GENI, GENOMI E CROMOSOMI
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- Susanna Bonelli
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1 GENI, GENOMI E CROMOSOMI
2 GENOMA E il DNA che contiene l intera informazione genetica di un organismo Le dimensioni e la sequenza nucleotidica del genoma sono tipiche di ciascuna specie Caratteristiche del genoma di alcune specie a Organismo E. coli Saccharomyces cerevisiae (lievito) Drosophila melanogaster (moscerino della frutta) Homo sapiens Dimensioni (coppie di basi) 4,5 X X X X 10 6 Dimensioni (mm) 1,4 4, a per gli Eucarioti le dimensioni sono riferite al genoma aploide
3 GENI GENI: unità in cui è suddivisa l informazione genetica contenuta nel genoma Un GENE è un tratto di DNA, con una specifica sequenza, che contiene le informazioni necessarie per la sintesi di una proteina o, piu generalmente, di un RNA Organismo E. coli Saccharomyces cerevisiae Drosophila melanogaster Homo sapiens Numero geni
4 CROMOSOMI Il genoma di una specie può essere costituito da un unica o da più molecole di DNA, associato a proteine, che prendono il nome di cromosomi Organismo E. coli Saccharomyces cerevisiae Drosophila melanogaster Homo sapiens Numero a cromosomi Forma cromosomi circolare lineare lineare lineare a per gli Eucarioti il numero è riferito al genoma aploide
5 IL CROMOSOMA DEI PROCARIOTI E. coli ha un cromosoma circolare di circa 4,5x10 6 coppie di basi che sarebbe lungo 1,4 mm (1000 volte più dell intero batterio) se non fosse condensato mediante avvolgimenti del DNA Cromosoma non condensato rilasciato da una cellula lisata di E. coli.
6 I CROMOSOMI EUCARIOTICI I cromosomi eucariotici sono lunghe molecole lineari di DNA avvolte e ripiegate più volte Nei cromosomi il DNA è associato a proteine, formando una sostanza fibrosa detta cromatina. L associazione con proteine permette la compattazione delle molecole di DNA, che è massima durante la metafase, uno stadio della divisione cellulare Nella metafase i cromosomi formano delle strutture compatte e ben distinguibili
7 L UNITA DI BASE DELLA CROMATINA IL NUCLEOSOMA Un nucleosoma è formato da un corto segmento di DNA (146 coppie di nucleotidi) avvolto intorno a un ottamero di istoni Istoni: piccole proteine basiche con carica positiva, che facilita il loro legame con il DNA, carico negativamente 2 nm DNA OTTAMERO DI ISTONI (2 H2A + 2 H2B + 2 H3 +2 H4) Istone H1 L istone H1 stabilizza il legame tra il DNA e l ottamero di istoni
8 I nucleosomi sono connessi da segmenti di DNA linker, di circa 60 coppie di nucleotidi. Ne risulta una fibra di cromatina con una struttura detta a collana di perle 11 nm DNA linker
9 LIVELLI DI CONDENSAZIONE DEL DNA Nel cromosoma metafasico la molecola di DNA risulta volte più corta di quando è distesa
10
11 CORREDO CROMOSOMICO Ogni specie possiede un numero caratteristico di cromosomi Negli organismi a riproduzione sessuata le cellule somatiche contengono un set di cromosomi di origine materna e uno di origine paterna Ad esempio, nelle cellule somatiche della specie umana, sono presenti 46 cromosomi, 23 di origine paterna e 23 di origine materna. Questo costituisce il corredo cromosomico diploide (2n = 46) Nei gameti (cellule uovo e spermatozoi) sono presenti 23 cromosomi. Questo costituisce il corredo cromosomico aploide (n = 23)
12 CROMOSOMI OMOLOGHI Origine paterna Origine materna Cromosomi omologhi
13 ALLELI I cromosomi omologhi portano gli stessi geni. Quindi ogni gene è presente in duplice copia. I due geni possono però essere presenti in versioni diverse, dette alleli
14 CICLO CELLULARE MITOSI MEIOSI GAMETOGENESI
15 DIVISIONE CELLULARE NEI PROCARIOTI I batteri hanno un ciclo vitale di minuti La divisione cellulare avviene per scissione binaria e coincide con la riproduzione dell organismo, che è asessuata Le cellule figlie sono geneticamente identiche alla cellula madre. L insieme delle cellule derivate dalla stessa cellula madre sono tutte geneticamente identiche (cloni) Fattore che può rendere diverse le cellule: il verificarsi di mutazioni
16 DIVISIONE CELLULARE NEGLI EUCARIOTI Due tipi di mecanismi: MITOSI: riproduzione delle cellule somatiche MEIOSI: riproduzione dell organismo nelle specie a riproduzione sessuata. Avviene nelle cellule della linea germinale e porta alla formazione dei gameti Entrambi i meccanismi assicurano la corretta distribuzione dei cromosomi alle cellule figlie
