Analisi di alimenti e mangimi Juni/2007 I/2013 RIDASCREEN FAST Soya (R7102) I prodotti a base di soia stanno diventando sempre più diffusi ed utilizzati nell industria alimentare, portando talvolta ad un involontaria contaminazione degli alimenti nel processo produttivo. Anche piccole concentrazioni di soia possono causare allergie alimentari, motivo per cui in molti paesi la soia deve essere indicata in etichetta come allergene. Il kit ELISA RIDASCREEN FAST Soya (vedi Figura 1) è utilizzato per determinare la presenza di proteine di soia in materie prime e in prodotti trasformati, come ad esempio insaccati, gelati, cioccolato, dolci, miscele per dolci, zuppe, salse, condimenti, margarina e bevande. Vista la grande varietà di alimenti che può contenere proteine di soia native o trattate termicamente, è stato sviluppato un metodo di preparazione del campione unico ed universale, valido sia per gli alimenti non trattati che per quelli trasformati. Un grammo di campione viene estratto in una soluzione di estrazione specifica a 100 C per 10 minuti. Il trattamento termico assicura che tutte le proteine di soia siano denaturate. In seguito, si prelevano 100 µl della soluzione del campione per il test ELISA. L anticorpo utilizzato riconosce in modo specifico la glicinina denaturata. Questo metodo di preparazione del campione universale e standardizzato consente di rilevare la soia sia in materie prime sia negli alimenti trasformati. L esecuzione del test dura 3 x 10 minuti ed i risultati sono successivamente misurati a 450 nm. continua a pagina 2
continua da pagina 1 Nostri prodotti RIDASCREEN FAST Soya (R7102) Figura 1: Il kit RIDASCREEN FAST Soya è un test ELISA a sandwich da 48 determinazioni Il limite di rivelabilità del kit RIDASCREEN FAST Soya è pari a 0.3 mg/kg (ppm) mentre quello di quantificazione è pari a 2.5 mg/kg (ppm) di proteine di soia. Il test è stato validato internamente e la tabella 1 mostra una selezione dei risultati ottenuti in una serie di esperimenti di arricchimento. I valori di recupero ottenuti per le diverse matrici sono compresi tra l 86 e il 109%. Tabella 1: Risultati degli esperimenti di arricchimento in diverse matrici utilizzando il kit RIDASCREEN FAST Soya Campione Crema alla nocciola Livello di concentrazione (mg/kg di proteine di soia) 2.5 Concentrazione misurata (mg/kg di proteine di soia) Recupero (%) 2.3 92 Miscele per dolci 2.7 109 Margarina 2.3 92 Insaccati 2.2 86 Ketchup 2.5 100 Quando si utilizzano i sistemi ELISA di R-Biopharm per gli allergeni, si raccomanda di seguire una procedura di estrazione del campione standardizzata utilizzando il tampone di estrazione contenuto nel kit, tranne quando l obiettivo è quello di determinare soia, latte e gliadina. Le proteine di questi tre allergeni infatti devono essere estratte dai campioni alimentari utilizzando metodi più specifici. In questi casi ad esempio è necessario utilizzare una speciale soluzione di estrazione oppure riscaldare il campione a 100 C. Per maggiori dettagli si prega di fare riferimento alle metodiche specifiche dei singoli prodotti. Per la determinazione della soia, durante la preparazione dei campioni, è necessario utilizzare una soluzione di estrazione diluita in associazione ad una soluzione di estrazione 2 non diluita, con riscaldamento a 100 C. Questa soluzione di estrazione 2 è utilizzata anche nel metodo ELISA per il latte, RIDASCREEN FAST Milk, ma in forma diluita. È per questo che l etichetta presente sulla bottiglia della soluzione di estrazione 2 riporta la dicitura concentrata. Tuttavia, quando si deve determinare la soia, questa indicazione è irrilevante e non deve essere tenuta in considerazione. RIDA SOFT Win / RIDA SOFT Win.net (Z9996) Versione attuale: 1.82 In caso di interesse per un aggiornamento del RIDA SOFT Win o del RIDA SOFT Win.net, si prega di contattare il distributore locale pagina 2
