Neisseria meningitidis. 1 di 33

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Norberto Franchi
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1 1 Neisseria meningitidis 1 di 33

2 EPIDEMIOLOGIA negli USA! Negli ultimi decenni si sono osservati da 0,9 a 1,5 casi per persone per casi all anno. 2 2 di 33

3 PATOGENESI! L uomo è l unico ospite naturale della N. meningitidis! Il nasofaringe è il sito dal quale i meningococchi si trasmettono mediante aereosol o secrezioni 3 di 33

4 MEMBRANA CELLULERE del MENINGOCOCCO Funzione CAPSULA Classificazione Protegge dalla fagocitosi e batteriolisi 13 sierogruppi: A, B, C, E-29,H, I, K, L, M, W-135, X, Y, Z 4 di 33

5 PATOGENESI PATOGENESI dell INFEZIONE MENINGOCOCCICA 1. Colonizzazione del naso-faringe 2. Invasione dell epitelio 3. Invasione del sangue 4 disseminazione Liquor e Tessuti 5 5 di 33

6 COLONIZZAZIONE I meningococchi: 1. superano le difese dell ospite 2. si attaccano alle cellule cilindriche epiteliali non cigliate della mucosa del nasofaringe, 3. si moltiplicano in esse (colonizzazione) 6 di 33

7 MENINGOCOCCEMIA Il 0-15% degli adulti sono portatori nasofaringei asintomatici di ceppi di N. meningitidis, la maggior parte dei quali non sono patogeni. In un numero limitato di persone, la N. meningitidis penetra nella mucosa e arriva nel circolo sanguigno, causando una malattia sistemica. Nella maggior parte delle persone, lo stato di portatore è un processo di immunizzazione che comporta una risposta anticorpale protettiva. 7 7 di 33

8 PATOGENESI Meningococchi vanno incontro ad autolisi con rilascio di DNA e componenti della parete cellulare, che inducono una cascata infiammatoria. 8 di 33

9 ETEROGENECITA ANTIGENICA delle NEISSERIE 9 9 di 33

10 ! Colonizzazione di Neisseria meningitidis nel nasofaringe! Entrata nel circolo sanguigno! Entrata nel liquido cefalorachidiano SEPSI e MENINGITE di 33

11 MANIFESTAZIONI CUTANEE della MENINGOCOCCEMIA: PETECCHIE 11 di 33

12 DIAGNOSI La classica diagnosi di laboratorio di malattia meningococcica su basa su: 1 Esame colturale: scarsa sensibilità, in particolare quando eseguito dopo l inizio di una terapia antibiotica; 2 Esame microscopico dopo colorazione con Gram: è importante e può essere utile; 3 Metodi non colturali: ricerca antigeni polisaccaridici: rapida, specifica, può fornire una diagnosi gruppo specifica. 4 Possibili falsi positivi. 12 di 33

13 ESAME MICROSCOPICO dopo COLORAZIONE con GRAM Neisseria meningitidis (freccia) nel liquor (Gram, x1000). Diplococchi Gram-negativi intracellulari di 33

14 Esame Colturale per N. meningitidis e tipizzazione del sierogruppo B mediante agglutinazione con sieri specifici 14 di 33

15 Ricerca di Antigeni Batterici di 33

16 DIAGNOSI Amplificazione genica (PCR) v Specificità v Identifica organismi non-viventi (in pazienti in terapia) v Rapidità d esecuzione Single Strand RNA 1 cicle = 1 (RNA/cDNA hybrid) 2 cicles = 2 3 cicles= 4 4 cicles = 8 5 cicles = 16 6 cicles = 32 7 cicles = di 33

17 TEMPI DI REFERTAZIONE DELLA DIAGNOSTICA CLASSICA Primi due casi! 15 marzo 2004 ore 05:00: decesso di PO ore 10.00: decesso di DMS! 16 marzo 2004 ore 12:00: autopsie e raccolta campioni! 17 marzo 2004 ore 09:00: isolamento di N.meningitidis da liquor, saliva e tamponi nasali! 18 marzo re 09:00: tipizzazione N.meningitidis tipo B 17 di 33

18 LightCycler Real Time PCR per N.meningitidis di 33

19 Identificazione di Neisseria meningitidis di tipo C 19 di 33

20 CASI CLINICI! Nel marzo 2004 sono deceduti in Genova due bambini di 19 (PO) e 21 (DMS) mesi, che frequentavano lo stesso asilo nido nel comune di S. Olcese! Identico il breve decorso della malattia: comparsa di febbre elevata, evoluzione ingravescente con vomito, petecchie ed exitus. 20 di 33

