Dimensioni di Genomi

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Michela Campo
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1 Dimensioni di Genomi plasmids viruses bacteria fungi plants algae insects mollusks bony fish amphibians Il Genoma umano è costituito da circa 3 miliardi di bp e contiene un numero di geni pari a circa ,000. reptiles birds mammals

2 IMPACCHETTAMENTO DEL DNA UMANO La lunghezza complessiva del genoma umano e di circa 1,8 metri (molecole di DNA dei 46 cromosomi di una cellula poste in fila). Il genoma e compresso in un nucleo < 10μm

3 Cromosoma di E.coli (1,7mm) e cellula di E.coli (2μm) Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed.

4 SUPERAVVOLGIMENTO DEL DNA Il DNA cellulare deve essere strettamente compattato per poter essere contenuto all interno della cellula, il che implica un elevato grado di organizzazione strutturale. Il meccanismo di ripiegamento deve anche permettere l accesso all informazione contenuta nel DNA, accesso alle basi (replicazione, trascrizione).

5 SUPERAVVOLGIMENTO avvolgimento di una struttura già avvolta Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed.

6 Superavvolgimento del DNA Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed.

7 DNA plasmidici rilassati e superavvolti Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed.

8 Il superavvolgimento non è casuale ma avviene se il DNA è sottoposto ad una forma di tensione Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed. Superavvolgimento indotto dalla separazione delle catene di una struttura a doppia elica

Effetti del parziale disavvolgimento del DNA 84 bp/8 giri 10,5 pb/giro Il DNA presenta un numero di giri di elica minore di quanto ci si attenderebbe

9 Effetti del parziale disavvolgimento del DNA 84 bp/8 giri 10,5 pb/giro Il DNA presenta un numero di giri di elica minore di quanto ci si attenderebbe per la struttura B. 84 pb/7= 12 pb/giro La tensione viene riequilibrata mediante c o d Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed.

modo che le catene non siano in grado di ruotare su se stesse.

10 Parziale disavvolgimento del DNA Lo stato parzialmente disavvolto puo essere mantenuto se il DNA e in forma circolare chiusa o se e stabilizzato da interazioni con proteine, in modo che le catene non siano in grado di ruotare su se stesse. DNA superavvolto negativamente Il superavvolgimento negativo può convertirsi nella separazione locale dei due filamenti

Numero di legame n di volte in cui un filamento si avvolge attorno all altro in un DNA chiuso circolare Il numero di legame non varia quando il DNA è

11 Numero di legame n di volte in cui un filamento si avvolge attorno all altro in un DNA chiuso circolare Il numero di legame non varia quando il DNA è deformato/piegato fino a che entrambi i filamenti rimangono covalentemente intatti. Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed.

12 Numero di legame Esempio: DNA circolare chiuso di 2100 coppie di basi 2100/10,5= 200 LK=Lko Lko=numero di legame allo stato rilassato Disavvolgimento del DNA Lk=Lk-Lko= =-2 2/200=1% dei giri di elica è stato rimosso Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed. nei DNA cellulari il 5%-7% dei giri e rimosso

13 Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed. Superavvolgimento negativo Deriva da un parziale disavvolgimento Superavvolgimento positivo Deriva da un iperavvolgimento

14 Il parziale disavvolgimento induce la formazione di strutture cruciformi Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed.

Il parziale disavvolgimento del DNA facilita modificazioni strutturali della molecola del DNA separazione dei filamenti (denaturazione di

15 Il parziale disavvolgimento del DNA facilita modificazioni strutturali della molecola del DNA separazione dei filamenti (denaturazione di regioni ricche in A+T) struttura Z (in corrispondenza di regioni di alternanza Pu/Py) strutture cruciformi (in corrispondenza di palindromi)

16 Superavvolgimento del DNA Positivo = DNA superspiralizzato Negativo = DNA sottospiralizzato

17 Le topoisomerasi Aumentano o diminuiscono l avvolgimento del DNA. Catalizzano variazioni del numero di legame. Tagliano una o entrambe le catene Passaggio di un segmento di DNA attraverso l apertura Chiusura dell interruzione Topoisomerasi I: scinde un singolo filamento Topoisomerasi II: scinde entrambi i filamenti

19 Reazione della topoisomerasi di tipo I Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed.

20 Attività della Topoisomerasi I Rimozione di superavvolgimenti negativi. Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed.

Topoisomerasi II: introduce superavvolgimenti negativi scinde entrambi i

22 Le topoisomerasi sono il bersaglio molecolare nel trattamento di malattie Agenti antimicrobici Agenti antitumorali Girasi (topoisomerasi II, batterica) Novobiocina: blocca il legame dell ATP alla girasi Acido nalidixico e ciprofloxacina: interferiscono con la rottura e ricongiungimento delle catene. Impiego: infezioni urinarie ed altre (antrace) Inibitori della topoisomerasi I e II umane Agenti antitumorali

23 Superavvolgimento plectonemico forma che si osserva nei DNA isolati in laboratorio Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 6 ed.

24 SUPERAVVOLGIMENTO A SOLENOIDE e SUPERAVVOLGIMENTO PLECTONEMICO La forma a solenoide, stretti avvolgimenti sinistrorsi, è la forma presente nella cromatina: DNA legato a proteine CROMOSOMI EUCARIOTICI Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 5 ed.

25 CROMATINA La cromatina e costituita da DNA e proteine e una piccola parte di RNA -Istoni -Topoisomerasi - Proteine SMC (structural mantainance of chromosome) coesine condensine altre

26 Interazione DNA e istoni

29 Nucleosoma

31 I NUCLEOSOMI SONO COMPATTATI IN STRUTTURE DI ORDINE VIA VIA SUPERIORE Fibra di 30nm

32 Zanichelli 6 enelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 5 edd.

35 Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 5 ed. Anse di DNA cromosomico attaccate all impalcatura nucleare spesso all interno di anse vi sono gruppi di geni con funzioni correlate

37 Modello di compattamento del DNA in un cromosoma eucariotico Nelson & Cox I principi di Biochimica di Lehninger- Zanichelli 5 ed.

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