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13 TIBC Total iron binding capacity UIBC Unsatured Iron-Binding Capacity

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15 Sideremia La sideremia è soggetta ad un ritmo circadiano, con valori più bassi in serata (determinazioni al mattino, dopo 12 h di digiuno e sospensione di terapie marziali da almeno 24-48h) V.N. = µg/dl Circa 10 µg/dl in meno nella donna E elevata nei neonati, ma si abbassa ai valori dell adulto dopo i tre mesi Nell anziano = µg/dl Sideruria < 1mg/24h

16 Sideremia Metodo spettrofotometrico Il Ferro Viene liberato dalla transferrina per reazione con il cloridrato di guanidina, in acetato a ph5 Viene ridotto a fe2+ con acido ascorbico Reagisce con la ferrozina, formando un complesso chelato colorato in rosso, la cui intensità viene letta spettrofotometricamente a 560 nm Note: non utilizzare sieri emolizzati ed usare eparina come anticoagulante

17 Sideremia Metodo di riferimento Misura elettrochimica: Solubilizzazione delle sieroproteine, mediante forte acidificazione (24% HCL 6M), che mantiene anche lo ione allo stato ridotto Lettura della differenza di potenziale nella cella di reazione contenente due elettrodi di grafite Precisione = 1.2% Linearità = + 2% in un range di µg/dl Interferenze = trattamenti con Fe destrano (anemie) e sulfasalazina

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21 RECETTORE SOLUBILE DELLA TRANSFERRINA Ø Utile nella diagnosi differenziale delle anemie da malattie croniche rispetto alle anemie da carenza di ferro. Ø Parametro indipendente dallo stato infiammatorio Campione: siero, plasma Evitare campioni lipemici ed emolizzati Metodo di riferimento: non disponibile Metodologie routinari: EIA, ELISA, turbidimetria, nefelometria

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23 TIBC (Total iron binding capacity) Quasi tutto il ferro circolante è legato alla transferrina, il cui ruolo fisiologico può essere valutato in base alla quantità di Fe che essa è capace di legare (TIBC). Normalmente 1/3 dei siti della transferrina sono saturati dal Fe. I metodi per il dosaggio della TIBC si basano su: Saturazione della transferrina in eccesso di ferro e a ph alcalino (ph=8) Precipitazione del Fe in eccesso con carbonato basico Dosaggio del Fe del surnatante, con i metodi utilizzati per il dosaggio della sideremia

24 TIBC v.n. = µg/dl nell adulto Nei bambini e nell anziano sono più bassi (in media 70 µg/dl in meno) La TIBC non presenta differenze significative nei due sessi e non ha ritmo circadiano Note per la determinazione: Le proprietà adsorbenti del carbonato di magnesio non sono costanti, quindi ricontrollare la qualità del reagente ad ogni approvvigionamento Il carbonato di magnesio può rimuovere anche Fe dalla transferrina I campioni di siero sono stabili per 4 giorni a 25 C e per una settimana a 4 C

25 TIBC La TIBC aumenta in corso di: Anemie sideroprive Gravidanza Utilizzo di contraccetivi orali La TIBC diminuisce in corso di: Diminuita o alterata sintesi proteica (digiuno, cirrosi, malattie renali croniche, malattie infettive, tumori) Perdita di proteine (nefrosi)

26 Saturazione della transferrina % di saturazione = sideremia x 100 v.n. = 20-45% TIBC UIBC (unsatured iron-binding capacity) = TIBC - sideremia

27 UIBC (Unsatured Iron-Binding Capacity) Aggiunta al siero una soluzione tamponante* contenente una concentrazione di Ferro definita, per la saturazione dei siti di legame per la transferrina Riduzione a Fe 2+ con riducente Il Ferro non saturato presente in eccesso reagisce con il cromogeno ferrozima UIBC = [ ] Fe definita - [ ] Fe in eccesso * Tampone contiene tiourea (complessa il rame)

28 UIBC Fe 2+ + Transferrina Transferrina Fe 3+ + Fe 2+ (eccesso) Tampone alcalino Fe Ferrozima Ferro-Ferrozima UIBC = Fe 2+ definita - Fe 2+ (in eccesso) TIBC = Fe rro sierico + UIBC

29 Sideruria in spettrofotometria di assorbimento atomico di fiamma (FAAS) La cella di lettura è una fiamma, nella quale l alta temperatura raggiunta (circa 2000 C) provoca la dissociazione termica della sostanza in esame, tale da produrre una nube di atomi allo stato fondamentale. Una radiazione monocromatica, passando attraverso la fiamma, subisce un decremento di intensità, proporzionale alla concentrazione dell elemento presente. La determinazione si esegue su urine delle 24 h acidificate. Le urine devono essere limpide È necessario allestire una curva di taratura su urine Il test è comunque poco sensibile

30 Iposideremia Anemia ipocromica, microcitica, sideropriva da: Insufficiente introduzione di ferro Perdita prolungata per emorragie croniche Insufficiente assorbimento (acloridia nei gastroresecati, diarrea cronica, steatorrea) Aumentata necessità (gravidanza, allattamento) Accumulo di ferro nello SRE, in corso di malattie infettive croniche

31 Ipersideremia Eritropoiesi depressa: anemia aplastica, anemia megaloblastica Anemia emolitica Epatite acuta Emosiderosi Emocromatosi (difetto congenito dell apoferritina intestinale, con aumentato assorbimento Ipersideruria In corso di emocromatosi e nei pazienti affetti da morbo di Cooley in trattamento marziale

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