GUIDA PER GLI UTENTI

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1 ASST - Spedali Civili di Brescia Dipartimento di Diagnostica di Laboratorio Presidio Ospedaliero Spedali Civili di Brescia SERVIZIO DI MEDICINA DI LABORATORIO MICROBIOLOGIA E VIROLOGIA Direttore: prof. Arnaldo Caruso GUIDA PER GLI UTENTI AL4LA001 - Edizione 2016 Data revisione: 30 dicembre 2016

2 INDICE PRESENTAZIONE DEL SERVIZIO... 3 AMBULATORI... 4 SCOPO DELLA GUIDA PER GLI UTENTI... 5 MODALITÀ DI ACCETTAZIONE DEI CAMPIONI... 6 ORGANIGRAMMA E RECAPITI TELEFONICI INTERNI... 7 BATTERIOLOGIA... 8 ISOLAMENTO BATTERI: LIQUOR-SANGUE-ASPIRATO MIDOLLARE... 9 ISOLAMENTO BATTERI: LIQUOR-SANGUE-ASPIRATO MIDOLLARE. 10 ISOLAMENTO BATTERI: APPARATO ORO-FARINGEO-NASALE ISOLAMENTO BATTERI: APPARATO RESPIRATORIO ISOLAMENTO BATTERI: APPARATO AURICOLARE ISOLAMENTO BATTERI: APPARATO OCULARE ISOLAMENTO BATTERI: URINA ISOLAMENTO BATTERI: APPARATO URO-GENITALE ISOLAMENTO BATTERI: FECI ISOLAMENTO BATTERI: RICERCHE MIRATE ISOLAMENTO BATTERI: LIQUIDI BIOLOGICI ISOLAMENTO BATTERI: LIQUIDI DRENAGGIO ISOLAMENTO BATTERI: BIOPSIE - TESSUTI - PROTESI ISOLAMENTO BATTERI: TAMPONI CUTANEI E DA FERITA RICERCA GERMI SENTINELLA ISOLAMENTO BATTERI: PROVE DI STERILITÀ RICERCA ENDOTOSSINE: PROVE DI STERILITÀ MICOBATTERI RICERCA ANTIGENI E TOSSINE BATTERICHE RICERCA ANTICORPI PER BATTERI BIOLOGIA MOLECOLARE PER BATTERI UREA BREATH TEST REUMATOLOGIA MICOLOGIA ISOLAMENTO MICETI RICERCA ANTIGENI MICOTICI RICERCA ANTICORPI PER MICETI PARASSITOLOGIA OSSERVAZIONE MICROSCOPICA PER PARASSITI RICERCA ANTIGENI PER PARASSITI RICERCA ANTICORPI PER PARASSITI BIOLOGIA MOLECOLARE PER PARASSITI VIROLOGIA ISOLAMENTO VIRUS RICERCA ANTIGENI VIRALI RICERCA ANTICORPI PER VIRUS BIOLOGIA MOLECOLARE PER VIRUS INDICE ANALITICO... 72

3 3 PRESENTAZIONE DEL SERVIZIO Il Servizio di Medicina di Laboratorio Microbiologia e Virologia esegue indagini su campioni provenienti sia da pazienti ricoverati presso i reparti dell Azienda Spedali Civili di Brescia, sia da pazienti non ricoverati che afferiscono al Servizio Prelievi Esterni. I metodi diagnostici impiegati consentono l isolamento e la tipizzazione di batteri, miceti, protozoi e virus da materiali biologici quali sangue, liquor, espettorato, urina, feci e altri campioni. Le indagini sono eseguite con metodi classici ed innovativi che prevedono anche l impiego di tecniche di biologia molecolare. Nel caso vengano riscontrate infezioni batteriche o micotiche è possibile eseguire l antibiogramma o l antimicogramma per valutare la sensibilità del microrganismo isolato alle molecole antibiotiche o antifungine disponibili. Il Servizio esegue, inoltre, indagini sierologiche per documentare la presenza di anticorpi (IgG, IgM, IgA) indotti da infezioni batteriche, micotiche, protozoarie e virali. Il Servizio è centro di riferimento regionale per la diagnostica delle infezioni da HIV: è in grado di eseguire indagini sierologiche di screening e di conferma, oltre che quantificare la carica virale e valutare la farmacoresistenza del virus. Per informazioni e chiarimenti, i Medici Specialisti che operano presso il Servizio sono disponibili ai recapiti telefonici riportati nella presente Guida. Il Servizio è collocato al piano terra del Padiglione Infettivi ed è operativo dalle ore 8,00 alle 20,00 dal lunedì al venerdì e il sabato, la domenica e i festivi infrasettimanali dalle ore 8,00 alle 16,00.

4 4 AMBULATORI Il Servizio mette a disposizione all utente esterno i seguenti ambulatori: - Ambulatorio di Microbiologia per la diagnosi delle infezioni dell apparato uro-genitale e per il controllo microbiologico delle infezioni in gravidanza; - Ambulatorio di Micologia per la diagnosi delle infezioni micosi superficiali; - Ambulatorio per l esecuzione dell urea breath test nelle infezioni da Helicobacter pylori. Ambulatorio Giorno Ore Dove Prenotazioni Microbiologia lunedì da martedì a venerdì 9,00-11,00 10,00 11,00 Micologia mercoledì 9,00-10,00 Esame micologico pediatrico venerdì 10,00-11,00 Poliambulatori area Stauffer da lunedì a venerdì dalle 9,00 alle 12,00 e dalle 14,00 alle 15,30 tel Urea breath test da lunedì a venerdì 9,15

5 5 SCOPO DELLA GUIDA PER GLI UTENTI La presente guida è stata redatta con l intento di fornire agli utenti informazioni riguardanti: le indagini eseguite, le modalità di raccolta, conservazione e trasporto dei campioni, i tempi di. Il Personale del Servizio sarà grato a tutti coloro che avanzeranno suggerimenti per migliorare il contenuto della presente Guida.

