Nuovi orientamenti in tema di trapianto embrionale. Embryo Terapy e Repeat Breeder

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1 Nuovi orientamenti in tema di trapianto embrionale. Embryo Terapy e Repeat Breeder Dr. Pierluigi Guarneri Embryovet Verolanuova (BS) gigi@embryovet.it Convegno PRO TECH Fiera zootecnica internazionale Cremona 28 Ottobre 2017

2 Biotecnologie a servizio degli allevatori Seme sessato Genomica Selezione animali Selezione embrioni Produzione di embrioni in vivo/vitro Animali da show Incremento genetico: caratteri salute resistenza alle malattie meno antibiotici Embryo terapy Stress da caldo Repeat breeder Giustifica l utilizzo dell ET su larga scala

3 Genomica seleziona le donatrici Linea maschile centri genetici Linea femminile rimonta aziendale

4 Utilizzo test genomico CLARIFIDE Next Generation Genetic Strategies (any Age) Non-Select Precision Inventory Management Select - Conventional Semen or Beef Semen Select - Sexed Semen ET or IVF Amplification The more you use genomic testing, the more progress and profit is possible

5 BIOTECNOLOGIE - EMBRYO TERAPY Trapianto embrionale una delle tecniche usate per recuperare le repeat breeder e/o periodi caldi dell anno Repeat Breeder: vacche che ritornano in calore sine materia dopo la 4 F.A. Tecnica proposta su larga scala dalla scuola sudamericana

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8 Embryo Terapy Tutti i lavori stranieri devo essere ripetuti nelle condizioni locali Ripetibilità?

9 Riepilogo C.R. da E.T. su repeat breeder fra i 3 gruppi vet (n 1011) gravide 48% gravide 53% Gravide 44% Buniotto Siet 2014

10 EMBRYO TERAPY Nessun segreto: bypasso tutte le fasi che precedono l annidamento dell embrione e che possono essere possibili punti critici Qualità oocita Problemi alle fimbrie Problemi tubarici Infezioni Occlusioni infertilità ( L.Quintela Siet 2014)

11 P.Hansen Siet 2016 Timing of Pregnancy Failure in Lactating Cows (in the absence of heat stress) Number of cows pregnant % fertilization failure 37% cleavagestage failure 23% postblastocyst embryonic failure 13% late embryonic failure 6% Early-tomid fetal failure 4% mid-to-late fetal failure 0 AI Fert. D 5-7 D 28 D 45 D 75 Term

12 Embryo Terapy : obiettivo Recuperare giorni aperti Guadagno

13 Raccolta embrioni da flushing: risultati seme convenzionale e SESSATO totali ultimi 12 mesi Risultati seme conv. ( n 215) Trasferibili Degenerati Non fecondati Risultati seme sex (n 201) Trasferibili Degenerati Non fecondati (Dati personali)

14 Embrioni trasferibili con seme sessato Dati Personali

15 Biotecnologie-Embryo terapy E un ottima tecnica da affiancare alla fecondazione artificiale per incrementare la fertilità aziendale e nello stesso tempo incrementare il livello genetico dell azienda! Seme sessato: opportunità in più, quasi 8 embrioni per il 90% femmine! Splitting!!!

16 SPLITTING IN CAMPO

17 Splitting

18 Temperature durante periodo estivo 2015 Centro meteorologico lombardo

19 ET vs AI Ho comparato il C.R. della FA vs ET in 25 aziende dal 1 Giugno al 15 Settembre Tutte aziende dove l allevatore feconda Il numero di vacche totale è più di % delle vacche ha sistemi di rilevamento calore, attivometripedometri.

20 CR 1 Giugno-15 Settembre 50% 40% 30% 20% 10% 0% ET 157/336 (47%) AI 732/4091 (18%)

21 CR ET per mese 70% 60% a a 50% 40% b 30% 20% 10% 0% June July August Sept A,b (P<0.05)

22 CR per tipo of embrione 60,00% 50,00% 40,00% 30,00% 20,00% 10,00% 0,00% Fresh em Frozen em Fresh IVF

23 CR e tipo di sincronizzazione 52,00% 50,00% 48,00% 46,00% 44,00% 42,00% 40,00% 38,00% Nat (43,5%) PgF (51,9%) Ov-synch (47%)

24 N of AI prima ET 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%

25 N di embrioni raccolti per flushing 10 8, ,36 5,00 5,05 0 June (33) July (28) Aug (4) Sept (19)

26 N di embrioni trasferibili Sept '14 Sept ' conv semen (8,97) 148 sexed semen (7,46) 405 total ( 8,44)

27 CR ET per mese 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% a b a June July August Sept F.A. + ET Luglio Sett 2017 A,b (P<0.05)

28 Perchè? Vado a Bypassare tutti I passaggi che possono creare problemi fino al giorno 7 - impianto Allevatore feconda tutte le vacche che mostrano segni di calore Vets controlla tutte le riceventi al giorno 7 (ecografia!!!) % di riceventi scartata nel periodo estivo e più alta Questo è quindi un uso diverso per incrementare la fertilità con o senza incremento genetico embryo terapy!

29 Use of Embryo Transfer to Improve Fertility Heat Stress P.Hansen Siet 2016

30 Superovulation FSH Induce multiple ovulations (superovulation) Inseminate with conventional semen Embryos develop in the cow Embryo Yield ~4-6 embryos/procedure ~6 flushes/yr ~24-36 embryos/yr Embryos develop in the lab Transfer to recipients In vitro fertilization with conventional, sexed or reverse-sorted semen Oocyte pickup (OPU) harvest oocytes transvaginally Embryo Yield ~2-4 embryos/opu ~26 OPU/yr ~ embryos/yr Gestation In Vitro Fertilization P.Hansen Siet 2016

31 EMBRYO PRODUCION PROPORTION ET Global Market (2015) ,0% 50,0% 40,0% 30,0% 20,0% 10,0% 0,0% Proporção in vitro in vivo in vitro IETS, 2015

32 Italia 1,26% della produzione europea di embrioni IVP 2012 Europa: 8729 embrioni IVP 2013 Europa: embrioni IVP Incremento 56% Nordamerica 48% Sudamerica 6% Incremento mondiale 19,5% Blondin, 2015

33 Clima OPU IN CONDIZIONI DI CAMPO Pulizia Contenzione dell animale Trasporto al laboratorio

34 Ovum pick up per noi Integra la tecnica di MOET E necessaria una produzione molto efficiente 140 sessioni OPU negli ultimi 12 mesi 2,6 embrioni / OPU 29,5% embrioni trasferibili/ oociti ricuperati

35 GRAZIE PER L ATTENZIONE