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LOTTO 1 (indivisibile) SISTEMA MACCHINA REATTIVI PER LA DIAGNOSI MOLECOLARE DI VIRUS, BATTERI E FUNGHI IN REAL TIME PCR 1. Obiettivi organizzativi del laboratorio: Gli obiettivi di organizzazione che il laboratorio si propone in conseguenza della acquisizione del sistema analitico richiesto sono i seguenti: Consolidamento dei test relativi all area della diagnostica molecolare per le infezioni virali nei pazienti trapiantati e nei pazienti con patologie infettive diverse privilegiando soluzioni che prevedano l esecuzione della maggior parte degli esami richiesti su un unica piattaforma Riduzione del numero d operatori necessari per l effettuazione delle analisi oggetto del presente capitolato in conseguenza della riduzione del numero di sistemi analitici da gestire privilegiando ipotesi che favoriscano l ottimale e razionale impegno del personale Riduzione del TAT tecnico/analitico Compatibilità dei sistemi prospettati con future esigenze di ampliamento/consolidamento dei test Forte contrazione delle attività manuali dell operatore con conseguente riduzione dei rischi biologici 2. Oggetto della fornitura Nel dettaglio, la fornitura finalizzata a realizzare una piattaforma analitica per la diagnostica molecolare delle infezioni virali nei pazienti trapiantati e pazienti con patologie infettive diverse dovrà comprendere: a) l uso delle seguenti strumentazioni di ultima generazione, dedicate all esecuzione dei parametri diagnostici in seguito indicati: n.1 strumento automatico per: 1) estrazione degli acidi nucleici (DNA e RNA) da campioni biologici diversi quali: sangue intero, liquor, urine, plasma ed altre matrici; 2) preparazione dei relativi estratti; n.1 strumento automatico di back up, anche con caratteristiche diverse rispetto allo strumento principale in grado di espletare almeno l estrazione degli acidi nucleici. n.1 strumento automatico di amplificazione e rilevazione degli amplificati in PCR Real Time completo di hardware e software di interpretazione; b) i reagenti o kit, i materiali di consumo e tutto quanto necessario per la corretta esecuzione delle procedure di estrazione e il corretto funzionamento dell apparecchiatura dedicata; c) i reagenti o kit, standard, controlli ed i materiali di consumo e tutto quanto necessario per la corretta amplificazione degli acidi nucleici con metodica PCR Real Time. I kit offerti devono possedere il marchio CE IVD ai sensi della Direttiva Europea 98/79/CE per uso sulla strumentazione Real Time offerta in associazione ed essere regolarmente licenziati per uso di tecnologia Real Time PCR e per diagnostica in vitro, pena esclusione. Tutta la strumentazione fornita deve avere marcatura CE-IVD, pena esclusione 3. Carico di lavoro del laboratorio Le prestazioni richieste normalmente vengono eseguite in routine salvo possibili eccezioni; a titolo indicativo si ritiene che saranno effettuate 2/3 sedute settimanali per CMV, 2 sedute settimanali per EBV. Per gli altri parametri le sedute saranno effettuate secondo necessità. Il totale annuo dei test richiesti è pari a 8.960 test compresi standard e controlli cui vanno aggiunti i reagenti e i materiali necessari per effettuare 3.500 estrazioni di acidi nucleici (RNA/DNA). Per ogni seduta analitica è previsto l utilizzo di almeno un controllo positivo per test qualitativi e almeno 4 punti standard per test quantitativi. Lotto 1 : SISTEMA MACCHINA-REATTIVI PER LA DIAGNOSI MOLECOLARE DI VIRUS, BATTERI, FUNGHI IN PCR REAL TIME 1

4. Caratteristiche del progetto: Il progetto dovrà contenere, oltre alla descrizione della strumentazione e delle metodologie analitiche offerte, anche una accurata e dettagliata esposizione della struttura organizzativa proposta, del personale necessario per l espletamento delle procedure analitiche e del TAT consentito dal sistema. Alle Ditte che partecipano alla gara è richiesta la predisposizione e presentazione di un progetto che consenta il massimo grado di raggiungimento degli obiettivi analitici e gestionali riportati al precedente punto 1. Le offerte tecniche dovranno essere presentate in forma di relazione progettuale con descrizione dettagliata delle modalità con le quali il sistema proposto è in grado di svolgere le funzioni richieste, e conseguentemente, degli obiettivi raggiungibili