Polaratherm series 9000 HPLC Booster Performance
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- Feliciano Mauri
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1 Polaratherm series 9 HPLC Booster Performance
2 Polaratherm Series 9 è uno speciale dispositivo stand alone che, sfruttando l effetto della temperatura, incrementa le prestazioni di un comune HPLC. Polaratherm Series 9 è in grado di operare in isoterma e in programmata di temperatura in un range compreso da temperature al di sotto dello zero fino a 2 C. Polaratherm Series 9 è un sistema adattabile a qualsiasi HPLC esistente sul mercato e, con un investimento economico ridotto, in grado di incrementare le potenzialità e la produttività di un cromatografo liquido in molti campi di applicazioni dall ambientale al farmaceutico ed al biomedico.
3 Vantaggi Sensibile riduzione dei tempi analitici Alta risoluzione ed efficienza separativa Selettività Unica Basso consumo di solvente Green Chromatography Abbattimento dei costi analitici Incremento della Produttività Compatibilità con qualsiasi HPLC
4 Specifiche Tecniche Temperatura da sotto zero a 2 C Gradiente di temperatura fino a 3 C/min Circolazione forzata dell aria Controllo attivo della temperatura della fase mobile e pre-heating Riscaldamento e raffreddamento attivo Sensore di vapori infiammabili Back pressure regulator Tenute a volume zero per alta temperatura Secure-Fit TM Compatibile con microbore e/o large bore stainless steel columns (fino a 4.6 mm ID e 25 cm di lunghezza) Compatibile con qualsiasi HPLC Controllo da keypad locale o software integrato (Waters, Agilent e EZChrom)
5 Sensibile riduzione dei tempi analitici Polaratherm Series 9 utilizza un efficientissimo sistema di circolazione forzata dell aria ed un preciso controllo della temperatura per un rapido riscaldamento fino a 2 C. All aumentare della temperatura, la viscosità del solvente decresce con la conseguente diminuzione della pressione necessaria per mantenere il flusso desiderato: questo permette di ridurre i tempi analitici utilizzando flussi elevati e senza la necessità di speciali pompe ad alta pressione C,.35 ml/min Column: STM Zorbax StableBond C8, 5 mm L x 2. mm ID x.8 µm particles C,.85 ml/min 2.4 min min min Sample: Standard solution of phenylurea pesticides ( ppm each). Fenuron; 2. Metoxuron; 3. Chlortoluron; 4.Diuron; 5. Isoproturon; 6. Linuron; 7. Chloroxuron Injection: µl Detection: UV, 245 nm Mobile phase: ACN/Water 3/7 Flow-rate:.35 or.85 ml/min
6 Alta risoluzione ed efficienza separativa Ad elevate temperature, il trasferimento dell analita dalla fase mobile a quella stazionaria è più efficace: il risultato è una migliore efficienza del sistema anche con flussi elevati. La riduzione della pressione dovuta alla diminuzione della viscosità del solvente consente di aumentare il numero di piatti teorici utilizzando colonne più lunghe e con particelle più piccole. All aumentare della temperatura, le interazioni dell analita con il supporto di silice si diminuiscono notevolmente riducendo fastidiosi effetti di peak tailing : questo consente di migliorare la simmetria e la forma dei picchi cromatografici aumentandone la risoluzione. Polaratherm Series 9 permette di raggiungere un alta risoluzione, un alta efficienza separativa ed una riduzione dei tempi analitici su HPLC standard evitando l utilizzo di dispositivi speciali e molto costosi min columns min Pyridine Caffeine Phenol Aniline Uracil column SB-C8 5 mm L x 3 mm ID x 3.5 µm Mobile Phase ACN/Water 4/6,.4 ml/min, T= 8 C P=49 bar P=68 bar P=356 bar Toluene Benzene Plates Plate numbers vs columns Caffeine Pyridine Phenol Aniline Benzene Toluene 5 8 columns min Number of columns
