I VIROIDI Una nuova problematica fitopatologica delle Solanacee ornamentali

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Celia Tommasi
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1 I VIROIDI Una nuova problematica fitopatologica delle Solanacee ornamentali Francesco Di Serio Istituto di Virologia Vegetale del CNR, Sede di Bari XIX Forum di Medicina Vegetale, Locorotondo 11 Dicembre 2007

2 I viroidi: I più piccoli agenti infettivi - RNA infettivi: di piccole dimensioni ( nt) non codificano proteine non sono incapsidati Patogeni delle piante Koller and Sogo

3 Citrus exocortis viroid Citrus cachexia viroid CEVd CCaVd Pear blister canker viroid PBCVd

4 Crysanthemum chlorotic mottle viroid CChMVd Avocado sunblotch viroid PLMVd ASBVd

5 Apple scar skin viroid Apple dimple fruit viroid ASSVd ADFVd Peach latent mosaic viroid PLMVd

6 GENUS POSPIVIROIDS HOSTUVIROIDS COCADVIROIDS POSPIVIROIDAE PSTVd TCDVd MPVd TPMVd CSVd CEVd TASVd IrVd CLVd HSVd CCCVd CTiVd HLVd CVd-IV SPECIES (potato spindle tuber) (tomato chlorotic dwarf) (Mexican papita) (tomato planta macho) (chrysanthemum stunt) (citrus exocortis) (tomato apical stunt) (iresine) (columnea latent) (hop stunt) (coconut cadang-cadang) cadang) (coconut tinangaja) (hop latent) (citrus IV) GENUS AVSUNVIROIDS PELAMOVIROIDS AVSUNVIROIDAE ASBVd SPECIES (Avocado sunblotch) PLMVVd (peach latent mosaic) CChMVd ELVd (Chrysanthemum chlorotic mosaic) (Eggplant latent viroid) APSCAVIROIDS ASSVd CVd-III ADFVd (apple scar skin) (citrus III) (apple dimple fruit) GYSVd 1 (grapevine yellow speckle 1) GYSVd 2 (grapevine yellow speckle 2) CBLVd PBCVd AGVd (citrus bent leaf) (pear blister canker) (Australian grapevine) COLEVIROIDS CbVd 1 (coleus blumei 1) CbVd 2 (coleus blumei 2) CbVd 3 (coleus blumei 3)

7 PSTVd Malattia del tubero fusiforme della patata Plant Protection Service, Netherlands Plant Protection Service, Netherlands

http://www.bspp.org.uk/ndr/jan2004/2003-68.

8 Sintomi di accartocciamento fogliare e necrosi in pomodori coltivati infetti da PSTVd

12 2002 France Potato 4 potato cvs eradicated 2003 UK Tomato cv. Passion eradicated 2004 Germany Tomato eradicated 2004 Netherlands Tomato eradicated 2006 Netherlands S. jasminoides 2006 Germany S. jasminoides Eradicated 2006 Netherlands S. jasminoies Brugmansia spp. under eradication 2006 Belgium Tomato eradicated 2007 Italy S. jasminoides S.rantonnetii rantonnetii under eradication 2007 Slovenia S. jasminoides S.rantonnetii B. cordata under eradication 2007 Netherlands Streptosolen jamesonii Yellow International Society for infectious disease ( European and Mediterranean plant protection organization (

13 Blue Album Solanum jasminoides Solanum rantonnetii

14 Brugmansia suaveolens Brugmansia variegata Brugmansia x candida B. cordata Streptosolen jamesonii

15 Fine anno 2006: Limitata indagine su S. jasminoides poi estesa anche a S. rantonnetti. Metodo di analisi: ibridazione dot-blot con sonda PSTVd-specifica

16 1 Analisi Dot-blot A B C D Analisi RT-PCR cdna di dimensioni attese(360 bp) A3 e C3: controlli positivi: N. benthamiana infette da PSTVd Controllo positivo

17 Risultati: Caratterizzazione molecolare di 5 popolazioni di PSTVd isolate S. jasminoides e S. rantonnetii Quali effetti patogenici hanno su patata e pomodoro le varianti di PSTVd isolate da solanacee ornamentali? X Le varianti di PSTVd caratterizzate in Italia sono identiche o solo minimamente X differenti rispetto alla variante di PSTVd previamente isolata da S. jasminoides e caratterizzata in Olanda TL P C V TR Le infezioni di PSTVd in Italia ed in altri Paesi Europei hanno una comune origine? Per chiarire questi aspetti è stata avviata una caratterizzazione biologica utilizzando ospiti sperimentali adeguati

