ALTERNANZA SCUOLA LAVORO IN ISS
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- Agnello Pavone
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1 ALTERNANZA SCUOLA LAVORO IN ISS Marzo 2019 Percorso formativo: BC16 Tecniche di risonanza magnetica e imaging: applicazioni su alimenti Studenti: Bonanata Alice(Nomentano); Cannella Raffaele(Papareschi); Casini Francesco Saverio (Talete); Caterinozzi Lorenzo(Gesù-Maria). Responsabili percorso: Bortolin Emanuela Tutor: Canese Rossella, Cecchetti Serena, Chirico Mattea, Fattibene Paola, Iorio Egidio, Pietraforte Donatella, Pisanu Maria Elena, Quattrini Maria Cristina, Sestili Paola, Spadaro Francesca (Servizio Grandi Strumentazioni e Core Facilities)
2 BC16-Tecniche di risonanza magnetica e imaging: applicazioni su alimenti Tecnica della risonanza paramagnetica elettronica (EPR) La tecnica EPR rivela le sostanze paramagnetiche (atomi o molecole con elettroni disaccoppiati) come i radicali. Ha numerose applicazioni, tra le quali l identificazione degli alimenti irradiati, attraverso il riconoscimento dei radicali radioindotti nella matrice alimentare. ATTIVITÀ SVOLTA: Identificazione di radicali radioindotti in: uvetta, nocciole, ossa di tacchino e cosce di rana.
3 BC16-Tecniche di risonanza magnetica e imaging: applicazioni su alimenti ALIMENTI IRRADIATI Il trattamento con radiazioni ionizzanti è una tecnica di conservazione degli alimenti. Le radiazioni infatti distruggono i microrganismi potenzialmente dannosi per la salute umana. La normativa prevede il controllo degli alimenti in fase di commercializzazione per tutelare il consumatore nella scelta dell alimento. Ogni alimento se irradiato mostra uno spettro EPR caratteristico.
4 Colture cellulari Osservazione al microscopio ottico Linea cellulare normale HaCaT (cheratinociti) Linea cellulare tumorale A431 (carcinoma epidermoide) ADESIONE Immunofluorescenza TRIPSINA SOSPENSIONE Semina delle cellule su vetrini per microscopia Fissazione e permeabilizzazione CENTRIFUGA CONTA CELLULARE Marcature con: - anticorpi primari e secondari (Apparato del Golgi, recettore EGFR, molecola di adesione) - falloidina (citoscheletro actinico) - DAPI (nucleo)
5 Golgi apparatus Actin DAPI EGF-receptor E-cadherin DAPI HaCaT E-cad EGFR A431 E-cad EGFR
6 Mean tumor diameter (mm) «Analisi morfologica dei tessuti tumorali» Esperimento in corso Curva di crescita in vivo MA (fenotipo meno aggressivo) PA (fenotipo più aggressivo) * Procedure istologiche 1. Prelievo e fissazione delle masse tumorali; 2. Disidratazione, Chiarificazione ed Inclusione in paraffina; 2. Allestimento del blocchetto di paraffina; 3. Taglio al microtomo; 4. Colorazione; 5. Osservazione al microscopio. Ematossilina-Eosina, che permette di colorare in maniera differenziale il nucleo ed il citoplasma delle cellule in base alle loro affinità chimiche, affinché i tessuti possano essere osservati al microscopio ottico Eccoci al lavoro: Lorenzo Days post injection Alice L analisi istopatologica è terminata con l osservazione morfologica delle masse tumorali indotte dai due diversi fenotipi tumorali (MA e PA) che abbiamo fotografato al microscopio ottico utilizzando l ingrandimento 10x MA (fenotipo meno aggressivo) PA (fenotipo più aggressivo) Raffaele Saverio
7 Metabolomica mediante la spettroscopia NMR in alta risoluzione (9.4 T) c Acetato c Il confronto del metaboloma tra le cellule tumorali A431 e non tumorali HACAT ha mostrato un accumulo di acetato intracellulare coinvolto in numerosi rami metabolici quali la sintesi di lipidi e modificazioni di proteine implicate nella crescita delle cellule tumorali
8 RM T1 Pesata RM T2 Pesata Grasso Muscolo Sop. H2O
9 Il nostro percorso in ISS lo abbiamo vissuto così Grazie!
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1.7.1 Classificazione Struttura e funzioni Riproduzione e approvvigionamento di energia I protisti 22
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