VALIDAZIONE DI PARAMETRI EMATOCHIMICI E COMPORTAMENTALI IN MAMMIFERI SELVATICI MANTENUTI IN CONDIZIONI DI ALLEVAMENTO, CATTIVITÀ E A VITA LIBERA.

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1 VALIDAZIONE DI PARAMETRI EMATOCHIMICI E COMPORTAMENTALI IN MAMMIFERI SELVATICI MANTENUTI IN CONDIZIONI DI ALLEVAMENTO, CATTIVITÀ E A VITA LIBERA. Ricerca finanziata dal Ministero della Salute, Dipartimento della Sanità Pubblica Veterinaria, della Sicurezza alimentare e degli Organi Collegiali per la Tutela della Salute Stefano Giacomelli Torino 16/12/2014

2 Obbiettivi Identificare le analisi ematologiche più utili per valutare le condizioni di allevamento, gestione e recupero di ungulati selvatici Fornire al laboratorio di biochimica clinica IZSLER gli strumenti per eseguire tali analisi (creazione range di riferimento, Validazione metodiche automatizzate)

3 Obbiettivi Identificare metodiche e parametri etologici in grado di fornire al clinico uno strumento per la valutazione del benessere

4 Nei C.R.A.S. il capriolo è l ungulato di più frequente riscontro nei cras che hanno collaborato Ultimo tentativo di creare degli intervalli di riferimento risale agli anni 80 (Ursache)

5 Punti critici Trovare una popolazione sana Alterazioni parafisiologiche nella popolazione riferimento dovute alla cattura ed alla manipolazione. Avere un sufficiente numero di animali sani (>40)

6 Popolazione di riferimento Caprioli campionati in occasione di catture pre-rilascio in recinti di ambientamento Cattura tramite reti verticali e battuta 64 caprioli sani catturati in 6 occasioni diverse

7 Count Intervalli di riferimento Calcolati per 43 valori ematochimici (linee guida IFCC) per il laboratorio di biochimica clinica IZSLER Emocromocitometrico Biochimica clinica Endocrinologia Immunologia AlbuminaBoxCox Observed distribution Fitted distribution Reference limits 90% CI

8 PC2 (4,9%) PC2 (4,9%) Analisi in base all anamnesi Popolazione di riferimento (64) VS animali ammalati (44) PC1 vs PC2 Emoglobina 0,507 Granulociti eosi rincorsa 8,665 int Eritrociti (RBC) Granulociti eosi terapia anaplasma Ematocrito (HCT) Ampiezza distrib Emoglobina globu Volume globulare Concentrazione m Trigliceridi imprintato starvation -0,29 0,226 cattura meccanic -2,91 8,833 herpes batt trauma -0,25-3,69 PC1 (11,2%) PC1 (11,2%) cattura meccanica cattura chimica terapia trauma infezione enteriti

9 Sensitivity Sensitivity Alcuni parametri aumento: Infezioni (polmoniti, ascessi) WBC, linfociti, Aptoglobina Score= 3,036 Aptoglobina AUC= 86 % CutOff = 1,38 Sensitivity = 83% Specificity = 81% diminuzione: RBC, HGB, HCT, Albumina, A/G Case Control 1 -Specificity Affezioni del digerente (E. coli, Clostridium spp.) aumento: diminuzione: Aptoglobina, Nefa, Neutrofili, WBC, Urea, Creatinina Albumine, Globuline, Linfociti Score= 3,631 Case Albumina/Globuline (A/G) Control 1 -Specificity AUC= 81 % CutOff = 0,48 Sensitivity = 100% Specificity = 76% Parassitosi (Tricostrongylidae, Trichuridae) aumento: diminuzione: Eosinofili Albumine, HCT, HGB, RBC

10 Capriolo traumatizzato 20 animali ricoverati per cause traumatiche Prelievo effettuato durante la terapia 10 sopravvissuti (gruppo terapia) 10 deceduti (gruppo trauma)

11 PC2 (1,6%) PC2 (1,6%) Trauma Vs terapia Creatinina PC1 vs PC2 0,784 Lattato deidroge PC1 vs PC2 0,587 trauma Albumina Eritrociti (RBC) Emoglobina -0,35 0,333-2,71 2,978 Ampiezza distrib Cortisolo terapia Ematocrito (HCT) Creatinchinasi Linfociti -0,87-0,53 PC1 (25,5%) PC1 (25,5%) Variable Map Log(P) -3,494 Cortisolo Monociti % Creatinchinasi Concentrazione media emoglobina globulare (MCHC) Fosforo Monociti Piastrine (PLT) Globuline Leucociti (WBC) Ampiezza distribuzione eritrocitaria (RDW) Albumina Linfociti Eritrociti (RBC) Emoglobina Ematocrito (HCT) 0-3,494 Down-regulation << Average ratio >> Up-regulation

12 Sensitivity Sensitivity Sensitivity Trauma Vs terapia Score= 5,831 Eritrociti (RBC) Score= 8,044 Ematocrito (HCT) AUC= 90 % CutOff = 49,2 Sensitivity = 90% Specificity = 90% AUC= 86 % CutOff = 11,4 Sensitivity = 100% Specificity = 70% Case Control 1 -Specificity Case Control 1 -Specificity Score= 6,613 Emoglobina AUC= 90 % CutOff = 17,2 Sensitivity = 90% Specificity = 90% Esame emocromocitometrico Case Control 1 -Specificity

13 Sensitivity Sensitivity Trauma Vs terapia Score= 1,719 Creatinchinasi Tempo trascorso prima del recupero!! AUC= 69 % CutOff = 879 Sensitivity = 70% Specificity = 70% Case Control 1 -Specificity Score= 7,699 Cortisolo AUC= 92 % CutOff = 8 Sensitivity = 90% Specificity = 100% Case Control 1 -Specificity

14 Osservazioni etologiche Effettuate in 4 differenti recinti 7 Ore e 50 minuti totali di osservazione Metodo Focal Animal Sampling 1 popolazione di animali non recuperabili perchè confidenti 1 popolazione di animali in riabilitazione 2 popolazioni in pre-ambientamento con differenti arricchimenti ambientali (piantumazione di biancospino)

15 Etologia 2,5 * Alimentazione aerea Allerta in stazione * P<0,05 Kruskar Wallis 2 1,5 1 0,5 Coricato at aa m als si di sg ag ic ia v rl rs ald 0 Popolazione confidente Recinto di ambientamento (Differenti arricchimenti ambientali) Animali in cura

16 Casi etologici particolari

17 Conclusioni I test biochimico clinici possono essere un utile strumento per la diagnosi e il monitoraggio della terapia Lo stress causato dalla manipolazione va calcolato nell interpretazione dei valori Caprioli in diversa condizione fisica e psicologica mostrano comportamenti differenti L arricchimento ambientale di tipo alimentare con arbusti a basso fusto è ben utilizzato dai caprioli oltre che utile da un punto di vista sanitario (Vercruysse, 1983)