PROGETTO INTERREGIONALE SEMENTIERO E MANGIME OGM- FREE Villa Chiozza, Scodovacca di Cervignano,, 9 giugno 2008 De Pauli Piera Servizio Fitosanitario,, Chimico Agrario, analisi e certificazione
Servizio Fitosanitario,, Chimico- agrario, analisi e certificazione LABORATORIO di BIOTECNOLOGIE MONITORAGGIO DELLA CONTAMINAZIONE ACCIDENTALE DA OGM NELLA SEMENTE E NELLA GRANELLA DI MAIS Progetti Interregionali Legge 499/99 Programma sementiero Programma Agricoltura- qualità- ambiente PERIODO MONITORATO: 2004-2008
Programma Interregionale Sementiero Progetto sperimentale: Certificazione e confronto di varietà OGM- free idonee alla coltivazione biologica e valutazione di metodi concianti innovativi basati sull impiego di sostanze ammesse in agricoltura biologica. settori di intervento: CEREALICOLO ORTICOLO CEREALI Finalità: : sviluppo di filiere produttive di semente OGM- free Richiesta del mercato di semente certificata OGM- free per produzioni biologiche e per filiere convenzionali ma OGM- free
Programma Interregionale Agricoltura - Qualità - Ambiente Progetto sperimentale: Determinazione di disciplinari di sistemi di tracciabilità per la costituzione di una filiera di produzione di mangimi OGM-free free. Finalità: salvaguardia della salute dei consumatori tutela dell ambiente Coltivazione di mais e soia esenti da OGM produzione di mangimi garantiti Sistema di tracciabilià- campionamento- controlli.
OBIETTIVI: Monitoraggio della contaminazione accidentale da OGM nelle sementi e nella granella di mais Valutazione dei livelli di contaminazione alla luce delle normative in materia di OGM Ricerca di lotti di semente esenti da contaminazioni accidentali per la creazione di filiere OGM- free Soggetti interessati: Regione Friuli Venezia Giulia, ERSA, Servizio Fitosanitario chimico agrario analisi certificazione, Pozzuolo del Friuli Confcooperative Fedagri FVG Industrie mangimistiche regionali e sementiere Essiccatoi cooperativi ed aziende agricole regionali
INQUADRAMENTO NORMATIVO DIR. 200/8/CE SEMENTE: DECRETO MINISTERIALE 27 NOVEMBRE 2003 ALIMENTI E MANGIMI: REG. CE N. 829/03 REG. CE N. 830/03
Dir. 200/8/CE Sull emissione deliberata nell ambiente di organismi geneticamente modificati Definisce organismo geneticamente modificato,, un organismo il cui materiale genetico è stato modificato in modo diverso da quanto avviene in natura con l accoppiamento e/o la ricombinazione genetica naturale Prevede un autorizzazione temporanea per gli OGM Istituisce un registro per gli OGM Iscrizione degli OGM nei cataloghi nazionali ufficiali di varietà vegetali per la commercializzazione dei semi
DECRETO MINISTERIALE 27 NOVEMBRE 2003 Campagna di semina- Modalità di controllo delle sementi di mais e soia per la presenza di organismi geneticamente modificati Procedura per l esecuzione l dell analisi ENSE Risultato dell analisi: espresso per approssimazione alla prima cifra decimale 0.050% si approssima a 0.%:lotto di semente non conforme 0.049%:lotto di semente conforme alla normativa SOGLIA TECNICA DI TOLLERANZA DELLO 0.05% LEGATA AI LIMITI DI AFFIDABILITA DELLO STRUMENTO
Reg. CE 829/03 Relativo agli alimenti e ai mangimi geneticamente modificati Istituisce le procedure per l autorizzazione l e la vigilanza di alimenti a mangimi OGM Autorizzazioni rilasciate previo parere positivo Autorità europea per la sicurezza alimentare Durata decennale, rinnovabile Soglia di tolleranza 0.9% per presenza accidentale o tecnicamente inevitabile di tracce di OGM in alimenti e mangimi o nei singoli ingredienti di cui sono composti
