Risultati del EUPT AO-08 e prestazione dei laboratori italiani sulla matrice «carne di pollame»
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1 Risultati del EUPT AO-08 e prestazione dei laboratori italiani sulla «carne di pollame» dott.ssa Patrizia Pelosi (patrizia.pelosi@iss.it) Istituto Superiore di Sanità - Roma Dipartimento Ambiente e Connessa Prevenzione Primaria Reparto Antiparassitari Workshop 2014 Laboratori Nazionali di Riferimento AO/FV/SRM e Laboratori Ufficiali per l analisi di residui di antiparassitari in alimenti Istituto Superiore di Sanità, Roma 20 Febbraio 2014
2 EUPT AO-08 (2013) Pesticides in homogeneized poultry meat Matrice Carne di pollame cruda (petto di pollo) Calendario Invio materiale test: 4 Marzo 2013 Invio risultati: 8 (9) Aprile 2013 Istruzioni particolari Conservazione del campione congelato prima dell analisi (< - 18 C) Scongelare ed omogeneizzare il campione prima dell analisi Antiparassitari scopo dell EUPT Target List Annex 1: composti da analizzare obbligatoriamente Annex 2: analiti da determinare su base volontaria Determinazioni Campione fortificato: determinazione del grasso e degli analiti (Annex 1 e 2) con Minimum Required Reporting Level (MRRL) stabilito Campione bianco: verifica della presenza di analiti (da usare per standards in / calcolo del recupero) Risultati (Result submission website: subpages 1 e 2) Determinazione del grasso dei campioni test Determinazione degli analiti nel campione fortificato e nel bianco: concentrazione in mg/kg di prodotto Esperienza del laboratorio nella determinazione dei composti della Target List Correzione per il recupero, se effettuata Recupero dell analita dal metodo utilizzato Informazioni sul metodo usato (Result submission website: subpages 3) Informazioni sul metodo di analisi e di determinazione analitica Falsi negativi (Result submission website: subpage 4) Dopo il termine per l invio dei risultati, in caso di falsi negativi riscontrati, gli organizzatori chiedono dettagli sul metodo usato Protocollo specifico Annex 2: analiti del Programma Coordinato di Controllo Pluriennale ( ) Reg. (UE) n. 788/2012: carne di pollame (2014) Allegato 1 Reg. (CE) n. 396/2005: Reg. (UE) n. 212/2013 2
3 EUPT AO-08 Laboratori partecipanti Laboratori europei partecipanti: 108 laboratori (113 registrati) rappresentanti di 25 Stati Membri e 2 Paesi EFTA EUPT AO-07: 102 laboratori (106 registrati) Laboratori italiani partecipanti: 11 laboratori (12 registrati): LNR-AO + 10 LU Laboratori Ufficiali italiani: 2 nuovi laboratori (IZS PLV IZS Sicilia) 9/10 Istituti Zooprofilattici Sperimentali (IZS) Partecipanti EUPT AO-08 Lab PT Istituto Superiore di Sanità LNR-AO X APPA Bolzano LU X IZS Abruzzo e Molise LU X IZS Lazio e Toscana LU X IZS Lombardia ed Emilia Romagna LU X IZS del Mezzogiorno LU no IZS Piemonte - Liguria - Valle d'aosta LU X IZS Puglia e Basilicata LU X IZS Sardegna LU X IZS Sicilia LU X IZS Umbria e Marche LU X IZS delle Venezie LU X LNR-AO: Laboratorio Nazionale di Riferimento per i residui dei pesticidi sui prodotti alimentari di origine animale ed alimenti con un alto contenuto di grassi LU: Laboratori Ufficiali 3
4 EUPT AO-08 Antiparassitari scopo del EUPT Annex 1 del protocollo: Composti da analizzare obbligatoriamente 57 analiti (mg/kg di prodotto) Minimum Required Reporting Level (MRRL): 0,002-0,020 mg/kg 12 analiti fortificati: 6 Organoclorurati (OC) (Oxychlordane, beta-endosulfan, o,p -DDT, trans-heptachlor epoxide, beta-hch) 3 Organofosforati (OP) (Diazinon, Chlorpyrifos-ethyl e Phosmet) 3 Piretroidi (PYR) (lambda-cyhalothrin, Cypermethrin e Bifentrin e Deltamethrin) 4
5 EUPT AO-08 Antiparassitari scopo del EUPT Annex 2 del protocollo: Composti da analizzare su base volontaria 22 analiti (mg/kg di prodotto) MRRL: 0,01 mg/kg 2 analiti fortificati: Prochloraz (*) (GC/LC) Tebuconazole (GC/LC) (*): analizzabile con difficoltà in GC La maggior parte dei composti sono analizzabili sia in GC che in LC-MS/MS 1 analita extra Metaflumizone (LC) Metodo analitico messo a disposizione su CIRCA ( ): QuEChERS modificato dal EURL-AO 5
