TEST FARMACI ANSIOLITICI E BENZODIAZEPINE
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- Dario Bartoli
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1 TEST FARMACI ANSIOLITICI E BENZODIAZEPINE
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4 I livelli di ansia sono alterati o aumentati da: Specifici stimoli Attesa di eventi inevitabili Ambiente nuovo Incertezza Paura Incapacità di esprimere impulsi o desideri Creazione di un conflitto che blocca il comportamento Conflitto
5 FARMACI ANSIOLITICI
6 Interazione benzodiazepine-gaba-canale dello ione cloruro
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8 TEST PER LE BENZODIAZEPINE 1) Binding 2) Antagonismo aggressività TEST PER GLI ANSIOLITICI 1) Gabbia a due comparti (evitamento) 2) Labirinto a quattro bracci 3) Test del conflitto 4) Interazione sociale 5) Test della discriminazione (pentilenetetrazolo)
9 BINDING
10 GABA ratio KD - GABA KD + GABA
11 Advantages and disavantages of ethological and conditioned models I Ethological Advantages -Often quick and easy to use - Equipement is inexpensive -Training of animals is not required - Natural stimuli are used Disavantages -Anxiolytic and anxiogenic effects are confounded by changes in motor activity - Baseline measures are subject to marked day-to-day variation -Animal cannot be reused -Effects of chronic drug administration cannot be investigated becouse exploratory behaviour habituates -Effects often cannot be reproduced within and between laboratories
12 Advantages and disavantages of conditioned and ethological models II Conditioned model Advantages Disavantages -Baseline measures are consistent and reproducible within and between laboratories -Animals can be reused - Good predictor of a drug s anxiolitic potential in humans -Animals have undergo long training periods -Food and water deprivation is required Only benzodiazepines have consistent effects - Sedation and muscle relaxation can affect the animal s ability to perform the behaviour
13 INIBIZIONE DELL EVITAMENTO
14 PROCEDIMENTO Durante i primi due giorni del test gli animali vengono lasciati all interno dello shuttle-box per 20 minuti, per consentire loro l ambientamento. I tre giorni successivi l animale viene testato sottoponendolo ad un training di 80, 40, 20 trial per un tempo totale di 40, 20, 10 minuti rispettivamente. La durata de singolo trial è di 6.5 sec. così suddivisa: Stimolo acustico/luminoso 6,5 sec Stimolo elettrico ultimi 3 sec dell intensità di 1 ma. Ogni trial è distanziato dal precedente di 30 sec e per ottenere una migliore risposta si usano due stimoli (sonoro e visivo) contemporaneamente. Schema riassuntivo 1 giorno: 20 min di adattamento 2 giorno:20 min di adattamento 3 giorno:80 trial per 20 min di test 4 giorno:40 trial per 20 min di test 5 giorno 20 trial per 10 min di test
15 Comportamenti registrati: Stop = numero di shock subiti e nessun passaggio del ratto durante stimolo Fuga = numero di passaggi in presenza di shock Evitamento = numero di passaggi in presenza di solo stimolo acustico/visivo Attraversamenti = attraversamenti spontanei durante test Latenza = tempo latenza (sec) tra stimolo acustico/visivo e passaggio Con BZ diminuisce evitamento e aumenta stop
16 LABIRINTO A QUATTRO BRACCI
17 TEST DEL CONFLITTO (TEST DI VOGEL)
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20 TEST DEL CONFLITTO (TEST DI GELLER)
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22 TEST ANTICONFLITTUALE (1 ma) TEST PROCONFLITTUALE (0.3 ma) N DELLE SCOSSE RICEVUTE CONTROLLO DIAZEPAM FG-7142
23 Dose-response effect of chloriazepoxide on rewarded, time-out and punished responding. The highest doses of benzodiazepine depress conditioned respondig. 10 mg/kg of the drug increases responding in all three sectors of the schedule but punished responding increases most. Rew = reward To = time-out c = conflict
24 EFFECTIVENESS OF SOME PSYCHOTROPIC DRUGS IN THE CONFLICT TEST ACTIVE BENZODIAZEPINES MEPROBAMATE BARBITURES ETHANOL (?) INACTIVE MORPHINE AMPHETAMINE CHLORPROMAZINE HALOPERIDOL IMIPRAMINE IPRONIAZID
25 TEST DELL INTERAZIONE SOCIALE
26 1. Esplorazione del partner 2. Ispezione ano-genitale 3. Monta 4. Autopulizia 5. Morsicature 6. Inseguimento 7. Scalciamento 8. Collutazione
27 Mean time spent in active social interaction Water Diazepam 0.5 mg/kg Low light Low light High light Familiar Unfamiliar Unfamiliar The mean time spent in active social interaction for rats tested in 3 conditions, after 5 days of diazepam administration (0.5 mg/kg) and after 5 days of water injection.
28 SEC ACUTE PHENOBARBITONE Sodium phenobarbitone 25 mg /Kg Saline Sodium phenobarbitone 35 mg /Kg CHRONIC PHENOBARBITONE Sodium phenobarbitone 25 mg /Kg Saline MEPROBAMATE Meprobamate Saline low light low light high light familiar unfamiliar unfamiliar low light low light high light low light low light high light familiar familiar unfamiliar familiar familiar unfamiliar The left-hand histogram shows the mean time spent in active social interaction by rats given an acute dose of sodium phenobarbitone, and by a group of saline injected control rats. Each point is the mean score of six pairs of rats, and indipendent groups of rats were tested in 3 different conditions.the central panel shows the results for rats treated with s. phenobarbitone for 5 days and for rats given 5 days of saline injections. The right hand histogram shows the results for rats given an acute dose of meprobamate and control rats given propylene glycol injections.
29 SEC MEAN TIME SPENT IN ACTIVE SOCIAL INTERACTION SALINE INJECTIONS CAFFEINE 20mg/Kg AMPHETAMINE 2 mg/kg Low light Low light High light familiar unfamiliar unfamiliar MEAN TIME SPENT IN ACTIVE SOCIAL INTERACTION, IN 3 TEST CONDITIONS, FOR RATS INJECTED WITH CAFFEINE CITRATE (20 mg/kg), AMPHETAMINE (2 mg/kg) AND FOR SALINE INJECTION CONTROLS
30 TEST DELLA DISCRIMINAZIONE
31 Test della discriminazione Addestramento Veicolo - leva A Farmaco A - leva B H2O / cibo H2O / cibo Esperimento Farmaco B - leva B Farmaco C - leva A Farmaco B = farmaco A H2O / cibo H2O / cibo Farmaco C diverso da farmaco B
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