilus influenzae ric.dna Helicobacter pylori (antigene fecale) Influenza A/B anticorpi G/M Influenza A/B ric. RNA Legionella pneumo. coltura Legionella pneumo. antigene Legionella pneumo. anticorpi Legionella pneumo. ric.dna Leishmania ricerca diretta Leishmania antigene Leishmania anticorpi totali Espettorato,, BASP T.nasofaringeo Tampone floccato + provetta UTM 5 EC Feci C.feci 3 IC Siero Provetta t.rosso 14 IFA T.nasofaringeo T.floccato + UTM 2 Rt- PCR Espettorato,, BASP Urina 5 PCR Parte del test Pneumobacter 7 EC 3 IC Siero Provetta t.rosso 14 IF T.nasofaringeo Tampone floccato + UTM Aspirato Midollare Provetta tappo lilla EM Urina 5 PCR Parte del test Pneumobacter 3 IA Siero Provetta t.rosso 14 IF/IC Il presente documento è di proprietà del AUSL IMPERIESE: Riproduzione vietata pag. 6 di 9
MOMicroSRAll2R 29/8/211 Leptospira anticorpi IgG/IgM Siero Provetta t.rosso 3 IC Listeria monocitog. Feci C.feci 7 EC Listeria monocitog. LCR Provetta tappo a vite 7 EC rossa Listeria monocitog. T.rettale,Tcervicale E-swab tappo rosa 7 EC MAC-MOTT coltura Malaria anticorpi totali Sangue Flacone MB tappo nero 5 EC Siero Provetta t.rosso 14 IF Malaria antigeni Sangue intero Provetta lilla con 1 IC EDTA Miceti coltura Tutti i tipi di mat.biologici Vedi contenitori colt. 5 Micobatteri coltura Micobatteri microscopico Micobatteri ric DNA Micoplasmi urogenitali Micoplasmi urogenitali Morbillo anticorpi IgG/IgM Micoplasma pneumoniae anticorpi IgG/IgM M.bioptico,L.pleurico,,Bron coaspirato,feci,drenaggio,l.g astrico,pus,l.sinoviale, Urine primo mitto,espettorato,lcr,l.perito neale,l.seminale M.bioptico,L.pleurico,,Bron coaspirato,feci,drenaggio,l.g astrico,pus,l.sinoviale,urine primo mitto,espettorato,lcr,l.perito neale,l.seminale,basp,espettorato, M.bioptico,Urine primo mitto,l.pleurico,lcr 65 EC 4 EB 14 Rt- PCR T.endocervicale,uretrale E-swab tappo arancio 4 EC Urina primo mitto, L.seminale,L.peritoneale, L.amniotico 4 EC Siero Provetta t.rosso 8 IF Siero Provetta t.rosso 8 ELISA Il presente documento è di proprietà del AUSL IMPERIESE: Riproduzione vietata pag. 7 di 9
MOMicroSRAll2R 29/8/211 Micoplasma pneumoniae ric.dna Neisseria gonorrhoeae Neisseria gonorrhoeae Neisseria meningitidis T.nasofaringeo L.peritoneale,seminale, amniotico Tampone floccato + UTM 5 PCR Parte del test Pneumobacter 5 EC T.uretrale,cervicale,rettale E-swab tappo arancio 5 EC LCR T.nasale Provetta tappo a vite rossa E-swab tappo arancio 5 EC Norovirus Feci C.feci 6 IC Si esegue su richiesta Risk Manager Ossiuri(scotch test) Scotch Portavetrini 3 EM PAR test Urina 3 EC Parassiti/Protozoi Feci C.feci 4 EM Parassiti/Protozoi Parotite anticorpi IgG/IgM L.gastrico, M.vario, 4 EM Urina primo mitto Siero Provetta t.rosso 8 IF Parvovirus B19 IgM Siero Provetta t.rosso 14 ELISA Pneumocistis carinii,espettorato,basp 5 IF Profilo SNC IgG Siero Provetta t.rosso 8 IFA Ricerca Ab verso microrganismi coinvolti in infezioni del SNC Profilo SNC IgM Siero Provetta t.rosso 8 IFA Ricerca Ab verso microrganismi coinvolti in infezioni del SNC Quantiferon TB Siero Provette dedicate 2 ELISA Rotavirus antigene Feci C.feci 3 IC Il presente documento è di proprietà del AUSL IMPERIESE: Riproduzione vietata pag. 8 di 9
