ANA-REFLEX ED ANCA CONSIDERAZIONI E QUALCHE CONSIGLIO

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1 ANA-REFLEX ED ANCA CONSIDERAZIONI E QUALCHE CONSIGLIO FORLI 28/03/2015 RAVENNA 11/04/2015 FAENZA-LUGO 29 Aprile 2015 Laboratorio Area Vasta Romagna U.O.C. CORELAB Settore ALLERGOLOGIA e AUTOIMMUNITA Dr. Conti Carlo ; [email protected] Dr.ssa Cova Vittoria : [email protected]

2 RICHIESTE DI ANA e ANA-Reflex 1 Semestre 2014

3 RICHIESTE DI ANA e ANA-Reflex 2 Semestre 2014

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5 ANA REFLEX NUCLEO Con titolo = 1:80 NUCLEO Con titolo 1:160 CITOPLASMA Con titolo 1:320 positivo basso titolo STOP indicazione eventuale controllo dopo 3-6 mesi positivo pattern e titolo AMA ENA (SSA e Jo-1) Se positivo Conferma W.B. ds-dna (ELISA) e ENA?????? Se positivo Crithidia

6 Quantizzazione degli ENA Gli ENA QUANTITATIVI sono test diagnostici. Non devono essere utilizzati per seguire l andamento della malattia. Al momento attuale hanno solo valore a livello Prognostico. Numerosi studi in corso.

7 Pattern ANA Particolari NUCLEAR-DOTS MEMBRANA NUCLEARE NUCLEOLARI, OMOGENO + NUCLEOLARE, SPEKLED + NUCLEOLARE (Fibrillarina, Pmscl, polimerasi 3 )

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9 2295 ANA-REFEX POSITIVI ENA POSITIVI 170 DNA POSITIVI

10 ANA-REFEX POSITIVI ENA NEGATIVI 1805 DNA NEGATIVI 1459

11 CONSIDERAZIONI Nel complesso la richiesta di Ana-Reflex è corretta (80%) ed è stato ottenuto il risultato sperato. Gli errori più frequenti: Ana-reflex + Ena, Ana-reflex + Dna, Ana-reflex + Ena + Dna, Ana-reflex + Ana. 2 richieste 1 con Ana-reflex ed 1 con Ana + Ena + Dna. Richedere l Ana-Reflex nei pazienti nuovi.

12 VASCULITI ANCA ASSOCIATE Vasculiti sistemiche Antigene Bersaglio Glomerulonephritis with Polyangiitis C-ANCA PR3 (70-80%) ex Granulomatosi di Wegener P-ANCA MPO (20-30%) Poliangioite microscopica C-ANCA PR3 (20-30%) P-ANCA MPO (70-80%) Eosinophilic Glomerulonephritis C-ANCA PR3 (30-40%) with Polyangiitis ex sindrome di Churg Strauss P-ANCA MPO (60-70%) Poliarterite nodosa classica P-ANCA MPO (90%) Glomerulonefrite necrosante C-ANCA PR3 (20%) pauci-immune idiopatica P-ANCA MPO (80%)

13 EliA PR3S Confronto con l Immunofluorescenza Indiretta IFA EliA PR3 S IFA Sensitivity in % Specificity in % Sensitivity in % Specificity in % EliA PR3S IFA

14 EliA MPO S Churg-Strauss Sera Excluded EliA MPO (n = 242) EliA MPO s (n = 242) Sensitivity 35,87% 56,52% Specificity 99,33% 99,33% EliA-MPOs sono calibrati contro il CDC Rif. umano.

15 3. EliA MPO S EliA MPO (n = 302) EliA MPO s (n = 302) Sensitivity 27,63% 41,45% Specificity 99,33% 99,33% La sensibilità del EliA-MPOS per CSS è stata calcolata separatamente a causa della ben nota più bassa prevalenza ANCA in questa patologia

16 COMPARATIVE EVALUATION OF A NOVEL HIGH SENSITIVE, FULLY AUTOMATED METHOD FOR MPO-ANCA DETECTION (EliA MPOS), IN DIAGNOSIS OF ANCA-ASSOCIATED SYSTEMIC VASCULITIS (AASV) *A. Radice, L. Bianchi, *C. Farina, ^C. Zehnder, RA Sinico *Microbiology Institute & Nephrology and Clinical Immunology Unit, Osp S. Carlo Borromeo, Milano, ITALY; ^Future-Lab, Sementina, CH. PATIENTS & CONTROLS 215 frozen serum samples from AASV (MPA 52, CSS 20), diseased (123: SLE, UCTD, MCTD, SSc, RA, IBD, Cryoglobulinemia, other vasculitis, infectious) & normal controls (20) were retrospectively studied. AASV were selected on the basis of the clinical diagnosis, according to the ACR, EUVAS, CHCC criteria & definitions, irrespective of the disease activity/inactivity/extension and ANCA status.

17 *A. Radice, L. Bianchi, *C. Farina, ^C. Zehnder, RA Sinico *Microbiology Institute & Nephrology and Clinical Immunology Unit, Osp S. Carlo Borromeo, Milano, ITALY; ^Future-Lab, Sementina, CH. RETROSPECTIVE STUDY: PATIENTS Sera from 107 AASV (WG 55, MPA 52), 123 pathological (SLE,CTDs, RA, IBD, Cryoglobulinemia, non-aasv vasculitis, infectious) and 20 healthy controls, were retrospectively tested. AASV were selected on the basis of the clinical diagnosis, according to the available criteria & definitions (ACR, EUVAS, CHCC), irrespective of the diseaseactivity / inactivity / extension, and ANCA status.

18 IL LABORATORIO E LE MICI: Marcatori anticorpali P-ANCA, ASCA, Anticorpi diretti contro antigeni batterici P-ANCA Atipici Fluorescenza lineare del nucleo. Target antigenico non ancora identificato. Si riscontrano nel 60-80% dei pazienti con CU. Sono presenti anche nel 20% dei familiari sani di pazienti con CU. Si riscontrano nel 20-25% di soggetti con MC con quadro clinico ed endoscopico simil-cu.

19 CONCLUSIONI In una sospetta vasculite conviene eseguire PR3 ed MPO, determinazioni più standardizzate, senza interferenze analitiche e con maggiore specificità analitica. In caso di una sospetta Patologia cronica intestinale si deve richiedere solo il P-ANCA IFA (anca perinucleare).

20 ANA-REFLEX ED ANCA CONSIDERAZIONI E QUALCHE CONSIGLIO Grazie per l attenzione Percorsi integrati di cura: dalla prevenzione alla presa in carico FORLI 28/03/2015 Laboratorio Area Vasta Romagna U.O.C. CORELAB Settore ALLERGOLOGIA e AUTOIMMUNITA Dr. Conti Carlo ; [email protected] Dr.ssa Cova Vittoria : [email protected]