Dipendente da contatto Segnali di posizione (migrazione dei leucociti) Paracrina Raggio breve (neurotrasmettitori) Autocrina Endocrina Agisce sulla stessa cellula che Fattori rilasciati in circolazione ha prodotto il segnale (maggior parte degli ormoni) (fattori di crescita) (eg, LH e FSH secreti dall ipofisi, Agiscono sulle gonadi)
I recettori: hanno una elevata affinità di legame con il ligando (consentendo una risposta cellulare anche a basse concentrazioni di ligando) Sono selettivamente specifici per il loro ligando Sono legati reversibilmente con il loro ligando tramite legami ad idrogeno, Forze di van der Waals, legami idrofobici
La fosforilazione è il meccanismo più comune attraverso il quale le proteine vengono modificate lungo una cascata di segnali cellulari. La fosforilazione avviene su aminoacidi che hanno un gruppo ossidrile disponibile per il legame con un gruppo fosfato (serina, treonina, tirosina). La presenza di un gruppo fosfato introduce nella proteina una forte carica negativa con un elevato ingombro sterico. Questo causa una riorganizzazione dei legami tra aminoacidi, responsabili della struttura terziaria della proteina. Cambia la struttura terziaria e si ha una transizione funzionale È una modificazione reversibile. La defosforilazione è operata dalle fosfatasi
Ione Ca++ come secondo messaggero: Bassa concentrazione nel citoplasma Accumulato in depositi intracellulari (RE) Lega una classe di proteine dette calmoduline (proteine regolatorie o subunità regolatorie)
Nelle miofibrille muscolariil Ca++ è immagazzinato nel ret sarcoplasmatico ed in seguito ad uno stimolo nervoso vi fuoriesce e lega una calmodulina detta troponina C che si associa ai filamenti di actina rendendoli capaci di interagire con la miosina
Comunicazione tra cellule nervose (risposte elettriche) Agiscono tramite l azione di una classe di proteine ancorate ai lipidi (proteine G) I recettori sono in grado di fosforilare (tirosina) i propri residui aminoacidici e quelli di altri enzimi
Legano il GTP Nella forma legata al GTP sono attive Hanno attività GTPasica (idrolizzano il GTP in GDP) Costituiscono una sorta di interruttori molecolari a tempo (idrolizzando il GTP ritornano allo stato inattivo, quindi si autoinattivano o autoregolano)
interruttori molecolari a tempo
Uno dei bersagli delle proteine G è l adenilato ciclasi
PKA fosforila: Glicogeno fosforilasi chinasi (attivandola) Glicogeno sintetasi (inibendola) Proteina fosfatasi I (inibendola) La glicogeno fosforilasi chinasi fosforila la glicogeno fosforilasi attivandola: il glicogeno viene metabolizzato in glucosio. La glicogeno sintetasi è responsabile della sintesi del glicogeno a partire dal glucosio La proteina fosfatasi I defosforila la glicogeno sintetasi attivandola Risultato finale dell azione del glucagone (secreto dal pancreas in risposta ad una riduzione del glucosio ematico) sarà l inibizione degli enzimi della glicogenolisi e liberazione di glucosio nel sangue
Ormoni come LH, l ormone adrenocorticotropo (ACTH) e l ormone stimolante la tiroide (TSH) sono in grado di attivare PKA che trasloca nel nucleo e fosforila il fattore di trascrizione CREB. CREB attivato è in grado di legarsi al promotore di alcuni geni attivando la trascrizione Le funzioni principali di questi ormoni consistono nel determinare l aumento della sintesi di progesterone (LH), la secrezione di cortisolo (ACTH) e la sintesi dell ormone tiroideo (TSH)
Il recettore attiva una proteina G q che a sua volta attiva la fosfolipasi Cβ (proteina periferica) che genera l inositolo trifosfato (IP 3 ) ed il diacilglicerolo (DAG). Il IP 3 si lega al canale del Ca++ aprendolo (diff passiva) aumentando la concentrazione del Ca nel citosol. Le subunità della PKC sono calmoduline. La PKC liberata dalle calmoduline è libera di muoversi nel citosol, si posizionerà sul lato interno della membrana e verrà attivata dal DAG
AMPLIFICAZIONE DEL SEGNALE A partire da poche molecole di ligando e poche molecole di recettore attivato si determina ad ogni passaggio un aumento di molecole segnale che attivano un gran numero di enzimi e quindi una risposta cellulare efficiente Ogni molecola direcettore può reclutare numerose proteine G in successione (fin quando è occupato dal ligando) La proteina G attiva l adenilato ciclasi con un rapporto stechiometrico 1:1 Adenilato ciclasi e fosfolipasi C producono grandi quantità di secondi messaggeri: per ogni molecole di adenilato ciclasi si hanno migliaia di molecole di camp; l apertura del canale del Ca++ causa il rilascio di quantità millimolari di Ca++ nel citosol. Leproteine chinasi PKA e PKC possono fosforilare diversi bersagli amplificando ancora il bersaglio. L amplificazione del segnale è molto utile per consentire alla cellula repentine modifiche del metabolismo.
Proteine transmembrana monopasso (in genere omodimeri) Hanno attività tirosin-chinasica Costituiscono molti recettori per fattori di crescita, differenziamento e per l insulina L attivazione del recettore da parte del ligando porta all autofosforilazione del recettore stesso. Si formano dei dimeri recettoriali: le regioni chinasiche dei due monomeri sono vicine e si possono fosforilare a vicenda. Il ligando favorisce la dimerizzazione
I residui fosforilati dei recettori sono riconosciuti da proteine che possiedono domini in grado di legare le tirosine fosforilate (SH2). La queste, le più note sono quelle della via Ras/MAPK
Il recettore fosforilato viene legato dalla proteine adattatrice Grb2 che a sua volta lega SOS. L assemblaggio di queste due proteine porta all attivazione diras. RAS èproteina G monomerica. SOS induce il rilascio di GDP ed illegame con GTP con RAS necessario per l attivazione
RAS attiva una chinasi (RAF) che a sua volta attiva a cascata due chinasi:mapkk (MEK) e MAPK (ERK). ERK attivata trasloca nel nucleo dove fosforila i suoi bersagli (fattori di trascrizione). In questo modo l attività del recettore modifica l espressione genica Questo tipo di risposta è amplificativa
Recettore nicotinico dell acetilcolina: è un canale per il sodio. Il legame dell acetilcolina apre il canale e permette l ingresso del Na. In questo modo si depolarizza la membrana e si aprono altri canali del Na in maniera tale che il segnale elettrico si propaghi sino ad i tubuli T della m plasmatica delle cellule muscolari. Queste strutture sono in contatto con il reticolo sarcoplasmatico. L arrivo dell onda elettricainduce il rilascio di Ca++ dal ret. Sarcoplasmatico: il primo evento che porta alla contrazione muscolare.
La risposta recettoriale non è temporalmente indefinita. Isegnali intracellulari sono transitori e si esauriscono in pochi minuti (anche se gli effetti possono durare parecchie ore). Autospegnimento delle proteine G Presenza di enzimi in grado di spegnere i segnali:camp fosfodiesterasi e fosfatasi. Una cascata di segnali attivatori è sempre associata ad una di segnali inibitori. La risposta ad uno stimolo è il risultato del dosaggio tra le due cascate di segnali. Desensibilizzazione dei recettori dopo uno stimolo prolungato o troppo intenso
GRK fosforila la porzione citoplasmatica del recettore beta-adrenergico impedendo il suo legame con la proteina G poiché viene legato dall arrestina