e dei benefici a livello di organizzazione che il progetto presentato comporterà. Nel progetto dovrà essere indicata la modalità di integrazione del sistema analitico proposto e del relativo software gestionale con il sistema informatico gestionale del laboratorio. Le Ditte interessate dovranno progettare e provvedere alla predisposizione del locale indicato nella relazione con relativi collegamenti elettrici nonché adeguati gruppi di continuità. Nel progetto dovrà essere indicata la metratura minima e quella ottimale per la collocazione e funzionalità del sistema (compresa l agibilità per manutenzioni ordinarie e straordinarie) e le eventuali connesse modifiche impiantistiche necessarie, saranno valutate in sede di sopralluogo con la U.O.C. Ingegneria aziendale. A tale proposito, dovrà essere preventivamente eseguito un sopralluogo presso i locali del laboratorio, per l acquisizione di tutti i dati e gli elementi utili alla compilazione del progetto e dell offerta e per la valutazione dei costi inerenti la messa in esercizio dell'attrezzatura allegando, altresì copia del verbale redatto in occasione del sopralluogo effettuato, come indicato nel Capitolato Speciale di gara. Le Ditte dovranno presentare, insieme al progetto, una planimetria del locale con indicazione degli spazi occupati dalla strumentazione proposta e di quant'altro concordato con la UO.C. Ingegneria aziendale qualora fossero necessari interventi di minima per l'adeguamento del locale. Il progetto presentato dovrà obbligatoriamente tenere conto inoltre sia degli spazi necessari per allocare tutti gli strumenti oggetto del presente Lotto che degli altri strumenti e attrezzature già presenti nel/i locale/i. Inoltre deve essere fornita esplicita dichiarazione: i locali destinati ad accogliere il sistema analitico (così come individuati dalla planimetria prodotta nel progetto) sono idonei ed adeguati alla connessione dell'attrezzatura e che nessun altro vincolo osta alla sistemazione della strumentazione offerta nei locali suddetti così come prevista nel progetto presentato. Il progetto deve includere nel pacchetto strumentale offerto tutto quanto necessario al funzionamento del sistema, compreso un gruppo di stabilizzazione e continuità per tutti gli analizzatori e per tutti i PC previsti e tutto il materiale di consumo, toner o cartucce, carta per le stampanti, consumabili e ricambi previsti dalla manutenzione ordinaria, escluse solo le provette per la raccolta dei campioni. Nel progetto dovranno infine essere dichiarate il numero e le referenze di installazioni di sistemi similari esistenti ed in routine al momento della presentazione delle offerte, presso altri centri italiani comparabili a questo per numerosità di tipologie e quantità richieste. 5. Sistema informatico Il sistema informatico gestionale del laboratorio è: DNLab della Ditta NoemaLife. 6. Locali La planimetria ed il modello di verbale che attesta l'avvenuto sopralluogo dei locali sono allegati ai documenti di gara. 7. Specifiche del sistema analitico Ogni Ditta partecipante dovrà presentare una soluzione tecnica globale, basata su associazione di più strumenti, per effettuare gli esami richiesti. Lotto 1 : SISTEMA MACCHINA-REATTIVI PER LA DIAGNOSI MOLECOLARE DI VIRUS, BATTERI, FUNGHI IN PCR REAL TIME 2

La soluzione dovrà comprendere: a) n 1 strumento automatico per: ALLEGATO AA 1) estrazione degli acidi nucleici (DNA e RNA) da campioni biologici diversi quali: sangue intero, liquor, urine, plasma ed altre matrici; 2) preparazione dei relativi estratti per l allestimento della seduta di amplificazione; b) n 1 strumento automatico di back up anche con caratteristiche diverse rispetto allo strumento principale in grado di espletare almeno l estrazione degli acidi nucleici. c) n 1 strumento automatico di amplificazione e rilevazione degli amplificati in PCR Real Time completo di hardware e software di interpretazione. Gli strumenti con rif. b) e c) devono permettere un uso anche come piattaforma aperta (quindi, anche per determinazioni diverse da quelle oggetto del presente Lotto). La Ditta partecipante dovrà inoltre presentare una relazione tecnica di sintesi, nella quale dovranno essere evidenti le specifiche tecniche, le caratteristiche e gli elementi propri del sistema rispetto alle caratteristiche indicate quali