BIODIVERSITA GERMOPLASMA LOCALE E SUA VALORIZZAZIONE

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1 Consiglio Nazionale delle Ricerche Istituto per la Fisiologia della Maturazione e della Conservazione del Frutto delle Specie Arboree Mediterranee -Sassari/Oristano Dipartimento di Scienze Ambientali Agrarie e Biotecnologie Agroalimentari Universita degli Studi di Sassari Centro Interdipartimentale per Ie Ricerche Conservazione ed Utilizzazione del Germoplasma Mediterraneo, BIODIVERSITA GERMOPLASMA LOCALE E SUA VALORIZZAZIONE Atti del 4 0 Convegno Nazionale Alghero, 8-11 seftembre 1998 a cura di MARIO AGABBIO Estratto.Carlo Delfino editore

2 STUDIO DI ALCUNE CARATTERISTICHE COMPOSITIVE DI OLI EXTRA VERGINI DI OLIVA SARDI IN RELAZIONE ALL'ORIGINE GEOGRAFICA SOME CHEMICAL PARAMETERS OF SARDINIAN EXTRA-VIRGIN OLIVE OILS AS AFFECTED BY PLACE OF ORIGIN Vacca V.*, Battacone G.*, Piga A.* *Dipartimento di Scienze Ambientali Agrarie e Biotecnologie Agro-Alimentari, Universita degli Studi, Viale Italia 39,07100 Sassari. Riassunto Su 110 oli extra vergini di oliva provenienti dalle cinque principali zone di produzione della Sardegna sono stati determinati la composizione percentuale in trigliceridi, il contenuto di caroteni e clorofille totali e a1cuni parametri primari della qualita. L'elaborazione statistica dei risultati ottenuti ha permesso di individuare la presenza di a1cuni componenti, che fungono da discriminanti in funzione della zona di provenienza degli olio Altri componenti, invece, si mostrano comuni all'intera produzione sarda. Inoltre, il valore del rapporto POOIPPO, per la sua costanza, puo aiutare a caratterizzare gli oli prodotti nell'isola. Abstract Percent trygliceride composition, total carotenoids and chlorophylles and the main quality parameters of 110 extra-virgin oils of the five most important Sardinian production places have been inspected. Statistical analysis of data revealed that some of the above cited components- can serve as discriminant factors to exactly define the origin of the oil, while others do not. Moreover, the POO/PPO rate can help to characterize the oils of the island. 1. Introduzione Le peculiarita delle caratteristiche di composizione dei diversi oli vergini di oliva rappresentano un sicuro elemento di interesse, in vista dell'applicazione delle norme per l'attribuzione delle DOC. Tali norme so no state emanate a difesa delle produzioni locali con la consapevolezza che il futuro della nostra olivicoltura e legato non all'aumento in termini quantitativi, rna alia capacita di sfruttare al meglio l'arma della qualita e della tipicita. Di qui la necessita di ricercare parametri oggettivi in grado di mettere in relazione la composizione dell'olio con la sua origine geografica. In linea generale, tale composizione e il fmtto di interazioni legate a vari fattori: grado di maturazione delle olive, sistema di raccolta, tempo che intercorre per la lavorazione, tipo di estrazione dell'olio, varieta, condizioni pedoclimatiche e tecniche colturali [1, 2]. La variabilita di questi fattori induce a procedere con cautela nella ricerca delle suddette correlazioni compositive, in quanta tutti gli oli, anche quelli originati dallo stesso oliveto, non sono "completamente identici". Tuttavia, e ragionevole pensare che per la stessa zona, siano "simili". Si accetta cioe il principio, peraltro gia sperimentato con successo, della "uniformita zonale" [3], che si basa sui postulato che oli prodotti nello stesso ambiente sono probabilmente simili, perche tali so no Ie condizioni pedoclimatiche, Ie varieta coltivate, Ie tecniche colturali, i metodi di raccolta e i sistemi di estrazione. Sulla base di queste premesse e stato elaborato un piano di campionamento in linea con il suesposto principio. Lo studio e mirato a mettere in evidenza eventuali differenze compositive tra gli oli vergini prodotti nelle pili importanti aree di produzione della Sardegna, che si differenziano per Ie condizioni pedologiche, microclimatiche e per Ie varieta di olive coltivate. A questa fine sono stati utilizzati a1cuni parametri analitici ritenuti tra i pili idonei. 2. Materiali e metodi Sono stati sottoposti ad analisi 110 oli extra vergini di oliva provenienti dalle cinque zone tipiche di produzione della Sardegna, pili precisamente: Zona I, Villacidro e Gonnosfanadiga (Sardegna sud-occidentale), 16 campioni da 4 frantoi; zona II, Dolianova, Donori e Serdiana (Sardegna meridionale), 23 campioni da 5 frantoi; zona III, Sassari, Sennori e Aighero (Sardegna nord-occidentale), 37 campioni da 8 frantoi; 521