Prodotti della linea SureFood PCR dalla nostra consociata CONGEN Biotechnologie GmbH, Berlino Con il primo trimestre del 2013 saranno presentati i seguenti nuovi prodotti PCR real-time: SureFood ALLERGEN QUANT Questa linea di prodotti sarà completata da due nuovi kit per la rilevazione quantitativa: SureFood ALLERGEN QUANT Arachide Noce S3203 S3207 Questi kit, usati in associazione al kit standardizzato per la preparazione del DNA SureFood PREP Allergen (S1012) e al sistema di calibrazione SureFood Allergen QUANTARD 40 (S3301), permettono di quantificare ed esprimere i risultati in mg/kg (ppm). SureFood ANIMAL ID Nuovi kit di rilevazione qualitativa nella serie SureFood ANIMAL ID: SureFood ANIMAL ID Suino IAAC Turkey IAAC Horse & Donkey IAAC Rabbit IAAC Black/white Halibut IAAC S6114 S6116 S6119 S6120 S6201 Il recente ed esclusivo metodo IAAC (amplificazione interna e controllo animale) associa la determinazione standard del parametro target nel canale FAM con un controllo interno di amplificazione nel canale VIC. Inoltre, questo canale VIC viene utilizzato per misurare un segnale di cross-specie per campioni di carne. Nel caso in cui si ottengano risultati negativi per FAM, il canale VIC può essere utilizzato per verificare che ogni amplificazione avvenga in modo corretto (risultati negativi corretti). L utilizzo del valore Ct, confrontato con i risultati dei controlli privi di carne, consente all operatore di valutare se il campione sconosciuto conteneva anche carni di altre specie. SureFood GMO Questa ampia serie di prodotti è ora completata dai seguenti kit: SureFood GMO Plant 4plex Corn/Soya/Canola/Cotton S5156 Plant 4plex Corn/Soya/Canola + IAC S5158 In associazione ai moduli di screening, è possibile assegnare a specifici eventi OGM campioni a composizione sconosciuta - quali ad esempio il polline nel miele - oppure escludere altri eventi di modificazione genetica. I campioni sono specificamente analizzati tramite GMO ID e OGM Quant. Anche qui, sono stati introdotti una serie di nuovi prodotti: SureFood GMO ID RR2Y Soya MIR162 Corn MON863 Corn MIR604 Corn S2034 S2035 S2037 S2039 A2704-12 Soya S2057 T45 Canola S2060 MS8 Canola S2062 SureFood GMO QUANT NK603 Corn MON863 Corn GA21 Corn GT73 Canola MIR162 Corn S2050 S2051 S2054 S2061 S2135 Questi kit possono essere utilizzati per determinare in modo specifico eventi OGM qualitativamente (GMO ID) o quantitativamente (GMO QUANT). Quest ultimo metodo è importante per i prodotti che hanno l approvazione alla commercializzazione nell Unione Europea e che sono di conseguenza soggetti a etichettatura secondo la normativa europea. SureAqua E stata lanciata una nuova serie di prodotti con il marchio SureAqua : SureAqua Bacteria I Legionella pneumophila PLUS S1023 S5501 Questi nuovi kit consentiranno di analizzare campioni di acqua sull eventuale presenza di microrganismi patogeni. Su richiesta è possibile ricevere la documentazione tecnica contenete tutti i dettagli della gamma di prodotti SureFood. pagina 3
Novità dalla nostra consociata GEN-IAL Nel campo delle analisi del vino, la determinazione qualitativa e quantitativa di Brettanomyces (Dekkera bruxellensis) sta diventando sempre più importante. Dal momento che il metodo classico è troppo lento e il metodo di riferimento OIV troppo complesso, i kit diagnostici basati sulla tecnologia PCR real-time - in particolare GEN-IAL Species Kit Dekkera bruxellensis ( TPYDB 0050) si stanno dimostrando essere una attraente alternativa per una rapida e facile gestione. Per semplificare la procedura di preparazione del campione con il kit GEN-IAL Simplex Easy Wine Kit ( SEW 0100) e la successiva fase di quantificazione, sono state apportate una serie di modifiche: Il kit GEN-IAL Dekkera bruxellensis Standard ( DBST 0008), che originariamente comprendeva quattro provette di analisi, è stato ridisegnato per renderlo