17 CICLO CELLULARE Serie di eventi che avvengono tra una divisione e la cellulare e quella successiva Le cellule si dividono per permettere l accrescimento corporeo, per rimpiazzare altre cellule o per riprodurre l organismo
18 IL CICLO CELLULARE MITOTICO Si divide in due fasi principali: INTERFASE e FASE M INTERFASE E il periodo tra una divisione cellulare e la successiva. Si suddivide in tre fasi: G 1 : sintesi proteine e accrescimento della cellula S: duplicazione del DNA G 2 : crescita della cellula e preparazione alla mitosi FASE M: divisione dei cromosomi (mitosi) seguita da divisione cellulare (citocinesi)
19 DURATA DEL CICLO CELLULARE Per cellule umane in attiva proliferazione o in coltura la durata media del ciclo cellulare è di circa 24 ore, così suddivise Interfase Mitosi G1 S G2 M ore La durata complessiva del ciclo cellulare è però molto variabile, e dipende essenzialmente dalla durata della fase G1, che può andare, a seconda del tipo di cellula, da ore a mesi
20 IN BASE ALLA LORO CAPACITÀ DI CRESCERE E DI DIVIDERSI SI POSSONO DISTINGUERE: cellule che hanno perso la capacità di dividersi (cellule del tessuto nervoso e muscolare) cellule che normalmente non si dividono ma possono riprendere a dividersi in determinate situazioni, come la ri parazione di una ferita (cellule del fegato, fibroblasti della pelle). Queste cellule escono temporaneamente dal ciclo e rimangono in quiescenza per molto tempo, fino a quando un appropriato stimolo non le induce nuovamente a dividersi cellule che continuano a dividersi (cellule della pelle e degli altri epiteli, cellule staminali, cellule della linea germinale)
21 MITOSI Processo somatiche di divisione e riproduzione delle cellule Porta alle formazione di due cellule figlie diploidi Le due cellule figlie sono geneticamente uguali alla cellula madre e fra di loro Nell uomo 2n 2n 2n Cellula madre Cellule figlie
22 CROMOSOMI PRIMA E DOPO LA DUPLICAZIONE DEL DNA Cromosoma prima della duplicazione del DNA Cromosoma dopo duplicazione del DNA: formato da due cromatidi fratelli uguali Centromero Mitosi Ripartizione dei cromosomi alle cellule figlie
23 IL FUSO MITOTICO Il Il fuso fuso si si forma durante la la profase a partire da da due due centri organizzatori, detti centrosomi, ai ai poli poli opposti La La struttura che che permette la la migrazione dei dei cromatidi fratelli ai ai poli poli opposti e la la suddivisione precisa del del materiale genetico è il il fuso fuso mitotico Dal Dal centrosoma parte una una serie di di microtubuli, strutture fibrillari proteiche che che si si ancorano ai ai cromosomi In In molte cellule ciascun centrosoma contiene un un paio paio di di centrioli
24 I microtubuli del fuso agganciano i cromosomi e trascinano i cromatidi fratelli ai poli opposti della cellula Cinetocori: complessi proteici che si formano a livello dei centromeri e ai quali si agganciano i cromosomi
25 MITOSI FASI DELLA MITOSI PROFASE METAFASE - PRECOCE -TARDIVA ANAFASE TELOFASE
26 FASI DELLA MITOSI
27 FASI DELLA MITOSI
28 RIPRODUZIONE E MEIOSI
29 LA RIPRODUZIONE La riproduzione permette il trasferimento del materiale genetico a nuovi individui assicurando la continuazione della specie. Può essere di due tipi: asessuata (o agamica): il nuovo organismo origina da un singolo genitore. Gli organismi derivati sono geneticamente identici e costituiscono un clone. Nei Procarioti avviene per scissione binaria; avviene anche in alcuni Eucarioti, nei quali la divisione della cellula è preceduta dalla mitosi sessuata (o gamica): origina dalla fusione di due cellule sessuali diverse, i gameti, prodotti da due genitori di sesso diverso attraverso il meccanismo della meiosi
30 MEIOSI E RIPRODUZIONE I gameti aploidi vengono prodotti per meiosi, a partire da cellule diploidi della linea germinale Durante la fecondazione, l unione dei gameti aploidi ripristina il corredo diploide nello zigote Dallo zigote diploide, per mitosi successive, si sviluppano gli organismi adulti diploidi
31 MEIOSI Avviene nelle cellule della linea germinale Porta alla formazione di quattro cellule aploidi, i gameti Gameti Consta di due divisioni cellulari I a divisione meiotica o meiosi I II a divisione meiotica o meiosi II:
32 La riduzione del numero dei cromosomi avviene nella meiosi I Meiosi II come una mitosi