3 zona IV, Seneghe, Cabras e Nurachi (Sardegna centro-occidentale), 15 campioni da 3 frantoi; zona V, Orosei e Oliena (Sardegna centro-orientale), 19 campioni da 5 frantoi. Le varieta prevalenti distinte per zona sono: I (Nera di Gonnosfanadiga, Pizz'e Carroga), II (Tonda di Cagliari, Pizz'e Carroga, Paschixedda), III (Bosana), IV (Bosana, Manna, Semidana), V ( Bosana, Niedda di Oliena). Gli oli sono stati prelevati direttamente in frantoio all'uscita dal separatore, posti in contenitore opaco e conservati a temperatura costante prima delle analisi. I prelievi sono stati eseguiti nel periodo compreso tra il 20 novembre e il 10 dicembre Su tutti i campioni prelevati sono stati determinati i seguenti parametri: Composizione trigliceridica: e stato utilizzato un sistema cromatografico costituito da modulo di pompaggio Hewlett-Packard 1050 corredato da rivelatore rifrattometrico differenziale Waters 401 e integratore Mega II (Carlo Erba Strumentazione). I campioni (10 JlL di olio al 9% in acetone) sono stati iniettati in una colonna Supelcosil LC-18 (5 mm) 25 x 4,6, preceduta da precolonna a connessione diretta 2 cm LC-18 (5 mm). Fase mobile: acetone: acetonitrile 63,6:36,4 (v/v), fiusso 0,9 ml/min. L'attribuzione dei picchi e stata eseguita mediante confronto con cromatogrammi presenti in letteratura [4, 5] e confronto dei tempi di ritenzione dei seguenti standard: Matreya per PPO (Cod. 1140), SOO (Cod. 1143), PSO (Cod. 1145), Supelco per LLL, LLO, 000, LLP (Olive Oil Standard Mix, Cod ) e olio di soia per una precisa assegnazione della trilinoleina. Contenuto in caroteni e clorofilla: e stata utilizzata la metodica proposta da [6] apportando lievi variazioni. Le misure sono state eseguite con uno spettrofotometro Carlo Erba Spectracomp 601. Acidita, N di perossidi e assorbimenti all'ultravioletto: sono state effettuate secondo il regolamento CEE n. 2568/91 [7]. I dati sono stati analizzati con il pacchetto statistico STATGRAPH mediante un'analisi della varianza ad una via (ANOV A), utilizzando come variabile la zona di provenienza. Le medie sono state separate secondo in Least Significant Difference Test. I valori relativi ai trigliceridi ed all'acidita, essendo in percentuali compresi tra e 30, sono stati trasformati, prima di essere sottoposti ad analisi statistica, secondo il metoda della radice quadrata (X + 0,5) Risultati e discussione Per quanta riguarda la composizione trigliceridica degli oli analizzati, i dati ottenuti non consentono un facile raffronto con quelli pre senti in letteratura e riferiti ad altre produzioni. Resta da definire se tale discrepanza sia da ascrivere aile procedure analitiche, che differiscono per i metodi di rivelazione cromatografici 0 per l'utilizzo di differenti fasi fisse 0 mobili da parte di altri Autori [4, 5] od alia reale differenza in percentuale di trigliceridi tra gli oli sardi e quelli di altre localita. Da un attento esame dei risultati ottenuti, comunque, e possibile definire dei fattori discriminanti, che potrebbero essere utile strumento di guida nella distinzione di un olio in relazione alia zona di provenienza, mediante semplice ripetizione del set di analisi proposto nel presente lavoro. Si evidenziano, infatti, delle differenze altamente significative per alcuni componenti chimici, che definiscono e tipizzano in maniera univoca Ie cinque principali zone oleicole della Sardegna. Dall'analisi dei dati presentati nelle tabelle I e 2, relative alla composizione trigliceridica e ai principali parametri chimico-fisici, rispettivamente, si evince che: e possibile identificare un olio di oliva extra vergine prodotto nella zona 3 per il suo statisticamente pili elevato contenuto del trigliceride SOO e per il pili