6 6 MODALITÀ DI ACCETTAZIONE DEI CAMPIONI L accettazione dei campioni avviene dal lunedì al sabato - dalle ore 8,00 alle ore 11,00 In caso di urgenza dalle 11,00 alle 16,00 è possibile accettare campioni oltre l orario stabilito, previo contatto telefonico (tel 8532). Servizio Prelievi Esterni: I campioni devono essere identificati dall etichetta prodotta dal sistema informatico del Servizio Prelievi Esterni. Reparti collegati al sistema informatico dei laboratori: i campioni devono essere identificati dall etichetta prodotta dal sistema informatico presente nel reparto. Nota bene: dopo aver inserito le richieste di analisi nel sistema informatico, ricordarsi di effettuare il loro trasferimento al laboratorio; in caso di urgenza è necessario contattare telefonicamente il laboratorio. È importante compilare anche la parte riguardante le NOTIZIE CLINICHE: l indicazione del sospetto clinico e dell eventuale terapia antimicrobica e qualunque altra informazione utile sono indispensabili per la valutazione dell idoneità del campione e per una corretta esecuzione e interpretazione dell esame microbiologico. Reparti non collegati al sistema informatico dei laboratori: i campioni dei pazienti devono essere identificati dall etichetta fornita al reparto dall Accettazione Amministrativa al momento del ricovero e devono essere accompagnati dal relativo modulo di richiesta analisi fornito dal laboratorio. Per le richieste riguardanti il Monitoraggio ambientale e quelle del Pronto Soccorso Pediatrico (Osservazione Breve) è necessario utilizzare ancora i moduli cartacei forniti dal Laboratorio. Inoltre, per i seguenti profili diagnostici, in aggiunta all accettazione online, è necessario inviare, unitamente al campione o via fax, le apposite schede anamnestiche compilate: diagnostica Toxoplasmosi congenita indagini per pazienti con Fibrosi Cistica

7 7 ORGANIGRAMMA E RECAPITI TELEFONICI INTERNI Direttore prof. Arnaldo Caruso tel Batteriologia tel prof. Carlo Bonfanti tel Emocolture tel dr.ssa Ida Foresti tel.6697 Micobatteri e miceti tel Dirigenti medici di 1 livello dr. Franco Gargiulo tel Infezioni respiratorie tel 5656 Dirigenti biologi di 1 livello dr. Gabriele Pinsi tel Coprocolture/urocolture tel dr. Giuseppe De Rose tel Batteriologia Pediatrica Tel 5656 dr.ssa Patrizia Boldrini dr.ssa Maria De Francesco prof.ssa Simona Fiorentini dr.ssa Marina Gelmi dr.ssa Cinzia Giagulli dr.ssa Fabrizia Martinelli dr. Claudio Poiesi dr.ssa Caterina Pollara dr. Giuseppe Ravizzola dr.ssa Anna Rodella dr.ssa Luigina Terlenghi tel 5859 tel tel tel tel tel tel tel tel tel tel Dirigente analista di 1 livello dr.ssa Laura Peroni tel Sierologia tel Epatiti virali e HIV tel Biologia molecolare tel Virologia tel Accettazione dalle ore 8,00 alle 20,00 risponde un laureato del Servizio Tecnico coordinatore sig.ra Elena Orlandi tel Segreteria Segreteria sig.ra Evelina Pinardi tel telefax 6071 tel tel telefax 6071 Ambulatorio tamp.vaginali tel. 6347

8 8 BATTERIOLOGIA Isolamento batteri: liquor - sangue - aspirato midollare... 9 apparato oro-faringeo-nasale apparato respiratorio apparato auricolare e oculare urina apparato uro-genitale feci ricerche mirate cateteri - drenaggi liquidi biologici e di drenaggio biopsie - tessuti - protesi tamponi cutanei e da ferita germi sentinella prove di sterilità Micobatteri Ricerca antigeni e tossine batteriche Ricerca anticorpi per batteri Biologia molecolare per batteri Urea breath test... 40

9 9 Isolamento batteri: liquor-sangue-aspirato midollare Indagine diagnostica Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Esame batteriologico del liquor Liquor Prelevare 1-5 ml di liquor in provetta sterile. Inviare subito al laboratorio. Quando il Servizio è chiuso inoculare 1-2 ml di liquor + supplemento in un flacone pediatrico (flacone tappo rosa). Se non si dispone del supplemento farlo presente al momento della consegna del campione. Consegnare la parte rimanete del liquor per esame microscopico, ricerca antigene ed eventuale PCR Sono effettuati di routine: Osservazione microscopica Antigeni solubili batterici e/o biologia molecolare previo accordo Esame colturale Si consiglia di eseguire anche un prelievo per emocoltura. Ricerca antigeni solubili Liquor Per la ricerca degli antigeni solubili è necessario almeno 1 ml di liquor. Raccogliere il campione in provetta sterile e inviarlo subito in laboratorio. 1 giorno Sono ricercati di routine: Streptococcus agalactiae (gruppo B) Streptococcus pneumoniae Neisseria meningitidis Haemophilus influenzae

10 10 Isolamento batteri: liquor-sangue-aspirato midollare Indagine diagnostica Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Adulti: inoculare 10 ml di sangue in un flacone per isolamento batteri aerobi ( tappo azzurro)10 ml di sangue in un flacone per isolamento batteri anaerobi (tappo arancio) Eseguire due set di emocolture. Emocoltura da vena periferica Bambini: La quantità di sangue da prelevare dipende dall età e dal peso del bambino e dal tipo e numero di flaconi. Neonati: prelevare 2-3 ml da vena periferica e immetterli in 1 flacone Ped-Plus (tappo rosa) Fino a 6 aa: prelevare 3-5 ml da vena periferica e immetterli in 1 flacone Ped-Plus 6-10 aa: prelevare 5-8 ml da vena periferica e immetterli in 1 flacone Ped-Plus Oltre 10 aa: effettuare, se possibile, 2 prelievi da vena periferica (braccio destro e braccio sinistro) e inoculare 2 flaconi Ped-Plus con 5-8 ml ciascuno Per tutte le fasce di età: se si sospetta un infezione da anaerobi (infezioni addomino-pelviche, interventi chirurgici addominali, raccolte ascessuali) prelevare la stessa quantità di sangue ed inoculare 1 flacone per anaerobi (tappo arancio) Inviare subito i flaconi inoculati al Laboratorio ( dal lunedì al venerdì sabato domenica e festivi) Quando il Laboratorio di Microbiologia è chiuso inviare al Laboratorio di Emergenza Su richiesta il tempo di incubazione è protratto fino a 20 giorni. Emocoltura da catetere In presenza di catetere vascolare, se gli accessi venosi periferici sono inagibili, si può procedere al prelievo dal catetere vascolare. In tal caso, prima di prelevare il sangue, prelevare liquido intracatetere ( Modalità di prelievo: aspirare il liquido finché non si aspira un po di sangue, non più di 1 ml totale, e trasferire in contenitore sterile) poi procedere al prelievo del sangue da CVC e inocularlo in un flacone Ped-Plus PROTOCOLLO DI SORVEGLIANZA DEI CATETERI VASCOLARI Solitamente con frequenza settimanale, inviare tampone HUB tampone cute punto di inserzione liquido intracatetere

