Sicurezza & catena di custodia Dott. Daniele Prucher Dott.ssa Paola Bigongiari
Diagnosi a valenza medico legale Human Performance Forensic Toxicology Determina l assenza o a presenza di alcool etilico,sostanze stupefacenti o farmaci e determina il loro ruolo nella modificazione delle prestazioni e dei comportamenti dell uomo Post -Mortem Forensic Toxicology Determina l assenza o la presenza di farmaci, dei loro metaboliti o sostanze chimiche come ad esempio l etanolo o atre sostanze tossiche ( droghe etc.) nei fluidi biologici o nei tessuti umani e valuta il loro ruolo come fattore determinante o contributivo alla causa di morte Idoneità alla guida Mansioni lavoratori a rischio Porto d armi Idoneità a specifiche norme concorsuali Affidamento di minori Annullamento di matrimoni Etc Avvelenamento Incidenti Etc
Matrici biologiche Human Performance Forensic Toxicology Post -Mortem Forensic Toxicology Sangue Urina Capelli Saliva Sudore Cervello Fegato Sangue periferico Sangue cavità cardiache Umor vitreo Bile Urine Contenuto gastrico
Linee guida Tra i tossicologi forensi il percorso verso la definizione di linee guida che garantissero la qualità delle prestazioni tossicologiche al di là dell esperienza dei singoli operatori nasce negli Stati Uniti nel 1991 dove furono pubblicati due documenti: The Forensic Toxicology Laboratori Guideline (Guidelines e Appendix). Questi documenti furono sviluppati in un primo tempo per regolare l analisi forense sulle urine, in seguito nel 1996 l American Board of Forensic Toxicology lanciava il Forensic Tossicology Accreditation Program basato sulle linee guida SOFT/AAFS, il documento finale fu redatto ed adottato e l ultima versione disponibile è quella del 2006. In concomitanza il Gruppo Tossicologi Forensi della Società Italiana di Medicina Legale e delle Assicurazioni (GTF SIMLA) nel 1998 iniziò un percorso in collaborazione con SSN che portò alla pubblicazione delle Linee guida per i laboratori di analisi delle sostanze di abuso in campioni biologici la cui revisione finale è stata data alle stampe nel mese di giugno 2007. Nel 2006 fu pubblicato dall AGSA (Swiss Working Group for Drugs of Abuse Testing Guidelines) un documento intitolato Drugs of Abuse Testing Guidelines supportato dal lavoro delle maggiori istituzioni pubbliche svizzere.
Catena di custodia - AGSA
Screening & Conferma (AGSA)
Il laboratorio Accesso Limitato e documentato Personale non autorizzato Le persone dovrebbero essere accompagnate e registrate
Campioni Prelievo Assicurare accessibilità solo a personale autorizzato Il soggetto deve lavarsi le mani prima di acceder al locale del prelievo Per i prelievi di urine avere la possibilità di una osservazione diretta Non disponibilità di fonti o materiale adulteranti (i.e. Acqua, sapone, disinfettanti o detergenti in genere) Procedure di campionamento Devono definire quantità minime Aliquote sufficienti per l esecuzione delle analisi di screening, conferma e revisione Contenitori necessari al prelievo debbono essere integri e sigillati
Campioni Ricevimento Firmato dalla persona che riceve il campione e al minimo deve essere registrata la data di ricevimento Etichettatura Il campione deve essere etichettato con il nome del paziente, caso, tipo di materiale biologico (i.e. urine, sangue etc.), numero univoco di identificazione, data prelievo, identificazione della persona che ha eseguito il prelievo e del responsabile dello stesso. Conservazione Devono essere previsti frigoriferi con chiusura di sicurezza (i.e. chiave) per lo stoccaggio a breve e a medio e lungo termine Quota da analizzare entro 48 ore frigo +4 C Analisi conferma /revisione freezer temperatura -20 C