18 PSTVd isolato da S. jasminoides (PSTVd-Sj) infetta piante di pomodoro cv Rutgers PSTVd-Sj induce sintomi di nanismo in pomodoro cv Rutgers Esiste un rischio fitosanitario per altre solanacee

19 Sviluppo di un metodo basato sull impronta di tessuto (TPH) per la diagnosi di infezioni di PSTVd in S. jasminoides e S. rantonnetii TPH DBH TPH DBH Sr sano Sr2 Sj Sano Il metodo TPH sembra valido per la diagnosi di PSTVd in solanacee ornamentali

Validazione del TPH su un totale di 200 campioni prelevati in tre serre di distinti vivai pugliesi 106 piante di S. rantonnetii 94 piante di S. jasminoides TPH DBH S.rantonnetii S. jasminoides S.

20 Validazione del TPH su un totale di 200 campioni prelevati in tre serre di distinti vivai pugliesi 106 piante di S. rantonnetii 94 piante di S. jasminoides TPH DBH S.rantonnetii S. jasminoides S.rantonnetii S. jasminoides S.rantonnetii A B C D E F G H I L M N O P Q (C+) (C-) (C+) S.rantonnetii S. jasminoides S.rantonnetii S. jasminoides S.rantonnetii A B C D E F G H I L M N O P Q (C-)(C+) Tutti i campioni positivi al TPH sono risultati positivi ai saggi DBH ed RT-PCR S. jasminoides: 100 % piante infette S. rantonnetii: 26,4 % piante infette

21 Difesa delle solanacee ornamentali dalle infezioni viroidali A monte del processo produttivo: Costituzione di piante madri libere da viroidi Mantenimento e frequente controllo fitosanitario delle piante madri Durante il processo produttivo: Disinfezione degli attrezzi da lavoro con ipoclorito di sodio (2%) Produzione in lotti separati con rintracciabilità di filiazione dalle piante madri Controlli fitosanitari A valle del processo produttivo: Controllo fitosanitario dei lotti prima della commercializzazione Evitare la coltivazione e la conservazione di Solanum ornamentali nei luoghi di produzione di pomodoro, patata e altre solanacee Prescrizioni del Servizio Fitosanitario della Regione Puglia (DETERMINAZIONE DEL DIRIGENTE SETTORE ALIMENTAZIONE 2 luglio 2007, n. 277)

22 Conclusioni PSTVd è presente in Italia su solanacee ornamentali (S. jasminoides e S. rantonnetii) Il viroide si accumula a concentrazioni elevate in questi ospiti Le percentuali di piante infette sono risultate molto elevate E necessario estendere l indagine ad altre regioni e ad altri possibili ospiti (Brugmansia spp., Streptosolen jamesoni), adottando adeguate misure di eradicazione o di contrasto alla diffusione del viroide Il metodo TPH è valido per la diagnosi massale di PSTVd in solanacee ornamentali L attenzione dovrebbe essere estesa anche ad altri viroidi (Chrysanthemum stunt viroid)

23 CSVd determina gravi sintomi in crisantemo

24 Malforamzioni dei fiori causate da CSVd

25 Clorosi fogliari causate da CSVd

26 In Olanda sono state segnalate infezioni latenti di CSVd su S. jasminoides (2006) Rischio alto di trasmissione in serra del viroide ad altre colture floricole Sarebbe conveniente: - Escludere anche la presenza di CSVd dalle piante madri di solanacee ornamentali propagate vegetativamente - Sviluppare metodi diagnostici in grado di rilevare contemporaneamente, e discriminare al tempo stesso, i viroidi da quarantena descritti su questi ospiti

27 Ringraziamenti Centro Ricerca e Sviluppo in Agricoltura Basile Caramia M. R. Silletti N. Trisciuzzi Servizio Fitosanitario della Regione Puglia A. Guario A. Percoco A. Di Lillo

28 FINE DELLA PRESENTAZIONE

A A B C D E F G H I L M N O P Q TPH 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 14 28 42 56 70 84 98 112 126 140 154 168 182 196 210 B A B C D E F G H I L M N O P Q RT-PCR 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 + + +

31 A A B C D E F G H I L M N O P Q TPH B A B C D E F G H I L M N O P Q RT-PCR

32 Prima segnalazione di PSTVd in Italia (Di Serio 2007, JPP 89: ) Prima segnalazione di S. rantonnetii come ospite naturale di PSTVd (Di Serio 2007, JPP 89: ) Avviso immediato dei Servizi Fitosanitari Regionali interessati Prescrizioni del Servizio Fitosanitario della Regione Puglia (DETERMINAZIONE DEL DIRIGENTE SETTORE ALIMENTAZIONE 2 luglio 2007, n. 277)

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