Allegato A Caratteristiche dei lotti Dispositivi e Analiti

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1 PROCEDURA APERTA PER LA FORNITURA DI SISTEMI IN SERVICE PER L ESECUZIONE DI ESAMI DI ELETTROFORESI Nel presente allegato sono riportate le tipologie di dispositivi richiesti secondo quanto riportato all art. 3 del Capitolato speciale di gara. La fornitura dovrà comprendere sia un programma di controlli di qualità intralaboratorio che un programma Valutazione esterna della qualità forniti da parte terza. Inoltre la ditta Partecipante, nella formulazione dell offerta, dovrà evidenziare chiaramente come le TS offerte potranno adattarsi al flusso di lavoro presente in ogni singolo laboratorio inteso come modalità operative e realtà organizzativa dei laboratori interessati. Legenda: Campione di controllo interni: si tratta di campioni interni al laboratorio; a cura dell aggiudicatario dovrà essere fornito solo reattivo e consumabili per l esecuzione del controllo. Il numero di sedute e dei livelli, per ciascun laboratorio è indicato nella tabella seguente. Campioni di controllo: si tratta di campioni di controllo forniti dalla ditta aggiudicataria; a cura dell aggiudicatario dovranno altresì essere forniti i reattivi e consumabili per l esecuzione del controllo. L impiego di tali controlli è finalizzato a verificare la funzionalità dei capillari. Frequenza, tipologia e numero di sedute sono definite nella tabella seguente. (CQI) Siero di controllo: dovrà essere fornito sia il materiale di controllo che reattivi, consumabili ed altro necessario all esecuzione. Il numero di sedute e dei livelli, per ciascun laboratorio è indicato nella tabella seguente. Dovrà altresì essere fornito un programma per la valutazione del CQI. VEQ: dovrà essere fornito sia il materiale di controllo (di terza parte), che reattivi, consumabili ed altro necessario all esecuzione. Il numero di sedute e dei livelli, per ciascun laboratorio è indicato nella tabella seguente. Dovrà altresì essere fornito un programma per la valutazione esterna della VEQ. La VEQ. dovra' avere un elevato numero di partecipanti e, dove possibile, essere internazionale. Gli elaborati di ciascun laboratorio dovranno pervenire on line assicurando i criteri necessari secondo le linee guida nazionali di raffronto agli altri laboratori partecipanti. Pag. 1

2 LOTTO 1 Elettroforesi proteine e tecniche derivate IN CAPILLARE In questo lotto sono richieste tecnologie sanitarie che consentano l esecuzione di esami, con tecnica separativa elettroforetica in capillare, su proteine di differenti matrici biologiche. Per il solo laboratorio di Guastalla entrano in questo lotto anche test su supporto di agarosio così come indicato nelle tabelle seguenti. Nelle tabelle sotto riportate vengono indicate le tipologie e le quantità di prestazioni richieste dai singoli laboratori. AO Reggio Emilia - LACCE controlli per seduta e Elettroforesi proteine siero CDT (transferrina desialata) campione di controllo/strumento/ seduta 1 campione di controllo interno (per verifica allineamento e ripetibilità) su tutti i capillari di ciascuno strumento per ogni seduta 1 campione di controllo (di allineamento e ripetibilità su tutti i capillari di ciascuno strumento) 1 volta alla. 3 VEQ/anno 2 campioni di controllo (alto e basso)/strumento/seduta 3 VEQ/anno AO Reggio Emilia Castelnovo né Monti controlli per seduta e Elettroforesi proteine siero campione di controllo interno (allineamento e ripetibilità) su tutti i capillari di ciascuno strumento per ogni seduta AUSL Reggio Emilia Laboratorio Guastalla controlli per seduta e Elettroforesi proteine siero campione di controllo (verifica allineamento e ripetibilità) su tutti i capillari di ciascuno strumento per ogni seduta 3 VEQ / anno almeno Pag. 2

3 CDT (transferrina desialata) campioni di controllo (alto e basso) per seduta 3 VEQ / anno almeno Immunotipizzazione immunoglobuline sieriche mediante Immunosottrazione(con elettroforesi capillare) e immunofissazione in agarosio per eventuale conferma campione di controllo (contenente componente monoclonale)/die 3 VEQ / anno almeno AO Parma - Unità Operativa Diagnostica Ematochimica Determinazioni annue previste controlli per seduta e Elettroforesi proteine siero CQI/strumento/seduta (un diverso capillare ogni giorno ) 1 campione di controllo (per allineamento e ripetibilita) '/strumento/seduta 6 VEQ / anno AUSL Parma Laboratorio di Fidenza Determinazioni annue previste controlli per seduta e Elettroforesi proteine siero campione di controllo interno (allineamento su tutti i capillari degli strumenti) per ogni seduta AUSL Parma Laboratorio di Borgotaro Determinazioni annue previste controlli per seduta e Elettroforesi proteine siero sedute 1 campione di controllo/seduta Pag. 3

