Nuove prospettive terapeutiche per la malattia celiaca
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- Severina Mori
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1 Nuove prospettive terapeutiche per la malattia celiaca
2 Terapia attuale Dieta senza glutine: Da seguirsi per tutta la vita Sicura ed efficace Normalizzazione della mucosa intestinale Bassa compliance Implicazioni sociali (mense, viaggi, etc, etc) CD mucosa atrofica CD mucosa trattata NO glutine glutine
3 Terapia futura Immunomodulazione: Deve sopprimere specificamente la reazione infiammatoria al glutine Deve essere priva di rischi Gianfrani et al. Immunotherapy of coeliac disease: where do we stand? In Perspective in Coeliac Disease. Catassi C. (eds), 2003 Gianfrani et al. Possible drug targets for coeliac disease. EOTT 2006
4 Perché immunomodulazione specifica? Patogeni batteri protozoi virus Non-patogeni proteine alimentari batteri probiotici IMMUNITÀ ATTIVA TOLLERANZA Risposta Immune attiva Tolleranza immunitaria
5 Digestione degli alimenti Digestione meccanica Proteine Digestione intestinale: pepsina, tripsina, endopeptidasi Lunghi peptidi Corti peptidi e aminoacidi
6 Patogenesi della lesione celiaca Lume intestinale Glutine Linfocita T CD4 Epitelio a spazzola T γ/δ TG2 CD8 CD4 TCRαβ TG2 T CD4 Peptide deamidato APC T T CD4 B cell T CD4 Lamina propria (LPLs) T CD8 APC HLA-DQ2/DQ8 APC Interferone-γ Proliferazione
7 Risposta Immune attiva Tolleranza immunitaria Interleuchina (IL)-10 e la risposta immune intestinale Controlla la risposta immune alla flora non patogena Induce l anergia cellulare Regola la proliferazione dei linfociti e produzione di interferone-γ Topi privi di IL-10 sviluppano l enterocolite cronica
8 La cultura d organo d della mucosa celiaca in remissione come strumento per lo studio della immunomodulazione da IL-10 Piccoli espianti di mucosa digiunale Gliadina IL-10 24hs at 37 C Immunoistochimica Morfologia dei villi/cripte Generazione di linee linfocitarie
9 Il trattamento con IL-10 inibisce l infiammazione l indotta dal glutine nella mucosa intestinale Notevole riduzione di: Dell infiltrato dei linfociti CD3 nell epitelio e lamina propria Dell attivazione cellulare (CD25) CD80 (B7-1) ICAM-1 Interferone-γ e IL-2 mrna Salvati et al. Gut 2005
10 IL-10 sopprime la reattività dei linfociti T al glutine nella mucosa celiaca γ-ifn-sfc/1x10 6 cells ctl-tcl IL-10-TCL T cell lines (n=4) Gianfrani C. et al J. Immunology 2006 medium gliadin gliadinα-il10r gliadinα-tgfbeta IL-10-SFC/1x10 6 cells ctl-tcl IL-10-TCL T cell lines (n=4) medium gliadin
11 L IL-10 attiva meccanismi di regolazione endogeni? gliadin IL-10 APC IFN-γ IL-2 IL-10 TGF β Tr Tr Nell intestino celiaco sono presenti cellule regolatorie?
