Università degli Studi di Firenze

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1 Università degli Studi di Firenze Dipartimento di Fisiopatologia Clinica Centro Interdipartimentale di Spettrometria di Massa MASTER DI 1 LIVELLO IN APPLICAZIONI CLINICHE DELLA SPETTROMETRIA DI MASSA Firenze febbraio-ottobre 2011 Con il patrocinio della Divisione di Spettrometria di Massa della Società Chimica Italiana Programma delle lezioni

2 1 INSEGNAMENTO Principi generali di spettrometria di massa Febbraio CFU = 60 ore Mercoledì 9 Introduzione organizzazione e finalità del master Prof. G. Moneti Storia della nascita della spettrometria di massa Prof. M. Bambagiotti Giovedì 10 Aula B DIP: FISIOPATOLOGIA CLINICA Metodi di ionizzazione ionizzazione elettronica, chimica, per desorbimento, a pressione atmosferica, diretta, MALDI Prof. G Giorgi Presentazione della piattaforma e-learning Dr. Jona Shtylla Analizzatori: a settore, quarupolari, trappola ionica, risonanza ionica ciclotronica, tempo di volo, alta risoluzione, ibridi Prof. G. Giorgi Venerdì 11 Novità delle ditte sulle sorgenti Ditta Thermo Dr. Scurati Ditta Agilent Dr. Barbieri Interpretazione spettri cenni accoppiamento GC-MS, caratteristiche dello spettro EI, ioni ioniradicali, formazione ioni e frammentazioni, ionizzazione soft Prof. G. Mellerio Sabaro 12 Spettri e computer Primo approccio alle biblioteche spettri: qualche esercizio insieme Prof. G. Mellerio Febbraio 2011 Mercoledì 16 Accoppiamenti con tecniche separative Ancora Analizzatori Prof. G. Giorgi GC, LC, elettroforesi capillare Prof. A. Raffaelli Giovedì 17 Aula B DIP: FISIOPATOLOGIA CLINICA Tecniche di acquisizione selettiva SIM, SRM, MRM, precursor neutral loss Prof. G. Moneti Esercizi di interpretazione spettri Prof. G. Pieraccini Novità delle ditte sugli analizzatori Ditta Agilent Dr. Cimino Ditta Thermo Dr. Scurati Venerdì 18 Aula B DIP: FISIOPATOLOGIA CLINICA Spettri di peptidi e proteine frammentazione peptidi e proteine, data dependent scan, MS e Prof. G. Pieraccini strategie in proteomica: digestioni, top-down e bottom-up Prof. F.R. Dani Imaging l imaging in spettrometria di massa Prof. G. Moneti Ditta Waters Dr. D. Ticozzi Sabaro Esempi ed esercizi Prof. G. Pieraccini Prof. F.R. Dani Ditta Bruker Dr. Basso

3 2 INSEGNAMENTO Principi generali di purificazione di molecole da matrici complesse e quantificazione di molecole in spettrometria di massa Marzo CFU = 72 ore Mercoledì Ditta AB Sciex: sorgenti ioniche ed analizzatori Dr. Dossetto Principi generali di cromatografia teoria della cromatografia,fasi stazionarie, fasi mobili GC. LC, ottimizzazione metodi per MS. Giovedì 3 Purificazione del campione Liquid/liquid extraction, SPE, SPME, gel permeation Ditta Dionex: struttura e selettività delle colonne, SPE on line, HPLC fast Dr. F. Abballe Novità delle ditte su purificazione ed automazione Ditta SRA Dr. F. Villanelli Venerdì 4 Come migliorare le prestazioni di un metodo derivatizzazione in GC, derivatizzazione in LC,effetto matrice Prof. G. Pieraccini Principi di analisi quantitativa Internal standard, isotopi stabili come IS, curva di taratura in matrice, Prof. G. Pieraccini curve lineari e non lineari, braketing,metodi di riferimento Ditta Labservice: automazione nella purificazione del campione Dr. Di Pinti Sabato Esercitazioni e analisi dati Prof. G. Pieracini Marzo 2011 Martedì 15 Riconoscimento molecolare e biblioteche spettri Strategie di riconoscimento molecolare Prof. G. Pieraccini Biblioteche spettri: GC-MS, GC-MS/MS, biblioteche per la metabolomica Prof. G. Mellerio Mecoledì Biblioteche LC-MS/MS ed in alta risoluzione Prof. G. Mellerio Metabolomica in LC Prof. G. Pieraccini Ditta Thermo: presentazione biblioteche spettri Dr. Vago Ditta Thermo: problematiche analitiche e soluzioni Dr. Vago Esercitazioni sulle biblioteche Prof. G. Pieraccini Giovedì 17 Festa nazionale per i 150 anni dell unità d Italia Venerdì 18 Sviluppo di un metodo quantitativo problematica analitica, raccolta e conservazione del campione, parametri Prof. G. Pieraccini pre-analitici, purificazione, performances cromatografiche, scelta dello ione, ottimizzazione strumentale, range curva di taratura Validazione di un metodo Prof. G. Pieraccini Sabato Esercitazioni su biblioteche e quantificazioni Prof. G. Pieraccini