4 AUSL Modena Baggiovara Laboratorio Unificato controlli per seduta e Elettroforesi proteine siero Campioni di controllo 1 volta alla 2 campioni di controllo (Normale e Patologico) su ogni strumento per ogni capillare. Campioni di controllo interni: 2 / seduta / strumento per ogni capillare (1 Normale e 1 Patologico) 4 VEQ / anno CDT (transferrina desialata) Immunotipizzazione immunoglobuline sieriche mediante Immunosottrazione con elettroforesi capillare campioni di controllo (alto e basso)/strumento/seduta 3 VEQ/anno 6 VEQ / anno Ausl di Modena Laboratorio Ospedale di Pavullo controlli per seduta e Elettroforesi proteine siero Immunotipizzazione immunoglobuline sieriche mediante Immunosottrazione con elettroforesi capillare Campione di controllo3 volte alla per 2 livelli alternati (Normale o Patologico) per ogni strumento per ogni capillare 4 VEQ / anno VEQ / anno AO Modena Laboratorio Centralizzato controlli per seduta e Elettroforesi proteine siero campione di controllo interno /strumento/seduta (un diverso capillare ogni giorno ) 1 Campione di controllo per allineamento e ripetibilità/strumento/seduta 4 VEQ / anno Pag. 4

5 ESAMI OPZIONALI: Immunotipizzazione immunoglobuline sieriche mediante Immunosottrazione con elettroforesi capillare AO Modena Laboratorio Centralizzato VEQ / anno controlli per seduta e Requisiti Tecnici Indispensabili Si elencano di seguito, i requisiti indispensabili che devono essere posseduti dalle TS e reattivi ed accessori offerti e la cui mancanza determinerà l esclusione dell offerta dalla gara: Elettroforesi proteine e tecniche derivate in Capillare Le TS offerte devono essere atte ad eseguire l elettroforesi capillare in fase liquida delle seguenti tipologie di indagine: 1. elettroforesi proteine siero 2. CDT (transferrina desialata); 3. immunotipizzazione immunoglobuline sieriche mediante Immunosottrazione con elettroforesi capillare 4. immunotipizzazione immunoglobuline sieriche mediante: Immunosottrazione con elettroforesi capillare e immunofissazione in gel di Agarosio per eventuale conferma per Laboratorio di Guastalla (Ausl di Reggio Emilia). Per i laboratori che richiedono differenti metodiche che sfruttano il principio dell elettroforesi capillare, il cambio di metodica sugli strumenti deve essere semplice (fatto salvo l eventuale cambio di reattivi, tamponi o diluenti specifici) gli strumenti dovranno essere intercambiabili tra di loro e non devono essere previsti strumenti dedicati a una singola metodica, in modo da garantire il backup funzionale del sistema. Le TS offerte devono disporre di tecnologia completamente automatica (senza intervento da parte dell operatore nella movimentazione dei campioni a parte carico e scarico) e devono prevedere: la diluizione automatica del campione (se necessaria); un dispositivo di campionamento automatico da provetta sia primaria che secondaria, in grado di effettuare il campionamento anche a partire da aliquote, provette pediatriche, coppette. Impiego di ridotti volumi di campione biologico (non superiore a 50 µl) e capacità di utilizzare, nel sistema di campionamento, le più comuni provette disponibili in laboratorio, di diverse dimensioni; il sistema di aspirazione deve essere dotato di tecnologia atta a rilevare il menisco del liquido biologico e prelevarne il corretto volume. Segnalazioni specifiche devono essere previste per segnalare l assenza o l insufficienza di campione; Pag. 5

6 lettura del barcode integrato, con riconoscimento positivo del campione (comunicazione hostquery o download con il LIS). caricamento in continuo dei campioni. I dispositivi porta-provette (rack o altro) devono sono immessi a gruppi o singolarmente, senza interrompere il lavoro dell analizzatore e senza tempi di attesa per l operatore. Deve essere garantita la tracciabilità dei lotti dei reagenti, impiegati per l analisi di ciascun campione e controllo. Capillari termostatati in modo da assicurare una temperatura controllata al processo analitico con un errore tollerato di +/- 1 C. Il sistema deve essere in grado di eliminare il carry over (lavaggio dell ago di campionamento e capillari). Le TS dovranno essere collegate al LIS dei laboratori presso i quali è prevista l installazione. Nell allegato B vengono definite le modalità e specificità dei collegamenti ai vari LIS nell ambito delle varie realtà dei laboratori AVEN. (NB: per i laboratori dell AO Ospedaliera di Reggio, Az. USL di Reggio e Azienda Ospedaliera di Parma deve essere trasmesso anche il tracciato densitometrico). Le TS devono inoltre ricevere il dato quantitativo delle proteine totali dal LIS, al fine del calcolo delle concentrazioni delle singole frazioni proteiche. E inoltre richiesta l integrazione di tali test in un unica piattaforma gestionale che consenta all operatore di avere una visione d insieme di tutti gli esami su proteine appartenenti a questo lotto e preveda la trasmissione al LIS di commenti codificati scelti dall'operatore e dei tracciati grafici. Tale piattaforma dovrà consentire la consultazione dell archivio storico per tutti gli esami oggetto del presente lotto di gara, di tutti gli esami in lavorazione. Deve essere possibile la trasmissione al sistema LIS anche di appropriati codici che prevedano la presenza di più Componenti Monoclonali. Deve essere prevista la possibilità di editazione dei tracciati densitometrici: identificazione ed integrazione automatica delle frazioni; spostamento, eliminazione o inserimento di uno o più minimi; marcatura, identificazione e quantificazione di picchi monoclonali; modifica dei nomi delle frazioni; importazione o inserimento dei commenti; Sistema esperto integrato di aiuto interpretativo, per la validazione dei tracciati elettroforetici delle siero proteine (in capillare), in grado di distinguere le frazioni anomale dalle normali, basandosi su uno o più dei seguenti algoritmi: regole quantitative personalizzabili dall'operatore; regole morfologiche basate su valutazioni relative a ciascuna delle 6 frazioni; regole matematiche di studio delle curve delle singole frazioni; il Sistema deve essere in grado di proporre un commento preimpostato dall'operatore in base all'analisi quali-quantitativa. Gestione dei reflui con riduzione al minimo del rischio biologico sia nel caso in cui le TS siano collegate a scarico centrale che su tanica. Deve essere garantita la completa tracciabilità dei campioni dal checkin alla fine del ciclo analitico. Pag. 6