alto assorbimento a 232 nm, rispetto aile altre quattro zone. Analogamente, possiamo esattamente classificare la zona 2, in quanta presenta il pili alto valore di POL e, contemporaneamente, il pili basso di 000, mentre la zona 4 ha fatto registrare il minor valore di ilk. Risulta, invece, pili difficile definire prontamente Ie zone 1 e 5, in quanta non presentano nessun parametro statisticamente differente nei confronti di tutte Ie altre zone, rna solo di alcune di esse. Comunque, considerando Ie discriminanti prima citate e possibile definire l'appartenenza alle zone 1 e 5 utilizzando pili di un parametro. Infatti, volendo distinguere un olio della zona 5 possiamo notare che presenta il pili basso contenuto, dal punto di vista statistico, in POL rispetto aile zone 1, 2 e 4 e si differenzia significativamente dalla zona 3 per un pili basso valore di SOO e di caroteni. Nella stessa maniera possiamo delimitare gli oli della zona 1, notando che il contenuto in POL e statisticamente differente rispetto aile altre zone, ad eccezione deua zona 4, da cui pero differisce nettamente nei confronti dell'ooln e del contenuto in caroteni e clorofille. Tutte queste considerazioni sono sintetizzate nella Fig. n. 1, in cui in grassetto sono riportate Ie discriminanti primarie, in quanto definiscono univocamente la zona di origine, e in corsivo queue secondarie, per Ie quali, cioe, e necessario il confronto di piu parametri per l'assegnazione della zona. OItre questi elementi discriminanti, l'osservazione dei dati della frazione trigliceridica mostra anche la presenza di alcuni composti Ie cui concentrazioni sono simili a prescindere dalla zona di provenienza e che accomunano quindi l'intera produzione sarda. E' il caso dei trigliceridi OLLn, PLLn, PLL e POO 0 del rapporto POOIPPO, che si presenta abbastanza costante in tutti gli oli esaminati. L'intervallo di questa rapporto, compreso tra un minimo di 5,01 e un massimo di 5,64, risulta abbastanza ristretto e puo quindi risultare di valido aiuto nel riconoscimento dell'origine sarda degli olio A conforto di questa tesi, e con Ie dovute cautele, si citano anche Ie discordanze del valore di questa rapporto in composizioni trigliceridiche riferite ad oli di altre origini [5, 7]. II valore di questa rapporto risulta inoltre facilmente calcolabile in virtu della buona definizione e dell' agevole assegnazione dei picchi 522

4 cromatografici dei POO e PPO. Per quanto riguarda Ie caratteristiche merceologiche degli oli esaminati, va rimarcata (Tab. 2) la loro appartenenza alia categoria degli extra vergini di alta qualita, con valori ottimali di acidita, N di perossidi e assorbimenti all'ultravioletto. Da notare, inoltre, che neg Ii oli sardi il contenuto di trilinoleina e sempre inferiore allimite dello 0,5% previsto dalla normativa CEE. 4. Conclusioni I risultati ottenuti con la presente ricerca consentono di formulare Ie seguenti conclusioni: la scelta di applicare il principio della "uniformita zonale" nel progettare il piano di campionamento degli oli di oliva da analizzare ha permesso di avere un quadro completo e reale della situazione produttiva isolana; l'utilizzo della composizione trigliceridica, dei pigmenti totali e di a1cuni parametri primari della qualita degli oli vergini di oliva ha messo in evidenza la possibilita di differenziare gli oli sardi in base alia provenienza territoriale; l'elaborazione statistica dei dati ottenuti ha permesso di individuare diversi parametri analitici che agiscono come discriminanti specifici per ognuna delle cinque zone tipiche di produzione. Di questi, a1cuni assumono molo di discriminanti primari: i trigliceridi POL e 000 per la zona 2, sao, PSO e l'indice K232 per la zona 3, l'indice ~K per la zona 4, altri rivestono un molo secondario. e stata riscontrata una costanza di valori del rapporto POOIPPO, a prescindere dalle diverse provenienze degli oli. Cio puo essere d'aiuto nell'attribuzione dell'origine geografica degli oli di oliva sardi. BIBLIOGRAFIA 1. Montedoro G., Garofalo L Caratteristiche qualitative degli oli vergini di oliva. Influenza di a1cune variabili: varieta, ambiente, conservazione, estrazione, condizionamento