7 Basso consumo di solventi organici All aumentare della temperatura, l acqua mostra una significante modifica della propria polarità (da polare a non-polare) a causa dell incremento della distanza intermolecolare e della debolezza dei legami a idrogeno: questo permette una riduzione della quantità di solvente organico utilizzato e la possibilità di utilizzare solo acqua come fase mobile (Green Chromatography). Flow Rate: 6 ml/min Mobile Phase: water Temperature: 2 o C Uracil 2. Androstadienedione 3. Androstenedione 4. Epitestosterone Flow Rate: 3 ml/min Mobile Phase: water/acetonitrile 75/25 Temperature: 5 o C ZirChrom Time (min) Analysis of a steroid mixture on a ZirChrom PBD x 4.6 mm column, UV 254 nm
8 HPLC a temperatura programmata Polaratherm Series 9 utilizza un efficientissimo sistema di circolazione forzata dell aria ed un preciso controllo della temperatura per un rapido riscaldamento fino a 2 C. All aumentare della temperatura, i solventi acquosi manifestano una minore polarità e di conseguenza un sistema a temperatura programmata ha lo stesso effetto di un gradiente di solvente. Metodi molto complessi possono essere sostituiti con un metodo isocratico ed un semplice programma di temperatura: la fase mobile può essere riutilizzata e i tempi necessari alla preparazione ed allo sviluppo del metodo analitico vengono ridotti drasticamente in quanto il condizionamento della colonna è più veloce ed è più facile modificare una programmata di temperatura che la composizione di un solvente. Evitare l uso di gradienti di solvente è inoltre utile per analisi dove i detector utilizzati sono sensibili alle differenze della composizione della fase mobile. In particolare in sistemi con rivelatori di massa e interfaccia ESI, la variazione della efficienza di ionizzazione, soggetta ai cambiamenti della composizione della fase mobile, è risolta. a) b) c) Peak area (MS) 3.E+7 2.E+7.E+7.E+ Temperature program Mobile phase program MS sensitivity Peak number Hypercarb column ( mm x 3 mm, 5 µm dp) Flow rate.5 ml/min Mobile phase:.% acetic acid water/ethanol (GREEN) Temperature: 8 C Detection: UV 273 nm Sulfonamide mixture Conditions a) isocratic 5% B, isothermic 5 C, b) solvent program 5 to % B in 5 min, isothermic 5 C, c) isocratic 5% B, temperature program: initial 4 C hold -2 min, 4-8 C at 2 C/min. 2 3 Time (min)
9 Selettività Unica La temperatura può essere usata per regolare la selettività dei composti. Il cambiamento di selettività, che può essere ottenuto variando la temperatura, consente di ottenere una migliore separazione dei picchi alla linea di base ed anche un inversione dell ordine di eluizione. C C 4 C 6 C Stable Bond C8 column (5 mm x 3 mm, 3.5 µm particles) -Flow rate.4 ml/min -Mobile phase:.% formic acid in water/.% formic acid in ACN, gradient -Temperature: variable -Detection: UV 24 nm -Peak identity: pharmaceutical mixture containing the drug (peak 5) and some intermediates (peaks to 4) 8 C Time (min)
10 Preheating/cooling della fase mobile Un inefficiente riscaldamento della fase mobile prima che entri nella colonna, può provocare una differenza termica tra le pareti ed il centro della colonna stessa, producendo una distorsione del fronte del campione ed il successivo allargamento dei picchi. Ciò riduce la risoluzione e l efficienza separativa della colonna già a 5 C. Polaratherm Series 9 include un nuovo, compatto ed economico sistema di preriscaldamento attivo. Il sistema di preriscaldamento è indipendente dalla camera colonne e quindi può essere selezionato dall utente adattandolo alle proprie esigenze analitiche. 4 3 Barbital Separation of Barbiturates mv 2 Preheater Off Butabarbital Carbromal Secobarbital Preheater On Minutes Raffreddamento passivo ed attivo dell effluente dopo la colonna L effluente cromatografico, dopo la separazione dei composti ad alta temperatura, deve essere raffreddato per proteggere l hardware del rivelatore e stabilizzarne il segnale: un inadeguata termostatazione dell effluente porta ad un instabilità della linea di base. Polaratherm Series 9 combina uno scambiatore di calore passivo con un preciso sistema di raffreddamento a cella di Peltier per raffreddare l effluente dopo l uscita dalla colonna.
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