6 Lista analiti fortificati CIRCA 16 Aprile 2013 Deadline EUPT AO-08: 8 Aprile 2013 Annex 1: 12 analiti Annex 2: 2 analiti extra: 1 analita (no valutazione EUPT AO-08) 6
7 Analiti fortificati - concentrazioni MRRL molto bassi Spiking Lelels Spiking levels/mrl 0,5-1,6 fino a 9,5 Spiking levels/mrrl 7,5-30 Joint Workshop, Almeria EUPT AO-08 Conception and results EURL-AO: feedback su azioni intraprese dai Lab FALSI NEGATIVI Analiti non determinati: Interferenti? Problemi analitici? Altro 7
8 EUPT AO-08 Preparazione dei campioni test Materiale test: carne di pollo (petto di pollo) preso dal mercato locale Controllo dell assenza di antiparassitari al di sopra del MRRL Metodi usati da EURL-AO EN 1528 GC-MSD QuEChERS modificato (tampone citrato) LC-MS/MS Test di omogeneità (**) 10 campioni test random analizzati in duplicato test passato Test di stabilità (**) Analisi effettuate dalla preparazione dei campioni alla fine dell EUPT AO-08 no degradazione (± 10%) (IUPAC/ISO/AOAC International Protocol for Proficiency Testing ISO 13528:2005) (**) dati presentati al Joint Workshop, Almeria EUPT AO-08 Conception and results 8
9 Codice Lab OC+PYR+OP+ Annex 2 OC+PYR+OP OC+PYR+OP+ Annex 2 alcuni OC (o-p'-ddt e b-endosulfan) OC+PYR+OP+ Annex 2 OC+PYR+OP+ Annex 2 OC+PYR+OP (32 analiti) OC+PYR+OP+ Annex 2 OC (20 analiti) PYR+OP OC+PYR (27 analiti) OP Classe analiti OC+PYR+OP+ tau-fluvalinate 112 OC+PYR+OP+ tau-fluvalinate Metodi usati dai laboratori italiani nell EUPT AO-08 EN (QuEChERS - tampone citrato) EN (QuEChERS - tampone citrato) Metodo interno Riferimenti Metodo > 2 anni; < 1 anno (Phosmet e Allegato 2) Esperienza Campione Solvente di estrazione 5 g ACN SI NO Aggiunta H2O > 2 anni; < 1 anno (l-cialotrina, o,p'- DDT, Phosmet e Allegato 2) 5 g ACN NO NO > 2 anni; < 1 anno (All 2); 1-2 anni Phosmet e Ciproconazolo 4 g ACN NO NO Correzione ph Dispersive SPE (PSA/MgSO4) Dispersive SPE (PSA/MgSO4) SPE (Extrelut NT-3) Metodo interno > 2 anni 4 g Esano NO NO H2SO4 Metodo interno Metodo interno EN (QuEChERS - tampone citrato) modifica EURL-AO > 2 anni; 1-2 anni Phosmet < 1 anno (All 2) > 2 anni; 1-2 anni Phosmet 10 g < 1 anno (All 2) < 1 anno 5g ACN NO NO ACN: Acetone: Dietil Etere 50:25: anni 5 g ACN Metodo interno < 1 anno 10 g Metodo interno EN :1996 (S-19) EN (QuEChERS) > 2 anni OC 1-2 anni PYR 20 g > 2 anni 10 g Acetone Esano Etere di petrolio Acetone Esano 1-2 anni 5 g ACN SPE (C18+Florisil on line) Purificazione 1 Purificazione 2 Correzione su recupero: analiti fuori dai range di accettabilità Recupero automatico "standrd addition" Recupero automatico "standrd addition" Recupero automatico "standrd addition" Recupero metodo % no info 70-90% 70% NO % NO NO GPC NO % SI 10 ml SI Dispersive SPE (PSA/MgSO4) GPC GPC SPE (Florisil) Colonna di Florisil Recupero automatico (tandards isotopici) NO 85-97% NO NO no info 55-80% (alcuni <70%) SI NO GPC NO % SI 5 ml PYR+OP: Classi di composti non analizzata OP: Classe di composti non analizzata NO Dispersive SPE (PSA/MgSO4) NO 90-94% Range recupero % analiti fortificati 1-livello solvente singolo-livello solvente Calibrazione GC-( ) ECD (delta-hch) GC-NPD (TPP) LC-MS/MS (QQQ) (TPP - nessuno) GC-MS/MS (QQQ) (PCB 209) GC-( ) ECD GC-NPD (DCB; TCPP) GC-( ) ECD (DCB) GC-MS/MS (QQQ) (PCB 209) GC-MS/MS (QQQ) (no St. Int.) OC: GC-MSD (PCB 52) PYR+OP+Annex2 LC-MS/MS (QQQ) (no St. Int.) GC-( ) ECD (Fenchlorphos) GC-( ) ECD (no St. Int.) OC+ PYR: GC-( ) ECD (no St. Int.) OP: GC-NPD GC-MSD (Malation d10) Determinazione (Standard Interno) GC-ECD LC-MS/MS (QQQ) GC-MS/MS (QQQ) GC-Ion Trap GC-Ion Trap GC-MS/MS (QQQ) GC-MS/MS (QQQ) GC-MSD LC-MS/MS (QQQ) Nessuna: Metodo Screening diverse colonne: