COLORAZIONI ISTOMORFOLOGICHE

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1 COLORAZIONI ISTOMORFOLOGICHE

2 EMATOSSILINA-EOSINA L ematossilina è isolata da un estratto di legno azzurro (legno di campeggio, Haematoxylum campechianum ) - Incolore (cristalli giallo-bruni) e incapace di colorare - Il vero colorante non è l ematossilina, ma il suo prodotto di ossidazione: l EMATEINA (aggiunta di ossidanti - permanganato di potassio, l idrato di potassio, iodato di sodio, ecc.) Ematossilina Emateina

3 EMATOSSILINA-EOSINA L EMATEINA è anionica e non ha affinità con gli acidi nucleici. Per conferirne carica positiva, si aggiunge un mordente (sali di alluminio o ferro) che costituirà con l emateina una LACCA. Se si usa alluminio, si parla di EMALLUME, se si usa ferro, si parla di EMATOSSILINA FERRICA, se si usa cromo, si parla di EMATOSSILINA CROMICA

4 EMATOSSILINA-EOSINA L EOSINA è artificiale, debolmente acida, colora i citoplasmi, il tessuto connettivo e la sostanza intercellulare in varie tonalità di rosa. Chimicamente: Tetrabromofluoresceina Eosina Y Eosina B

5 EMATOSSILINA-EOSINA MILZA

6 EMATOSSILINA-EOSINA RENE

7 EMATOSSILINA-EOSINA RENE

8 EMATOSSILINA-EOSINA PANCREAS

9 EMATOSSILINA-EOSINA T. MUSCOLARE STRIATO

10 EMATOSSILINA-EOSINA T. MUSCOLARE LISCIO

11 EMATOSSILINA-EOSINA T. ADIPOSO

12 EMATOSSILINA-EOSINA TESTICOLO

13 EMATOSSILINA-EOSINA TRACHEA

14 EMATOSSILINA DI ERLICH RENE

15 STUDIO DEI TESSUTI E DEGLI ORGANI

16 TESSUTO NERVOSO

17 TESSUTO NERVOSO CRESYL-VIOLET - Colorante basico che lega le componenti acide del citoplasma dei neuroni (RNA dei ribosomi e nuclei). - Mette in evidenza i Corpi di Nissl. Risultato: RNA nero Altre strutture viola

18 CRESYL-VIOLET T. NERVOSO

19 TESSUTO NERVOSO IMPREGNAZIONE ARGENTICA Studio della forma dei neuroni Il nitrato di argento (o il cromato di argento) viene ridotto da sostanze riducenti ad argento metallico che precipita. 2 metodi: - GOLGI-CAJAL - BIELSCHOWSKY

20 GOLGI-CAJAL T. NERVOSO

21 GOLGI-CAJAL T. NERVOSO

22 BIELSCHOWSKY T. NERVOSO

23 TESSUTO NERVOSO LUXOL FAST BLUE Rame ftalocianina solfonata (X=SO3-) Colora bene i fosfolipidi, specifica per la MIELINA. Risultati: Mielina blu-azzurro

24 LUXOL FAST BLUE T. NERVOSO

25 LUXOL FAST BLUE T. NERVOSO

26 TESSUTO NERVOSO KLUVER-BARRERA LUXOL FAST BLUE associata al CRESYL-VIOLET Risultati: Mielina blu-azzurro Corpi cellulari violetto

27 KLUVER-BARRERA T. NERVOSO

28 TESSUTO CONNETTIVO

29 TESSUTO CONNETTIVO AZAN-MALLORY AZocarminio-Blu di anilina, modificata da Mallory - Specifico per le fibre collagene -Azocarminio (nuclei rosso vivo, citoplasma rosso chiaro) -Miscela di Mallory [Blu d anilina, Orange G, acido ossalico] (connettivo in azzurro) Azocarminio Blu di anilina