11 11 Isolamento batteri: liquor-sangue-aspirato midollare Indagine diagnostica Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Mielocoltura Aspirato midollare Inoculare l aspirato midollare in un flacone per isolamento batteri aerobi e in un flacone per isolamento batteri anaerobi. Per l'invio comportarsi come per le emocolture Su richiesta il tempo di incubazione è protratto fino a 20 giorni. Aspirare il liquido finché non si aspira un po di sangue (non più di 1 ml totale) e trasferire in contenitore sterile. Esame colturale su liquido intracatetere Liquido intracatetere PROTOCOLLO DI SORVEGLIANZA DEI CATETERI VASCOLARI Solitamente con frequenza settimanale, inviare tampone HUB tampone cute punto di inserzione liquido intracatetere Procalcitonina Effettuare il prelievo con provetta da sierologia contenente EDTA. 2 giorni

12 12 Isolamento batteri: apparato oro-faringeo-nasale Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Tampone faringeo Tampone tonsilla Tampone labbro Tampone lingua Tampone mucosa orale Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Sono ricercati di routine: Streptococcus pyogenes Streptococchi β emolitici (gruppo C e G) Staphylococcus aureus Miceti lievitiformi Sono ricercati su richiesta: Batteri anaerobi (angina di Vincent) Arcanobacterium haemolyticum Neisseria gonorrhoeae nel neonato (vedi ricerche mirate) Corynebacterium diphteriae Tampone faringeo test rapido per la ricerca di S. pyogenes Utilizzare l apposito tampone senza terreno di trasporto. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo immediatamente in laboratorio. 2 giorni Questo test ha una specificità del 99% e una sensibilità dell'80%: un risultato negativo deve essere confermato con l'esame colturale tradizionale. Tampone nasale Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Miceti lievitiformi Aspergillus sp. Sono ricercati su richiesta: Batteri anaerobi (solo su tampone nasale profondo) Neisseria meningitidis (vedi ricerche mirate)

13 13 Isolamento batteri: apparato respiratorio Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Aspirato naso faringeo Inserire l'apposito catetere attraverso il naso fino al retrofaringe, aspirare ml e metterli in una provetta sterile vuota oppure immettere 1-2 ml di fisiologica sterile e aspirare direttamente nel contenitore sterile. Consegnare entro 1 ora oppure conservare a 4 C fino a 12 ore. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Miceti lievitiformi È consigliabile raccogliere la prima epettorazione del mattino a digiuno, dopo detersione del cavo orale con acqua. Espettorare direttamente nel contenitore sterile. Vanno esclusi i materiali francamente salivari. Espettorato Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. È un materiale poco rappresentativo (a causa della contaminazione con la flora microbica dell'orofaringe) per la diagnosi eziologica di infezione delle vie aeree profonde. Utile, per la diagnosi di polmonite, la ricerca dell'antigene di pneumococco nelle urine. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Miceti lievitiformi Aspergillus sp. Lavaggio broncoalveolare 4 giorni Sono ricercati su richiesta: Batteri anaerobi (solo su BAL) Nocardia spp. Legionella spp. Miceti a lenta crescita Broncoaspirato Raccogliere il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Tracheoaspirato Protesi tracheale e bronchiale

14 14 Isolamento batteri: apparato respiratorio Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Aspirato naso faringeo Inserire l'apposito catetere attraverso il naso fino al retrofaringe, aspirare ml e metterli in una provetta sterile vuota oppure immettere 1-2 ml di fisiologica sterile e aspirare direttamente nel contenitore sterile. Consegnare entro 1 ora oppure conservare a 4 C fino a 12 ore. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Miceti lievitiformi Liquido pleurico Raccogliere il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio prima possibile. Se la consegna avviene il giorno successivo al prelievo conservare a 4 C Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Lieviti patogeni

15 15 Isolamento batteri: apparato auricolare Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Tampone auricolare destro Tampone auricolare sinistro Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Miceti lievitiformi Aspergillus sp. Sono ricercati su richiesta: Batteri anaerobi Isolamento batteri: apparato oculare Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Tampone oculare/congiuntivale destro Tampone oculare/congiuntivale sinistro Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Miceti lievitiformi Aspergillus sp. Sono ricercati su richiesta: Batteri anaerobi Neisseria gonorrhoeae nel neonato (vedi ricerche mirate)

16 16 Isolamento batteri: urina Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Urina Lavare accuratamente la zona periuretrale con acqua e sapone (non usare antisettici) e raccogliere l urina del mitto intermedio in specifico contenitore sterile (contenitore tappo giallo e relativa provetta sottovuoto tappo giallo come da istruzione già consegnata a tutti i reparti e presidi esterni) Far bere abbondantemente il bambino. Lavare con acqua e sapone i genitali esterni e le regioni sovrapubica e perianale, risciacquare ed asciugare; effettuare quindi un tampone periuretrale (prepuziale o vulvare). Applicare il sacchetto fino alla raccolta del campione, rimuoverlo, prelevare sterilmente con siringa e trasferire in contenitore sterile. Inviare al Laboratorio unitamente al tampone di accompagnamento entro 2 ore: non è possibile la conservazione. NON USARE I NUOVI CONTENITORI TAPPO GIALLO MA UTILIZZARE I BARATTOLI TAPPO ROSSO Inviare in laboratorio entro 2 ore o conservare il campione a +4 C (frigorifero) fino a 24 ore. Urina da catetere vescicale a permanenza - Clampare il catetere immediatamente a valle del dispositivo di prelievo. - Disinfettare il dispositivo del catetere predisposto per il prelievo. - Aspirare con una siringa 20 ml di urina, dispensarla nell'apposita provetta per urocoltura con tappo giallo. - Rimuovere il clampaggio dal catetere. - Consegnare il campione in laboratorio il più presto possibile oppure conservare in frigorifero ( 2-8 ) fino al momento della consegna ( tempo massimo 24 ore ) 4 giorni Punta catetere vescicale permanente La coltura della punta non è interpretabile a causa della contaminazione della flora uretrale: il materiale non è da considerarsi idoneo. Urina da sacchetto Far bere abbondantemente il bambino. Lavare con acqua e sapone i genitali esterni e le regioni sovrapubica e perianale, risciacquare ed asciugare; effettuare quindi un tampone periuretrale (prepuziale o vulvare). Applicare il sacchetto fino alla raccolta del campione, rimuoverlo, prelevare sterilmente con siringa e trasferire in contenitore sterile. Inviare al Laboratorio unitamente al tampone di accompagnamento entro 2 ore: non è possibile la conservazione. NON USARE I NUOVI CONTENITORI TAPPO GIALLO MA UTILIZZARE I BARATTOLI TAPPO ROSSO