DB-5 DB-1701 GC-( ) ECD (diverse colonne) GC-MSD GC-ECD Conferma Metodo 10/11 Lab: metodi multi-residuo e multi-classe 1/11 Lab: metodo OC (sceening) 1 Lab ulteriore metodo specifico per alcuni OC 5/11 Lab: metodi normalizzati (4 Lab usano il QuEChERS) Esperienza > 2 anni 1-2 anni o < 1 anno alcuni analiti 1 Lab non analizza OP 5/11 Lab: analiti Annex 2 2/11 Lab: tau-fluvalinate Analisi Campione di analisi: 4-20 g < 5 g: SPE g: GPC Estrazione Solventi: ACN, Ac, Es, EtilAcetati, Dietil Etere, Etere di petrolio Purificazione - SPE (su cartuccia/dispersiva) - GPC (da sola o combinata con SPE/ cromatografia su colonna) 9
10 Metodi usati dai laboratori italiani nell EUPT AO-08 (cont.) Codice Lab OC+PYR+OP+ Annex 2 OC+PYR+OP OC+PYR+OP+ Annex 2 alcuni OC (o-p'-ddt e b-endosulfan) OC+PYR+OP+ Annex 2 OC+PYR+OP+ Annex 2 OC+PYR+OP (32 analiti) OC+PYR+OP+ Annex 2 OC (20 analiti) PYR+OP OC+PYR (27 analiti) OP Classe analiti OC+PYR+OP+ tau-fluvalinate 112 OC+PYR+OP+ tau-fluvalinate EN (QuEChERS - tampone citrato) EN (QuEChERS - tampone citrato) Metodo interno Riferimenti Metodo > 2 anni; < 1 anno (Phosmet e Allegato 2) Esperienza Campione Solvente di estrazione 5 g ACN SI NO Aggiunta H2O > 2 anni; < 1 anno (l-cialotrina, o,p'- DDT, Phosmet e Allegato 2) 5 g ACN NO NO > 2 anni; < 1 anno (All 2); 1-2 anni Phosmet e Ciproconazolo 4 g ACN NO NO Correzione ph Dispersive SPE (PSA/MgSO4) Dispersive SPE (PSA/MgSO4) SPE (Extrelut NT-3) Metodo interno > 2 anni 4 g Esano NO NO H2SO4 Metodo interno Metodo interno EN (QuEChERS - tampone citrato) modifica EURL-AO > 2 anni; 1-2 anni Phosmet < 1 anno (All 2) > 2 anni; 1-2 anni Phosmet 10 g < 1 anno (All 2) < 1 anno 5g ACN NO NO ACN: Acetone: Dietil Etere 50:25: anni 5 g ACN Metodo interno < 1 anno 10 g Metodo interno EN :1996 (S-19) EN (QuEChERS) > 2 anni OC 1-2 anni PYR 20 g > 2 anni 10 g Acetone Esano Etere di petrolio Acetone Esano 1-2 anni 5 g ACN SPE (C18+Florisil on line) Purificazione 1 Purificazione 2 Correzione su recupero: analiti fuori dai range di accettabilità Recupero automatico "standrd addition" Recupero automatico "standrd addition" Recupero automatico "standrd addition" Recupero metodo % no info 70-90% 70% NO % NO NO GPC NO % SI 10 ml SI Dispersive SPE (PSA/MgSO4) GPC GPC SPE (Florisil) Colonna di Florisil Recupero automatico (tandards isotopici) NO 85-97% NO NO no info 55-80% (alcuni <70%) SI NO GPC NO % SI 5 ml PYR+OP: Classi di composti non analizzata OP: Classe di composti non analizzata NO Dispersive SPE (PSA/MgSO4) NO 90-94% Range recupero % analiti fortificati 1-livello solvente singolo-livello solvente Calibrazione GC-( ) ECD (delta-hch) GC-NPD (TPP) LC-MS/MS (QQQ) (TPP - nessuno) GC-MS/MS (QQQ) (PCB 209) GC-( ) ECD GC-NPD (DCB; TCPP) GC-( ) ECD (DCB) GC-MS/MS (QQQ) (PCB 209) GC-MS/MS (QQQ) (no St. Int.) OC: GC-MSD (PCB 52) PYR+OP+Annex2 LC-MS/MS (QQQ) (no St. Int.) GC-( ) ECD (Fenchlorphos) GC-( ) ECD (no St. Int.) OC+ PYR: GC-( ) ECD (no St. Int.) OP: GC-NPD GC-MSD (Malation d10) Determinazione (Standard Interno) GC-ECD LC-MS/MS (QQQ) GC-MS/MS (QQQ) GC-Ion Trap GC-Ion Trap GC-MS/MS (QQQ) GC-MS/MS (QQQ) GC-MSD LC-MS/MS (QQQ) Nessuna: Metodo Screening diverse colonne: DB-5 DB-1701 GC-( ) ECD (diverse colonne) GC-MSD GC-ECD Conferma Correzione per il recupero 7/11 Lab: nessuna correzione 3/11 Lab: tutti gli analiti (es. St. Addition/ St. Isotopici) 1/11 Lab: in base al recupero dell analita Rec. analiti fortificati (*) Generalmente buoni 1 Lab alcuni OC Rec < 70% Calibrazione (*) 8 Lab: calibrazione 8 Lab: calibrazione in Determinazione (*) 6 Lab: MS/MS o MSD 5 Lab: GC-( ) ECD GC-NPD 6 Lab: standard interno Conferma (*) 7 Lab: tecniche MS 2 Lab: doppia colonna 1 Lab: solo screening 2 Lab: secondo strumento (*): 1 Lab non ha fornito informazioni 10