requisiti tecnici indispensabili e a quelle che saranno oggetto di valutazione, oltre a fornire tutti gli elementi e la documentazione ritenuta utile per effettuare una completa e corretta valutazione dell offerta tecnica. Strumentazione analitica: La strumentazione analitica dovrà avere le caratteristiche minime indispensabili come riportate nel presente Allegato A. Caratteristiche tecniche e qualitative dei reagenti e delle metodologie analitiche: I reagenti dovranno avere le caratteristiche minime indispensabili riportate nel presente Allegato A. Adattamento del sistema al laboratorio e aderenza agli obiettivi organizzativi. Oltre a rispondere agli obiettivi organizzativi indispensabili di cui al punto 1 le Ditte dovranno: - fornire dettagliate indicazioni delle installazioni funzionanti sul territorio nazionale; - fornire idonei supporti per la collocazione del sistema analitico in caso di strumento/i da banco; - dotare la strumentazione di P.C., e quant altro necessario per l interfacciamento con il LIS del Laboratorio. Assistenza, supporto specialistico e formazione del personale: - intervento tecnico garantito entro 24h, come richiesto nel Capitolato Speciale di gara. - formazione e addestramento personale, come richiesto nel Capitolato Speciale di gara. Lotto 1 : SISTEMA MACCHINA-REATTIVI PER LA DIAGNOSI MOLECOLARE DI VIRUS, BATTERI, FUNGHI IN PCR REAL TIME 3

Esami eseguibili in PCR Real Time - numero Test annui Rif ESAMI ESEGUIBILI n. test/anno 1 CMV Test Quantitativo 3.000 2 EBV Test Quantitativo 2.500 3 HSV1 Test Quantitativo 300 4 HSV2 Test Quantitativo 300 5 HHV6 Test Quantitativo 200 6 HHV7 Test Quantitativo 100 7 HHV8 Test Quantitativo 400 8 VZV Test Quantitativo 200 9 BKV Test Quantitativo 100 10 JCV Test Quantitativo 100 11 Parvovirus B19 Test Quantitativo 300 12 Adenovirus Test Quantitativo 100 13 MTB Test Qualitativo 360 14 Enterovirus Test Qualitativo 90 15 RSV Test Qualitativo 90 16 Virus Influenza A/B Test Qualitativo 90 17 Aspergillus Test Quantitativo 100 18 Chlamydophila pneumoniae Test Qualitativo 90 19 Legionella pneumophila Test Qualitativo 90 20 Mycoplasma pneumoniae Test Qualitativo 90 21 Toxoplasma Gondii Test Qualitativo 90 22 Parotite qualitativo 90 23 Rubeo qualitativo 90 24 Morbillo qualitativo 90 TOTALE TEST ANNO 8.960 N.B.: Le Ditte devono offrire almeno il 90% delle tipologie dei test sopraindicati pena esclusione Esami da eseguire con gli strumenti per l'estrazione degli acidi nucleici Reagenti e materiali per estrazione di acidi nucleici (RNA/DNA) 3.500 STANDARD, CONTROLLI, MATERIALE DI CONSUMO: La Ditta dovrà offrire tutti i reagenti, le soluzioni, materiale consumabile, standard e controlli necessari per l esecuzione dei test. I numeri dei test su riportati sono omnicomprensivi di standard e controlli. Lotto 1 : SISTEMA MACCHINA-REATTIVI PER LA DIAGNOSI MOLECOLARE DI VIRUS, BATTERI, FUNGHI IN PCR REAL TIME 4

NUMERO STRUMENTI RICHIESTI: N 1 (uno) strumento automatico per a) estrazione degli acidi nucleici (DNA e RNA) da campioni biologici diversi quali: sangue intero, liquor, urine, plasma ed altre matrici; b) preparazione dei relativi estratti per l allestimento dell amplificazione. + N 1 (uno) strumento di back up anche con caratteristiche diverse in grado di espletare almeno l estrazione degli acidi nucleici. + N 1 (uno) strumento automatico di amplificazione e rilevazione degli amplificati in PCR Real Time. REQUISITI MINIMI DI INGRESSO: Sistema di estrazione e preparazione dei campioni - (da possedere tutti, pena l esclusione) Piattaforma unica che consenta in maniera automatica l estrazione di acidi nucleici (DNA e RNA) da campioni biologici (cellulari e non) e l allestimento della seduta di amplificazione per l analisi dei relativi estratti Il sistema di estrazione e di preparazione deve avere la marchiatura CE-IVD ed essere compatibile con il sistema proposto di successiva amplificazione e rivelazione. Caricamento del campione direttamente da tubo primario tramite riconoscimento del bar code con lettore interno allo strumento. Riconoscimento automatico dei reagenti mediante bar code. Chimica basata su utilizzo di biglie magnetiche. Decontaminazione dell ambiente di lavoro a fine seduta tramite lampada UV integrata. Flessibilità formato supporti porta campioni su ambo i moduli estrattore e preparatore. Il