17 17 Isolamento batteri: apparato uro-genitale Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Tampone balano-prepuziale Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Possibile conservare a +4 C per 24 ore Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Miceti Tampone endocervicale Utilizzando uno speculum, rimuovere il muco cervicale con un tampone a perdere. Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto e prelevare due campioni Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Possibile conservare a +4 C per 24 ore Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Neisseria gonorrhoeae Sono ricercati su richiesta: Mycoplasma hominis Ureaplasma urealyticum Chlamydia trachomatis (vedi ricerche mirate) Tampone perianale Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Possibile conservare a +4 C per 24 ore Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Miceti Tampone rettale per Streptococco gruppo B Utilizzare gli appositi tamponi con terreno di trasporto. Prelevare un tampone vaginale e un tampone rettale. Conservare i tamponi e a temperatura ambiente e inviarli in laboratorio entro 2 ore. Possibile conservare a +4 C per 24 ore Sono ricercati di routine: Streptococco gruppo B Ricerca riservata a donne in gravidanza Utilizzare gli appositi tamponi sottili con terreno di trasporto. Prelevare due campioni dopo almeno 2 ore dall ultima minzione. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Neisseria gonorrhoeae Tampone uretrale Inserire ogni tampone per 2-3 cm e ruotarlo. Conservare i tamponi a temperatura ambiente e inviarli in laboratorio entro 2 ore. Possibile conservare a +4 C per 24 ore Sono ricercati su richiesta: Mycoplasma hominis Ureaplasma urealyticum (vedi ricerche mirate)

18 18 Isolamento batteri: apparato uro-genitale Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Tampone vaginale Utilizzare tamponi con terreno di trasporto. Prelevare due campioni a livello del fornice posteriore (senza speculum). Conservare i tamponi a temperatura ambiente e inviarli in laboratorio entro 2 ore. Possibile conservare a+4 C per 24 ore In età pediatrica, ove non è possibile effettuare tampone endovaginale, raccogliere la secrezione e effettuare un tampone vulvare. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi e anaerobi Miceti Trichomonas vaginalis Gardnerella vaginalis Sono ricercati su richiesta: Mycoplasma hominis Ureaplasma urealyticum Chlamydia trachomatis (vedi ricerche mirate) Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Miceti Tampone vulvare Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto e prelevare un campione. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Possibile conservare a +4 C fino a 24 ore In età pre-pubere vengono cercati anche: Haemophilus influenzae Streptococcus pyogenes. In età pre-pubere sono cercati su richiesta: Chlamydia trachomatis (con ibridazione) Neisseria gonorrhoeae (con ibridazione) Vanno effettuati con scraping (cytobrush) vulvare e dall introito vaginale inserito nell apposito terreno di trasposto per Clamidia. Annessi fetali Raccogliere il campione in contenitore sterile. Inviare subito in laboratorio. Durante le ore di chiusura del laboratorio aggiungere 5-6 ml di fisiologica sterile, agitare bene e trasferire 3 ml in flacone BACTEC-ANA e 3 ml in flacone BACTEC- AERO (vedere pagina 10) 6 giorni Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Neisseria gonorrhoeae Haemophilus spp.

19 19 Isolamento batteri: apparato uro-genitale Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Dispositivo endouterino Trasferire il dispositivo endouterino in contenitore sterile. Inviare subito in laboratorio. 6 giorni Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Sono ricercati su richiesta: Actinomyces spp. (vedi ricerche mirate) ( dopo 10 giorni ) Liquido amniotico Raccogliere il campione in contenitore sterile. Inviare subito in laboratorio. Durante le ore di chiusura del laboratorio aggiungere 5-6 ml in flacone BACTEC- ANA e in flacone BACTEC-AERO (vedere pagina 10) 6 giorni Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Haemophilus spp. Neisseria spp. Liquido seminale Raccogliere il campione in contenitore sterile. Inviare subito in laboratorio. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Neisseria gonorrhoeae Sono ricercati su richiesta: Mycoplasma hominis Ureaplasma urealyticum Chlamydia trachomatis (vedi ricerche mirate)

20 20 Isolamento batteri: apparato uro-genitale Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Placenta Raccogliere il campione in contenitore sterile. Inviare subito in laboratorio. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Secreto prostatico test di Stamey Detergere il glande. Prima del massaggio prelevare in contenitori sterili: un campione di urina - primo mitto, un campione di urina - mitto intermedio. Effettuare il massaggio prostatico e raccogliere il fluido con l apposito tampone con terreno di trasporto. Dopo la raccolta del fluido prelevare un campione di urina in contenitore sterile. Inviare subito in laboratorio i tre campioni di urina e il tampone. 4 giorni Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Neisseria gonorrhoeae Haemophilus spp. Sono ricercati su richiesta: Mycoplasma hominis Ureaplasma urealyticum Chlamydia trachomatis

