LIP Precipath U plus (10 x 3 ml, per gli USA) Codice 301

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1 Informazioni per ordini Analizzatori su cui le confezioni possono essere impiegate assay ([1] 6 x 20 ml, [2] 6 x 13 ml) Roche/Hitachi MODULAR P assay ([1] 6 x 64 ml, [2] 6 x 42 ml) Roche/Hitachi MODULAR P assay ([1] 12 x 40 ml, [2] 6 x 50 ml) Roche/Hitachi Calibrator f.a.s. (12 x 3 ml) Codice Calibrator f.a.s. (12 x 3 ml, per gli USA) Codice Precinorm U (20 x 5 ml) Codice Precinorm U plus (10 x 3 ml) Codice Precinorm U plus (10 x 3 ml, per gli USA) Codice Precipath U (20 x 5 ml) Codice Precipath U plus (10 x 3 ml) Codice Precipath U plus (10 x 3 ml, per gli USA) Codice PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 ml) Codice PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml) Codice PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml, per gli USA) Codice PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 ml) Codice PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml) Codice PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml, per gli USA) Codice 392 Alcuni analizzatori e alcune confezioni indicati non sono disponibili in tutti i paesi. Per ulteriori informazioni relative agli strumenti, rivolgersi alla propria rappresentanza di Roche Diagnostics. Italiano Informazioni relative al sistema Per l'analizzatore Roche/Hitachi MODULAR P: ACN 731 (non per gli USA), ACN 733 (STAT). Finalità d uso Test enzimatico in vitro per la determinazione quantitativa della lipasi nel siero e nel plasma umani, impiegando analizzatori automatici di chimica clinica di Roche. Sommario 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11 Le lipasi sono glicoproteine con un peso molecolare di Da. Vengono definite come idrolasi trigliceridiche che catalizzano la scissione di trigliceridi a digliceridi, formando successivamente monogliceridi e acidi grassi. Oltre all'α amilasi, le lipasi pancreatiche per molti anni hanno innegabilmente rappresentato i parametri più importanti, in chimica clinica, per la diagnosi differenziale delle patologie del pancreas. A livello internazionale, la determinazione dell attività della lipasi è stata sempre di più riconosciuta grazie alla sua alta specificità e rapida risposta. Dopo una pancreatite acuta, l attività della lipasi aumenta entro 4 8 ore e raggiunge il picco dopo 24 ore, per diminuire dopo 8 14 giorni. Comunque, non esiste una correlazione tra l attività della lipasi determinata nel siero ed il grado del danno al pancreas. Sono stati descritti numerosi metodi per la determinazione della lipasi che determinano la diminuzione del substrato turbidimetricamente o nefelometricamente, o che determinano i prodotti di degradazione. Il presente metodo è basato sulla scissione di uno specifico substrato cromogenico della lipasi, acido 1,2 O dilauril-rac-glicero-3 glutarico- (6 metilresorufina) estere, emulsionato con acidi biliari. L attività dell enzima pancreatico viene determinata specificamente mediante la combinazione di acido biliare e colipasi impiegata nel test. Non si rileva praticamente nessuna attività della lipasi in assenza di colipasi. La colipasi attiva solo la lipasi pancreatica, ma non altri enzimi lipolitici riscontrati nel siero. L alta quantità di colati assicura che le esterasi presenti nel siero non reagiscano con il substrato cromogenico, a causa della carica di superficie altamente negativa. Principio del test 8 Metodo enzimatico colorimetrico Campione e aggiunta di R1 Aggiunta di R2 ed inizio della reazione: acido 1,2 O