Streptococcus equi subsp. equi (S. equi) Adenite equina (Strangles)

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1 Silvia Preziuso Facoltà di Medicina Veterinaria Università di Camerino

2 Streptococcus

3 Streptococcus equi subsp. equi (S. equi) Adenite equina (Strangles)

4 Adenite equina (Strangles) Mal. infettiva contagiosa degli equini: prime vie respiratorie e linfonodi Trasmissione per via respiratoria Problema: animali portatori asintomatici

5 Prima localizzazione: prime vie respiratorie cripte tonsillari da Timoney JF, 2004 Segue rapido trasporto ai linfonodi Tasche gutturali

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7 Patogenicità: capsula acido jaluronico streptochinasi (plasminogeno->plasmina) streptolisina S (emolisi) peptidoglicano pyrogenic mytogens (SePE-H, SePE-I,...) proteine di superficie (SeM,...) fibronectin binding protein...

8 Complicazioni Bastard strangles : diffusione in sedi diverse con formazioni ascessuali Porpora emorragica : flogosi immunomediata a livello dei capillari, petecchie sulle mucose, edemi.

9 75% cavalli guariti: solida immunità 25% cavalli guariti: può reinfettarsi

10 I portatori In >50% focolai alcuni cavalli rimangono portatori per permanenza prolungata di S. equi nelle tasche gutturali Tamponi nasofaringei batteriologicamente negativi per 2-3 mesi (lavaggi delle tasche gutturali positivi), poi nuovamente positivi per escrezione respiratoria = contagio

11 S. equi nell uomo 2003: Canada, meningite in un 14enne. No altre segnalazioni

12 Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (S. zooepidemicus)

13 S. zooepidemicus nel cavallo Alta omologia genomica con S. equi Opportunista? Fattori predisponenti? Isolato da casi simil-adenite flogosi prime vie respiratorie ascessi linfonodali Isolato da articolazioni, polmone, tamponi vaginali, uterini, latte, cute Molti fattori di patogenicità comuni a S. equi, no SeM ed esotossine SePE-I e H Pochi studi nel cavallo

14 S. zooepidemicus nell uomo Numerose segnalazioni nell uomo Responsabile di polmonite, artrite, endocardite, glomerulo-nefrite postfaringite, meningite; talvolta letale. Zoonosi? Problema di sanità pubblica? 2006: descrizioni di trasmissione con formaggio!!!

15 Gran Canaria: batteriemia, artrite settica, polmonite e meningite in 15 pazienti (47-86a) per ingestione di queso fresco. Isolamento di S. zooepidemicus dal latte delle bovine in azienda produttrice Finlandia: setticemia, artrite settica in 7 pazienti per ingestione formaggio di capra. Isolamento di S. zooepidemicus in azienda da formaggio, latte di massa, tamponi faringei delle capre

16 Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis (S. equisimilis)

17 S. equisimilis nel cavallo Poco considerato in medicina veterinaria Normale habitat: cute e mucose del cavallo (?) Segnalazioni di isolamenti da: placente, ascessi linfonodali, casi simil-adenite Poco studiato Poche informazioni su fattori di patogenicità e su patogenesi

18 S. equisimilis nell uomo Responsabile di faringite, artrite reattiva, osteomielite, endocardite, shock settico anche letale. Zoonosi? Isolato da cani con tonsillite, con forme simil-adenite e da feti abortiti Isolato da suini con endocardite

19 Diagnosi S. equi S. zooepidemicus S. equisimilis

20 Indiretta Test sierologici Diretta Esame batteriologico Polymerase Chain Reaction (PCR)

21 Test ELISA Per S. equi Rileva anticorpi > 7 giorni da infezione Antigene test: proteina SeM Applicazioni: screening d allevamento valutazione titolo post-vaccinale Analisi effettuata in Kentucky (U.S.A.)

22 Campionamento per diagnosi diretta Materiale patologico: tamponi nasofaringeo vaginale-uterino cutaneo liquido di lavaggio delle tasche gutturali aspirato linfonodale latte tessuti (polmone, linfonodi, ecc.) Conservazione 4 C e analisi entro 24-48h (per esame batteriologico se non in terreno di mantenimento)

23 Esame batteriologico!! %& '((& '( "# $ '(

24 Polymerase Chain Reaction (PCR)! %& ) * + $,-./ $ #* + $ '/ ) #,

25 Multiplex-PCR PCR in cui vengono utilizzate CONTEMPORANEAMENTE più coppie di primer specifiche per più batteri: S. equi + S. zooepidemicus S. equisimilis S. equi S. zooepidemicus + S. equisimilis + controllo interno (esclude inibenti) Nello stesso tempo si ottiene il risultato per 3 batteri diversi

26 Metodi diretti a confronto!""#$% % $% Acquisizione ceppo x antibiogramma, valutazioni biochimiche, conservazione No limitato a specifici batteri Distinzione batteri vitali da morti & '() Più sensibile Più rapido No necessità campione fresco Meno spazio lab. Più sicurezza lab. Quale scegliere?

27 Quale scegliere? & '() screening allevamento esame nuovi arrivi ricerca dei portatori non disponibilità di campioni idonei per batteriologia sintomi specifici #!""#$% % $% necessità antibiogramma sintomi aspecifici necessità conservazione ceppi valutazione dei portatori Migliori risultati: metodo ibrido

28 Metodo ibrido Metodo A: Esame batteriologico ed identificazione degli streptococchi beta-emolitici con PCR risparmio 18 ore Metodo B: Esame Multiplex-PCR seguito da esame batteriologico solo sui positivi disponibilità di ceppi vivi

29 Controllo e prevenzione Vaccino per S. equi inoculazione sottomucosale cavalli età >4 mesi Prima vaccinazione: 2 inoculazioni a 4 settimane l una dall altra Richiami: 1 inoculazione ogni 3 mesi

30 Controllo e prevenzione Indicazioni per S. equi rapida identificazione degli infetti e separazione dai recettivi controllo delle movimentazioni individuazione dei cavalli portatori schema di campionamento

31 Individuazione dei cavalli portatori asintomatici Campionamento: tampone nasofaringeo settimanale ed esame batteriologico/pcr In caso di negatività a 3 campioni consecutivi: analisi del liquido di lavaggio delle tasche gutturali In caso di negatività: cavallo non infetto Sweeney et al, J Vet Intern Med 19:123-34, 2005

32 Nella nostra esperienza... Campionamento in allevamento con anamnesi di infiammazione vie respiratorie e forme simil-adenite (26 cavalli) 1 tampone nasofaringeo/settimana x 3 volte + 1 lavaggio tasche gutturali

33 Esame batteriologico e PCR (in doppio cieco) 104/104 campioni: No rilevato S. equi 22/26 cavalli: in almeno 1 prelievo rilevati S. zooepidemicus e/o S. equisimilis 8 cavalli S. zooepidemicus (in almeno 1 prelievo) 16 cavalli S. equisimilis (in almeno 1 prelievo) 2 cavalli coinfezione S. zooepidemicus + S. equisimilis 2 cavalli S. zooepidemicus tasche gutturali PCR: pos. in 10/68 batteriologicamente neg.

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