7 Nell ambito di ogni laboratorio dovranno essere fornite più stazioni HW collegate fra di loro, tipicamente una o più di governo tecnico del sistema analitico ed una o più per la refertazione, interpretazione e commento o modifica dei tracciati. Tali dispositivi dovranno avere una loro interconnessione in rete locale (LAN) con creazione di un solo archivio dati accessibile da una qualunque delle postazioni di lavoro della rete locale. Nell allegato B sono descritte le caratteristiche di minima per ogni azienda sanitaria. La cadenza analitica dei sistemi nel loro complesso, a regime, deve essere tale da garantire, per tutti i laboratori (tenendo conto della tipologia e numero di esami dichiarati nella tabella soprariportata) di concludere le operazioni analitiche entro 4.00 ore dal caricamento del primo campione. Il numero di strumenti da offrire per ogni laboratorio sarà da commisurare sulla base di questo vincolo. Per ogni laboratorio dovrà comunque essere garantito il back up in caso di crash di un singolo strumento. Per il laboratori di Pavullo, Castelnovo né Monti e Borgotaro il backup verrà realizzato inviando i campioni al laboratorio hub provinciale, non sarà pertanto necessario installare strumentazione di backup presso i tre laboratori sopra citati. I materiali di controllo devono essere preparati su matrice proteica. Tutti i reattivi e i materiali di consumo devono possedere la certificazione di conformità alla direttiva 98/79 CE e successivi recepimenti già al momento dell offerta. In particolare non sono ammessi, reattivi potenzialmente cancerogeni o mutageni. MIDDLEWARE A fronte di accertamenti (es. immunofissazione a seguito di componente monoclonale), il middleware deve poter inviare l aggiunta di analisi con rispettivi risultati al LIS. Non ci si aspetta quindi che la richiesta di esecuzione accertamento nasca dal LIS ma il clinico deve poter lavorare sul middleware ed inviare al LIS anche le aggiunte di analisi con i rispettivi risultati; invio di note/commenti testuali e/o codificate al LIS; ricezione da LIS dei dati-paziente: anagrafica in chiaro (cognome e nome e data di nascita), numero richiesta e/o provetta, reparto richiedente; invio al LIS del tracciato densitometrico. Si specificano le caratteristiche indispensabili dei singoli test. 1. ELETTROFORESI CAPILLARE SIEROPROTEINE Velocità operativa: (del singolo strumento che costituisce il sistema): tempo di avvio (dall'accensione all inserimento del primo campione): non superiore a 30 minuti; tempo uscita primo tracciato (a partire dall inserimento del primo campione): non superiore a 20 minuti; cadenza analitica minima (dopo il primo tracciato): la cadenza analitica dei singoli strumenti che costituiscono i vari sistemi non deve essere inferiore a 50 test/ora; tempo di shut-down non superiore a 20 minuti. I tracciati elettroforetici delle proteine devono possedere i requisiti definiti dalla commissione sieroproteine della SIBIOC in particolare: deve essere apprezzabile la banda della prealbumina; si deve apprezzare l eventuale eterozigosi dell alfa 1 antitripsina Pag. 7