dilauril-rac-glicero-3 glutarico- (6 metilresorufina) estere 1,2 O dilauril-rac-glicerolo + acido glutarico-(6 metilresorufina) estere acido glutarico-(6 metilresorufina) estere lipasi decomposizione spontanea acido glutarico + metilresorufina Il substrato cromogenico della lipasi, acido 1,2 O dilauril-racglicero-3 glutarico-(6 metilresorufina) estere, viene dissociato dall azione catalitica della soluzione di lipasi alcalina, formando 1,2 O dilauril-racglicerolo e un intermedio instabile, acido glutarico-(6 metilresorufina) estere. Quest ultimo degrada spontaneamente in soluzione alcalina, formando acido glutarico e metilresorufina. L intensità di colore del colorante rosso formatosi è direttamente proporzionale all'attività di lipasi e può essere misurata fotometricamente. Reattivi soluzioni pronte all'uso R1 R2 Tampone BICINA a) : 50 mmol/l, ph 8.0; colipasi (pancreas porcino): 0.9 mg/l; sodio deossicolato: 1.6 mmol/l; cloruro di calcio: 10 mmol/l; detergente; conservante Tampone tartrato: 10 mmol/l, ph 4.16; acido 1,2 O dilauril-racglicero-3 glutarico-(6 metilresorufina) estere: 0.27 mmol/l; taurodeossicolato: 8.8 mmol/l; detergente; conservante a) BICINA = N,N bis(2 idrossietil)glicina Precauzioni e avvertenze Per uso diagnostico in vitro. Osservare le precauzioni normalmente adottate durante la manipolazione dei reagenti di laboratorio. Lo smaltimento di tutti i rifiuti deve avvenire secondo le direttive locali. Scheda dati di sicurezza disponibile su richiesta per gli utilizzatori professionali. Per gli USA: solo per uso con prescrizione. Utilizzo dei reattivi R1: pronto all uso 1 / 5

2 R2: pronto all uso Conservazione e stabilità Componenti della confezione integri: a 2 8 C fino alla data di scadenza indicata Conservare il reagente R2 al riparo dalla luce. R1: 4 settimane aperto e refrigerato sull'analizzatore R2: 4 settimane aperto e refrigerato sull'analizzatore Prelievo e preparazione dei campioni Per il prelievo e la preparazione dei campioni impiegare solo provette o contenitori di raccolta adatti. Solo i tipi di campione elencati di seguito sono stati testati e risultano accettabili. Siero. Plasma: plasma con (litio, sodio o NH 4+ ) eparina. Il plasma con EDTA, ossalato, fluoruro o citrato provoca risultati diminuiti (inibizione dell'attività della lipasi). I tipi di campione elencati sono stati testati impiegando una selezione di provette per il prelievo di campioni disponibili in commercio al momento dell'analisi; non sono, quindi, state testate tutte le provette disponibili di tutte le case produttrici. Alcuni sistemi per il prelievo di campioni di vari produttori possono contenere diversi materiali e in alcuni casi possono interferire sui risultati del test. Quando si trattano i campioni in provette primarie (sistemi per il prelievo di campioni), seguire le istruzioni del produttore delle provette. I campioni contenenti precipitati devono essere centrifugati prima dell esecuzione del test. Stabilità: 12 7 giorni a C 7 giorni a 4 8 C 1 anno a 20 C Materiali a disposizione Per i reattivi, vedere la sezione Reattivi soluzioni pronte all'uso. Materiali necessari (ma non forniti) Vedere la sezione Informazioni per ordini. NaCl (0.9 %) Normale attrezzatura da laboratorio Esecuzione Per una performance ottimale del test, attenersi alle indicazioni riportate nel presente documento per l'analizzatore in questione. Per le istruzioni specifiche dell'analizzatore relative all'esecuzione del test, consultare il manuale d'uso dello strumento. Roche non risponde delle performance delle applicazioni