LABORATORIO DI ANALISI BIO-FARMACEUTICA E FARMACEUTICA. Prof.ssa Manuela Bartolini Prof.ssa Rita Gatti
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1 LABORATORIO DI ANALISI BIO-FARMACEUTICA E FARMACEUTICA Prof.ssa Manuela Bartolini Prof.ssa Rita Gatti
2 Prof.ssa M. Bartolini Prof.ssa R. Gatti Daniele Tedesco Edoardo Fabini Anna Tramarin Marina Naldi Thomas Themelis
3 Informazioni pratiche La durata della tesi è di circa 7 mesi Le liste di attesa sono variabili: per maggiori info contattate direttamente i relatori Sarete seguiti da un tutor durante tutto il progetto di tesi Non è necessario aver fatto prima il tirocinio Avere sostenuto il maggior numero di esami prima della tesi è un vantaggio
4 Campi di ricerca Studio di fenomeni di bio-riconoscimento molecolare e determinazione dei parametri cinetici e termodinamici di legame nell interazione farmaco-proteina e proteina-proteina. Caratterizzazione di modifiche strutturali a carico di proteine di interesse farmaceutico Sviluppo di sistemi miniaturizzati a base di enzimi o proteine immobilizzate per studi in linea (inibizione, binding, digestione triptica, N-deglicosilazione) Studi enzimatici di aggregazione proteica
5 Individuazione di nuovi composti d interesse farmaceutico PRODOTTI DI SINTESI PRODOTTI NATURALI DRUG DISCOVERY Composti potenzialmente utili per il trattamento la malattia di Alzheimer. Bersagli molecolari considerati: enzimi colinesterasici (AChE, BuChE), peptide beta-amiloide
6 Lab. Di Analisi Bi-Farmaceutica e Farmaceutica Caratterizzazione del profilo di attività di composti d interesse farmaceutico in SOLUZIONE Saggi fluorimetrici o spettrofotometrici SAGGI con ENZIMA O PROTEINA IMMOBILIZZATA Potenza inibitoria (target enzimatico o peptidico) Meccanismo d azione Cinetica d azione
7 Tecniche analitiche utilizzate Cromatografia Liquida ad alta prestazione (HPLC) Risonanza Plasmonica di superficie (SPR) Dicroismo circolare (CD) Spettrometria di massa Spettroscopia UV-vis e di fluorescenza
8 Biosensore ottico (SPR) Specificità di legame (Yes/No reponse) Concentrazione attiva dell analita nel campione Parametri cinetici dell interazione (k on, k off ) Affinità di legame tra analita e target (K D ) Dicroismo circolare (CD) Configurazione assoluta del farmaco Legame enantioselettivo Parametri di legame Interazioni tra farmaci Cambi conformazionali della proteina B A B = (S)-1 A = (R)-1 Tratta da J Chrom A 2012, 1232:
9 Spettrometria di massa (MS) Analisi di matrici complesse (formulazioni farmaceutiche, fluidi biologici, estratti cellulari e vegetali) Analisi di peptidi e proteine (interazioni proteinaproteina o farmaco-proteina, mutazioni posttraduzionali, isoforme, aggregazione proteica) Drug discovery (caratterizzazione, dosaggio, stabilità di farmaci e composti naturali) Biocromatografia (HPALC) Frazione del farmaco legato Legame enantioselettivo Parametri di legame Interazioni tra farmaci
10 Progetti di ricerca Individuazione dei ligandi plasmatici per il recettore RAGE: recettore coinvolto nell insorgenza di complicanze croniche del diabete Studio delle proprietà di isoforme modificate di sieroalbumina umana (HSA) in condizioni patologiche croniche (diabete, cirrosi) Studio dell interazione di SMYD3 con partner molecolari e screening di inibitori per il trattamento del tumore colon-rettale Screening di inibitori di enzimi colinesterasici e di inibitori della aggregazione della b-amiloide per il trattamento della malattia di Alzheimer
11 Sviluppo di nuovi metodi cromatografici applicabili all analisi di farmaci, integratori e campioni biologici. Utilizzo di reattivi di derivatizzazione sia nuovi che commerciali applicabili all analisi di molecole che presentano scarsa rivelabilità analitica (amminoacidi, tioli alifatici, etc.) Studio delle reazioni di derivatizzazione e ottimizzazione dei parametri che le influenzano. Convalida dei metodi sviluppati. Campi di ricerca Tecniche HPLC UV/DAD HPLC - FL Prof.ssa RITA GATTI
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