PRE-ANALITICA E DATO DI LABORATORIO. IMPORTANZA E CORRELAZIONE
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1 PRE-ANALITICA E DATO DI LABORATORIO. IMPORTANZA E CORRELAZIONE 01 MARIA CHIARA BALBONI Facilitatore della gestione della qualitàpreanalitica. TSLB Esperto Laboratorio Unico Provinciale Azienda Ospedaliero-Universitaria Polo Ospedaliero di Cona 28 Novembre 2015
2 PROCESSO DIAGNOSTICO 68.2% 13.3% 18.5% 02 % errori Plebani M, Carraro P. Mistakes in a stat laboratory: types and frequency. Clin Chem 1997;43:
3 Variabili preanalitiche- relative al prelievo del campione Possono essere introdotte in ogni momento del processo di prelievo del campione venoso 1 Fase pre-preanalitica 2 Fase preanalitica 03 2a Preparazione del Paziente 2b Tecnica di prelievo del campione 2c Manipolazione, trasporto, conservazione del campione
4 2a. Preparazione del paziente DIGIUNO (8-12 ore) NO Alcool, Zuccheri, Caffè, Fumo Trigliceridi Glicemia Fattore VIII 2a Preparazione del Paziente DIETA ESERCIZIO FISICO (evitare nelle 8-12 ore precedenti) POSTURA (orto-clino statismo) NO ASSUNZIONE FARMACI CPK LDH AST Fattore VIII Hb Calcio Bil Colesterolo Proteine Tot 04 VARIAZIONI DEL RITMO CIRCADIANO (7-10 del mattino) 4
5 2b.Tecnica e prelievo del campione Prevenzione delle infezioni Uso DPI/Idonea preparazione della cute Corretto utilizzo del laccio emostatico 2b Tecniche e prelievo del campione Idonea scelta del materiale per il prelievo Ordine (sequenza) di prelievo delle provette Eccessivo o scarso riempimento delle provette 05 Fonti di emolisi Manipolazione del campione 5
6 Uso errato del laccio emostatico Causa comune di errore preanalitico Sono errori spesso difficili da identificare in laboratorio e sono dovuti a: Tempo troppo lungo di applicazione del laccio emostatico Eccessiva pressione esercitata dal laccio emostatico 06 Implicazioni per la qualità del campione: Emoconcentrazione Reflusso di sangue dalla provetta nella vena del Paziente Attivazione piastrinica dovuta a stasi venosa 6
7 Uso errato del laccio emostatico Ulteriori informazioni sull EMOCONCENTRAZIONE Aumento fino al 14% della concentrazione nel siero delle molecole più grandi (ad es. enzimi, immunoglobuline, bilirubina, albumina, proteine totali, colesterolo, trigliceridi, emoglobina,) ed elementi corpuscolati Riduzione fino al 4% della concentrazione nel siero di cloro, potassio, creatinina, urea, glucosio Vena Capillare Venule 07 Arteriole Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. Samples: From the patient to the laboratory: The impact of preanalytical variables on the quality of laboratory results. 3 rd ed, Wiley-VCH, 2003:
8 Contaminazione da EDTA (in seguito a reflusso di sangue) In una Provetta con EDTA : 1 µlitro di sangue contiene: 0,0089mEq di K Range di normalità del dosaggio del K: 3,5-5,1 meq/l cioè 0,0035-0,0051 meq/ml In una Provetta da siero da 5 ml avrò: da (0,0035x5) cioè 0,0175 a (0,0051x5) cioè 0,0225 meq in paziente sano Aggiungo 1 µlitro di sangue contenente 0,0089mEq di K: (0,0175+0,0089) cioè 0,0264 a (0,0255+0,0089) cioè 0,0344 meq in 5 ml In 1 ml di siero di paziente sano avrò un range: 0,0058-0,00688 meq/ml quindi 5,8-6,88 meq/l 08 1 μl di campione in EDTA il dosaggio del K di circa 2 meq 8
9 CAMPIONE COAGULATO: ERRATO USO DEL LACCIO EMOSTATICO ATTIVAZIONE PIASTRINICA DOVUTA A STASI VENOSA CAMPIONE COAGULATO: COAGULO COAGULO 09 COAGULO
10 CAMPIONI EMOLIZZATI 10
11 CORRETTO RIEMPIMENTO DELLE PROVETTE TAPPO AZZURRO: RIEMPIMENTO CORRETTO: Campione idoneo RIEMPIMENTO SCORRETTO: Campione non idoneo per eseguire i test coagulativi 11
12 12
13 Ordine di prelievo Il motivo per cui può essere utile seguire un preciso ordine (sequenza) di prelievo delle provette (come raccomandato da CLSI 1 ), è di evitare eventuali potenziali errori dei risultati dei test dovuti a contaminazioni incrociate tra gli additivi contenuti nelle provette. 13 Clinical and Laboratory Standards Institute. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture; Approved Standard 6th Edition; H3-A6, Vol. 27, No