che non sono state validate dalla stessa Roche tali performance devono quindi essere definite dall'utilizzatore. Calibrazione Tracciabilità: questo metodo è stato standardizzato contro il reagente di sistema Roche, impiegando pipette calibrate insieme ad un fotometro manuale, fornendo valori assoluti e l'assorbitività specifica del substrato, ε. S1: NaCl (0.9 %) S2: C.f.a.s. (Calibrator for automated systems) Frequenza di calibrazione Si consiglia di eseguire una calibrazione a 2 punti a cambio di lotto del reattivo se richiesto dai procedimenti del controllo di qualità Controllo di qualità Per il controllo di qualità, impiegare i materiali di controllo indicati nella sezione Informazioni per ordini. In aggiunta, è possibile utilizzare altro materiale di controllo appropriato. Gli intervalli ed i limiti del controllo dovranno essere conformi alle esigenze individuali di ogni laboratorio. I valori ottenuti devono rientrare nei limiti definiti. Ogni laboratorio deve definire delle misure correttive da attuare nel caso che alcuni valori siano al di fuori dei limiti definiti. Per il controllo di qualità, attenersi alle normative vigenti e alle linee guida locali. Se si impiega il materiale di controllo di altri produttori, possono ottenersi valori (3 7 volte) più alti. Calcolo L'analizzatore effettua il calcolo automatico dell'attività dell analita di ciascun campione. Fattore di conversione: U/L x = µkat/l Limiti del metodo interferenze 13 Valutazione: recupero entro ±10 % dei valori iniziali ad un'attività della lipasi di 50 U/L. Ittero: 14 nessuna interferenza significativa fino ad un indice I di 60 per la bilirubina coniugata e non coniugata (concentrazione di bilirubina coniugata e non coniugata: ca. 60 mg/dl oppure 1026 µmol/l). Emolisi: 14 nessuna interferenza significativa fino ad un indice H di 500 (concentrazione di emoglobina: ca. 500 mg/dl oppure 311 µmol/l). Lipemia (Intralipid): 14 nessuna interferenza significativa fino ad un indice L di Non esiste una buona correlazione tra l indice L (corrisponde alla torbidità) e la concentrazione di trigliceridi. In casi molto rari, la gammapatia, particolarmente di tipo IgM (macroglobulinemia di Waldenström), può causare risultati inaffidabili. 15 Ai fini diagnostici, i risultati devono sempre essere valutati congiuntamente con la storia clinica del paziente, con gli esami clinici e con altre evidenze cliniche. Poiché il test per la lipasi è sensibile alla luce, evitare la luce diretta al di sopra dell'analizzatore durante la misura. AZIONI RICHIESTE Programmazione extra lavaggi: è assolutamente necessario effettuare specifiche fasi di lavaggio se certe combinazioni di test vengono eseguite insieme sugli analizzatori Roche/Hitachi. Per ulteriori istruzioni, consultare la versione più recente degli elenchi dei possibili carry over ed il manuale d'uso. Utilizzatori negli USA: per le istruzioni relative alle specifiche fasi di lavaggio, consultare il documento relativo alla programmazione per extra lavaggi (disponibile su usdiagnostics.roche.com) ed il manuale d'uso. È necessario implementare la procedura di extralavaggio (qualora richiesta) prima di riportare i risultati di questo test. Limiti ed intervalli Intervallo di misura Analizzatori Roche/Hitachi 902/MODULAR Intervallo di misura: U/L ( µkat/l) Analizzatori Roche/Hitachi MODULAR Determinare i campioni con attività più alte con la funzione rerun. La diluizione dei campioni con la funzione rerun avviene nel rapporto 1:2. I risultati ottenuti con i campioni diluiti con la funzione rerun vengono