Reg.CE 830/03 Concernente la tracciabilità e l etichettatura l di ALIMENTI e MANGIMI ottenuti da organismi geneticamente modificati alimenti e mangimi costituiti da OGM o ottenuti da OGM alimenti e mangimi o loro singoli ingredienti con presenza accidentale di OGM < 0.9% alimenti e mangimi o loro singoli ingredienti con presenza accidentale di OGM > 0.9% obbligo di indicare in etichetta la dicitura questo prodotto contiene organismi geneticamente modificati non si applicano le norme di etichettatura e tracciabilità obbligo di indicare la presenza di OGM
METODO DI ANALISI CAMPIONE 3000 semi PREPARAZIONE DEL CAMPIONE DI ANALISI macinazione 2 aliquote di farina da 3 g estrazione del DNA ANALISI PCR Real Time: promotore 35S: regola l espressione l del transgene gene endogeno ZM transgeni specifici analisi qualitativa- quantitativa Gene Promotore Transgene Gene Terminatore
RISULTATI MONITORAGGIO SEMENTE 2004-2008 ANNO campioni analizzati negativi positivi <0,05% % positivi >0,05 % 2004 34 27 93 29,6% 4,3% 2005 557 495 62,% 0 0,0% 2006 40 37 3 7,5% 0 0,0% 2007 93 89 4 4,3% 0 0,0% 2008 04 93 0 9,6%,0% NUMERO TOTALE DI CAMPIONI ANALIZZATI: 08 CONTAMINAZIONI < 0.05%: 7, IL 5.4% POSITIVI > 0.05%: 5, IL 0,29%
35,00% RISULTATI MONITORAGGIO SEMENTE 2004-2008 % campioni positivi sul totale 30,00% 29,62% 25,00% 20,00% 5,00% 0,00% 5,00% 0,00%,3% 9,60% 7,50% 4,30%,27% 0,00% 0,00% 0,00%,5% 2004 2005 2006 2007 2008 positivi <0,05% positivi >0,05
RISULTATI MONITORAGGIO SEMENTE 200-2008 % campioni positivi sul totale 35,00% 500 semi 750 semi 3000 semi 30,00% 29,62% 25,00% 20,00% 5,00% 5,98% 9,40% 0,00% 5,00% 7,55%,3% 7,50% 4,30% 9,60% 0,00% 200 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2004: Modificata la modalità di campionamento per le sementi. Protocollo ufficiale di analisi prevede campione di 3000 semi
IL PRINCIPIO DI CAMPIONAMENTO ED I SUOI LIMITI DI AFFIDABILITA I N k P+% 0,50% 750 97,65% 0,0% 750 52,76% 0,05% 750 3,27% 0,0% 750 7,23% 0,50% 3000 00,00% 0,0% 3000 95,02% 0,05% 3000 77,69% 0,0% 3000 25,92% I = CONTAMINAZIONE REALE DEL LOTTO N = NUMERO SEMI PER CAMPIONE k = NUMERO DI CAMPIONI ANALIZZATI P+ = PROBABILITA' DI AVERE UNA POSITIVITA'
IL PRINCIPIO DI CAMPIONAMENTO ED I SUOI LIMITI DI AFFIDABILITA I N k P+%,00% 3000 5 00,00% 0,50% 3000 5 00,00% 0,0% 3000 5 00,00% 0,05% 3000 5 99,94% 0,03% 3000 5 98,89% 0,02% 3000 5 95,02% 0,0% 3000 5 77,69% 0,007% 3000 5 65,0% 0,00% 3000 5 3,93% I = INFEZIONE REALE DEL LOTTO N = NUMERO DI SEMI PER GRUPPO k = NUMERO DI GRUPPI ANALIZZATI P+ = PROBABILITA' DI AVERE UNA POSITIVITA'
IL MONITORAGGIO RIFERITO ALLE VARIETA NEL 2005-2008 2008 I RISULTATI SI RIFERISCONO AD ANALISI QUALITATIVE SU GRUPPI DI 3000 SEMI 58 varietà sottoposte a screening da un minimo di un gruppo ad un massimo di 38 gruppi 39 varietà risultate negative al controllo 24 varietà negative su almeno 5 gruppi
I RISULTATI ANALITICI DEI MIGLIORI IBRIDI VARIETA' GRUPPI NEGATIVI (Y) TOTALE GRUPPI (N) ANNI LOTTI Century 5 5 Costanza 7 7 DKC 5353 9 9 3 DKC 6309 28 28 2 7 DKC 6677 6 6 DKC 688 8 8 8 DKC 6842 7 7 DKC 6854 9 9 2 4 Eleonora 6 6 Kalibo 5 5 Kamil 5 5 KARATE 30 30 6 KERMESS 38 38 2 7 KubricK 5 5 4 Larigal 5 5 3 Lolita 33 33 3 9 Raf 8 4 Ritmic 0 0
RISULTATI MONITORAGGIO GRANELLA n. campioni con contaminazioni accidentali da OGM sul totale 3% 5% 87% 95% 200-2003 2007 CAMPIONI TOTALI POSITIVI <0,9% % CONTAMINAZIONE 200-2003 592 77 3,0% 2007 070 52 4,9% NO campioni con % di contaminazione > 0,9%
RISULTATI MONITORAGGIO GRANELLA TRANSGENI SPECIFICI campioni anno 2007 ripartizione % dei campioni positivi 2% 8% 2% 78% mon 80 conferisce resistenza alla piralide nk 603 conferisce tolleranza al Glyphosate? mon80/nk 603