4 3 INSEGNAMENTO Ambiti clinici e biomedici di applicazione della spettrometria di massa Maggio CFU = 120 ore Mercoledì 4 Applicazioni in farmacologia Ditta Agilent: Presentazione biblioteche spettri Dr. Cimino La MS in farmacologia: dalla sintesi del farmaco alla clinica Prof. MG. Giovannini La spettrometria di massa nella sintesi di nuovi farmaci Prof. A. Triolo Giovedì La spettrometria di massa negli studi preclinici Prof. MG. Giovannini I farmaci immunosoppressori, monitoraggio terapeutico Prof. F. Luceri Venerdì 6 Applicazioni in tossicologia Aspetti procedurali e analitici del laboratorio di tossicologia clinica: indagini Prof. A Fratini per fini diagnostici e legali Aspetti procedurali e analitici del laboratorio di tossicologia clinica: attività Prof. Baronti del laboratorio regionale antidoping Ricerca farmaco-tossicologica in urgenza e applicazioni Prof. F. Luceri Sabato Esempi Prof. F. Luceri Prof. Fratini Prof. Baronti Maggio 2011 Mercoledì 18 Applicazioni in endocrinologia Endocrinologia come materia interdisciplinare Prof. G Danza Gli ormoni ed il loro dosaggio: storia del connubio tra endocrinologia e biochimica clinica Giovedì Dosaggi ormonali: quando serve la MS? Di ghiandola in ghiandola: analisi delle patologie dove serve o servirebbe la MS Prof. G Danza Prof. G Danza Metodi esistenti e problemi ancora irrisolti Prof. G Danza Ditta A.B. sciex: analisi degli steroidi in LC-MS/MS Dr. B. Casetta Venerdì Massa e routine: come adattare i metodi, costi e benefici, volume di analisi e necessità di automazione Ditta Perkin Elmer: kit per MS: dosaggio di 10 ormoni steroidei e dosaggio della vitamina D Applicazioni MS oltre i dosaggi ormonali: proteomica, metabolomica, imaging e quant altro Prof. G Danza Dr. R. Bozic Prof. G. Danza Sabato Discussione su recenti lavori scientifici apparsi in letteratura Prof. G Danza

5 Giugno 2011 Mercoledì 8 Applicazioni in biomedicina I difetti del ciclo dell urea e la loro identificazione mediante LC-MS/MS Dosaggio dell omocisteina plasmatica per malattie aterotrombotiche Purine e pirimidine Giovedì Studio di farmaci in età pediatrica Messa a punto di un metodo analitico da dried blood spot (DBS). Trasponibilità dell analisi DBS ad analisi su siero o plasma. Esempi Identificazione di molecole attive da omogenato d organo La SM nei casi di intossicazione e in urgenza metabolica Ditta Perkin Elmer: screening neonatale e LIMS per lo screening neonatale Dr. R. Bozic Venerdì 10 Lo screening neonatale La storia degli screening neonatali. Gli screening obbligatori per legge. Procedure di preparazione del campione Dal campione all analisi. Patologie sottoposte a screening e possibili terapie a disposizione. Valutazione dei risultati analitici: aspetti positivi e negativi. I second triers test e analisi dei costi. Sabato Introduzione ai nuovi test di screening. Malattie da accumulo lisosomiale. Immunodeficienze severe combinate (SCIDs) Giugno - Luglio 2011 Mercoledì 29 Applicazioni in tossicologia forense La spettrometria di massa nella tossicologia forense Prof. Favretto La spettrometria di massa nella tossicologia forense Prof. Favretto Ditta Dionex : moderne tecniche HPLC fast e SPE on line Dr F. Abballe Giovedì 30 L antidoping I controlli antidoping Prof. G. Pieraccini Le procedure analitiche nell antidoping Prof. G. Pieraccini Il fenomeno doping Dr. D ottavio Il doping ematico Dr. Ronci Venerdì 1 Controllo di qualità e accreditamento La massa nel controllo di qualità e il controllo di qualità per la massa Prof. M. Pazzagli L accreditamento del laboratorio Prof. G. Messeri

6 1 TIROCINIO Conoscenza delle macchine, principali operazioni di manutenzione ordinaria, ottimizzazione dei parametri strumentali, cromatogrammi e spettri. Aprile 2011 Lunedì 4 venerdì 8 Dalle 9.00 alle (45 ore) Tirocinio primo gruppo 3 CFU = 45 0re Lunedì 11 venerdì 15 Dalle 9.00 alle (45 ore) Tirocinio secondo gruppo 2 TIROCINIO Esperienza di applicazione di un metodo analitico in spettrometria di massa ad una problematica clinica Settembre 2011 Lunedì 5 venerdì 16 Dalle 9.00 alle (75 ore) Tirocinio primo gruppo 5 CFU = 75 0re Lunedì 19 venerdì 30 Dalle 9.00 alle (75 ore) Tirocinio secondo gruppo Ottobre 2011 Preparazione e discussione tesi 10 CFU