automaticamente moltiplicati per il fattore 2. Analizzatore Roche/Hitachi 902 In caso di strumenti senza rerun, diluire i campioni con attività più alte manualmente (ad es ) impiegando NaCl (0.9 %) o acqua distillata/deionizzata. Moltiplicare il risultato per il fattore appropriato (ad es. 2). Limiti inferiori di misura Limite di sensibilità inferiore del test 3 U/L (0.05 µkat/l) Il limite di sensibilità inferiore rappresenta la minima concentrazione misurabile dell analita che può essere distinta dallo zero. Viene calcolato come il valore che si trova 3 deviazioni standard al di sopra dello standard più basso (standard DS, ripetibilità, n = 21). Valori di riferimento 16 Adulti: U/L ( µkat/l) Ogni laboratorio deve controllare l applicabilità dei valori di riferimento alla propria popolazione di pazienti e, se necessario, determinare intervalli di riferimento propri. 2 / 5

3 Dati specifici sulla performance del test 13 Qui di seguito sono riportati i dati rappresentativi delle prestazioni sugli analizzatori. I risultati dei singoli laboratori possono differire da questi. Precisione La precisione è stata determinata usando campioni umani e controlli, eseguiti in base ad un protocollo interno, con ripetibilità (n = 21) e precisione intermedia (3 aliquote per serie, 1 serie al giorno, 11 giorni). Sono stati ottenuti i seguenti risultati: Ripetibilità Media Campione U/L µkat/l CV Precisione intermedia Media % U/L µkat/l Siero umano I Siero umano II Precinorm U Confronto tra metodi Il confronto della determinazione della lipasi impiegando il test colorimetrico per la lipasi di Roche ed il fattore di conversione 3.2 (y) con la determinazione turbidimetrica della lipasi di Roche (x) sull'analizzatore Roche/Hitachi 747 ha prodotto le seguenti correlazioni (U/L): Passing/Bablok 17 Regressione lineare y = 0.295x y = 0.304x r = Numero dei campioni misurati: 87 Le attività dei campioni (metodo turbidimetrico) erano comprese tra 5 e 661 U/L (tra 0.08 e 11.0 µkat/l). Letteratura 1 Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer Verlag Keller H, ed. Klinisch-chemische Labordiagnostik für die Praxis, 2nd ed. Stuttgart/New York: Georg Thieme Verlag 1991: Kazmierczak S, Catrou P, Van Lente F. Diagnostic accuracy of pancreatic enzymes evaluated by use of multivariate data analysis. Clin Chem 1993;39: Steinberg WM, Goldstein SS, Davies ND, et al. Diagnostic assays in acute pancreatitis [Review]. Ann Intern Med 1985;102: Panteghini M, Pagani F, Bonora R, et al. Diagnostic value of four assays for lipase determination in serum: A comparative reevalution. Clin Biochem 1991;24: Tietz NW, Shuey DF. Lipase in serum - the elusive enzyme: An overview. Clin Chem 1993;39(5): Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia PA: WB Saunders Company 1995; Neumann U, Junius M, Batz HG, et al. New substrates for the optical determination of lipase. EP Borgström B. The action of bile salts and other detergents on pancreatic lipase and the interaction with colipase. Biochimica et Biophysica Acta 1977;488: Gargouri Y, Julien R, Bois A, et al. Studies on the detergent inhibition of pancreatic lipase activity. J of Lipid Research 1983;24: Leybold A, Junge W. Importance of colipase for the measurement of serum lipase activity. Adv Clin Enzymol 1986;4: Guder W, Fonseca-Wollheim W, Heil O, et al. Maximum permissible transport and storage times for analysis of blood (serum, plasma), urine and cerebrospinal fluid. DG Klinische Chemische Mitteilungen 1995;26: Kaiser H. Zum Problem der Nachweisgrenze. Fresenius Zeitschr Anal Chem 