Eziologia. La peste europea è una malattia della covata causata da un agente microbico spesso associato ad altri batteri, specifici od occasionali.

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1 LA PESTE EUROPEA

2 Eziologia La peste europea è una malattia della covata causata da un agente microbico spesso associato ad altri batteri, specifici od occasionali. Agente specifico: Melissococcus plutonius (anaerobio obbligato) Si associano ad esso: Paenibacillus alvei, ed Enterococcus faecalis la loro presenza e la forte quantità (spt. del P. alvei e dell E. faecalis) possono essere considerati indici di peste europea; aggravano la sintomatologia del M. plutonius Ma possono anche essere presenti: Bacillus laterosporus ed Achromobacter eurydicae

3 Melissococcus plutonius

4 Agente eziologico: Melissococcus plutonius

5 PATOGENESI Sono colpite le larve al primo stadio di sviluppo nei primi 4 giorni di vita. L infezione avviene per via orale e si localizza a livello intestinale. La larva muore prima che la celletta venga opercolata; in casi gravi può manifestarsi anche in cellette opercolate.

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7 MALATTIA STAGIONALE Compare solitamente in primavera/inizio estate quando la covata è nel periodo di maggiore sviluppo. E caratterizzata da un andamento benigno con tendenza a regredire ed a guarire spontaneamente con la stagione di raccolta e l aumento del numero delle operaie. Esiste infatti una resistenza genetica dell ape italiana a tale patologia

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10 La malattia colpisce principalmente la covata non opercolata provocando la morte delle larve 1-2 giorni prima che vengano opercolate

11 L identificazione della malattia tramite la sola osservazione dei segni clinici sul campo non è attendibile in quanto altre cause possono concorrere alla morte delle larve Le larve colpite all inizio si presentano di colore bianco opaco Contorte, incurvate con il dorso verso l apertura dalla celletta, appiattite contro il fondo della celletta

12 Successivamente le larve assumeranno un colore giallo, fino al bruno più o meno scuro (sempre in funzione dei batteri concorrenti a dare il quadro lesivo)

13 DIAGNOSI IN APIARIO Osservazione della covata Test EFB (Vita Europe) utilizzare 2-3 larve per Kit

14 DIAGNOSI IN APIARIO Striscio su vetrino di larva (contenuto interno) da inviare al laboratorio per le colorazioni

15 Diagnosi di laboratorio

16 Diagnosi di laboratorio (1) colorazioni istologiche a partire da larve (STRISCIO DELLA LARVA SUL VETRINO) Colorazioni di Gram o Carbol fuxina - larve non opercolate: Melissococcus plutonius si evidenzia in cocchi Gram +, lanceolati, a coppia, che formano piccole catenelle o piccoli ammassi; - larve opercolate: si vedono, oltre al M. plutonius, anche le spore del Paenibacillus alvei (si vede la parete delle spore, come fossero in trasparenza)

17 Colorazione gram striscio di intestino larva non opercolata : Cocchi lanceolati, in corte catene, accoppiate ed in piccoli ammassi

18 Cocchi isolati, a coppia, spore P. alvei COVATA OPERCOLATA Positiva Kit EFB

19 Colorazione gram striscio di intestino larva non opercolata : Cocchi lanceolati gram positivi, in coppia, in piccoli ammassi, bacilli gram positivi.

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21 Diagnosi di laboratorio (2) isolamento su terreno colturale Isolamento del Melissococcus plutonius: si utilizza agar Bailey dopo incubazione in anaerobiosi per 3-4 giorni a 35 C (anche una piastra in termostato a temperatura classica ed aerofilia per vedere se eventualmente cresce il Paenibacillus alvei) e successiva colorazione con Nigrosina (si può osservare di nuovo il tipico aspetto).

22 DIAGNOSI DI LABORATORIO Colonie cresciute su agar Bailey dopo 4 giorni di incubazione in anaerobiosi a 35 C

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25 Colorazione nigrosina 5% colonie di Melissococcus plutonius cresciute su agar Bailey

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27 Grazie dell attenzione

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