6 Simposio internazionale delle Malvasie nel bacino del Mediterraneo

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1 6 Simposio internazionale delle Malvasie nel bacino del Mediterraneo COME UN LIEVITO AZIENDALE PUÒ DIVENTARE MODELLO PER LO STUDIO DELL ADDOMESTICAZIONE DI SACCHAROMYCES CEREVISIAE HOW A YEAST COMPANY CAN BECOME MODEL FOR THE STUDY OF THE ADDOMESTICATION OF SACCHAROMYCES CEREVISIAE Giacomo Zara, Alberto Tanda, Annalisa Coi, Jean Luc Legras 2, Ilaria Mannazzu, Severino Zara 1, Giovanni Antonio Farris, Marilena Budroni 1 Dipartimento di AGRARIA, Univ. di Sassari, SASSARI, IT, mbudroni@uniss.it 2 INRA Montpellier France Alghero Bosa 6-9 settembre 2018

2 Scopo del lavoro RICOSTRUIRE LA STORIA DELLA DOMESTICAZIONE DI Saccharomyces cerevisae

3 1) Il ceppo aziendale, buono per tutte le tipologie? 2) la creazione di strumenti per lo studio del genoma e la sua espressione 3) analisi di genomica comparata 4) il futuro e le nuove applicazioni

4 MALVASIA DI BOSA - Reg. Cee 1250/70, D.M. 25/5/1970; - Superficie totale a Malvasia DOC= 13,81ha (50,6 %) (dati Laore, 2014) Incidenza Malvasia su sup. vitata Tot. (Bosa) Altri Vitigni 25% Superficie a Malvasia 75%

5 TIPOLOGIE La denominazione di origine controllata Malvasia di Bosa è riservata ai vini che rispondono alle condizioni ed ai requisiti prescritti dal presente disciplinare di produzione per le seguenti tipologie: Malvasia di Bosa Malvasia di Bosa - riserva Malvasia di Bosa - spumante Malvasia di Bosa - passito

6 FERMENTAZIONE SPONTANEA FERMENTAZIONE GUIDATA Candida Kloeckera/Hanseniaspora Saccharomyces cerevisiae - ELEVATA VARIABILITÀ - RISCHI - QUALITÀ COSTANTE - STANDARDIZZAZIONE DEL PRODOTTO ceppo aziendale

7 ISOLAMENTO.Il ceppo az I prelievo (mosto) II prelievo (al travaso)

8 ceppo azie IDENTIFICAZIONE MORFOLOGICA Saccharomyces Pichia Kloeckera/Hanseniaspora 7 ISOLATI NON-SACCHAROMYCES; 62 ISOLATI SACCHAROMYCES.

9 ceppo aziend IDENTIFICAZIONE MOLECOLARE L analisi degli amplificati ottenuti ha mostrato per ciascun isolato una singola banda di 880bp che, in accordo con quanto riportato in letteratura, corrisponde alla dimensione attesa per Saccharomyces (Zarzoso et al., 1999).

10 CARATTERIZZAZIONE MOLECOLARE ceppo azie Isolati da tre contenitori diversi presentano lo stesso profilo di amplificazione

11 CARATTERIZZAZIONE TECNOLOGICA ceppo azie ceppo T2Z2 ceppo T2O3 ceppo T3N3 va di fermentazione CO2 prodotta (g) CO2 prodotta (g) CO2 prodotta (g) giorni giorni giorni ceppo T3A2 ceppo T1C1 ceppo T1B CO2 prodotta (g) CO2 prodotta (g) CO2 prodotta (g) giorni Gli isolati son caratterizzati da: -Fase lag ridotta; -Potere fermentativo statisticamente non differente(p<0,5); -Buon vigore fermentativo giorni giorni

12 IN CONCLUSIONE ceppo azie Gli isolati selezionati e caratterizzati potrebbero essere cloni di un unico ceppo aziendale predominante di Saccharomyces cerevisiae. Tale ceppo potrebbe essere utilizzato quindi per la fermentazione guidata della Malvasia di Bosa.

13 inamento biologico H 2 O etanolo acetaldeide aromi terziari H 2 O H 2 O

14 CARATTERIZZAZIONE TECNOLOGICA La storia

15 canismo di risalita La stor., et al. (2012); Zara G., et al.(2011) ; Zara S., et al. (2010); Zara S., et al. (2005)

16 ppi diversi, fenotipi diversi La stor M46 A43 V16 V44 M66 A51 V19 A68 A9 M39 V30 V80 V75 M49 A41 M25 ra G. et al. (2009)

17 La storia ppi parentali Flor ni ras et al., 2014

18 eppi parentali La stor Efficienza di sporificazione Vitalità delle spore Spessore del flor 2D P3-D5 GUF54-A1 Adesione alla plastica Invasività Crescita su vino Crescita su galattosio oi et al. 2016

19 La stor ratterizzazione colture aploidi i et al. 2016

20 La stor ppi vinari e ceppi flor Individuazione di geni che marcano le differenze tra ceppi FLOR e non flor di Saccharomyces cerevisiae i et al. 2017

21 tudio della Biodiversità di Saccharomyces erevisiae reazione di ceppi aploidi flor ndividuazione di geni che marcano le ifferenze tra FLOR e non flor e differenze sono importanti per accontare la storia Zara G. et al. (2009)

22 PROSSIME E FUTURE PROSPETTIVE

23 fferenze proteomiche fase flor e non-flor La stor oreno-garcía et al. (2016)

24 La stor lezione geni per knock-out CCW14 (YLR390W-A): glicoproteina legata covalentemente alla parete cellulare Ccw14p flor Ygp1p non-flor YGP1 (YNL160W): Glicoproteina di secrezione associata alla parete cellulare reno-garcía et al., 2018

25 La stor ratterizzazione mutanti Riduzione n cellule in fase flor Aumento n cellule in fase nonflor Riduzione aderenza alla plastica nel mutante CCW14 reno-garcía et al. 2018

26 ppi modello u Zeidan et al. (2014)

27 plicazioni innovative capsule: P. chrysogenum + lieviti flor inado et al., 2006 García-Martínez et al., 2015

28 Grazie