Matrici quantita Aliquote n.provette (10ml) Matrice 3 da 2 provette 6 urina 3 da 1 provetta 3 sangue
Catena di custodia La catena di custodia è la procedura che accompagna il campione e fornisce notizie sul prelievo, sul trasporto, e sulla conservazione. E una procedura fondamentale che garantisce: l identità del campione l integrità del campione la conservazione corretta del campione a disposizione per le contro-analisi
Modello catena custodia Identificazione struttura Identificazione paziente Identificazione univoca aliquote Dichiarazione di conformità del prelievo dell interessato Data: Ora del prelievo: Struttura:. Medico: Firma: Io sottoscritto/a Nato/a Il: Nazionalità: Documento: n Rilasciato da: il: Codice Fiscale Aliquota Urina Sangue A B C Prelevato ed etichettato da 1 : Altro Note I campioni, sigillati devono essere conservati a +4 C e consegnati il più velocemente possibile all U.O. Biochimica Clinica che provvederà a conservarli in freezer a -70 C per 1 anno a disposizione dell autorità per le analisi di conferma. Urina: 10ml riempita per 9ml Sangue: 10ml vacutainer contenente Floruro Sodio/ Ossalato Potassio Firma: Dichiaro che le etichette identificative sono correttamente compilate e da me confrontate. Tutto il materiale utilizzato per il campionamento era integro, chiuso/sigillato. I prelievi sono stati suddivisi, etichettati e sigillati in mia presenza. Firma dell interessato 2 Firma: Operatore sanitario al campionamento NOTE PER IL LABORATORIO Identificazione del trasporto CONSEGNA IN LABORATORIO Consegnato per il trasporto in laboratorio Data: Ora: Consegnato in laboratorio Data: Ora: DA (nome cognome) A (nome cognome) Motivazione data ora integro SI NO Firma consegna Firma ricevente
Contenitori.. URINE Contenitore di prelivo SANGUE Vacutest 10ml NaF + K2Oxalate URINA Vacutest 10ml NaF Sangue - Urine Etichetta sicurezza amovibile
Contenitori
Abuso alcolico Indicatori di uso acuto breve termine occasionale Alcolemia - BrAC - BAC - Alcoluria Marcatori di abuso alcolico cronico γgt γ-glutamyl transferase MCV Mean Corpuscolar Volume AST/ALT Aspartate-amino Transferase / Alanine-amino Transferase 5HTOL/5HIAA 5-Hydroxy-Triptophenol/ 5-HydroxyIndolacetc Acid Addotti acetaldehyde FAEE Fatty Acid Ethyl Esters EtG Ethyl Glucuronide CDT Carbohydrate-Deficient Transferrin
Dosaggio Etanolo Sangue Plasma Siero Urina Metodo enzimatico Metodo Gascromatografico con spazio di testa R-OH + NAD ADH NADH + acetaldeide
GC Schema a Blocchi + + He Air H 2
Metodo di conferma Gascromatografico Spazio di testa (NH 4 ) 2 SO 4 Sangue
VEQ 2008 Media[g/l] 0,5 0,49 0,48 0,47 0,46 0,45 0,44 0,43 0,42 Media [g/l] 0,45 EMIT 1 ENZIMATICO Alcolemia Campione n 1 0,32 0,880,32 0,32 0,49 1,65 1,62 0,86 0,31 0,84 1 0,84 1,6 0,81 0,98 1,55 0,82 0,3 0,96 1,55 0,96 0,8 0,29 1,5 0,94 0,78 0,92 0,76 0,77 0,28 1,45 0,9 0,74 0,27 1,4 0,88 0,45 0,72 1,35 0,86 0,26 0,84 1,3 0,82 Media [g/l] Media [g/l] EMIT 2 EMIT Media [g/l] 3 Alcolemia Alcolemia Campione campione n 2 n 3 Alcolemia Campione n 4 Alcolemia campione n 5 EMIT ENZIMATICO 4 ENZIMATICO ENZIMATICO DRY CHEMISTRY ENZIMATICO EMIT 5 0,47 ENZIMATICO DRY CHEMISTRY GASCROMATOGRAFIA 0,86 0,28 ENZIMATICO DRY ENZIMATICO CHEMISTRY 0,95 1,43 ENZIMATICO DRY CHEMISTRY GASCROMATOGRAFIA REA GASCROMATOGRAFIA 0,49 0,82 0,28 ENZIMATICO GASCROMATOGRAFIA DRY CHEMISTRY REA 0,87 0,31 1,60 0,88 REA (vuoto) REA GASCROMATOGRAFIA 0,50 1,64 0,92 (blank) Totale (vuoto) 0,30 (vuoto) REA 1,00 1,56 Totale Totale (vuoto) 0,96 Totale
Grazie per l attenzione