11 Valutazione dei risultati degli EUPTs Rapporto Preliminare EUPT AO-08 (CIRCA ) Statistica armonizzata tra EURLs Concentrazione vera ( ): mediana dei risultati (mg/kg di prodotto) di tutti i partecipanti Deviazione Standard target (d): modello di Deviazione Standard basata sul Fit For Purpose (FFP) d = x FFP FFT= 0.25 (25%, dal EU PT6-2004) z-score (z): calcolato usando il modello di Deviazione Standard basata sul FFP z-score = (x ) / d x = valore riportato dal laboratorio Criteri di valutazione: Accettabile: IzI 2 Questionabile: 2 < IzI 3 Non Accettabile: IzI > 3 Deviazione standard robusta (Q): utilizzato l algoritmo descritto in DIN :2003. Minimizzazione dei risultati outliers: buona stima della deviazione standard Falsi negativi: analiti «analizzati» dal laboratorio ma non riscontrati al MRRL calcolo dello z-score (MRRL) Falsi positivi: analiti non addizionati e non rilevati dagli organizzatori z-score non calcolato Rapporto Finale EUPT AO-08 (non ancora disponibile) Calcolo della mediana dopo eliminazione dei risultati provenienti da Lab con z-score > 5 Nuovo calcolo di z-score Valori combinati di z-score 11
12 EUPT AO-08: Risultati preliminari dei laboratori italiani Classe analiti Annex 1 Rrecupero % del grasso dal campione test Principi attivi determinati MRRL Mediana Lab 4 Lab 56 Lab 59 Lab 63 Lab 64 Lab 71 Lab 73 Lab 77 Lab 101 Lab 102 Lab 112 6,62 6,62 1,50 6,55 5,89 7,33? 6,30 (0,63) 5,49 3,70 7,08 n.a. Mediana (mg/kg prodotto) z-score (Fit For Purpose, 25%) Annex 1 : Analiti nello scopo dell'eupt da ricercare obbligatoriamente Oxychlordane 0,002 0,0187 0,3 n.a. -3,3 0,7-0,8 n.a. 1,2 nd (-3,6) n.a. -2,2 n.a. o,p'-ddt 0,002 0,0220 0,0-1,3-3,0 1,0-2,0-3,5 nd (-3,6) nd (-3,6) -2,0-0,5-2,7 OC beta-endosulfan 0,002 0,0351 0,9 0,6-1,6 0,3-0,8-2,4 0,1 n.a. -2,4 3,1-1,9 Endosulfan Sulfate 0,002 0,0482 1,5 0,6-2,3 0,2-1,2-1,9 0,6 n.a. -2,2 2,3 n.a. trans-heptachlor epoxide 0,002 0,0196 0,5-0,2-0,8 0,5-0,8 nd (-3,6) 0,7 nd (-3,6) -1,8-0,9-2,2 beta-hch 0,002 0,0129 1,6 0,4-0,7 0,4-1,3 4,8 0,5 nd (-3,4) -1,9 0,3-1,5 Cypermethrin 0,010 0,0582 1,8 0,8-0,3-0,1-0,7 6,7 0,7 n.a. -1,3 0,2-0,8 PYR Deltamethrin 0,010 0,0710 1,9 0,3 0,2-0,6 0,2 0,8-0,4 n.a. -1,7 0,1-0,8 lambda-cyhalothrin 0,010 0,0857 1,6 0,4 0,7-0,2-0,6-0,4 0,0 n.a. -1,9-0,8 2,2 Diazinon 0,005 0,0536 1,9 0,4-1,5 0,5-1,2-2,0 0,3 n.a. n.a. 0,5-1,1 OP Annex 2 Chlorpyrifos(-ethyl) 0,005 0,0458 1,2 0,2-2,5 0,4-1,2-2,7-0,1 n.a. n.a. nd (-3,6) -1,5 Phosmet 0,020 0,1270 0,2 0,5-2,0-2,0-1,4 n.a. 0,6 n.a. n.a. 3,0 n.a. Annex 2 : Analiti nello scopo dell'eupt da ricercare su base volontaria Altro Legenda: n.a. = non analizzato Prochloraz (parent) 0,01 0,0798 1,6 n.a. -1,6-0,3-1,1 n.a. 0,6 n.a. n.a. n.a. n.a. Tebuconazole 0,01 0,0647 1,2 n.a. -2,8 0,5-0,8 n.a. 1,1 n.a. n.a. n.a. n.a. n.d. = non determinato, corrispondente ad un falso negativo analisi NON in routine nel laboratorio Lab Lab Lab Laboratori che usano metodo EN (QuEChERS - tampone citrato) Laboratori che usano purificazione con SPE su cartuccia Laboratori che usano purificazione con GPC 12
13 Categoria A Classe analiti Annex 1 OC EUPT AO-08: Z-Scores dei laboratori italiani - Risultati preliminari Codice Laboratorio partecipante Principi attivi determinati MRRL Mediana Lab 4 Lab 56 Lab 59 Lab 63 Lab 64 Lab 71 Lab 73 Lab 77 Lab 101 Lab 102 Lab 112 (mg/kg prodotto) z-score (Fit For Purpose, 25%) Annex 1 : Analiti nello scopo dell'eupt da ricercare obbligatoriamente Oxychlordane 0,002 0,0187 0,3 n.a. -3,3 0,7-0,8 n.a. 1,2 n.d. (-3,6) n.a. -2,2 n.a. o,p'-ddt 0,002 0,0220 0,0-1,3-3,0 1,0-2,0-3,5 n.d. (-3,6) n.d. (-3,6) -2,0-0,5-2,7 beta-endosulfan 0,002 0,0351 0,9 0,6-1,6 0,3-0,8-2,4 0,1 n.a. -2,4 3,1-1,9 Endosulfan Sulfate 0,002 0,0482 1,5 0,6-2,3 0,2-1,2-1,9 0,6 n.a. -2,2 2,3 n.a. Annex 1 7 Lab cat. A 5 Lab z-scores Accettabili e Questionabili PYR OP trans-heptachlor epoxide 0,002 0,0196 0,5-0,2-0,8 0,5-0,8 n.d. (-3,6) 0,7 n.d. (-3,6) -1,8-0,9-2,2 beta-hch 0,002 0,0129 1,6 0,4-0,7 0,4-1,3 4,8 0,5 