21 21 Isolamento batteri: feci Note Coprocoltura Feci Raccogliere almeno 2 grammi di campione in contenitore per feci (non occorre sia sterile). Inviare in laboratorio entro 1 ora o conservare il campione a +4 C (frigorifero) fino a 24 ore. Sono ricercati di routine: Salmonella spp. Shigella spp. Campylobacter spp. Sono ricercati su richiesta: Aeromonas spp. Plesiomonas spp. Yersinia spp. Escherichia coli enteropatogeni Escherichia coli enteroemorragici Vibrio cholerae Aeromonas spp. Escherichia coli enteropatogeni Escherichia coli enteroemorragico Plesiomonas spp. Feci Raccogliere almeno 2 grammi di campione in contenitore per feci (non occorre sia sterile). Inviare in laboratorio entro 1 ora o conservare il campione a +4 C (frigorifero) fino a 24 ore. 6 giorni Vibrio cholerae 6 giorni Yersinia spp. Clostridium difficile esame colturale Feci Raccogliere almeno 5 ml o 2 grammi di campione in contenitore per feci. Inviare in laboratorio entro 1 ora o conservare il campione a +4 C (frigorifero) fino a 24 ore. Feci formate non sono idonee Per i pazienti ricoverati viene effettuata la Ricerca Clostridium difficile tossicogenico (biologia molecolare)

22 22 Isolamento batteri: feci Note Clostridium difficile ricerca tossina Feci Raccogliere almeno 5 ml o 2 grammi di campione in contenitore per feci. Inviare in laboratorio entro 1 ora o conservare il campione a +4 C (frigorifero) fino a 24 ore. Feci formate non sono idonee Per i pazienti ricoverati viene effettuata la Ricerca Clostridium difficile tossicogenico (biologia molecolare) GERMI SENTINELLA: Enterococco vancomicina resistente Acinetobacter Baumannii Produttori betalattamasi Produttori di carbapenemasi Tampone rettale Feci Utilizzare l'apposito tampone con terreno di trasporto Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo entro 2 ore Raccogliere il campione in contenitore per feci. Inviare in laboratorio entro 1 ora o conservare il campione a +4 C (frigorifero). 4 giorno

23 23 Isolamento batteri: ricerche mirate Ago-aspirato Dispositivo endouterino Materiale purulento Raccogliere il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Actinomyces spp. 9 giorni Tampone da ferita Tampone endocervicale Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Legionella spp. Broncoaspirato Espettorato Lavaggio broncoalveolare Tracheoaspirato Nota bene: è possibile richiedere la ricerca dell antigene nell urina. Raccogliere il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. 6 giorni Rivolgersi al laboratorio per ritirare l apposito terreno di trasporto. Helicobacter pylori Biopsia da mucosa gastrica Inserire i frustoli bioptici dell antro e del corpo gastrico nell apposito contenitore. 1 Inviare subito in laboratorio. Leptospira spp. Urina Liquor Rivolgersi al laboratorio per ritirare l apposito terreno di trasporto e le relative modalità di prelievo. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. 19 giorni

24 24 Isolamento batteri: ricerche mirate Mycoplasma hominis e Ureaplasma urealyticum Liquido amniotico Liquido seminale Secreto prostatico Urina Tampone endocervicale Tampone uretrale Tampone vaginale Rivolgersi al laboratorio per ritirare l apposito terreno di trasporto. Inviare in laboratorio entro 2 ore. Trasferire 0,2 ml del campione nel terreno di trasporto. Rivolgersi al laboratorio per ritirare l apposito terreno di trasporto. Inviare in laboratorio entro 2 ore. Stemperare subito il tampone nel terreno di trasporto poi eliminarlo. Neisseria gonorrhoeae Materiali vari Raccogliere il campione in contenitore sterile o con tempone con terreno di trasporto, e inviarlo immediatamente in laboratorio. NON CONSERVARE IL MATERIALE IN FRIGORIFERO Neisseria meningitidis Materiali vari Raccogliere il campione in contenitore sterile o con tempone con terreno di trasporto, e inviarlo immediatamente in laboratorio. 4 giorni NON CONSERVARE IL MATERIALE IN FRIGORIFERO Nocardia spp. Broncoaspirato Espettorato Lavaggio broncoalveolare Pus Tracheoaspirato Raccogliere il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore.

25 25 Campione Cuffia Tenckoff Punta catetere arterioso Punta catetere intra-parenchimale Punta catetere Tenckoff Isolamento batteri: cateteri - drenaggi Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Punta catetere venoso Punta catetere venoso centrale (CVC) Punta catetere ventricolare Trasferire il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a 4 C inviarlo in laboratorio prima possibile Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Lieviti patogeni Punta catetere vescicale Punta drenaggio addome Punta drenaggio cranico Punta drenaggio mediastinico Punta drenaggio pleurico Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto. Tampone inserzione catetere venoso centrale Tampone hub catetere venoso centrale Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio prima possibile PROTOCOLLO DI SORVEGLIANZA DEI CATETERI VASCOLARI Solitamente con frequenza settimanale, inviare tampone HUB tampone cute punto di inserzione liquido intracatetere Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Lieviti patogeni Tampone inserzione catetere arterioso Tampone inserzione drenaggio addome Tampone inserzione drenaggio pleurico Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio prima possibile Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Lieviti patogeni Tampone inserzione Tenckoff

26 26 Isolamento batteri: liquidi biologici Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Aspirato Liquido biliare Liquido duodenale Liquido gastrico Liquido pelvico Liquido pericardico Liquido peritoneale Liquido pleurico Raccogliere il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio prima possibile. Negli orari di chiusura del Laboratorio inoculare in flaconi Bactec. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Lieviti patogeni Liquido sinoviale Pus Umor acqueo Umor vitreo Isolamento batteri: liquidi drenaggio Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Liquido drenaggio addome Liquido drenaggio cranico Liquido drenaggio mediastinico Liquido drenaggio pleurico Raccogliere il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio prima possibile. Negli orari di chiusura del Laboratorio inoculare in flaconi Bactec. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Lieviti patogeni Liquido drenaggio toracico

27 27 Isolamento batteri: biopsie - tessuti - protesi Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Biopsia Fibrina Fili pace-maker Linfonodo Micetoma Protesi vascolare Trasferire il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a 4 C e inviarlo in laboratorio prima possibile Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Lieviti patogeni Tessuto Valvola cardiaca Valvola cranica