8 nella zona alfa 2 si deve poter distinguere la componente anodica determinata dalla alfa 2 macroglobulina da quella catodica determinata dall aptoglobina; la zona beta deve essere ben separata in due bande (transferrina e C3). Deve essere prevista la stampa di un densitogramma corredato di tutte le informazioni quantitative riferibili alle singole frazioni (% e g/dl). Tale stampa deve avere le caratteristiche di referto, pertanto deve possedere i seguenti requisiti: formato UNI A4, completo dei seguenti dati: intestazione del laboratorio (3 righe di almeno 40 caratteri), reparto richiedente, anagrafica del paziente (cognome, nome, data di nascita, n. identificativo), data e ora, risultati del test e di una stampa riepilogativa della singola seduta con i dati di calibrazione e controllo. Visualizzazione grafica del frazionamento sul referto: le frazioni dovranno essere le seguenti: albumina, alfa1 globuline, alfa 2 globuline, beta1 globuline, beta2 globuline, gamma globuline. Controllo di qualità interno (CQI) a esecuzione (per ciascun laboratorio) come da tabella del presente allegato pag. 1 e segg., con elaborazione dei dati secondo Levy Jennings e stampa delle relative carte di controllo per le singole frazioni proteiche. Controllo di qualità esterno (VEQ)di terza parte. Deve essere prevista la possibilità di effettuare modifiche e correzioni del frazionamento, in particolare deve essere prevista la possibilità di quantificare le componenti monoclonali (sia in termini di % che di g/dl). Deve essere prevista la possibilità di archiviazione dei dati. Deve essere disponibile un archivio per i dati delle sedute analitiche (campioni, calibratori, controlli), con possibilità di backup. I dati principali (quantitativi e tracciato di ogni campione devono poter essere esportati in un formato compatibile con software della famiglia Office di Windows. Deve essere prevista la possibilità di creazione di un archivio di tutti i tracciati eseguiti; in particolare deve essere possibile selezionare come noti pazienti con determinate caratteristiche a scelta dell operatore. 2. CDT (TRANSFERRINA DESIALATA) Velocità operativa del sistema nel suo complesso: tempo di avvio (dall accensione all inserimento del primo campione): non superiore a 30 minuti; tempo uscita primo tracciato (a partire dall inserimento del primo campione): non superiore a 40 minuti; cadenza analitica minima dopo il primo tracciato 30 test/ora; tempo di shut-down non superiore a 20 minuti; tempo necessario al cambio metodica (da sieroproteine a CDT) non superiore a 30 minuti. Deve eseguire, in completa automazione, tutte le fasi di trattamento pre-analitico e analitico del campione, fino alla quantificazione della CDT (in percentuale delle singole frazioni). Devono essere identificate le frazioni significative ai fini di una valutazione di abuso alcoolico Deve essere prevista la stampa di un densitogramma corredato di tutte le informazioni quantitative riferibili alle singole frazioni. Tale stampa deve avere le caratteristiche di referto, pertanto deve possedere i seguenti requisiti: formato UNI A4, completo dei seguenti dati: intestazione del laboratorio (3 righe di almeno 40 caratteri), reparto richiedente, anagrafica del paziente (cognome, nome, data di nascita, n. identificativo), data e ora, risultati del test e di una stampa riepilogativa della singola seduta con i dati di calibrazione e controllo. Deve essere prevista la presenza di computer di gestione del sistema analitico con software per la gestione dei dati e rianalisi grafica e con programma per l elaborazione statistica dei dati del controllo qualità. Pag. 8

9 Deve essere prevista l'dentificazione assistita dei reattivi, calibratori e controlli, mediante lettura di codice a barre o altro meccanismo che ne consenta l identificazione e l introduzione sullo strumento in modo univoco. 3. IMMUNOTIPIZZAZIONE MEDIANTE IMMUNOSOTTRAZIONE PROTEINE SIERICHE CON ELETTROFORESI CAPILLARE Velocità operativa (del sistema nel suo complesso salvo dove diversamente specificato): tempo di avvio (dall accensione all inserimento del primo campione): non superiore a 30 minuti; tempo uscita primo tracciato (a partire dall inserimento del primo campione): non superiore a 15 minuti; cadenza analitica minima (dopo il primo tracciato): la cadenza analitica dei singoli strumenti che costituiscono i vari sistemi non deve essere inferiore a 7immunosottrazioni/ora; tempo di shut-down non superiore a 20 minuti; tempo necessario al cambio metodica (da sieroproteine a immunosottrazione) non superiore a 10 minuti. Deve essere possibile l esecuzione del test con antisieri monospecifici anti-igg, anti-iga, anti- IgM, anti catene leggere Kappa e anti catene leggere Lambda per la determinazione di eventuali Componenti Monoclonali. Deve essere possibile la stampa di un densitogramma di tutti i capillari in cui avviene la sottrazione relativa ai 5 antisieri e di una o più elettroforesi di riferimento. Deve essere possibile la diluizione del campione adattata alla concentrazione delle immunoglobuline con diluente specifico e di facile gestione da parte dell operatore. Deve essere possibile la trasmissione informatica del densitogramma ad un sistema informatico middleware per la valutazione della presenza o meno della CM. 4. IMMUNOTIPIZZAZIONE MEDIANTE IMMUNOSOTTRAZIONE PROTEINE SIERICHE CON ELETTROFORESI CAPILLARE E IMMUNOFISSAZIONE INAGAROSIO PER EVENTUALE CONFERMA Per il solo laboratorio di Guastalla sono da considerare i seguenti requisiti indispensabili: Sistema composto da uno o più analizzatori per l'esecuzione della tipizzazione qualitativa delle componenti monoclonali su siero, su agarosio, con produttività di almeno 6 campioni/ora. Dispensatore di campioni (integrato nel sistema principale o fornito come tecnologia a parte) per la deposizione dei sieri da processare con IFE se in semiautomazione in grado di utilizzare tubi primari, aliquote o coppette) Fornitura di antisieri IgG, IgA, IgM, K, L, IgD, IgE. Questi due ultimi antisieri potranno essere forniti in un kit a parte. Sensibilità minima di rilevazione delle componenti monoclonali di 0,1 g/l su siero (raccomandazioni di Tate et al. I Annals of Clinical/Biochemistry 2012). Pag. 9