MOMicroSRAll2R 29/8/211 Salmonella Feci C.feci 3 EC Shigella Feci C.feci 4 EC Stafilococcus aureus Str. agalactiae (gr.b) Str.pneumoniae antigene Str.pneumoniae antigene Str. pneumoniae ric.dna T.faringeo, nasale E-swab tappo rosa 3 EC T.rettale,vaginale, vaginorettale,auricolare L.seminale LCR Urina T.nasofaringeo E-swab tappo rosa rosso Provetta tappo a vite rossa rosso Tampone floccato + provetta UTM 3 EC 3 IC 3 IC Str.pyogenes (gr.a) T.faringeo E-swab tappo rosa 3 EC Toxoplasma anticorpi IgM Trichomonas vaginalis Urinocoltura Varicella Zoster anticorpi IgG/IgM Siero Provetta t.rosso 8 IF T.vaginale,uretrale Urine,L.seminale Urina da mitto intermedio,catetere, sacchetto Provetta sterile con fisiologica rosso azzurro/provetta tappo verde 5 PCR Parte del test Pneumobacter 2 EF 4 EC Siero Provetta t.rosso 8 IF Vibrio cholerae Feci C.feci 4 EC Virus HPV Yersinia enterocolitica T.endocervicale T.floccato + UTM 15 PCR Materiale bioptico Feci C.feci 3 EC Il presente documento è di proprietà del AUSL IMPERIESE: Riproduzione vietata pag. 9 di 9
ASL 1 IM PERIESE Kit Tampone cervicale per Chlamydia PCR Tappo rosso Guida ai materiali per la raccolta dei campioni microbiologici Kit T.faringeo,vaginale,rettale,ferita ecc. Tappo Rosa Kit Tampone uretrale per Chlamydia PCR Tappo rosso Tampone cervicale per HPV+UTM Tappo rosso Kit T.uretrale, T.oculare,T.cervicale Tappo Arancio Tampone nasofaringeo pediatrico per PCR+UTM Tappo rosso ATTENZIONE I TAMPONI PER LA PCR SI DIFFERENZIANO PER FORMA DEL TAMPONE
ISTRUZIONE OPERATIVA CORRETTA ESECUZIONE TAMPONE NASOFARINGEO INDICAZIONI AI REPARTI OSPEDALIERI IOBM7R 14/1/213 Per quali ricerche microbiologiche è necessario eseguire il tampone nasofaringeo? Per ricerca del Virus dell Influenza (A,B,A H1N1) Per ricerca Virus Respiratorio Sinciziale (RSV): solo in pazienti pediatrici selezionati Per ricerca patogeni batterici respiratori (Micoplasma pne.,chlamydia pne, Legionella pne., Haemophilus inf., Streptococco pne., Bordetella pert.): in pazienti pediatrici Che materiale serve per eseguire il tampone nasofaringeo? La ricerca del Virus influenzale, del RSV ed il test Pneumobacter per la ricerca dei patogeni respiratori batterici sono tutti test di biologia molecolare Per il prelievo è necessario procurarsi un kit di prelievo tappo rosso (tampone floccato + provettina tappo rosso UTM da 3 ml) Come si esegue il tampone nasofaringeo? Inclinare la testa del paziente di 7 come mostrato in figura ISTRUZIONE OPERATIVA PER AREA DI BIOLOGIA MOLECOLARE
ISTRUZIONE OPERATIVA CORRETTA ESECUZIONE TAMPONE NASOFARINGEO INDICAZIONI AI REPARTI OSPEDALIERI IOBM7R 14/1/213 Introdurre il tampone nella narice fino a raggiungere la parete posteriore del rinofaringe Ruotare il tampone quindi rimuoverlo Inserirlo nella provetta UTM tappo rosso e spezzare l astina ISTRUZIONE OPERATIVA PER AREA DI BIOLOGIA MOLECOLARE