ancor più semplice includendo un unico e nuovo standard di DNA, DBST 0100 con DNA da 200.000 cfu. L operatore può ora diluire e aliquotare questo standard di DNA in una serie di standard a sua scelta. Un nuovo prodotto - Liticasi di lievito (art. YLYT 2000) La lisi completa delle cellule di lievito è ottenuta mediante un incubazione con l enzima liticasi in una concentrazione di 15 u/reazione. Fino ad ora, questo sensibile enzima doveva essere ordinato e sciolto separatamente. Per rendere le procedure di diluizione e manipolazione più semplici e sicure per i laboratori del vino, questo prodotto è ora offerto da GEN-IAL, l unica cosa che rimane da fare è sciogliere la liticasi liofilizzata misurata nel tampone incluso. Il kit real-time PCR può essere utilizzato con il controllo di amplificazione interno su diversi termociclatori con l impostazione FAM/HEX o FAM/ROX. Estremamente semplice e poco costoso, Spartan DX 12 si è dimostrato essere uno strumento adeguato per i laboratori enologici. In caso di interesse per i nostri prodotti, contatta il distributore di zona Informazioni da R-Biopharm Rhône, Scozia Identificazione di specie animale Recentemente è stato lanciato l allarme a causa della scoperta di DNA di cavallo in hamburger di manzo in vendita in Gran Bretagna. Questo ha scosso i grandi supermercati coinvolti che vendevano tali prodotti e ha diffuso la preoccupazione in vari aspetti della sicurezza alimentare. Il rischio di adulterazione degli alimenti, eseguita da commercianti o trasformatori senza scrupoli, è qualcosa a cui le agenzie di regolamentazione non solo nel Regno Unito ma in tutto il mondo devono prestare attenzione. Nell ambito del processo di produzione della carne nei macelli, delle carni macinate e lavorate fino ai mangimi contenenti carne, l identificazione delle specie di carni macinate e trattate non è sempre semplice e chiara. Ciò pone il rischio di falsificazione del prodotto nel senso che la carne di una specie di minore valore potrebbe essere dichiarata come carne di un animale di valore maggiore. Il rischio è più elevato in miscele a base di carne come ad esempio la carne macinata di manzo e i prodotti derivati. Utilizzando la PCR real-time è possibile rilevare diverse specie animali ed identificare in modo altamente specifico le diverse specie presenti. Il gruppo R-Biopharm, in collaborazione alla consociata Congen, offre sia i kit real-time PCR sia un servizio PCR per l identificazione qualitativa delle diverse specie animali tra cui cavalli. In entrambi i casi si ottengono risultati in tempi rapidi e con un limite di rilevazione estremamente basso. Per maggiori informazioni si prega di contattare Victoria@r-biopharmrhone.com pagina 4
Informazioni da R-Biopharm Rhône, Scozia Modifiche ai regolamenti europei per l ocratossina A nelle Spezie Le micotossine sono metaboliti tossici prodotti da differenti specie di funghi, che possono formarsi sulle piante sia durante la crescita sia durante lo stoccaggio. Molte specie del genere Aspergillus e Penicillium, come ad esempio Penicillium Verrucosum, sono responsabili della produzione dell ocratossina A (OTA), un noto cancerogeno, teratogeno e nefrotossico. L OTA si trova spesso negli stoccaggi di granella e, fino a poco tempo fa, i cereali erano considerati la principale fonte di questa micotossina. Le indagini sulla presenza di OTA sono però aumentate e le spezie sono ora considerate un altra fonte importante. Dal momento che OTA è un contaminante naturale e non è possibile eseguirne una completa eliminazione da alimenti e mangimi, l obiettivo delle indagini è quello di prevenire e controllare la produzione di OTA in campo per la sicurezza della salute umana.una recente pubblicazione della commissione europea (EU No. 594/2012) ha modificato il regolamento CE 1881/2006 per quanto riguarda i livelli massimi di contaminanti tra cui OTA. Il