30 AZAN-MALLORY FEGATO

31 AZAN-MALLORY RENE

32 AZAN-MALLORY INTESTINO TENUE

33 AZAN-MALLORY OVAIO

34 AZAN-MALLORY TESTICOLO

35 AZAN-MALLORY TIROIDE

36 AZAN-MALLORY TRACHEA

37 TESSUTO CONNETTIVO MAY-GRÜNWALD-GIEMSA Doppia colorazione utilizzata per gli STRISCI DI SANGUE. - Sangue strisciato su vetrino - Miscela di May-Grünwald (blu di metilene + eosina) - Colorante di Giemsa (eosina giallastra, blu di metilene, azzurro A e B, violetto di metilene) Risultati: Globuli rossi rosa-arancio Nuclei dei leucociti blu-porpora Granuli eosinofili rosso brillante Granuli basofili blu

38 MAY-GRÜNWALD-GIEMSA SANGUE

39 MAY-GRÜNWALD-GIEMSA Acidofilo Linfocita Neutrofilo Basofilo SANGUE Piastrine Monocita

40 TESSUTO CONNETTIVO WEIGERT - VAN GIESON Metodo specifico per le FIBRE ELASTICHE Il metodo di Weigert sfrutta l affinità per le fibre elastiche del precipitato (CRESOFUCSINA) ottenuto facendo reagire resorcina, fucsina basica e cristalvioletto con perclorato di ferro. Il metodo di Van Gieson permette differenziare il collagene dalle fibre elastiche. di

41 WEIGERT-VAN GIESON AORTA

42 WEIGERT-VAN GIESON AORTA

43 TESSUTO CONNETTIVO TRICROMICA DI GOLDNER Ematossilina, rosso Ponceau, Orange G, Light Green. Rosso Ponceau Orange G Light green Risultati: Nuclei marrone-nero Strutture poco acidofile (cartilagine) rosso-arancio Strutture molto acidofile (collagene, osso) azzurro-verde

44 TRICROMICA DI GOLDNER OSSO

45 TRICROMICA DI GOLDNER OSSO

46 TESSUTO CONNETTIVO TRICROMICA DI MASSON - Colorazione nucleare ottenuta con ematossilina ferrica - Colorazione dei globuli rossi con acido picrico - Colorazione del connettivo con Light Green Risultati : Nuclei nero Citoplasma, muscolo rosso Connettivo, muco blu-verde Eritrociti giallo

47 TRICROMICA DI MASSON RENE

48 TRICROMICA DI MASSON TIROIDE

49 TESSUTO CONNETTIVO PENTACROMICA DI MOVAT Mucosostanze acide e i diversi componenti del connettivo. Alcian blu, resorcifucsina, blu di celestina, ematossilina, miscela di Van Gieson Risultati: Mucine acide e sostanza fondamentale blu Collagene rosso Muscolo giallo Nuclei neri

50 PENTACROMICA DI MOVAT POLMONE

51 TESSUTO OSSEO

52 TESSUTO OSSEO Per l osservazione microscopica del tessuto osseo si utilizzano tecniche particolari che tengono conto della struttura dura e mineralizzata dell osso stesso. 1) METODO PER DECALCIFICAZIONE 2) METODO PER USURA

53 TESSUTO OSSEO METODO PER DECALCIFICAZIONE Mantenimento della componente organica dell osso, a scapito della componente minerale che viene rimossa - Fissazione del frammento fissato - Scioglimento con acidi (citrico, ascorbico) della componente minerale - Inclusione - Sezionamento - Colorazione

54 DECALCIFICAZIONE OSSO

55 TESSUTO OSSEO METODO PER USURA Mantenimento della componente minerale dell osso, a scapito della componente organica che viene rimossa - Macerazione in acqua del frammento fissato per la rimozione della componente organica - Sezionamento di fettina spessa - Adesione su vetrino con balsamo - Lavorazione con carta abrasiva a grana decrescente - Montaggio

56 USURA OSSO