n.d. (-3,4) -1,9 0,3-1,5 Cypermethrin 0,010 0,0582 1,8 0,8-0,3-0,1-0,7 6,7 0,7 n.a. -1,3 0,2-0,8 Deltamethrin 0,010 0,0710 1,9 0,3 0,2-0,6 0,2 0,8-0,4 n.a. -1,7 0,1-0,8 lambda-cyhalothrin 0,010 0,0857 1,6 0,4 0,7-0,2-0,6-0,4 0,0 n.a. -1,9-0,8 2,2 Diazinon 0,005 0,0536 1,9 0,4-1,5 0,5-1,2-2,0 0,3 n.a. n.a. 0,5-1,1 Chlorpyrifos(-ethyl) 0,005 0,0458 1,2 0,2-2,5 0,4-1,2-2,7-0,1 n.a. n.a. n.d. (-3,6) -1,5 Phosmet 0,020 0,1270 0,2 0,5-2,0-2,0-1,4 n.a. 0,6 n.a. n.a. 3,0 n.a. n analiti target fortificati (n=12) determinati dal Lab % analiti target fortificati determinati dal Lab (90%) Falsi Positivi (n=0) Falsi Negativi (n.d.) n analiti fortificati non nello scopo del Lab (n.a.) n z-score Accettabili ( z 2) n z-score Questionabili (2< z 3) n z-score Non Accettabili ( z > 3) Lab z-scores Non-Accettabili 4 Lab con falsi negativi 5 Lab con alcuni analiti n.a. 1 Lab scopo scarso e analiti n.d. Legenda: n.a. = non analizzato n.d. = non determinato, corrispondente ad un falso negativo Lab Lab Lab Laboratori che usano metodo EN (QuEChERS - tampone citrato) Laboratori che usano purificazione con SPE su cartuccia Laboratori che usano purificazione con GPC 13
14 Categoria A Categoria A Classe OC PYR OP EUPT AO-06 (2011) vs EUPT AO-08 (2013) Confronto prestazione Lab italiani Rrecupero % del grasso dal campione test Falsi Positivi Ossiclordano cis-clordano DDT (M3, definizione LMR) p,p'-ddd (TDE) p,p'-ddt 4,4'-Metossicloro Ciflutrin Fenvalerate (M6, definizione LMR) Deltametrina Clorpirifos (-etile) Clorpirifos-metile Diazinon Pirimifos-metile n analiti target fortificati analizzati dal Lab (n=12 (+2)) Falsi Negativi (n.d.) Principi attivi determinati Clordano (M1, definizione LMR) % analiti target fortificati determinati dal Lab n analiti target nella capacità analitica del Lab % analiti target determinati rispetto scopo del PT (n=62) n z-score Accettabili ( z 2) n z-score Questionabili (2< z 3) n z-score Non Accettabili ( z > 3) 2013: EUPT AO-08 Mediana Lab 4 Lab 59 Lab 63 Lab 64 Lab 79 Lab 85 Lab 99 5,5 5,5 6,3 4,3 5,3 7,2 5,5 3,0 z-score (Fit For Purpose, 25%) 0,1 0,2-0,1-3 -1,4 2,1 n.a. 0,1 0-0,3 n.d. (-3,6) n.d. (-3,6) 2,1 n.a. -0,3 0,4 0-1,7 2,1 1, ,5 0,0-0,6 2,1 n.a. 0,1 1-0,4 0,1-0,6 2,3-1,2 n.d. n.d. n.d. n.d. n.d. n.d. n.d. n.d. n.d. n.d. n.d. n.d. n.d. n.a. -0,2-0,3-1,9 0,3 1,7 1,5 2,5-0,2 n.d. (-3,8) -2,2 1,3 1,1 0,8 0,8-0,4-0,1-1,2 2,3 0,1 0,3 0,2-0,3 0,7-1,3 0,7 0,0 0,7 0,2-0,1 0,8-2,6 0,5-1,8 0,1-1,0-1,1 0,4 0,2 0,2-1,2 0,7-1,4-0,1 0,4-1,5 0,3-1,1 1,1-0, Matrice: carne di pollame (cruda), grasso ca. 7% Partecipanti: 11 laboratori 1 Lab non analizza PYR 2 Lab non analizzano OP Prestazione dei Lab non è migliorata: z-score Non Accettabile : 2 Lab + 4 Lab anche con falsi negativi 2011: EUPT AO-06 Matrice: carne di pollame (cotta), grasso ca.6% Partecipanti: 7 laboratori Tutti i laboratori analizzano PYR e OP Prestazioni dei Lab generalmente migliorate rispetto al EUPT su carne di maiale (2010) z-score Non Accettabile : 3 da Lab con falsi negativi 4 Lab in categoria A Principi attivi determinati Falsi Negativi (n.d.) 7 Lab in categoria A ma 2 hanno z-score Non n z-score Accettabili ( z 2) Accettabile Classe analiti Annex 1 OC PYR OP Codice Laboratorio partecipante Lab 4 Lab 56 Lab 59 Lab 63 Lab 64 Lab 71 Lab 73 Lab 77 Lab 101 Lab 102 Lab 112 Oxychlordane 0,002 0,0187 0,3 n.a. -3,3 0,7-0,8 n.a. 1,2 n.d. (-3,6) n.a. -2,2 n.a. o,p'-ddt 0,002 0,0220 0,0-1,3-3,0 1,0-2,0-3,5 n.d. (-3,6) n.d. (-3,6) -2,0-0,5-2,7 beta-endosulfan 0,002 0,0351 0,9 0,6-1,6 0,3-0,8-2,4 0,1 n.a. -2,4 3,1-1,9 Endosulfan Sulfate 0,002 0,0482 1,5 0,6-2,3 0,2-1,2-1,9 0,6 n.a. -2,2 2,3 n.a. trans-heptachlor epoxide 0,002 0,0196 0,5-0,2-0,8 0,5-0,8 n.d. (-3,6) 0,7 n.d. (-3,6) -1,8-0,9-2,2 beta-hch 0,002 0,0129 1,6 0,4-0,7 0,4-1,3 4,8 0,5 n.d. (-3,4) -1,9 0,3-1,5 Cypermethrin 0,010 0,0582 1,8 0,8-0,3-0,1-0,7 6,7 0,7 n.a. -1,3 0,2-0,8 Deltamethrin 0,010 