10 Antisieri pronti all uso e identificabili in modo chiaro da parte dell'operatore. Pag. 10

11 Requisiti Tecnici Auspicabili Si elencano di seguito, i requisiti auspicabili di massima, oggetto di valutazione sulla base dei punteggi riportati nel disciplinare di gara. Elettroforesi proteine e tecniche derivate in Capillare Possibilità di eseguire, sulla tecnologia offerta, l elettroforesi delle proteine urinarie. Cadenza analitica elevata di ogni singolo strumento, sia in termini di primo risultato prodotto all inizio di una nuova seduta che per i risultati successivi. Ridotto numero di strumenti per ciascun laboratorio, fatte salve le esigenze minime di back up; Tempi ridotti e semplicità delle operazioni di manutenzione giornaliera e periodica a carico del laboratorio Semplicità d uso ed interfaccia utente di semplice utilizzo. Possibilità di gestire campioni urgenti. Volume ridotto del campione. Ridotti Coefficienti di Variazione entro la serie e tra le serie. In particolare sono considerati preferibili CV intraserie non superiori ai valori indicati: - albumina < 1.5%, - γ-globuline < 2% - altre frazioni < 7% Tempi ridotti di manutenzione giornaliera e periodica a carico del laboratorio. Elevato numero di test effettuabili sullo stesso capillare. Ulteriori funzioni di editazione del referto: zoom fisso o programmabile; sovrapposizione ad una curva di controllo; marcatura curva patologica e programmazione reflex test per i test di approfondimento (con relativa trasmissione al LIS). Possibilità di sospendere la refertazione di un campione, in attesa del completamento degli approfondimenti diagnostici complementari (reflex test) in tal caso i referti andranno archiviati separatamente e non inviati a LIS; possibilità di evidenziare i campioni con precedenti significativi in archivio. I tracciati precedenti devono poter essere richiamati facilmente a video al momento della validazione, sovrapposti e confrontati col dato in esame. Funzionalità per la gestione del Controllo di Qualità tali da permettere al laboratorio di valutare costantemente le prestazioni del sistema. I dati relativi alle misure dei controlli andranno memorizzati ed aggregati anche in forma grafica (Levey-Jennings). Pag. 11

12 Referto personalizzabile in ogni dettaglio, in particolare la posizione e la formattazione dei campi dati, dei densitogrammi e delle immagini del gel. Database strutturato per essere esportato su altri sistemi, in particolare compatibili con il formato Office di Windows (tracciati compresi). Dotazione di sistema esperto per la discriminazione fra tracciati normali e patologici basato su regole di tipo quantitativo e di tipo morfologico del tracciato. La disponibilità nel software di gestione del sistema analitico di funzioni quali la preparazione di liste di lavoro per i campioni da ripetere o diluire, la validazione automatica dei risultati con l impiego di deltacheck o algoritmi multiparametrici. Si specificano i requisiti auspicabili dei singoli test. 1. ELETTROFORESI CAPILLARE SIEROPROTEINE Reattivi pronti all uso con ampia stabilità a bordo. Impiego, per differenti metodi analitici, di reattivi, diluenti, tamponi o altro dello stesso tipo: nel caso di un uso dell analizzatore per differenti metodiche, la gestione deve risultare semplice e veloce, consentendo di processare i diversi analiti senza cambio di reagenti. 2. CDT (TRANSFERRINA DESIALATA) Reattivi pronti all uso con ampia stabilità a bordo. Ridotta interferenza da parte di componenti monoclonali (in particolare in zona beta-globuline) Ridotta interferenza dovuta ad alterazioni del quadro sieroproteico (es. dovute a cirrosi etc.) Impiego, per differenti metodi analitici, di reattivi, diluenti, tamponi o altro dello stesso tipo: nel caso di un uso dell analizzatore per differenti metodiche, la gestione deve risultare semplice e veloce, consentendo di processare i diversi analiti senza cambio di reagenti 3. IMMUNOTIPIZZAZIONE MEDIANTE IMMUNOSOTTRAZIONE PROTEINE SIERICHE CON ELETTROFORESI CAPILLARE Reattivi pronti all uso con ampia stabilità a bordo. Sistema strutturato per la miscelazione automatica del campione con i diversi antisieri specifici, identificati in modo riconoscibile da parte dello strumento, o comunque strutturati in modo da impedire errori di identificazione o posizionamento dei singoli antisieri. Impiego, per differenti metodi analitici, di reattivi, diluenti, tamponi o altro dello stesso tipo: nel caso di un uso dell analizzatore per differenti metodiche, la gestione deve risultare semplice e veloce, consentendo di processare i diversi analiti senza cambio di reagenti Pag. 12

13 4. IMMUNOTIPIZZAZIONE MEDIANTE IMMUNOSOTTRAZIONE PROTEINE SIERICHE CON ELETTROFORESI CAPILLARE EIMMUNOFISSAZIONE INAGAROSIO PER EVENTUALE CONFERMA Possibilità di standardizzare la fase della stratificazione simultanea degli antisieri sul gel per evitarne la contaminazione Pag. 13

