La sorveglianza in sanità pubblica: le attività analitiche dell IZS Venezie in autocontrollo

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1 La sorveglianza in sanità pubblica: le attività analitiche dell IZS Venezie in autocontrollo Dr.ssa Monia Cocchi SCT4 FVG Istituto Zooprofilattico Sperimentale delle Venezie La sicurezza alimentare dei molluschi bivalvi in Friuli Venezia Giulia: azioni di controllo e autocontrollo Grado (GO) 31/05/2018 Venezie in autocontrollo Introduzione Autocontrollo microbiologico Attività analitica del Laboratorio di tecnologie alimentari Autocontrollo biotossine algali (acido okadaico) Attività analitica del Laboratorio di Udine M. Cocchi- 31/05/2018 2

2 Venezie in autocontrollo. Introduzione Protocollo di intesa ai fini della sicurezza alimentare Definizione e coordinamento dei soggetti coinvolti: AC e OSA Programmazione dei controlli sia ufficiali che in autocontrollo: alternanza o scacchiera delle zone di campionamento Fermo volontario tra il prelievo dei MBV e i referti dei laboratori: nel giorno di consegna e fino all'invio dei referti del test rapido per la ricerca dell'acido Okadaico da parte dell'izsve sez. di BasaIdella al CTI; entro 4 giorni dal prelievo, compreso il giorno di prelievo e consegna e fino all'invio dei referti analitici della presenza di contaminanti microbiologici da parte dell' IZSVe Sez. San Donà di Piave (autocontrollo) al CTI Prelievo in autocontrollo da parte degli OSA: raccolta di campione rappresentativo della zona di produzione M. Cocchi- 31/05/ Venezie in autocontrollo. Autocontrollo microbiologico Autocontrollo microbiologico. Laboratorio di tecnologie alimentari, S. Donà di Piave, SCS 8 «Valorizzazione delle produzioni alimentari», Dr.ssa M. Favretti Ricerca Salmonella spp(afnor BRD 07/06-07/04; ISO :2017(escluso Annex D); ricerca Escherichia coli (MPN, metodo UNI EN ISO :2015. Esclusi CAP. 4.1,9.1 e 10.1) Altre analisi, su richiesta (metodo colturale, biomolecolare) Semina in terreno agarizzato, TBX, dei tubi virati E. coli, MPN. Tubi a singola e doppia concentrazione. M. Cocchi- 31/05/2018 Giallo, viraggio Foto: dr.ssa M Favretti 4

3 Autocontrollo biotossine algali, Sezione territoriale Udine. SCT4 FVG In particolari condizioni possono proliferare alghe unicellulari che a determinate concentrazioni producono biotossine Le biotossine algali si possono trovare all interno dei MBV e il loro consumo può determinare l insorgenza di quadri patologici nell uomo (quadro patologico dipende dalla natura e dalla concentrazione della tossina) Problema di sanità pubblica Accumulo biotossine nei mitili frequente, soprattutto l acido okadaico(nord Adriatico) M. Cocchi- 31/05/ Tossine OA (tossine acide, Joint FAO/IOC/WHO ad hoc Expert Consultationon Biotoxinsin Bivalve Molluscs, 2004): Acido okadaico(oa) e analoghi (DTX1, DTX2 e DTX3) Termostabili Lipofile Prodotte da Dinoflagellati Possono accumularsi in diverse specie di molluschi Tossine OA causano nell uomo la sindrome DSP: nausea, diarrea, vomito, dolori addominali Mda: inibizione fosfatasi (PP1 e PP2A) M. Cocchi- 31/05/2018 6

4 Campionamento a carico dell OSA Consegna al laboratorio Esecuzione test ELISA Rapporto di prova CTI M. Cocchi-31/05/ Foto: dr A. Zentilin Campione prelevato dall OSA Rappresentativo MBV taglia commerciale Identificato e accompagnato da verbale M. Cocchi- 31/05/2018 8

