Conteggio differenziale delle cellule somatiche nel latte: dalla teoria alla pratica

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Gregorio Molteni
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1 Conteggio differenziale delle cellule somatiche nel latte: dalla teoria alla pratica Alfonso Zecconi (1) e Diego Vairani (2) Università degli Studi di Milano (1) ; ARAL Lombardia (2)

2 CombiFoss TM 7 La settima generazione di CombiFoss TM Uno strumento nuovo che ci offre l opportunità di analizzare simultaneamente le cellule somatiche totali e differenziali

4 CombiFoss TM 7

5 CombiFoss TM 7 Sviluppata una nuova chimica per colorare le cellule con l utilizzo dell arancio di acridina e di una nuova soluzione tampone

6 Raccolta dati e costruzione database con dati qualitativi e riproduttivi

7 FL 2 Cosa fa la macchina? Analisi del DSCC 94% macrofagi 83% PMN + linfociti

8 Presupposti biologici 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% Sane Infiammate Subcliniche Sarikaya et al epiteliali PMN Macrofagi Linfociti

9 Presupposti biologici SCC/ml % 54% Log 10 SCC/ml Zecconi & Piccinini WBC 2002

10 Il problema principale Quale soglia dobbiamo mettere per DSCC?

11 Cosa abbiamo fatto Abbiamo raccolto ed analizzato i CF di 4 allevamenti a distanza di 7-10 giorni. Complessivamente 4802 campioni Definito valore soglia per SCC a /ml mastite subclinica Verificato relazione con DSCC mediante curva ROC e calcolo valore soglia per DSCC

Valutazione epidemiologica I parametri di un test diagnostico Valore predittivo positivo VPP: probabilità che un soggetto positivo al test (DSCC > soglia definita) sia ammalato (SCC>200.

12 Valutazione epidemiologica I parametri di un test diagnostico Valore predittivo positivo VPP: probabilità che un soggetto positivo al test (DSCC > soglia definita) sia ammalato (SCC> /ml) Valore predittivo negativo VPN: probabilità che un soggetto negativo al test (DSCC soglia definita) sia sano (SCC /ml) Questi valori ci danno quindi la probabilità che un soggetto sia sano o ammalato e quindi ci mettono in condizione di prendere decisioni su basi oggettive

13 Tasso di veri positivi (Sensibilità) Curva ROC / DC / AUC= Tutti i campioni 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0, ,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1 Tasso di falsi positivi (1 - Specificità) Soglia Sensibilità Specificità VPP VPN LR+ LR

14 Tasso di veri positivi (Sensibilità) Curva ROC / DC-1 / AUC= DSCC primi 100 gg 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0, ,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1 Tasso di falsi positivi (1 - Specificità) Soglia Sensibilità Specificità VPP VPN LR+ LR

15 Tasso di veri positivi (Sensibilità) Curva ROC / DC-2 / AUC= Dscc giorni 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0, ,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1 Tasso di falsi positivi (1 - Specificità) DC-2 Sensibilità Specificità VPP VPN LR+ LR

16 Decisioni, decisioni, decisioni Primi 100 gg SCC < DSCC < 66,2 DSCC > 66,2 Sana (97%) Da valutare Oltre 100 gg SCC < DSCC < 69,2 DSCC > 69,2 Sana (89-96%) Da valutare

17 Passo successivo Campioni controlli funzionali a 7-10 gg di distanza Possibilità di verificare stato sanitario animale Sano 2 controlli consecutivi < cellule/ml Mastite subclinica 2 controlli consecutivi > cellule/ml Nuova MS primo < , secondo > cellule/ml Guarito primo > , secondo < cellule/ml Verifica del valore DSCC > soglia nell individuare animali problema

18 DSCC > soglia Positive DSCC (30.5%) SCC < 200 (44%) SCC >200 (56%) Sane (85%) N.I. (15%) Mast subc conf (66%) Guarite (34%)

19 Traduciamo in numeri 17 sane DSCC (150) 104 sane 20 < N.I. 46? 26 > MS 9 guarite

20 La storia continua Valutazione DSCC su quarto in abbinamento con analisi batteriologica (prova asciutta selettiva)

21 Un invito Latte & salute: un associazione da salvaguardare XVI Congresso MCI 9-10 Marzo 2018 Aula Magna Manodori - Università di Modena e Reggio Emilia Via Allegri 15 Reggio Emilia

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