14 LOTTO 2 Elettroforesi e tecniche derivate in GEL D AGAROSIO In questo lotto sono richieste tecnologie sanitarie che consentano l esecuzione di esami, con tecnica separativa elettroforetica e derivate (es. immunofissazione, ricerca proteina di Bence Jones) in Gel di Agarosio, su proteine di differenti matrici biologiche. Nelle tabelle sotto riportate vengono indicate le tipologie e le quantità di prestazione richieste dai singoli laboratori. AO Reggio Emilia - LACCE Elettroforesi di conferma (con metodo ad alta risoluzione) siero proteine Elettroforesi proteine urinarie (mediante metodo ad alta risoluzione) Isoelettrofocusing proteine liquor Immunofissazione siero proteine Immunofissazione proteine urinarie (Proteine di Bence Jones) controlli per seduta e campione di controllo per ogni gel campione di controllo per ogni gel 3 VEQ/anno VEQ/anno VEQ/anno 2 campioni di controllo per gel (1 negativo e 1 positivo) Isoenzimi Fosfatasi Alcalina campione di controllo/seduta Isoenzimi CPK campione di controllo/seduta Tipizzazione delle crioglobuline mediante immunofissazione del crioprecipitato 50 1 Non richiesti Ricerca beta2 Transferrina (ricerca qualitativa) su secrezioni nasali o auricolari mediante immunofissazione 10 1/mese 2 campioni di controlli (1 liquor e 1 siero)/seduta Test di screening proteinurie (tubulare e glomerulare) Non richiesti Pag. 14

15 Elettroforesi di conferma (con metodo ad alta risoluzione) siero proteine Elettroforesi proteine urinarie(mediante metodo ad alta risoluzione) AO Reggio Emilia Castelnovo né Monti 50 6 Non richiesti 50 6 Non richiesti Immunofissazione siero proteine Non richiesti Immunofissazione proteine urinarie (Proteine di Bence Jones) Non richiesti controlli per seduta e AUSL Reggio Emilia Laboratorio Guastalla Elettroforesi proteine urinarie (mediante metodo ad alta risoluzione) controlli per seduta e 1 CQI per ogni gel 3 VEQ / anno almeno Immunofissazione proteine urinarie (Proteine di Bence Jones) VEQ / anno almeno Tipizzazione delle crioglobuline mediante immunofissazione del crioprecipitato 50 1 Non richiesti Screening proteinurie (tubulare e glomerulare) CQI per ogni gel 3 VEQ / anno almeno AO Parma - Unità Operativa Diagnostica Ematochimica Determinazioni annue previste controlli per seduta e Isoelettrofocusing proteine liquor campioni di controllo per ogni gel (1 negativo e 1 positivo) 6 VEQ anno Immunofissazione siero proteine VEQ anno Immunofissazione proteine urinarie (Proteine di Bence Jones) VEQ anno Tipizzazione delle crioglobuline mediante immunofissazione del crioprecipitato Non richiesti Pag. 15

16 AUSL Parma Laboratorio di Fidenza Determinazioni annue previste controlli per seduta e Elettroforesi di conferma (con metodo ad alta risoluzione) siero proteine Elettroforesi proteine urinarie(mediante metodo ad alta risoluzione) Non richiesti campione di controllo/seduta Isoelettrofocusing proteine liquor campioni di controllo per ogni gel (1 negativo e 1 positivo) 6 VEQ anno Immunofissazione siero proteine VEQ anno Immunofissazione proteine urinarie (Proteine di Bence Jones) Tipizzazione delle crioglobuline mediante immunofissazione del crioprecipitato VEQ anno 10 1 Non richiesti AUSL Modena Baggiovara Laboratorio Unificato controlli per seduta e Immunofissazione siero proteine VEQ/anno Immunofissazione proteine urinarie (Proteine di Bence Jones) Tipizzazione delle crioglobuline mediante immunofissazione del crioprecipitato VEQ / anno Non richiesti AO Modena Laboratorio Centralizzato controlli per seduta e Immunofissazione siero proteine Campione di controllo / gel 4 VEQ / anno Immunofissazione proteine urinarie (Proteine di Bence Jones) Campione di controllo / gel 4 VEQ / anno Tipizzazione delle crioglobuline mediante immunofissazione del crioprecipitato Campione di controllo / gel Pag. 16

17 ESAMI OPZIONALI AO Parma - Unità Operativa Diagnostica Ematochimica Elettroforesi proteine urinarie Determinazioni annue previste controlli per seduta e 1 campione di controllo per ogni gel per seduta AUSL Modena Baggiovara Laboratorio Unificato Elettroforesi proteine urinarie Non richiesti controlli per seduta e Test di screening proteinurie (tubulare e glomerulare) campione di controllo per seduta AO Modena Laboratorio Centralizzato controlli per seduta e Elettroforesi proteine urinarie Test di screening proteinurie (tubulare e glomerulare) Campione di controllo / gel 4 VEQ / anno 1 Campione di controllo / gel 4 VEQ / anno Pag. 17