1965;209: Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: CV % 15 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9): Junge W, Abicht K, Goldmann J, et al. Evaluation of the Colorimetric Liquid Assay for Pancreatic Lipase on Hitachi Analyzers in 7 Clinical Centers in Europe, Japan and USA. Clin Chem Lab Med 1999;37(Special Suppl): Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Regolazione degli strumenti Utilizzatori negli USA: per ulteriori informazioni relative allo strumento, consultare il foglio di applicazione ed il documento relativo alla programmazione per extra lavaggi (disponibile su usdiagnostics.roche.com). Utilizzatori degli analizzatori Roche/Hitachi MODULAR: introdurre i parametri di applicazione nello strumento mediante i codici a barre riportati sul relativo foglio. Analizzatore Roche/Hitachi 902 applicazione normale (10 min) No. <Chemistry> Lipase SMS 1 Test Name Lip 2 Assay Code (Mthd) Rate A 3 Assay Code (2. Test) 0 4 Reaction Time 10 5 Assay Point Assay Point Assay Point Assay Point Wave Leng. (SUB) Wave Leng. (MAIN) Sample Volume R1 Volume R1 Pos R1 Bottle Size Large 15 R2 Volume 0 16 R2 Pos R2 Bottle Size Small 18 R3 Volume R3 Pos R3 Bottle Size Large 21 Calib. Type (Type) Linear 22 Calib. Type (Wght) 0 23 Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc / 5

4 34 Calib. Pos S1 ABS 0 36 K Factor K2 Factor K3 Factor K4 Factor K5 Factor A Factor 0 42 B Factor 0 43 C Factor 0 44 SD Limit Duplicate Limit Sens. Limit S1 Abs. Limit (L) S1 Abs. Limit (H) Abs. Limit Abs. Limit (D/I) Increase 51 Prozone Limit 0 52 Proz. Limit (Upp/Low) Lower 53 Prozone (Endpoint) Expect. Value (L) Expect. Value (H) Instr. Fact. (a) 1 57 Instr. Fact. (b) 0 58 Key setting Dati da introdurre dall'utilizzatore SMS = Selective Mode Solution su R3 Analizzatore Roche/Hitachi 902 applicazione STAT No. <Chemistry> Lipase SMS 1 Test Name Lip 2 Assay Code (Mthd) Rate A 3 Assay Code (2. Test) 0 4 Reaction Time 5 5 Assay Point Assay Point Assay Point Assay Point Wave Leng. (SUB) Wave Leng. (MAIN) Sample Volume R1 Volume R1 Pos R1 Bottle Size Large 15 R2 Volume R2 Pos R2 Bottle Size Large 18 R3 Volume R3 Pos R3 Bottle Size Small 21 Calib. Type (Type) Linear 22 Calib. Type (Wght) 0 23 Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos S1 ABS 0 36 K Factor K2 Factor K3 Factor K4 Factor K5 Factor A Factor 0 42 B Factor 0 43 C Factor 0 44 SD Limit Duplicate Limit Sens. Limit S1 Abs. Limit (L) S1 Abs. Limit (H) Abs. Limit Abs. Limit (D/I) Increase 51 Prozone Limit 0 52 Proz. Limit (Upp/Low) Lower 53 Prozone (Endpoint) Expect. Value (L) Expect. Value (H) Instr. Fact. (a) 1 57 Instr. Fact. (b) 0 58 Key setting Dati da introdurre dall'utilizzatore SMS = Selective Mode Solution su R2 Per ulteriori informazioni, consultare il manuale d uso appropriato per il relativo analizzatore, i rispettivi fogli di applicazione e le metodiche di tutti i componenti necessari. In questa metodica, per separare la parte intera da quella frazionaria in un numero decimale si usa sempre il punto. Il separatore delle migliaia non è utilizzato. Simboli Oltre a quelli indicati nello standard ISO , Roche Diagnostics impiega i seguenti simboli: Contenuto della confezione Reattivo 4 / 5

5 GTIN Calibratore Volume dopo ricostituzione o mescolamento Global Trade Item Number Le aggiunte, cancellazioni o modifiche sono indicate mediante una linea verticale posizionata al margine. 2015, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribuzione negli USA: Roche Diagnostics, Indianapolis, IN Assistenza tecnica alla clientela negli USA: / 5