livello massimo rimarrà inferiore a 15 µg/kg per le seguenti spezie: Piper spp. (frutti, compreso il pepe bianco e nero) Myristica fragrans (noce moscata) Zingiber officinale (zenzero) Curcuma longa (curcuma) Tuttavia le modifiche ai livelli di Capsicum spp saranno posticipate e resteranno a 30 µg/kg fino al 31 dicembre 2014 e saranno fissate a 15 µg/kg a partire dal 1 gennaio 2015. Capsicum spp. (frutti secchi, interi o macinati, compresi peperoncini rossi, peperoncino in polvere, pepe di Caienna e paprika) R-Biopharm Rhône Ltd, grazie al proprio team dedicato all assistenza tecnica, alla ricerca e allo sviluppo, ha introdotto con successo nuovi metodi di analisi per l ocratossina A in difficili campioni di spezie. Utilizzando le colonne di immunoaffinità OCHRAPREP (P14/P14B) è possibile estrarre, purificare e concentrare in modo semplice e selettivo l OTA da una vasta gamma di prodotti alimentari e mangimi garantendo una rilevazione ottimale mediante HPLC. Sono disponibili diverse note applicative per molte spezie provenienti dal Capsicum spp. tra cui paprika e peperoncino in polvere. I risultati sono coerenti, affidabili e consentono di rilevare livelli di OTA ben al di sotto dei livelli consentiti. Informazioni aggiuntive riguardanti i regolamenti sulla melamina Lo stesso Regolamento della Commissione ha pubblicato anche informazioni supplementari per quanto riguarda i livelli di melamina negli alimenti e nei mangimi. I dati provenienti dall EFSA hanno dimostrato che l esposizione alla melamina può provocare la formazione di cristalli nelle vie urinarie, e causare danno tubulare prossimale. Questo è stato osservato negli animali e nei bambini a seguito di incidenti che hanno coinvolto adulterazioni dei mangime e dei prodotti per l infanzia con melamina, portando talvolta fino alla morte. I livelli di melamina in alimenti e mangimi sono i seguenti: Prodotti alimentari ad eccezione di quelli per l infanzia e alle formule di proseguimento (*) Prodotti in polvere per lattanti e formule di proseguimento 2.5 mg/kg 1 mg/kg R-Biopharm Rhône Ltd mette a disposizione colonne di purificazione a fase solida per la melamina che consentono di ottenere ottimi recuperi e hanno un limite di rivelabilità inferiore ai limiti legislativi internazionali quando vengono usate in associazione al sistema HPLC. Le colonne sono state validate per la rilevazione di melamina negli alimenti per l infanzia, nei prodotti lattiero-caseari, nei prodotti a base di cioccolato e nei mangimi mediante HPLC. * Il livello massimo non si applica agli alimenti per i quali può essere dimostrato che il livello di melamina superiore a 2,5 mg/kg è la conseguenza dell uso autorizzato del ciromazina come insetticida. Il livello di melamina non deve superare il livello di ciromazina. pagina 5
Fiere e conferenze Rappresentante: R-Biopharm AG 13.04.2013 Giornata ANTIM Filo di Argenta (FE), Italy 17.04. - 19.04.2013 Analytica Vietnam HoChiMinh City, Vietnam 15.05. - 17.05.2013 IAFP Europe Symposium Marseille, France 21.05. - 22.05.2013 CISETA Fiera Milano-Rho, Italy 22.05. - 24.05.2013 35 th Mycotoxin Workshop Gent, Belgium 27.05. - 30.05.2013 Final MycoRed Conference Martina Franca, Italy 03.06. - 07.06.2013 IDF-ISO Analytical Week Rotterdam-Zutphen, Netherlands 12.06-14.06.2013 ICC Gluten Free Symposium Vienna, Austria Sei sicuro? SureFood ANIMAL ID Horse sistema modulare per la preparazione del DNA (sia da materie prime sia da alimenti e mangimi altamente processati), lo screening e la quantificazione cavallo manzo suino pollo tacchino coniglio halibut cane & gatto cavallo & asino R-Biopharm Identificazione di specie animali Il prossimo numero di R-Biopharm news sarà pubblicato nel II trimestre del 2013. R-Biopharm news è edito da R-Biopharm Italia Srl Via Morandi 10 20077 Melegnano MI Tel: 02 9823 3330 e-mail: info@r-biopharm.it www.r-biopharm.com