del prodotto finito. Riv. Ital. Sost. Grasse 61: Montedoro G I fattori genetici e agronomici della qualita degli oli di oliva. Uliveto 18: Lupoli M.F L'origine degli oli extra-vergini qi oliva non e pili un mistero. Uliveto 25: Perrin J-L., Prevot A Utilisation d'un detecteur a diffusion de la lumiere laser dans l'etude des corps gras par C.L.H.P. II. Analyse des triglycerides des huiles et des graisses. Rev. Fran. des Corps Gras 11: Marini D., Balestrieri F Analisi di miscele di trigliceridi mediante HPLC con rivelatore UV. Riv. Ital. Sost. Grasse 66: Mincione B., Poiana M., Giffre A.M., Modaferri v., Giuffre F Ricerche sugli oli monovarietali. Nota II. Caratterizzazione dell'olio di Peranzana. Riv. Ital. Sost. Grasse 73: Regolamento CEE n. 2568/91 (11 luglio 1991), L248, 5 sett Tab. 1 - Composizione percentuale in trigliceridi di oli di oliva extra vergini delle 5 principali zone olivicole della Sardegna. Tab. 1 - Percent triglyceridic composition of extra virgin olive oils from the five main oil producing places of Sardinia. Trigliceride (%) LLL OLLn PLLn all OOLn PLL OOL POL PPL 000 POO PPO sao PSO POOIPPO 1 0,237ab* 0,474a 0,164a 3,880b 2,536a 0,526a 15,085b 10,589b 1,550bc 30,688ab 24,766a 4,413ab 3,928bc 1,159c 5,612a 2 0,318a 0,459a 0,155a 4,626a 2,966a 0,707a 16,l09a 12,059a 1,871a 26,696c 24,421a 4,870a 3,569c 1,168c 5.014a ZONA 3 0,205b 0,475a 0,117a 3,981b 1,619b 0,456a 14,808b 9,090c 1,382cd 31,933ab 24,817a 4,632ab 4,813a 1,665a 5,357a 4 0,336a 0,533a 0,162a 4,359ab 1,621b 0,967a 15,022b 10,432b 1,825ab 29,613b 24,865a 4,81 lab 4,031b 1,417b 5,168a 5 0,241ab 0,404a 0,101a 3,888b 1,973b 0,521a 15,398ab 9,219c 1,171d 32,936a 24,581a 4.354b 3,984b 1,223bc 5,645a *Valori seguiti da lettere uguali all'intemo della stessa riga non differiscono significativamente, secondo il Least Significant Differences Test, per P.::;O,Ol. * Mean separation in each line by Least Significant Differences Test, at P~O,OJ. 523

5 Tab. 2 - Valori dei principali parametri chimico-fisici di oli di oliva extra vergini appartenenti alle cinque principali aree olivicole della Sardegna. Tab. 2 - Chemical and phisical values of extra virgin olive oils from the five main oil producing places of Sardinia. Zona N Acidita N Indici spettrofotometrici Caroteni Clorofille campioni (%) Perossidi (ppm) (ppm) Kl K3 L.\K (232nm) (270nm) 1 16 O.58a 11,34ab* 1,905bc O,136a -O,OOO8a 14,83b 38,59bc 2 23 O,44ab 10,93b 1,985b O,112b -O,OOlla 14,14b 33,69c 3 37 O,37b 13.58a 2,214a O,151a -O,OOI2a 19,13a 58,03a 4 15 O,34b 7,80c 1,812c O,135ab 19,80a 62,03a O,OO41b 5 19 O,47ab 9,57bc 1,946bc O,144a -O,OOI6a 16,68b 51,96b *Valori seguiti da lettere uguali all'intemo della stessa riga non differiscono significativamente, secondo il Least Significant Differences Test, per P~O,O 1. * Mean separation in each line by Least Significant Differences Test, at P~O.OI. Fig. 1 - Sintesi dei parametri discriminanti per il riconoscimento di oli di oliva extra vergini provenienti dalle cinque principali zone oleicole della Sardegna. In grassetto sono riportate Ie discriminanti primarie, in corsivo quelle secondarie. Fig. 1 - Discriminants parameters for recognizing extra virgin olive oil from the five main oil producing places of Sardinia. Principal discriminants are in bold type, while secondary ones are in italic. Zona 1 POL < z* 2, > ZZ 3 e 5 e = z. 4 OOLn > zz 4, 3 e 5, = z. 2 PSO < zz 3, 4 e = z. 5 Zona 4 DK < zz tutte POL > zz 3, 5 < z 2 e = Z 1 PSO > zz 1, 2 < z 3 e = Z 5 Caroteni > zz 1, 2, 5 e = z 3 Clorofille > zz 1, 2, 5 e = z 3 Zona 3 SOO > zz tutte PSO < zz tutte Kl > zz tutte POL < zz 1, 2, 4 e = z 5 Caroteni > zz 1, 2, 5 e = z 4 Clorofille > zz 1, 2, 5 e = Z 4 Zona 2 POL> zz tutte 000 < zz tutte all> zz 1, 3, 5 e = z 4 sao < zz 3, 4, 5 e = z 1 Zona 5 POL < zz 1, 2, 4 e = Z 3 SOO < z 3 > z 2 e = ZZ 1, 4 Caroteni < zz 3, 4 e = zz 1,2 Clorofille < zz 3, 4 > z 2 e = z 1 Z, zz zona e zone, rispettivamente <=>, statisticamente inferiore, uguale 0 superiore a, rispettivamente, per P~O,01. z, zz Producing place or places, respectively. <=> significantly lower, equal or higher than, respectively, at P<O