0,0710 1,9 0,3 0,2-0,6 0,2 0,8-0,4 n.a. -1,7 0,1-0,8 lambda-cyhalothrin 0,010 0,0857 1,6 0,4 0,7-0,2-0,6-0,4 0,0 n.a. -1,9-0,8 2,2 Diazinon 0,005 0,0536 1,9 0,4-1,5 0,5-1,2-2,0 0,3 n.a. n.a. 0,5-1,1 Chlorpyrifos(-ethyl) 0,005 0,0458 1,2 0,2-2,5 0,4-1,2-2,7-0,1 n.a. n.a. n.d. (-3,6) -1,5 Phosmet 0,020 0,1270 0,2 0,5-2,0-2,0-1,4 n.a. 0,6 n.a. n.a. 3,0 n.a. n analiti target fortificati (n=12) determinati dal Lab % analiti target fortificati determinati dal Lab (90%) Falsi Positivi (n=0) n analiti fortificati non nello scopo del Lab (n.a.) n z-score Questionabili (2< z 3) n z-score Non Accettabili ( z > 3) MRRL Mediana (mg/kg prodotto) z-score (Fit For Purpose, 25%) Annex 1 : Analiti nello scopo dell'eupt da ricercare obbligatoriamente
15 Categoria A Categoria A EUPT AO-06 (2011) vs EUPT AO-08 (2013) Confronto analiti comuni Classe Classe analiti Annex 1 Codice Laboratorio partecipante Principi attivi determinati MRRL Mediana (mg/kg prodotto) Mediana Lab 4 Lab 59 Lab 63 Lab 64 Lab 79 Lab 85 Lab 99 OC Oxychlordane 0,1 0-0,3 n.d. (-3,6) n.d. (-3,6) 2,1 n.a. PYR Deltamethrin -0,4-0,1-1,2 2,3 0,1 0,3 0,2 OP Rrecupero % del grasso dal campione test n analiti target fortificati analizzati dal Lab (n=12 (+2)) Falsi Positivi Falsi Negativi (n.d.) Principi attivi determinati Diazinon Chlorpyrifos(-ethyl) % analiti target fortificati determinati dal Lab n analiti target nella capacità analitica del Lab % analiti target determinati rispetto scopo del PT (n=62) n z-score Accettabili ( z 2) n z-score Questionabili (2< z 3) n z-score Non Accettabili ( z > 3) z-score (Fit For Purpose, 25%) -1,1 0,4 0,2 0,2-1,2 0,7-1,4-0,3 0,7-1,3 0,7 0,0 0,7 0, Lab 4 Lab 56 Lab 59 Lab 63 Lab 64 Lab 71 Lab 73 Lab 77 Lab 101 Lab 102 Lab 112 z-score (Fit For Purpose, 25%) Annex 1 : Analiti nello scopo dell'eupt da ricercare obbligatoriamente OC Oxychlordane 0,002 0,0187 0,3 n.a. -3,3 0,7-0,8 n.a. 1,2 n.d. (-3,6) n.a. -2,2 n.a. PYR Deltamethrin 0,010 0,0710 1,9 0,3 0,2-0,6 0,2 0,8-0,4 n.a. -1,7 0,1-0,8 2011: EUPT AO-06 Oxychlordane: 1 Lab non lo analizza; 2 falsi negativi Deltamethrin: analizzata da tutti i Lab Diazinon e Chlorpyrifos: buone performance dei 7 Lab partecipanti 2013: EUPT AO-08 Oxychlordane: 4 Lab non lo analizzano; 3 Lab hanno performance da migliorare OP Diazinon 0,005 0,0536 1,9 0,4-1,5 0,5-1,2-2,0 0,3 n.a. n.a. 0,5-1,1 Chlorpyrifos(-ethyl) 0,005 0,0458 1,2 0,2-2,5 0,4-1,2-2,7-0,1 n.a. n.a. n.d. (-3,6) -1,5 n analiti target fortificati (n=12) determinati dal Lab % analiti target fortificati determinati dal Lab (90%) Falsi Positivi (n=0) Falsi Negativi (n.d.) n analiti fortificati non nello scopo del Lab (n.a.) n z-score Accettabili ( z 2) n z-score Questionabili (2< z 3) Deltamethrin: analizzata da 10/11 Lab Diazinon e Chlorpyrifos: 6 Lab buone performance; 3 Lab da migliorare; 2 Lab non analizzano OP n z-score Non Accettabili ( z > 3)
16 EUPT AO-06 vs EUPT AO-08 Laboratori e Metodi Aumento dei laboratori partecipanti (da 7 a 11) Aumento dei metodi multi-classe e multi-residuo Prestazioni Aumentato il numero dei Lab con z-scores Non Accettabile (numero Lab maggiore) 2 Lab non analizzano OP (da incrementare lo scopo del Lab) 1 Lab non analizza PYR (da incrementare lo scopo del Lab) 16
17 EUPT AO-08 (analiti Annex 2): Z-Scores dei laboratori italiani - Risultati preliminari Classe Codice Laboratorio partecipante Lab 4 Lab 56 Lab 59 Lab 63 Lab 64 Lab 71 Lab 73 Lab 77 Lab 101 Lab 102 Lab 112 analiti Annex 2 Principi attivi determinati MRRL Mediana (mg/kg prodotto) z-score (Fit For Purpose, 25%) Annex 2 : Analiti nello scopo dell'eupt da ricercare su base volontaria Altro Prochloraz (parent) 0,01 0,0798 1,6 n.a. -1,6-0,3-1,1 n.a. 0,6 n.a. n.a. n.a. n.a. Tebuconazole 0,01 0,0647 1,2 n.a. -2,8 0,5-0,8 n.a. 1,1 n.a. n.a. n.a. n.a. Falsi Positivi (n=0) Falsi Negativi (n.d.) n analiti fortificati non nello scopo del Lab (n.a.) n z-score