5 Analisi di screening per ricerca di residui di acido okadaico, ELISA Campionamento a carico dell OSA Consegna al laboratorio Esecuzione test ELISA Saggio colorimetrico basato sulla inibizione dell attività fosfatasicada parte del gruppo delle tossine OA e delle tossine carbossiliche del gruppo dell OA (DTX1, DTX2 e DTX3) Rapporto di prova CTI risposta nella giornata di consegna del/i campione/i Piastra ELISA M. Cocchi- 31/05/ Campionamento a carico dell OSA Consegna al laboratorio Esecuzione test ELISA Rapporto di prova CTI Preparazione e omogeneizzazione campione Estrazione M. Cocchi- 31/05/2018 Esecuzione test ELISA e lettura allo spettrofotometro

6 Campionamento a carico dell OSA Consegna al laboratorio Esecuzione test ELISA Rapporto di prova CTI Campione conforme, <100 ug/kg p.e. AO Campione non conforme, 100 ug/kg p.e. AO Conferma in LC/MS-MS, laboratorio di chimica, PD Rapporto di prova inviato al CTI (condivisione esito AC/OSA) Tempo analisi: 4-6 h dalla consegna al laboratorio M. Cocchi- 31/05/ L. Bille et al., SIRAM. Correlazione tra la presenza le fioriture di Dinophysis sp. e di Acido Okadaico nei mitili del Golfo di Trieste: uno studio preliminare Scopo: valutazione di una possibile correlazione tra la presenza di alghe del genere Dinophysis sp. nell acqua e di AO nei mitili (controlli ufficiali) La correlazione tra i livelli di fitoplancton in acqua e le tossine nei molluschi, seppur probabile, è abbastanza controversa e difficile da provare, in particolare per l AO: correlazione moderata L analisi statistica indica una significativa associazione positiva tra il riscontro di Dinophysisnell acqua e di campioni di mitili non conformi La percentuale di campioni di mitili non conformi è più alta in presenza di Dinophysis che in assenza di questo genere di fitoplancton (10% vs 3%). M. Cocchi- 31/05/

7 In questo studio preliminare, tuttavia, sono stati considerati solo i risultati dei controlli ufficiali, ottenendo una frequenza di campionamento quindicinale i cui risultati, secondo la letteratura scientifica, dovrebbero essere interpretati con cautela Costituisce un primo passo verso ulteriori studi che permetteranno di acquisire maggiori conoscenze riguardo le dinamiche delle fioriture di dinoflagellati e l accumulo di tossine nei molluschi Fig. Andamento temporale del numero di cellule di Dinophysis sp. presenti nell acqua e della concentrazione di AO nei mitili Importanza del monitoraggio del fitoplancton come strumento di early warning M. Cocchi 31/05/ M. Cocchi et al., SIRAM. Acido okadaico in molluschi bivalvi allevati nel Golfo di Trieste: considerazioni sull applicazione del metodo ELISA in autocontrollo. Scopo: valutazione nel periodo dei risultati ottenuti con il metodo ELISA e con il metodo LC-MS/MS. Sono stati considerati i valori di AO suddivisi per zona monitorata del golfo di Trieste Lo studio condotto ha evidenziato una sostanziale sovrapponibilità dei dati ottenuti con il test di screening ELISA rispetto a quelli ottenuti in LC/MS-MS. M. Cocchi- 31/05/

8 ELISA AO in MBV: rapidi tempi di risposta, importante elemento a garanzia della salubrità del prodotto ELISA AO per studi futuri sull andamento della contaminazione dei MBV. Questi dati, uniti a quelli sulla determinazione del fitoplancton potrebbero contribuire: ad individuare aree maggiormente soggette all accumulo di biotossine, a valutare le dinamiche di accumulo specie-specifiche, a determinare i periodi maggiormente a rischio M. Cocchi- 31/05/ Venezie in autocontrollo Grado, 31/05/2018 M. Cocchi-31/05/