28 28 Isolamento batteri: tamponi cutanei e da ferita Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Tampone cuoio capelluto Tampone cute Tampone ferita Tampone ferita chirurgica Tampone ferita sternale Tampone fistola Tampone foruncolo Tampone innesto cute Tampone lesione Tampone mammario Tampone ombelicale Tampone piaga Tampone piaga decubito Utilizzare l apposito tampone con terreno di trasporto. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Sono ricercati di routine: Batteri aerobi Batteri anaerobi Lieviti patogeni Tampone pus Tampone pustola Tampone stomia Tampone tasca Pace-maker Tampone tracheostomia Tampone ulcera Tampone unghia Tampone ustione Tampone vescicola-bolla

29 29 Ricerca germi sentinella Ricerca di: Enterococco vancomicina resistente Acinetobacter baumannii Enterobatteri produttori di betalattamasi Enterobatteri produttori di carbapenemasi Tampone rettale Feci Utilizzare l'apposito tampone con terreno di trasporto Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo entro 2 ore Raccogliere il campione in contenitore per feci. Inviare in laboratorio entro 1 ora o conservare il campione a +4 C (frigorifero). Tampone nasale Ricerca di: Staphylococcus aureus meticillina resistente (MRSA) Tampone ascellare Tampone inguinale Tampone ombelicale Tampone perianale Utilizzare l'apposito tampone con terreno di trasporto Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo entro 2 ore 2 giorni ANTIBIOGRAMMA La valutazione della sensibilità batterica agli antibiotici è eseguita mediante tecniche di microdiluizione in brodo che permettono di determinare la Minima Concentrazione Inibente (MIC) o mediante il sistema dell agar diffusione. Sono saggiati i rappresentanti delle principali famiglie di antibiotici: beta-lattamici, glicopeptidi, chinoloni, aminoglicosidi, tetracicline, macrolidi, lincosamidi, nitrofurani, nitroimidazoli e altri composti come cloramfenicolo, cotrimoxazolo, fosfomicina, linezolid. Previo accordo con il Servizio, possono essere valutati antibiotici non saggiati routinariamente e/o associazioni di antibiotici.

30 30 Isolamento batteri: prove di sterilità Prove di sterilità Acqua Tamponi per prove di sterilità strumentale e ambientale Conservare il campione a +4 C (frigorifero) e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Per le spore conservare le fialette a temperatura ambiente ed inviare entro 24 ore 2 giorno Spore per controllo autoclave Conservare le fialette a temperatura ambiente e inviare in laboratorio entro 24 ore. 1 giorno Controllo sterilità emoderivati Emazie concentrate Piastrine Plasma Sacca sangue 1 giorno Ricerca endotossine: prove di sterilità Prove di sterilità Acqua Distillato ultrapuro Acqua da osmosi Conservare il campione a +4 C (frigorifero) e inviarlo in laboratorio entro 6 ore in provetta sterile da 15 ml. Lo stesso campione va inviato per la ricerca batterica (prove di sterilità) in un altro contenitore sterile da 175 ml 2 giorni

31 31 Micobatteri Emocoltura per ricerca Micobatteri Inoculare 3-5 ml di sangue in flacone per isolamento micobatteri fornito dal laboratorio. Effettuare 2 3 prelievi a distanza di 30 minuti l uno dall altro È possibile conservare il flacone a temperatura ambiente fino a 72 ore. 3 Mielocoltura per ricerca Micobatteri Aspirato midollare Inoculare fino a 5 ml di aspirato midollare in flacone per isolamento micobatteri fornito dal laboratorio. È possibile conservare il flacone a temperatura ambiente fino a 72 ore. 3 Ricerca colturale Micobatteri Materiali vari Raccogliere il campione in contenitore sterile o utilizzare un tampone senza terreno di trasporto. È possibile conservare il campione a +4 C (frigorifero) fino a 72 ore. 4 Ricerca microscopica Micobatteri Materiali vari Raccogliere il campione in contenitore sterile o utilizzare un tampone senza terreno di trasporto. È possibile conservare il campione a +4 C (frigorifero) fino a 72 ore. 2 giorni Identificazione Micobatteri con sonde molecolari Coltura L identificazione è effettuata su tutti gli isolati. 6 giorni Antibiogramma Micobatteri Coltura L antibiogramma è effettuato su tutti gli isolati di Micobacterium TB complex. 1 PCR per Micobatteri MTB complex Materiali vari Raccogliere il campione in contenitore sterile. È possibile conservare il campione a 4 C (frigorifero) fino a 72 ore 6 giorni

32 32 ANTIBIOGRAMMA PER MICOBATTERI Test di sensibilità per Mycobacterium tuberculosis complex Metodo indiretto delle proporzioni (saggio qualitativo). Farmaci saggiati: Isoniazide, Streptomicina, Etambutolo, Rifampicina, Pirazinamide; per Mycobacterium tuberculosis complex poliresistente si saggiano anche: Amikacina, Rifabutina, Levofloxacina, Capreomicina, Linezolid, Kanamicina, Etionamide.

33 33 Ricerca antigeni e tossine batteriche Note Rivolgersi al laboratorio per ritirare le provette per il prelievo. Tubercolosi test di stimolazione linfocitaria Per il prelievo procedere seguendo la seguente procedura: 1. riempire la provetta, tenuta verticale, sino alla tacca nera (0,8 1,2 ml), 2. mescolare bene la provetta per dieci volte, 3. conservare la provetta inoculata a temperatura ambiente e consegnarla al laboratorio entro 16 ore dal prelievo. Antigeni solubili batterici Prelevare circa 5 ml di sangue in provetta senza anticoagulante. Inviare subito in laboratorio. 1 giorno Sono ricercati di routine: Streptococcus agalactiae (gruppo B) Streptococcus pneumoniae Neisseria meningitidis Haemophilus influenzae Clostridium difficile tossina Feci Raccogliere almeno 5 ml o 2 grammi di campione in contenitore per feci. Inviare in laboratorio prima possibile o conservare il campione a +4 C 2 giorni Helicobacter pylori antigene Feci Per il prelievo, seguire le indicazioni della coprocoltura. È possibile la conservazione a 4 C fino a 24 ore Questa indagine consiste solo nella ricerca dell'antigene nelle feci. Nelle due settimane prima dell'esecuzione del test, il paziente non deve aver assunto antibiotici, antiacidi o preparazioni a base di bismuto. Se il test viene utilizzato per il controllo dell eradicazione, devono passare almeno 8 settimane dalla fine della terapia (per evitare falsi positivi in quanto, dopo la terapia, l antigene continua ad essere eliminato per almeno 2 mesi).