Accettabili ( z 2) n z-score Questionabili (2< z 3) n z-score Non Accettabili ( z > 3) Legenda: n.a. = non analizzato n.d. = non determinato, corrispondente ad un falso negativo 5 Lab hanno fornito dati che sono anche soddisfacenti: 4 Lab z-scores solo Accettabile, 1 Lab z-score Accettabile + Questionabile 3/5 Lab non analizzano i composti in routine Lab Lab Lab Laboratori che usano metodo EN (QuEChERS - tampone citrato) Laboratori che usano purificazione con SPE su cartuccia Laboratori che usano purificazione con GPC 1 Lab ha trovato anche Cyproconazolo, falso positivo (non nello scopo di routine) Tutte le determinazioni analitiche sono state fatte in GC o LC accoppiate a detectors MSD, MS/MS o Ion Trap 17
18 EUPT AO-08: Falsi positivi dai Lab europei Non nell analisi di routine del Lab Joint Workshop, Almeria EUPT AO-08 Conception and results Lab italiani: EURL-AO: feedback su azioni intraprese dai Lab 18
19 EUPT AO-08: Falsi negativi dai Lab europei Analiti non determinati da Lab che dichiarano di ricercarli ai MRRL Caso o,p -DDT : falso negativo (n.d.) Lab italiani: Lab italiani: nessuno Analiti fortificati su materiale test: o,p -DDT trans-heptachlor epoxide EURL-AO: feedback su azioni intraprese dai Lab Joint Workshop, Almeria EUPT AO-08 Conception and results Caso Heptachlorepoxide (HEPO) : Falso negativo (n.d.) trans-hepo e Falso positivo cis-hepo 19
20 EUPT AO-08 - Deviazione Standard Relativa robusta (Q) per gli analiti fortificati Q = Deviazione Standard robusta calcolata con l algoritmo Q (DIN :2003) Buona stima della Deviazione Standard, con minima influenza di risultati isolati OC OP PYR Deviazione Standard Relativa robusta (Q) EUPT AO-08 OC % OP % PYR % Annex % da Annex 2 ISS - Workshop 2014 LNR-Lab Ufficiali ISS
21 Deviazione Standard Relativa robusta (Q) performance analiti fortificati EUPT AO-06 vs EUPT AO-08 Deviazione Standard Relativa robusta (Q) EUPT AO-06 EUPT AO-08 OC % % OP % % PYR % % Annex % 2011: EUPT AO-06 (carne di pollame cotta) PYR OC OP 2013: EUPT AO-08 (carne di pollame cruda) OC OP PYR Performance migliorata (in generale) Deviazione Standard Relativa (Q) ca. 30% (2011: 30-40%) 21
22 Determinazione del grasso (carne di pollame) performance EUPT AO-06 vs EUPT AO : EUPT AO-06 Grasso è sotto stimato Necessario un metodo più accurato/robusto per la determinazione del grasso EUPT AO-06 EUPT AO-08 Mediana 5,50% 6,62% Minimo 1,67% 0,63 (3,37) % Massimo 8,50% 8,10% RSD 29,40% 20,00% RSD (Q) 25,30% 11,33% 2013: EUPT AO-08 Deviazioni Standard Relative (RSD) sono migliorate RSD da 30% a 20% RSD (Q) da 25% a 11% 22
23 EUPT AO-08: Determinazione del grasso da Lab italiani Distribuzione dei risultati dei laboratori partecipanti all EUPT AO-08 Carne di pollame (cruda) EUPT AO-08 Mediana 6,62% Minimo 0,63 (3,37) % Massimo 8,10% Metodi e risultati dei Lab italiani Codice Lab Riferimenti Metodo Esperienza Campione Solvente di estrazione Contenuto di grasso (%) Deviazione 4 AOAC Method > 2 anni 3 g Etere di petrolio 6,62 0,00 56 Soxhlet > 2 anni 10 g Esano 1,50-5,12 59 Soxhlet > 2 anni 108 g Acetone:Esano (20:80) 6,55-0, AOAC Official Methods of Analysis (1990) 15 Ed. 3 Suppl metodo Cavieziel (J AOAC Int 1998, 81 (4), ) >2 anni 3 g Etere di petrolio 5,89-0,73 > 2 anni 7,33 0,71 71 > 2 anni 73 ASE 1-2 anni 10 g 77 ASE 1-2 anni 10 g 101 Metodo interno 20 g Acetone Esano Acetone Esano Etere di petrolio 0,63 (6,30) 5,49-1,13 3,70-2, ISO 1443: g 7,08 0,46 Joint Workshop, Almeria EUPT AO-08 Conception and results 112 non analizza il grasso n.a. 23