14 Ordine di prelievo 14 Colore del tappo Provetta per prelievo Provette ematiche BD Vacutainer (PET) oppure oppure oppure Emocolture -SPS Provetta con sodio citrato* BD Vacutainer SST TM II Advance Provetta con gel separatore Provetta per siero Provetta con eparina BD Vacutainer PST TM II Provetta con gel separatore e con eparina Provetta con EDTA Provetta con fluoruro (per glicemia) 1. CLSI Document H3-A6, Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture; Approved Standard 6th Edition. 2. CLSI Document H4-A5, Procedures and Devices for the Collection of Diagnostic Capillary Blood Specimens; Approved Standard 5 th Edition. 14
15 Esempi di effetti indesiderati dovuti a ordine di prelievo errato 15 I test influenzati da contaminazione con EDTA delle provette contenenti sodio citrato e nelle provette per chimica clinica comprendono: tempo di tromboplastina parziale attivata (aptt( aptt) tempo di protrombina (PT, INR) potassio calcio ferro sierico alcuni saggi enzimatici I test influenzati da contaminazione con eparina delle provette con sodio citrato comprendono: tempo di tromboplastina parziale attivata (aptt( aptt) tempo di protrombina (PT, INR) I test influenzati da contaminazione con fluoruro/potassio ossalato ato ed EDTA delle provette con sodio citrato e delle provette per chimica ca clinica includono: tempo di tromboplastina parziale attivata (aptt( aptt) tempo di protrombina (PT, INR) potassio 15
16 OMOGENIZZAZIONE DEI CAMPIONI 16 16
17 Numero corretto di capovolgimenti 17 Colore del tappo Azzurro Rosso Tappo giallo Verde chiaro/pst Verde Lilla o viola Rosa Grigio Beige Giallo chiaro Arancio Blu Additivo Citrato di sodio sodio 3-4x Attivatore della coagulazione Capovolgiment i 4x 5x Attivatore della coagulazione + gel 5x Eparina + gel 8x Eparina EDTA K2 o K3 EDTA K2 o K3 Fluoruro Ossalato Attivatore della coagulazione CAT ACD Trombina Metalli in tracce 8x 8x 8x 8x 8x 8x 8x 8x. Guida BD Vacutainer alle provette 17
18 Trasporto dei campioni venosi Minimizzare il tempo di trasporto di sangue intero (non centrifugato) per mantenerne inalterata la stabilità Si raccomandano temperature tra 10 e 22ºC, sopra i 35 C devono essere evitate. Alte temperature accelerano il deterioramento dei costituenti ematici. Se non appropriatamente imballato, anche il trasporto ad una temperatura inferiore agli 0 C deve essere evitato poiché fonte di emolisi. In posizione verticale per evitare spargimenti 18 NCCLS H18-A3 Vol. 24 No. 38 PROCEDURE FOR THE HANDLING AND PROCESSING OF BLOOD SPECIMENS ; Approved Guideline 3rd Edition 18
19 Trasporto dei campioni venosi Direttiva CEE 679 del 26/11/1990 Circolare Min.San # 16/1994 Direttiva UNI EN Circolare Min.Sal # 03/ ADR ediz ediz /98 Nelle attività connesse con la spedizione ed il trasporto di campioni diagnostici vanno seguite appropriate procedure per: 1. Garantire la sicurezza degli O.S. coinvolti nelle attività di trasporto 2. Impedire la dispersione di agenti infettanti o potenzialmente tali nell ambiente Il confezionamento deve essere effettuato secondo il sistema a 3 involucri. Deve prevedere la presenza di materiale assorbente e di etichettatura idonea.ilsistema contenitore primario + contenitore secondario deve superare test di caduta e di resistenza 3. far si che il materiale giunga a destinazione nei tempi e nelle condizioni ottimali al fine di poter essere analizzato garantendo la sicurezza per gli O.S. di laboratorio e l attendibilità dell esito. 19
20 Comprendere le ricadute delle variabili preanalitiche sulla qualità dei campioni e quindi sull attendibilit attendibilità dei dati analitici: Ridurre gli errori preanalitici Ridurre le ripetizioni dei prelievi Migliorare l assistenza ai Pazienti Ridurre i costi 20
21 SERVIZIO SANITARIO REGIONALE GRAZIE DELL ATTENZIONE 21
22 22
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