18 Requisiti indispensabili Si elencano di seguito, i requisiti indispensabili che devono essere posseduti dalle TS offerte la cui mancanza determinerà l esclusione dell offerta dalla gara. Elettroforesi e tecniche derivate in GEL D AGAROSIO La TS deve consentire di eseguire su agarosio le seguenti tipologie di indagini: 1. Elettroforesi di conferma (con metodo ad alta risoluzione) delle siero proteine 2. Elettroforesi delle proteine urinarie 3. Isoelettrofocusing proteine Liquor 4. Immunofissazione siero proteine 5. Immunofissazione proteine urinarie (proteine di Bence Jones) 6. Isoenzimi fosfatasi alcalina 7. Isoenzimi CPK 8. Tipizzazione delle crioglobuline mediante immunofissazione del crioprecipitato 9. Ricerca transferrina Beta2 (ricerca qualitativa) su secrezioni nasali o auricolari mediante immunofissazione 10. Screening proteinurie tubulare e glomerulare Ciascuno dei sistemi deve poter eseguire una scansione densitometrica dei tracciati elettroforetici (sieroproteine e proteine urinarie). Deve inoltre essere prevista la stampa di un referto completo dei seguenti dati: intestazione del laboratorio (3 righe di almeno 40 caratteri), reparto richiedente, anagrafica del paziente (cognome, nome, data di nascita, n. identificativo), data, risultati del test e ranges di riferimento ed eventuali commenti. Sistema per metodiche su gel d'agarosio, che comprenda tutte le fasi analitiche, con particolare riferimento a: eventuale diluizione del campione, deposizione dei campioni e degli antisieri, migrazione, colorazione lavaggio, decolorazione, essicazione e lettura ad alta risoluzione. Gel pronti all uso. Utilizzo di applicatori monouso o comunque atti ad evitare il carry over. Deve essere prevista la possibilità di utilizzare un dispositivo per la stratificazione standardizzata degli antisieri nelle metodiche immunofissative. Controllo della temperatura durante la fase di migrazione Le TS dovranno essere collegate al LIS dei laboratori presso i quali è prevista l installazione. Nell allegato B vengono definite le modalità e specificità dei collegamenti ai vari LIS nell ambito delle varie realtà dei laboratori AVEN. (NB: per i laboratori dell AO Ospedaliera di Reggio, Az. USL di Reggio e Azienda Ospedaliera di Parma deve essere trasmesso anche il tracciato densitometrico qualora significativo per il test). Pag. 18

19 Lettore barcode integrato allo strumento con riconoscimento positivo del campione. La cadenza analitica dei sistemi offerti per ciascun laboratorio dovrà essere tale da garantire, con l impiego di un operatore dedicato, il completamento della routine giornaliera così come sopra definita (per gli analiti con minimo 5 sedute/)entro quattro ore dall accensione del sistema al suo spegnimento. I materiali di controllo devono essere preparati su matrice proteica. Tutti i reattivi e i materiali di consumo devono possedere la certificazione di conformità alla direttiva 98/79 CE e successivi recepimenti già al momento dell offerta. In particolare non sono ammessi, a pena esclusione, reattivi potenzialmente cancerogeni o mutageni. Si specificano le caratteristiche indispensabili riferiti ai singoli test. 1. ELETTROFORESI DI CONFERMA SIERO PROTEINE Sistema elettroforesi delle sieroproteine ad alta risoluzione, con possibilità sia di ispezione visiva della migrazione che di lettura da sistema densitometrico. 2. ELETTROFORESI PROTEINE URINARIE Sistema elettroforesi delle proteine ad alta risoluzione, con possibilità sia di ispezione visiva della migrazione che di lettura da sistema densitometrico. Trasmissione del densitogramma (qualora significativo) al LIS; le TS devono essere idonee ad eseguire lo screening in gel di agarosio delle proteinurie in base al peso molecolare e alla carica elettrica; qualora la determinazione, per le caratteristiche del sistema (sensibilità), richiedesse l esecuzione del test su campione di urine concentrate, deve essere altresì fornito il dispositivo o il sistema di concentrazione. 3. ISOELETTROFOCUSING PROTEINE LIQUOR Le TS devono permettere una elettroforesi ad alto voltaggio per separare le proteine siero/liquor in base al loro punto isoelettrico per mezzo di gradiente di ph continuo, lineare e stabile creato dalla presenza nel gel di una miscela di molecole anfotere, Le Ts devono prevedere un sistema per il trasferimento dei campioni (siero e liquor, con relative proteine), la essiccazione, l incubazione con anticorpi specifici e la colorazione. Le Ts devono produrre in modo riconoscibile uno dei cinque pattern riconosciuti internazionalmente, mediante corsa comparativa di siero e liquor. Pag. 19

20 4. IMMUNOFISSAZIONE SIERO PROTEINE Sistema composto da uno o più analizzatori per l'esecuzione della tipizzazione qualitativa delle componenti monoclonali su siero, su agarosio, con produttività di almeno 6 campioni/ora. Dispensatore di campioni per la deposizione dei sieri da processare con IFE se in semiautomazione in grado di utilizzare tubi primari, aliquote o coppette) Fornitura di antisieri IgG, IgA, IgM, K, L, IgD, IgE. Questi due ultimi antisieri potranno essere forniti in un kit a parte; Sensibilità minima di rilevazione delle componenti monoclonali di 0,1 g/l su siero (raccomandazioni di Tate et al. I Annals of Clinical/Biochemistry 2012.) Antisieri pronti all uso e identificabili in modo chiaro da parte dell operatore. 5. IMMUNOFISSAZIONE PROTEINE URINARIE (PROTEINE DI BENCE JONES) TS composta da uno o più analizzatori per l'esecuzione della tipizzazione qualitativa delle componenti monoclonali su urine o altro liquido organico su agarosio con produttività di almeno 6 campioni/ora. Deve essere possibile la lettura di un tracciato utilizzando urine non concentrate con proteinuria di Bence Jones pari a 10 mg/l. Il colorante deve essere idoneo ad ottimizzare la sensibilità del metodo alla soglia sopra indicata. Disponibilità dei seguenti antisieri: Deve essere prevista, per ogni campione, una corsa elettroforetica senza antisieri. Anti-catene pesanti (G+A+M) Anti Kappa Anti Kappa free Anti Lambda Anti Lambda free Lavaggi e colorazione in automatico dei gel Antisieri pronti all uso e identificabili in modo chiaro da parte dell operatore 6. ISOENZIMI FOSFATASI ALCALINA Sistema in gel di agarosio in grado di separare e rendere pertanto riconoscibili le seguenti frazioni: Epatica I Epatica II Intestinale Placentare Ossea Tutte con relative possibili varianti. Espressione dei risultati delle singole frazioni in %. Pag. 20