RISULTATI MONITORAGGIO GRANELLA Confronto OGM SPECIFICI granella 200-2002- 2003-2007 ripartizione % dei campioni positivi 00,0% 80,0% 60,0% 40,0% 20,0% 0,0% MON80 T25 BT76 BT PAT NK603 200 2002 2003 2007 MON80: resistenza piralide T25: tolleranza glufosinate ammonio BT76: resistenza piralide + tolleranza erbicida BT: resistenza piralide + tolleranza erbicida PAT: tolleranza glufosinate ammonio NK603: tolleranza Glyphosate
Esempio di possibile filiera OGM- free Cerealicola Vieris, Castions di Strada Filiera certificata per le micotossine: coltivazione monoibrido,, Lolita, acquisto di un unico lotto di semente da parte dei soci coinvolti nella filiera disciplinare di produzione conferimento programmato in un unico silo. Potenzialmente una filiera di questo tipo può essere certificata anche OGM- free
RISULTATI DELL ATTIVITA ATTIVITA DI CONTROLLO 25 gruppi conferiti nel 2005, 3 nel 2007 ANNO VARIETA' Y N n P% Li (%) Ls(%) 2005 Lolita 25 25 3000 NEGATIVO 0,0000 0,0050 2007 Lolita 9 9 3000 NEGATIVO 0,0000 0,0007 N= NUMERO DEI GRUPPI ANALIZZATI Y = NUMERO DEI GRUPPI RISULTATI NEGATIVI n = SEMI PER GRUPPO P % = STIMA DELLA CONTAMINAZIONE Li%= LIMITE INFERIORE DI CONTAMINAZIONE Ls%= LIMITE SUPERIORE DI CONTAMINAZIONE
VALUTAZIONE CONTAMINAZIONI DA OGM IN MANGIME DI MAIS DI PRODUZIONE LOCALE Scopo: valutare l incidenza l di contaminazioni dovute a soia OGM presente in tracce come residuo di lavorazione nella linea di produzione di sfarinato di mais. Prelievo di 3 campioni di sfarinato di mais presso mangimificio regionale lungo la linea di produzione: : testa 2: cuore 3: coda ANALISI PCR:. per il gene endogeno ZM del mais 2. per il promotore 35S 3. Per il gene endogeno lectina della soia 4. Per il transgene specifico RR della soia (soia Roundup Ready)
% DI TRANSGENE SU CAMPIONE SFARINATO % DI TRANSGENE SULLA SINGOLA FRAZIONE MAIS (con le tracce di soia OGM) DI SOIA campioni %Trans. Media SD CV campioni %Trans. Media S.D. C.V. A ripetiz. 0,45% 0,3% 0,98% 63,70% A ripetiz. 00,427% 05,929% 7,78% 7,35% A ripetiz. 2 A ripetiz. 2 B ripetiz. 0,7% B ripetiz.,430% B ripetiz. 2 B ripetiz. 2 2A ripetiz. 0,044% 0,042% 0,003% 7,345% 2A ripetiz. 68,594% 72,35% 5,3% 7,35% 2A ripetiz. 2 2A ripetiz. 2 2B ripetiz. 0,040% 2B ripetiz. 76,09% 2B ripetiz. 2 2B ripetiz. 2 3A ripetiz. 0,037% 0,039% 0,003% 7,345% 3A ripetiz. 07,635% 04,03% 5,0% 4,90% 3A ripetiz. 2 3A ripetiz. 2 3Bripetiz. 0,04% 3Bripetiz. 00,427% 3B ripetiz. 2 3B ripetiz. 2 CONCLUSIONI: Contaminazione nello sfarinato di mais: 0.3% Contaminazione della soia presente in tracce: 00% LA PRESENZA ACCIDENTALE DI SOIA TRANSGENICA, OGM AL 00%, RENDE IL MANGIME DI MAIS SOGGETTO ALL OBBLIGO DI ETICHETTATURA COME MANGIME OGM, PERCHE LA % DI CONTAMINAZIONE VA CONSIDERATA PER OGNI SINGOLO INGREDIENTE
CONCLUSIONI Il livello di contaminazioni accidentali da OGM nella semente di mais è minimo, sporadici i casi positivi >0.05%, 5 su 08 campioni analizzati tra 200 e 2008 L andamento delle contaminazioni da OGM < 0,05 nella semente è in diminuzione: dal 29,6% del 2004 al minimo del 4.3% del 2007. Il livello di contaminazioni accidentali (< 0,9%) da OGM nella granella risulta in media del 7,7% Mai riscontrate contaminazioni oltre la soglia di tolleranza dello 0,9%
CONCLUSIONI molti ibridi di mais analizzati su vari campioni, almeno 5, hanno dato sempre esito negativo alle analisi PCR per il promotore 35S transgenico: : i lotti di semente degli ibridi LOLITA, KERMESS e DKC6309 sono risultati i migliori per numero di lotti e di anni in cui i controlli hanno dimostrato l assenza da contaminazioni accidentali da OGM. Creazione di filiere OGM- free: : strada fattibile e percorribile allo scopo di fornire valore aggiunto alle produzioni di mais regionali con prodotti certificati e monitorati lungo tutta la filiera.
GRAZIE PER L ATTENZIONEL