CARIOTIPO ( tipo nucleare ) L insieme completo di tutti i cromosomi metafasici di una cellula Si utilizzano i cromosomi metafasici perche rappresentano la forma piu compatta dei cromosomi degli eucarioti e pertanto sono piu facilmente osservabili al microscopio ottico Il cariotipo e specie-specifico
Numeri cromosomici negli organismi eucariotici. NOME SCIENTIFICO NOME COMUNE NUMERO DI CROMOSOMI* ORGANISMI DIPLOIDI Animali Homo sapiens Uomo 46 Pan troglodytes Scimpanzé 48 Equus caballus Cavallo 64 Bos taurus Bovini 60 Canis familiaris Cane 78 Felis domesticus Gatto 38 Oryctolagus cuniculus Coniglio 44 Rattus norvegicus Ratto 42 Mus musculus Topo domestico 40 Meleagris gallopavo Tacchino 82 Xenopus laevis Rospo 36 Caenorhabditis elegans Nematode 11 (male) /12 ermafrodita Musca domestica Mosca domestica 12 Drosophila melanogaster Moscerino della frutta 8 Piante Pinus ponderosa Pino giallo 24 Pisum sativum Pisello da orto 14 Solanum tuberosum Patata 48 Nicotiana tabacum Tabacco 48 Triticum aestivum Frumento 42 Zea mays Granoturco 20 Vicia faba Fava 12 ORGANISMI APLOIDI Chlamydomonas reinhardtii Alga unicellulare 16 Neurospora crassa Muffa arancione del pane 7 Aspergillus nidulans Muffa verde del pane 8 Saccharomyces cerevisiae Lievito di birra 17 * Per gli organismi diploidi, è indicato il numero cromosomico diploide.
Dimensioni Triturus cristatus HSA Drosophila m. Uomo Triturus cristatus (anfibio) Drosophila melanogaster
p q Telomero i. c. = p p+q
STRUTTURA E MORFOLOGIA DEI CROMOSOMI EUCARIOTICI Rappresentazione schematica del cromosoma eucariotico.
Metacentrico Acrocentrico Sub-metacentrico Telocentrico Classificazione dei cromosomi eucariotici basata sulla posizione del centromero. (I cromosomi sono rappresentati come appaiono dopo la duplicazione in mitosi e in meiosi).
STRUTTURA E MORFOLOGIA DEI CROMOSOMI EUCARIOTICI CENTROMERO Classificazione dei cromosomi in base alla posizione del centromero e alla lunghezza dei bracci: (A) metacentrico; (B) sub-metacentrico; (C) acrocentrico; (D) telocentrico.
Colorazione Giemsa
CARIOTIPO GIEMSA 1-3 gruppo A larghi metacentrici 4-5 gruppo B larghi submetacentrici X-6-12 gruppo C medi metacentrici 13-15 gruppo D medi acrocentrici 16-18 gruppo E relativemente corti metacentrici 19-20 gruppo F corti metacentrici Y-21-22 gruppo G corti acrocentrici
A B C D E F G Giemsa
History of Chromosome Banding Techniques Stain or Banding Technique Investigator Year --------------------------------------------------------------------------------------------------- Q-banding Caspersson, Zech, Johansson 1970 G-banding (by trypsin) Seabright 1971 G-banding (by acetic-saline) Sumner, Evans, Buckland 1971 C-banding Arrighi, Hsu 1971 R-banding (by heat and Giemsa) Dutrillaux, Lejeune 1971 G-11 stain Bobrow, Madan, Pearson 1972 Antibody bands Dev, et al 1972 R-banding (by fluorescence) Bobrow, Madan 1973 In vitro bands (by actinomycin D) Shafer 1973 T-banding Dutrillaux 1973 Replication banding Latt 1973 Silver (NOR) stain Howell, Denton, Diamond 1973 High resolution banding Yunis 1975 DAPI/distamycin A stain Schweizer, Ambros, Andrle 1978 Restriction endonuclease banding Sahasrabuddhe, Pathak, Hsu 1978 --------------------------------------------------------------------------------------------------- Source: Priest, JH. Banding Procedures and Special Stains. In The Cytogenetic Symposia, 1994, B. J. Kaplan and K. S. Dale, Editors. The Association of Cytogenetic Technologists, Burbank, California, 1994.
mostarda di Quinacrina BANDE Q
46 10 9 11 16
mostarda di Quinacrina CARIOTIPO Q
Tripsina + Giemsa BANDE G
Tripsina + Giemsa BANDE G
Tripsina + Giemsa BANDE G
BANDE R Alta temperatura (80-85 C) + Giemsa o Acridina orange
Nota bene: Le bande-g rappresentano regioni cromosomiche che si replicano tardivamente durante la fase S e sono costituite da cromatina piu condensata (LATE REPLICATING CHROMATIN) Le bande-r rappresentano regioni cromosomiche che si replicano durante la prima parte della fase S e sono costituite da cromatina meno condensata (EARLY REPLICATING CHROMATIN)
BANDEGG IO SEL ET TIV O BANDEGG IO DEI CROMOSOM I CBG (bande C) mediante pre -trattament o del vetrino con idrossido di sodi o (NaOH) o bario e colorazione con Giemsa Identif ica le costrizioni pri marie (cen) e secondarie non nucleola ri (h) di 1,9 16 e Y N-banding (ban de NOR) p re-trattamento del vetri no con t riclo roacetico (TCA ) e colorazione con Giemsa Identif ica le cos trizione secondarie nucleol ari (NOR) Ag-N OR-banding (NOR colorazione con AgNO3) Identif ica le costrizioni secondarie nucleola ri (NOR) attive
NaOH o Ba (OH)2 2XSSC Giemsa BANDE C
BANDEGGIO CBG
BANDE NOR TCA + Giemsa Ac. Formico + AgNO3
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