21 21 21 di 33

22 PROTOCOLLO MEALATTIE INFETTIVE CONTAGIOSE Sulla base del sospetto clinico di malattia infettiva contagiosa, l Autorità Giudiziaria dispone l autopsia nominando un articolato gruppo di periti, al fine di: 1. Identificare l agente infettivo 2. Escludere altre cause di morte: a) avvelenamento b) intossicazione c) altra malattia pediatrica 22 di 33

23 TEAM APPROACH 23 di 33

24 2.B Per esami microbiogici PRELIEVI DA EFFETTUARSI IN CORSO DI AUTOPSIA PRIMA DELLA RIMOZIONE O ALL ATTO DELL APERTURA DEGLI ORGANI: 2.A Per esami tossicologici 2.B Per esami Microbiologici 2.C Per indagini metaboliche 1) un campione di sangue 2) un campione di midollo osseo ottenuto mediante puntato sternale o biopsia della cresta iliaca 3) un campione di contenuto gastrico 4) un campione di feci 5) tampone faringeo 6) tampone bronchiale 7) tampone polmonare 24 di 33

25 Meningite meningococcica (P.O.) Courtesy of Ezio Fulcheri 25 di 33

26 Meningite meningococcica (DM.) Courtesy of Ezio Fulcheri 26 di 33

27 Surrenalite Emorragica Bilaterale Courtesy of Ezio Fulcheri 27 di 33

28 Encefalo e Meningi DIAGNOSI Meningite acuta da Neisseria meningitidis di gruppo B con edema cerebrale, surrenalite emorragica bilaterale e petecchie alla cute ed alle mucose; stasi poliviscerale ed edema polmonare terminale. 28 di 33

29 PROTOCOLLO OPERATIVO DIAGNOSTICO 1. prelievi da effettuarsi prima del riscontro autoptico v v v v Un tampone nasale per ciascuna narice Un tampone orofaringeo Un tampone anale Liquido cefalorachidiano (ottenuto sterilmente con puntura lombare) 2. prelievi da effettuarsi in corso di autopsia prima della rimozione o all atto dell apertura degli organi 3. il riscontro diagnostico con procedura congiunta anatomo-patologica e medico legale 29 di 33

30 20 Casi di Sospetta Meningite Batterica v 20 casi di sospetta meningite batterica: 12 maschi e 8 femmine di età da 4 mesi ad 80 anni v 9 deceduti v Meningococcus meningitidis è stato identificato in 7 pazienti: 3 ceppi erano di tipo B e i rimanenti 5 di tipo C v Streptococcus pneumoniae è stato identificato in 3 pazienti. v Mycobacterium tuberculosis è stato identificato in 1 paziente. v 3 pazienti sono risultati negativi per la presenza di patogeni infettivi: v S.C. è deceduto per una causa violenta non ancora identificata v IJ è deceduto per una polmonite ab ingestis v ZAM di 80 anni è deceduta per decadimento generale 30 di 33

31 PROTOCOLLO OPERATIVO DIAGNOSTICO TEAM APPROACH Microbiologia Università v Claudio Giacomazzi v Maddalena Perotti v Isabella Martini v Jennifer McDermott Anatomia Patologica - Università v G. Gaggero v M. Mora v Ezio Fulcheri Malattie Infettive Università v Claudio Viscoli v Matteo Bassetti v Gabriella Pagano Medicina Legale Università v Benedicta Astengo v Francesco Ventura v A. Gianelli Castiglione 31 di 33

32 DOMANI: MENINGITIDIS MULTIPLEX DETECTION! La MENINGITE è UNA DELLE MALATTIE PIU AGGRESSIVE! PUO ESSERE FATALE IN ORE! SEBBENE I SINTOMI PRECOCI SIANO QUELLI DI PATOLOGIE AUTOLIMITATE QUALI INFLUENZA O RAFFREDDORE 32 di 33

33 MENINGITIDIS MULTIPLEX DETECTION 1.Streptococcus pneumoniae 2. Neisseria meningitidis 3. Streptococcus gruppo B 4. Haemopjlus influenzae 5. Listeria monocytogenes 33 di 33

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