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13 Nell intestino dei celiaci trattati la risposta infiammatoria al glutine è contrastata da meccanismi di regolazione IL-10 & TGF-β mediati 60 Treated CD-TCL Treated CD-TCL 3-H-TdR (cpmx10 3 ) IFN γ (pg/ml) cells gliadin gliadin ail10r gliadin atgfβ gliadin both cells ail10r cells atgfβ cells gliadin gliadin ail10r gliadin atgfβ gliadin both cells ail10r cells atgfβ N=5, P<0.05
14 Nell intestino dei celiaci atrofici la risposta infiammatoria al glutine è contrastata da meccanismi di regolazione IL-10 & TGF-β mediati 3-H-TdR (cpmx10 3 ) Untreated CD-TCL γ -IFN - SFC/1x10 6 cells Untreated CD-TCL medium gliadin Gliadin αil10r αtgfβ medium gliadin Gliadin αil10rαtgfβ N=5, P<0.05
15 Nell intestino dei celiaci sono presenti cellule T regolatorie che bloccano la risposta infiammatoria al glutine 5 Teff:Treg 1:1 Stimulation index % 0 Th.3 (Th0) Th.3 Tr1.9 (Th0 Tr1) Tr1.9 (Tr1) Inibizione del 57% della risposta proliferativa al glutine
16 Lume intestinale glutine glutine IL-10 APC HLA-DR ICAM-1 B7.1 APC HLA-DR ICAM-1 B7.1 CD25 IL-2 IFN- γ? Tr IL-10 IFN-γ Tr IL-10 Tr Tr Tr Tr infiammazione NO infiammazione
17 Prospettive terapeutiche Espansione ed attivazione in vivo delle cellule regolatorie attraverso l immissione di IL-10 esogena Vescicole lipoproteiche che rilasciano IL-10 nel sito di infiammazione Dose di IL-10 Via di somministrazione orale o rettale Sicurezza del farmaco/effetti collaterali Efficacia Dosaggio di glutine ingerito Pazienti non complianti e con autoimmunita associate?
18 Applicazioni terapeutiche Deviere et al Gastroenterology 2001: Riduzione dei casi di pancreatite spontanea dopo indagine ERCP Assenza di effetti collaterale Schreiber et al Gastroenterology 1995: Pazienti con colite ulcerativa refrattaria Riduzione delle citochine pro-infiammatorie Migloramento del tessuto all esame endoscopico Mulder et al 2001 Celiachia refrattaria: Somministrazione sottocutanea di IL-10 (8 ug/kg) per 3 volte/settimana per 3 mesi 5/8 nessun miglioramento istologico 1/8 esacerbazione dell istologia 2/8 miglioramente clinico e istologico
19 Contributi Giuseppe Mazzarella Alessandra Camarca Istituto Scienze dell Alimentazione CNR, Avellino Virginia Salvati Delia Zanzi Salvatore Auricchio Riccardo Troncone Dip. Pediatria & ELFID Univ. Federico II, Napoli Maria Grazia Roncarolo Tiget, Milano Nicola Giardullo Gaetano Iaquinto U.O. Gastroenterologia, Os Moscati, Avellino
20 Strategie terapeutiche alternative alla dieta senza glutine Diminuzione del carico antigenico Selezione/produzioni di varietà prive delle sequenze biologicamente rilevanti Terapia enzimatica supplementare o digestione di cereali tossici mezzo di proteasi batteriche Interferenza con il passaggio intestinale della gliadina Interferenza con la presentazione della gliadina a cellule T Inibizione della transglutaminasi Blocco molecole HLA Interferenza con attivazione cellule T Anticitochine infiammatorie Strategie che interferiscono con l immunitl immunità innata glutine-indotta indotta (anti-il15) Anti IFNgamma Citochine immunoregolatrici e induzione di cellule T regolatorie gliadina-specifiche Interferenza con i meccanismi di homing
21 Management of CD: from the Bench to In Vivo Therapeutic Intervention Drugs That Target the Enzymatic Breakdown of Gluten bacterial prolyl endopeptidases (PEPs) can efficiently degrade gluten peptides by cleaving proline bonds (Mitea C. XII International Celiac Disease Symposium, New York, November 2006 ) Drugs That Interfere with the Intestinal Transport of Gluten An inhibitor of zonulin, AT-1001, is currently being tested in clinical trials for the treatment of CD patients on a gluten-free diet (Paterson B. Alba Therapeutics. US patent and XII International Celiac Disease Symposium, New York, November 2006) Peptide Therapy a vaccine with a peptide that combines two immunodominant α- and ϖ- gliadin 17-mer peptides (combo-epitope) (Anderson R. granted patent WO/2001/ and XII International Celiac Disease Symposium, New York, November 2006) Reviewed in Gianfrani et al. MRMC submitted
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