21 7. ISOENZIMI CPK Sistema in gel di agarosio in grado di separare e rendere pertanto riconoscibili le seguenti frazioni: MM MB BB Macro CPK Espressione dei risultati delle singole frazioni in %. 8. TIPIZZAZIONE DELLE CRIOGLOBULINE MEDIANTE IMMUNOFISSAZIONE DEL CRIOPRECIPITATO. Sistema composto da uno o più analizzatori per l'esecuzione della tipizzazione qualitativa delle componenti monoclonali su siero, su agarosio, con produttività di almeno 4 campioni/ora. Dispensatore di campioni per la deposizione dei precipitati risospesi a partire da coppette. Fornitura di antisieri IgG, IgA, IgM, K, L. Antisieri pronti all uso e identificabili in modo chiaro da parte dell operatore. 9. RICERCA TRANSFERRINA BETA2 (RICERCA QUALITATIVA) SU SECREZIONI NASALI O AURICOLARI MEDIANTE IMMUNOFISSAZIONE Sistema in gel di agarosio in grado di identificare (mediante tecnica elettroforetica) la betatrace-protein confrontandone la presenza sia su sangue che su liquor (in contemporanea). Espressione dei risultati della singola frazione in PRESENZA/ASSENZA della frazione specifica. 10. SCREENING PROTEINURIE (TUBULARE e GLOMERULARE) le TS devono essere idonee ad eseguire lo screening in gel di agarosio delle proteine su urine non concentrate per la identificazione qualitativa delle proteinurie di tipo glomerulare, tubulare o mista in base al Peso Molecolare. Disponibilità di antisieri anti-micro ed anti-macro proteine in grado di classificare le proteinurie in: glomerulari, tubulari e miste. Pag. 21

22 REQUISITI TECNICI AUSPICABILI Si elencano di seguito, i requisiti auspicabili di massima, oggetto di valutazione sulla base dei punteggi riportati nel disciplinare di gara. Elettroforesi e tecniche derivate in GEL D AGAROSIO Hardware e software di facile uso per la gestione informatica dell'intero sistema. Pezzatura gel con ampia gamma, sia in termini di numero di deposizioni su singola lastrina che di lunghezza della corsa elettroforetica. Sistema integrato allo strumento che consenta il riconoscimento dei seguenti elementi: gel, antisieri e campioni, con completa tracciabilità della seduta di lavoro. Semplicità di manutenzione. Possibilità di eseguire i test elettroforetici in totale automazione a partire da tubo primario, comprese le seguenti attività: Riconoscimento campione (bar code), Campionamento, Diluizione campione (standard e personalizzabili), Deposizione campioni (indicare anche se possibili deposizioni multiple), Riconoscimento antisieri, Deposizione antisieri (impiego di profili anticorpali standard o personalizzati per campione), Incubazione, Colorazione, Lavaggio, essicazione, Attività supplementari (ad es. per riconoscimento frazioni isoenzimi). Sistema di applicazione, in particolare per i liquidi biologici a basso contenuto proteico, tale da garantire un elevata sensibilità del metodo. Massima integrazione e compattezza della strumentazione proposta. Reattivi pronti all uso. Certificazione del Sistema Qualità aziendale (per la casa madre e le eventuali sedi staccate). cadenza analitica dei sistemi offerti per ciascun laboratorio tale da consentire una riduzione del tempo occorrente della routine giornaliera. Ridotto numero di strumenti per ciascun laboratorio, fatte salve le esigenze minime di back up. Riguardo tale aspetto si precisa che per il laboratorio di Castelnovo né Monti il backup si realizza sull hub provinciale di riferimento. Per tale ragione nel laboratorio sopra citato non è richiesta strumentazione di backup Presenza di un dispositivo che eviti l evaporazione dei campioni biologici in attesa di essere processati. Presenza di accorgimenti o dispositivi che impediscano fisicamente lo scambio di posizione tra diversi antisieri. periodo di stabilità dei reagenti superiore ai 6 (sei) mesi prima della eventuale ricostituzione. Pag. 22

23 In particolare si specificano i requisiti auspicabili per i test seguenti. ELETTROFORESI PROTEINE URINARIE Possibilità di eseguire la determinazione utilizzando urine non concentrate; presenza di un sistema informatico (middleware) di facile gestione che permetta la valutazione del risultato analitico integrandolo con altre eventuali analisi dello stesso paziente (anche su siero) e di archiviarli in un unico file (middleware); rifiuti tossici in quantità minima. IMMUNOFISSAZIONE SIERO PROTEINE Possibilità di standardizzare la fase della stratificazione simultanea degli antisieri sul gel per evitarne la contaminazione TIPIZZAZIONE DELLE CRIOGLOBULINE MEDIANTE IMMUNOFISSAZIONE Presenza di programma specifico per la gestione dei crioprecipitati. Pag. 23