33 FASI DELLA MEIOSI: I DIVISIONE Profase I iniziale Profase I intermedia Profase I tardiva Crossing over La cromatina inizia a condensarsi I cromosomi si compattano ulteriormente. I cromosomi omologhi si appaiano Tra cromosomi omologhi avviene il crossing over. L involucro nucleare si dissolve Metafase I Anafase I Telofase I I cromosomi omologhi si allineano lungo la piastra metafasica I cromosomi omologhi migrano verso i poli opposti della cellula I cromosomi omologhi si raggruppano in due nuclei e la cellula si divide
34 FASI DELLA MEIOSI: II DIVISIONE Profase II Metafase II Anafase II Dopo una breve interfase, durante la quale il DNA non si duplica, i cromosomi si condensano nuovamente I cromosomi si allineano sulla piastra equatoriale I cromatidi di ciascun cromosoma si dividono e migrano verso i poli opposti delle cellule Telofase II Prodotti I cromosomi si raggruppano in due nuclei e le cellule si dividono Si sono formate 4 cellule, ciascuna con un numero aploide di cromosomi
35 n = corredo cromosomico aploide 2n = corredo cromosomico diploide
36 IL CROSSING-OVER Processo di ricombinazione (scambio di materiale genetico) tra cromosomi omologhi Profase I: i cromosomi omologhi si appaiano strettamente Tra i cromatidi dei due omologhi avviene il crossing-over: i cromatidi si rompono, si scambiano e si risaldano in modo che dopo il crossing-over una porzione di cromatidio di origine materna si trova su quello di origine paterna e viceversa Il risultato del crossing-over è un rimescolamento di pezzi di cromosomi e quindi dei geni
37 ASSORTIMENTO INDIPENDENTE DEI CROMOSOMI I cromosomi di ciascuna coppia di omologhi si separano e si combinano in maniera indipendente da quelli di un altra coppia. M= materno P = paterno 1P 1M 1P 1M 2P 2M 2M 2P 1P 1M 1P 1M 2P 2M 2M 2P 1P 1P 1M 1M 1P 1P 1M 1M 2P 2P 2M 2M 2M 2M 2P 2P I cromosomi di due coppie di omologhi possono così generare 4 diversi tipi di gameti
38 2 coppie di omologhi = (2 2 ) 4 gameti 3 coppie di omologhi = (2 3 ) 8 gameti. Nell uomo: 23 coppie di omologhi = 2 23 = 8,4 x 10 6 possibili gameti Ciascun individuo può produrre 8,4 x 10 6 possibili gameti che differiscono nella combinazione dei cromosomi
39 LA MEIOSI PRODUCE VARIABILITA GENETICA assortimento casuale dei cromosomi durante la I divisione meiotica: un individuo può produrre 2 23 (8,4 x 10 6 ) diversi tipi di gameti casualità della fecondazione di una certa cellula uovo con un certo spermatozoo cellula uovo (2 23 ) x spermatozoo (2 23 ) = 2 46 tipi di zigote crossing-over tra cromosomi omologhi: produce nuove combinazioni di geni Questi meccanismi fanno sì che ogni individuo abbia una costituzione genetica praticamente unica (ad eccezione dei gemelli monozigoti) La riproduzione sessuata produce diversità tra gli individui
40 CONFRONTO TRA MITOSI E MEIOSI n = corredo aploide 2n = corredo diploide
41 CONFRONTO TRA MITOSI E MEIOSI MITOSI Avviene nelle cellule somatiche Una divisione cellulare Produce due cellule diploidi (2 n) No crossing-over Cellule figlie geneticamente identiche MEIOSI Avviene nelle cellule linea germinale Due divisioni cellulari Produce quattro cellule aploidi (n) Sì crossing over Cellule figlie geneticamente diverse
42 GAMETOGENESI
43 SPERMATOGENESI Inizia alla pubertà Avviene nei tubuli seminiferi dei testicoli Complessivamente l intero processo impiega 48 giorni
44 OOOGENESI 2n 2n n n n n n n
45 OOOGENESI Inizia prima della nascita (intorno al 2-3 mese di vita embrionale) quando cellule specializzate per la riproduazione, gli oogoni, iniziano a dividersi per mitosi e a maturare in oociti primari (oociti I) Questi iniziano la I divisione meiotica, che si arresta nella profase I fino alla pubertà. Alla nascita, nelle ovaie, sono presenti circa oociti I, fermi in profase I A partire dalla pubertà, ogni mese, un oocita I completa la I divisione meiotica, originando un oocita secondario (oocita II) e un globulo polare, che degenera L oocita II inizia la II divisione meiotica che si arresta in metafase II e viene completata solo se si ha la fecondazione, generando una cellula uovo e un globulo polare
46 CONFRONTO TRA OVOGENESI E SPERMATOGENESI 1 sola cellula uovo 4 spermatozoi
47 Solo uno spermatozoo feconderà la cellula uovo, generando uno zigote La fecondazione ristabilisce nello zigote il numero diploide di cromosomi
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