PRESENTAZIONE DI UNO STUDIO SULLE ALTERAZIONI LEUCOCITARIE METODICA CITOTOSSICA E METODICA ANALITICA

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Marcella Motta
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1 PRESENTAZIONE DI UNO STUDIO SULLE ALTERAZIONI LEUCOCITARIE METODICA CITOTOSSICA E METODICA ANALITICA Prof. S. La Bruna Laboratorio Analisi Ospedale Garibaldi - Catania

2 RISULTATI Abbiamo testato 2 campioni di soggetti risultati intolleranti al latte. E stato effettuato un controllo con sangue di soggetto sicuramente sano che ha confermato il dato negativo. I due campioni alla lettura del test citotossico sono risultati con intolleranza di grado 3 verso il latte. Gli stessi campioni (sospensione di leucociti) sono stati analizzati al contaglobuli prima dell aggiunta dell allergene (vedi grafici 1 e 2) e dopo aver aggiunto 50 μl di allergene di Caseina e β lattoglobulina. 1

3 Campione 1 Prima dell aggiunta dell allergene Dopo l aggiunta di 50 μl di caseina Istogrammi dimensioni globuli bianchi Diagrammi di contorno dei globuli bianchi Diagrammi di dispersione neutrofili ed eosinofili 2

4 Campione 2 Prima dell aggiunta dell allergene Dopo l aggiunta di 50 μl di caseina Istogrammi dimensioni globuli bianchi Diagrammi di contorno dei globuli bianchi Diagrammi di dispersione neutrofili ed eosinofili 3

5 Campione 1 Prima dell aggiunta dell allergene Dopo l aggiunta di 50 μl di β-lattoglobulina Istogrammi dimensioni globuli bianchi Diagrammi di contorno dei globuli bianchi Diagrammi di dispersione neutrofili ed eosinofili 4

6 Campione 2 Prima dell aggiunta dell allergene Dopo l aggiunta di 50 μl di β-lattoglobulina Istogrammi dimensioni globuli bianchi Diagrammi di contorno dei globuli bianchi Diagrammi di dispersione neutrofili ed eosinofili 5

7 I risultati preliminari sono incoraggianti. Osservando, infatti, i grafici si nota in tutti i campioni sia lo spostamento della curva di distribuzione dei globuli bianchi a sinistra che la completa modificazione della curva sostituita o da un solo parallelogramma o da una serie di parallelogrammi sovrapposti. Inoltre analizzando i diagrammi di dispersione, ove vengono posizionati gli eventi relativi a differenti dimensioni, si può osservare la netta trasformazione della granulosità con riduzione drastica delle granulosità del grafico. Infine emerge un dato molto interessante in quanto vengono segnalati dal contaglobuli in completa automazione degli allarmi relativi ai globuli bianchi ed esattamente (vedi 6

8 rapporto del contaglobuli): VARLYM = Linfocita variante: presenza di cellule con caratteristiche simili a quelle dei linfociti varianti; NvWBC = Leucociti non vitali: presenza di un gran numero di leucociti ad elevata fluorescenza. (Anche se l esame è stato eseguito dopo poco tempo dal prelievo). 7

9 DISCUSSIONE Sui campioni analizzati i risultati ottenuti, anche se il numero dei campioni su cui è stato effettuato lo studio è stato molto esiguo, con il test citotossico eseguito manualmente corrispondono all analisi eseguita al contaglobuli. L alterazione dei leucociti viene evidenziata in maniera netta, almeno in questi pochi casi osservati, sia nel campione di sospensione dei leucociti che nei campioni con diluizione: 1/10, 1/15 e 1/20 come sopra ben evidenziato; anche se, ai fini di una completa standardizzazione è necessario proseguire nella ricerca. Altro dato interessante scaturito dalla osservazione dei 8

10 vari grafici è la modificazione quantitativa e qualitativa dei granuli relativi alla distribuzione dei granulociti neutrofili ed eosinofili; infatti risalta in maniera notevole che le granulazioni presenti nel grafico prima dell aggiunta dell allergene sono numericamente di gran lunga superiori a quelle osservabili nel grafico ottenuto dopo l esposizione all allergene. Infine un altro dato molto interessante è che il contaglobuli in maniera completamente automatica avverte l operatore che i risultati di alcuni parametri non soddisfano i criteri di accettazione e richiamano l attenzione su condizioni relative ai dati che richiedono ulteriore esame. Le segnalazioni relative a popolazioni sospette indica la presenza di sottopopolazioni anomale o immature. 9

11 - Nel nostro caso il contaglobuli segnala due indici di valutazione: Varlym e nvwbc e cioè presenza di cellule con caratteristiche simili a quelle dei linfociti varianti e di leucociti non vitali. In effetti il contatto dei leucociti con l allergene ha determinato una modificazione strutturale degli stessi per cui non vengono riconosciuti come tali dalla apparecchiatura. 10

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