24 Classe Lab che hanno trovato analita % z-score Accettabile % z-score Questionabile % z-score Non accettabile Lab che hanno trovato analita % z-score Accettabile % z-score Questionabile % z-score Non accettabile EUPT AO-08 - Confronto dei risultati preliminari dei laboratori italiani ed europei Laboratori italiani Laboratori europei n di laboratori italiani partecipanti = 11 n di laboratori totali (UE+EFTA) partecipanti = 108 Principi attivi determinati n n.d. n n.a. % Lab che analizzano l'analita target n n.d. n n.a. % Lab che analizzano l'analita target OC PYR OP CONSIDERAZIONI Analiti nello scopo dell'eupt AO-08 da ricercare in manieara obbligatoria (Annex 1 del protocollo) Oxychlordane o,p'-ddt beta-endosulfan Endosulfan Sulfate trans-heptachlor epoxide beta-hch Cypermethrin Deltamethrin lambda-cyhalothrin Diazinon Chlorpyrifos(-ethyl) Phosmet Analiti nello scopo dell'eupt AO-08 da ricercare su base volontaria (Annex 2 del protocollo) Prochloraz (parent) Tebuconazole Legenda: OC: Oxychlordane è analizzato di meno dai Lab italiani PYR: ricercati da ca. 90% dei laboratori n.a. = non analizzato n.d. = non determinato, corrispondente ad un falso negativo OP: Phosmet è analizzato da meno Lab italiani e con performance peggiori rispetto ai Lab europei Analiti dell Annex 2: analizzati da un minor numero di laboratori ma ottime performance come in UE 24
25 Partecipazione Conclusioni EUPT AO-08 Buona partecipazione dei laboratori italiani, 10/11 laboratori iscritti hanno fornito dati 2 ulteriori laboratori introdotti nel circuito dei EUPTs (IZS) Necessaria la partecipazione di tutti i laboratori di controllo ufficiale (art. 28 Reg. (CE) n. 396/2005) Prestazioni dei laboratori Metodi analitici: Laboratori usano metodi multi-classe e multi-residuo (obiettivo di miglioramento 2011) Analiti analizzati: Annex 1- La maggior parte dei laboratori hanno un adeguato scopo del laboratorio (OC, OP e PYR); 2 laboratori non analizzano OP e 1 laboratorio non analizza PYR (ampliare lo scopo ) Annex 2 - Analiti analizzati da circa la metà dei laboratori italiani (molti non in routine) Determinazione del grasso nel campione test: RSD è migliorata rispetto EUPT AO-06 Lab in categoria A: aumentato il numero dei laboratori con prestazioni adeguate z-scores: riscontrati alcuni z-scores Non Accettabili (4 Lab); falsi positivi (2 Lab) e falsi negativi (4 Lab) Obiettivi di miglioramento (compatibilmente con le risorse dei laboratori) Aumentare analiti nello scopo del laboratorio: includere tutti i composti dell Annex 1 e incrementare analiti dell Annex 2 (Programma Coordinato di Controllo Pluriennale dell Unione Europea, analisi su base volontaria) Applicare le procedure interne di controllo qualità per tenere sotto controllo la prestazione del laboratorio Miglioramento dei metodi analitici MSD e MS/MS come tecnica di conferma Determinazione in LC-MSD o LC-MS/MS Miglioramento del recupero degli analiti (alcuni laboratori) Determinazione del grasso del campione test (alcuni laboratori) 25
26 Proficiency Test europeo 2014: EUPT AO-09 Organizzatori: EURL-AO Matrice: uova Partecipanti: LNR-AO e LU di settore dei Paesi europei ( uova, nello scopo del laboratorio) Antiparassitari scopo dell EUPT: analiti scopo del precedente EUPT AO-08 (OC, OP, PYR ed altri composti) Annex 1 (composti da analizzare obbligatoriamente) Annex 2 (analiti da determinare su base volontaria) Obiettivo della Commissione: aumentare gli analiti nello scopo dei laboratori e le tecniche di determinazione (GC - LC) Informazioni: Portale EURLs ( EURL-AO 26
27 Proficiency Test Europeo 2014: EUPT AO-09 Protocollo Generale (4 ed. portale EURL, Gen 2014) Protocollo Specifico EUPT (2 settimane prima dei campioni) Registrazione EUPT AO-09: dal 18 Febbraio Campioni: 22 Aprile 2014 Risultati: 23 Maggio 2014 Consultare! Lab settore AO «via scope» 27
28 Proficiency Test Europeo 2014: EUPT AO-09 Resmethrin Consultare! Abamectin Controllare documentazione disponibile: Metodo per analiti Annex 2 (?) 28
29 Webpage: 29
30 Webpage: 30
31 Grazie per l attenzione! Domande? Patrizia Pelosi patrizia.pelosi@iss.it 31
Partecipazione dei laboratori italiani all EUPT AO-07 sulla panna
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