34 34 Ricerca antigeni e tossine batteriche Note Legionella spp. antigeni Urina Raccogliere 10 ml di campione in una provetta per urina. Conservare a 4 C e inviare s prima possibile il campione in laboratorio. Con la stessa provetta si può richiedere la ricerca antigeni per legionella e pneumococco Streptococcus pneumoniae antigeni Urina Raccogliere circa 10 ml di urina in contenitore sterile. Conservare a 4 C einviare prima possibile il campione in laboratorio. Con la stessa provetta si può richiedere la ricerca antigeni per legionella e pneumococco 1 giorno

35 35 Ricerca anticorpi per batteri anti Bartonella henselae, IgG anti Bartonella henselae, IgM 6 giorni anti Bordetella pertussis, IgG - IgM - IgA 6 giorni anti Borrelia burgdorferi, IgG anti Borrelia burgdorferi, IgM 6 giorni test di conferma / approfondimento: Western-Blot anti Borrelia burgdorferi, IgG Liquor Effettuare il prelievo con provetta sterile. 10 giorni Western-Blot anti Borrelia burgdorferi, IgM anti Chlamydia pneumoniae, IgG anti Chlamydia pneumoniae, IgM anti Chlamydia pneumoniae, IgA anti Chlamydia psittaci, IgG anti Chlamydia psittaci, IgM anti Chlamydia psittaci, IgA 6 giorni

36 36 Ricerca anticorpi per batteri anti Chlamydia trachomatis, IgG anti Chlamydia trachomatis, IgM anti Chlamydia trachomatis, IgA Anti Coxiella Burnetii (febbre Q) IgG/IgM È possibile conservare il campione a temperatura ambiente fino a 12 ore anti Helicobacter pylori, IgG anti Legionella pneumophila, Ig totali 6 giorni anti Leptospira spp. 9 giorni anti Listeria monocytogenes

37 37 Ricerca anticorpi per batteri anti Mycoplasma pneumoniae, IgG anti Mycoplasma pneumoniae, IgM anti Mycoplasma pneumoniae, IgA Procalcitonina Effettuare il prelievo con provetta da sierologia contenente EDTA. anti tossina tetanica Anti Treponema pallidum, Ab Test di screening, EIA Nota bene: per le indagini sierologiche della Lue è possibile inviare una sola provetta. Anti Treponema pallidum, Ab RPR Nota bene: per le indagini sierologiche della Lue è possibile inviare una sola provetta. test di conferma / approfondimento: Anti Treponema pallidum, Ab FTA Abs, IgG Nota bene: per le indagini sierologiche della Lue è possibile inviare una sola provetta.

38 38 Ricerca anticorpi per batteri test di conferma / approfondimento: Anti Treponema pallidum, Ab FTA Abs, IgM Nota bene: per le indagini sierologiche della Lue è possibile inviare una sola provetta. anti Treponema pallidum, titolazione test di conferma / approfondimento: Western-Blot anti Treponema p, IgG Western-Blot anti Treponema p, IgM Liquor Effettuare il prelievo con provetta sterile. Nota bene: per le indagini sierologiche della Lue è possibile inviare una sola provetta. 10 giorni Anti Rickettsie IgG/IgM È possibile conservare il campione a temperatura ambiente fino a 12 ore Anti Rickettsie Conorii IgG/IgM È possibile conservare il campione a temperatura ambiente fino a 12 ore Weil-Felix (anticorpi anti Rickettsie) 4 giorni Widal-Wright (anticorpi anti Salmonelle e Brucelle) 4 giorni

39 39 Ricerca anticorpi per batteri Test di conferma Immunoblot Ab IgG e IgM Specificare microrganismo 10 giorni Biologia molecolare per batteri Chlamydia trachomatis ricerca con SDA (Strand Displacement Amplification) Liquido addominale Liquido peritoneale Liquido seminale Urina Tampone endocervicale Tampone cervicale Tampone uretrale Tampone oculare Tampone anale Raccogliere il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Rivolgersi al laboratorio per ritirare l apposito tampone. Conservare il tampone a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. 8 giorni Clostridium difficile Feci Raccogliere 5ml o 2 gr. di campione in contenitore per feci. Inviare in laboratorio prima possibile o conservare a +4 C 1 giorno

40 40 Urea breath test Helicobacter pylori urea breath test Aria espirata Richiedere in laboratorio il protocollo e il materiale per l esecuzione del test. Il paziente deve essere a digiuno da almeno 8 ore e non deve aver assunto: - antibiotici da almeno 4 settimane, - inibitori di pompa protonica (PPT) e/o antiacidi da almeno 10 giorni. Modalità di prelievo: seguire le istruzioni riportate all interno della confezione. Conservazione dei campioni: i campioni possono essere conservati a temperatura ambiente fino a ore.

41 41 REUMATOLOGIA ASTAL titolo anticorpale anti stafilolisina È possibile conservare il campione a + 4 C fino a 12 ore. 4 giorni Streptozyme anti isoenzimi Streptococco A È possibile conservare il campione a + 4 C fino a 12 ore. Waaler-Rose Polyatitre È possibile conservare il campione a + 4 C fino a 12 ore.

42 42 MICOLOGIA Isolamento miceti Ricerca antigeni micotici Ricerca anticorpi per miceti... 45

43 43 Isolamento miceti Ricerca miceti Materiali vari Raccogliere il campione in contenitore sterile o utilizzare un apposito tampone con terreno di trasporto. È possibile conservare il campione a +4 C (frigorifero) fino a 48 ore. 14 giorni Emocoltura per ricerca miceti Inoculare 3-10 ml di sangue in flacone per isolamento miceti fornito dal laboratorio. È possibile conservare il flacone a temperatura ambiente fino a 36 ore. 1 Mielocoltura per ricerca miceti Aspirato midollare Inoculare 3-10 ml di aspirato midollare in flacone per isolamento miceti fornito dal laboratorio. È possibile conservare il flacone a temperatura ambiente fino a 36 ore. 1 Esame micologico Capelli Cute Peli Unghie Raccogliere il campione in contenitore sterile o richiedere i terreni di coltura in laboratorio. È possibile conservare il campione a temperatura ambiente fino a 48 ore. 26 giorni Miceti da coltura identificazione biochimica Miceti da coltura identificazione microscopica Coltura Coltura L identificazione è effettuata su tutti gli isolati. 1 Antimicogramma Coltura L antimicogramma è effettuato in caso di micosi profonda. 4 giorni Pneumocystis carinii Broncoaspirato Espettorato Lavaggio broncoalveolare Raccogliere il campione in contenitore sterile. È possibile conservare il campione a +4 C (frigorifero) fino a 48 ore. ANTIMICOGRAMMA Saggio di sensibilità ai farmaci antifungini con microdiluizione in RPMI secondo metodica standardizzata derivata da quella di riferimento. Farmaci saggiati: 5-Fluorocitosina, Amphotericina-B, Itraconazolo, Fluconazolo, Echinocandine, Voriconazolo, Posaconazolo.

44 44 Ricerca antigeni micotici Aspergillus spp.antigene 6 giorni Lavaggio broncoalveolare Effettuare il prelievo in contenitore sterile. Cryptococcus neoformans antigene solubile Liquor Raccogliere il campione in provetta sterile. 6 giorni

45 45 Ricerca anticorpi per miceti PER LA RICERCA DEGLI ANTICORPI PER MICETI È POSSIBILE INVIARE UNA SOLA PROVETTA anti Aspergillus spp, IgG. anti Blastomyces dermatitidis 6 giorni anti Candida spp. IgG - IgM - IgA anti Histoplasma capsulatum 6 giorni

46 46 PARASSITOLOGIA Osservazione microscopica per parassiti Ricerca antigeni per parassiti Ricerca anticorpi per parassiti Biologia molecolare per parassiti... 53

47 47 Osservazione microscopica per parassiti Indagine diagnostica Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note L osservazione microscopica diretta è eseguita dopo centrifugazione e colorazione con Lugol o Giemsa. Feci Raccogliere il campione in contenitore per feci. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio prima posibile Se il campione è consegnato il giorno successivo conservare a 4 C. Se si utilizzano per la raccolta del campione contenitori con fissativo questi si possono conservare per più giorni a temperatura ambiente Colorazione di Kinyoun per: Cryptosporidium spp., Cyclospora cayetanensis, Isospora belli. Colorazione in fluorescenza per: Cryptosporidium spp., Giardia intestinalis. Inviare tre campioni raccolti in giorni diversi. Parassiti osservazione microscopica Urina Raccogliere il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio. prima possibile Se il campione è consegnato il giorno successivo conservare a 4 C. Se si utilizzano per la raccolta del campione contenitori con fissativo questi si possono conservare per più giorni a temperatura ambiente L osservazione microscopica diretta è eseguita dopo centrifugazione e colorazione con Lugol o Giemsa. Inviare tre campioni raccolti in giorni diversi. Espettorato Raccogliere il campione in contenitore sterile. Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Se il campione è consegnato il giorno successivo conservare a 4 C. Effettuare il prelievo con provetta da sierologia contenente EDTA. Inviare in laboratorio prima possibile o conservare il campione a +4 C 1 giorno L osservazione microscopica diretta è eseguita su striscio dopo colorazione specifica per parassiti ematici (Giemsa).

48 48 Osservazione microscopica per parassiti Indagine diagnostica Campione Note per prelievo, conservazione e trasporto del campione Note Fissare 4 cm di nastro adesivo trasparente su una spatola di legno in modo che la parte adesiva risulti esterna. Tamponare le pliche cutanee-mucose perianali con il nastro adesivo. Incollare il nastro adesivo su un vetrino portaoggetti. Inviare in laboratorio nell apposito contenitore portavetrini o in un involucro ben chiuso. Ossiuri osservazione microscopica (scotch test) Raccogliere 3 campioni a giorni alterni. Effettuare la raccolta al momento del risveglio mattutino, prima che il soggetto defechi o si lavi. Dopo aver indossato DPI, con l'aiuto di un abbassalingua, appoggiare del nastro adesivo trasparente sull'orifizio anale, facendolo ben aderire alle pliche perianali e lasciandolo per circa 20 secondi; staccarlo e applicarlo ben steso su un vetrino portaoggetti. N.B.: lavarsi bene le mani dopo il prelievo! I vetrini si possono conservare in frigorifero per non più di 4 giorni. Inviare tre campioni raccolti in giorni diversi. Plasmodium spp. (malaria) osservazione microscopica Effettuare il prelievo con provetta da sierologia contenente EDTA. Inviare in laboratorio prima possibile o conservare il campione a +4 C 1 giorno

49 49 Ricerca antigeni per parassiti Raccogliere il campione in contenitore per feci. Cryptosporidium spp. antigeni Feci Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio prima possibile. Se il campione è consegnato il giorno successivo conservare a 4 C. Se si utilizzano per la raccolta del campione contenitori con fissativo questi si possono conservare per più giorni a temperatura ambiente Cryptosporidium non è invece rilevabile con l'esame microscopico. Se il campione è costituito da feci fresche verrà utilizzata la metodica EIA, se c'è liquido conservante verrà utilizzata la metodica in IFA. Entamoeba histolytica antigeni Raccogliere il campione in contenitore per feci. Feci Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio entro 2 ore. Aspirato Raccogliere il campione in contenitore sterile conservare il campione a 4 C 1 giorno Raccogliere il campione in contenitore per feci. Giardia intestinalis antigeni Feci Conservare il campione a temperatura ambiente e inviarlo in laboratorio prima possibile Se il campione è consegnato il giorno successivo conservare a 4 C. Se si utilizzano per la raccolta del campione contenitori con fissativo questi si possono conservare per più giorni a temperatura ambiente. Giardia è visibile anche all'esame microscopico, ma la ricerca con queste metodiche consente di aumentare notevolmente la sensibilità dell'indagine.

50 50 Ricerca antigeni per parassiti Effettuare il prelievo con provetta da sierologia contenente EDTA. Plasmodium spp. (malaria) antigene Inviare in laboratorio prima possibile: dal lunedì al venerdì ; sabato, domenica e festivi infrasettimanali ; in altri orari inviare al laboratorio di emergenza 1 giorno