sistema deve essere in grado di estrarre almeno 48 campioni in un unica seduta di estrazione. Possibilità di controllare il processo di estrazione ed amplificazione dei campioni mediante l utilizzo di Controllo Interno al campione specifici per DNA e RNA Il sistema deve essere in grado di rivelare la presenza di coaguli durante la fase di aspirazione e dispensazione del campione. Interfacciamento bidirezionale in rete con sistema gestionale DNLab. Fornitura di tutto l hardware ed il software necessario definito in accordo con la Ditta Noemalife. Strumentazione dotata di gruppo di continuità. Strumento di ultima generazione, dotato di supporto adeguato se da banco, stabilizzatore di corrente, complementi hardware, software aggiornato e ogni altro accessorio necessario al funzionamento. Conformità del sistema offerto e dei singoli reagenti alla Direttiva CEE 98/79 relativa ai sistemi diagnostici in vitro (indicare ove possibile il n di registrazione o altrimenti produrre dichiarazione di conformità) Lotto 1 : SISTEMA MACCHINA-REATTIVI PER LA DIAGNOSI MOLECOLARE DI VIRUS, BATTERI, FUNGHI IN PCR REAL TIME 5

REQUISITI MINIMI DI INGRESSO: Strumento di estrazione di back up - (da possedere tutti, pena l esclusione) Piattaforma unica che consenta in maniera automatica l estrazione di acidi nucleici (DNA e RNA) da differenti tipi di campioni biologici (cellulari e non) Il sistema deve essere compatibile con il sistema proposto di successiva amplificazione e rivelazione Il sistema deve avere una chimica basata su utilizzo di biglie magnetiche La strumentazione fornita deve avere marcatura CE- IVD Il sistema deve essere in grado di estrarre almeno 12 campioni in un unica seduta di estrazione. REQUISITI MINIMI DI INGRESSO : Strumento di amplificazione e rivelazione - (da possedere tutti, pena l esclusione) Termociclatore per l analisi Real Time in grado di effettuare l analisi quantitativa/qualitativa dei prodotti di reazione tramite PCR. Capacità di effettuare 96 determinazioni a seduta. Strumento basato su tecnologia peltier con rilevatore di fluorescenza integrato in grado di rilevare almeno 5 fluorocromi differenti con acquisizione contemporanea del segnale sull intero blocco porta campioni. Strumento dotato di software in grado di elaborare la scomposizione della fluorescenza all interno della mix di reazione e di monitorare la reazione in tempo reale. Strumento provvisto di marcatura CE per la direttiva 89/336/CEE (compatibilità elettromagnetica) e per la 98/79/CEE (diagnostici in vitro). Costruito secondo norme CENELEC e CEN generali (CEI66-5) e di prodotto ad esso applicabile. Strumentazione aperta per la determinazione di altri parametri. Presenza di un sistema interno di correzione automatica dell emissione di fluorescenza dei campioni che permetta la normalizzazione di segnali per correggerli da fluttuazioni di fluorescenza non correlati alla PCR (come temperatura esterna o efficienza dei sistemi ottici). Strumento adeguato a supportare il carico di lavoro indicato e la complessità organizzativa del lotto (documentare il progetto proposto); Strumento di ultima generazione, completo di gruppo di continuità, dotato di supporto adeguato se da banco, stabilizzatore di corrente, complementi hardware, software aggiornato e ogni altro accessorio necessario al funzionamento; REQUISITI MINIMI DI INGRESSO : REAGENTI - (da possedere tutti, pena l esclusione) I kit offerti devono possedere il marchio CE- IVD ai sensi della Direttiva Europea 98/79/CE per uso sulla strumentazione Real Time offerta in associazione ed essere regolarmente licenziati per uso di tecnologia Real Time PCR e per diagnostica in vitro, pena esclusione. I kit di amplificazione devono essere completi e dovranno contenere piastre, foglietti adesivi, enzima. Gli standard offerti (ove richiesto) dovranno comprendere punti a concentrazione nota non inferiori a 4. Possibilità di utilizzare per tutti i prodotti offerti un controllo interno per verificare l idoneità del campione analizzato. Impiego di un fluoroforo passivo di riferimento (es. ROX o equivalenti) in grado di normalizzare la fluorescenza di fondo non specifica e non correlata alla PCR. Uso di sistemi di anti-contaminazione (es. UNG o equivalenti). Lotto 1 : SISTEMA MACCHINA-REATTIVI PER LA DIAGNOSI MOLECOLARE DI VIRUS, BATTERI, FUNGHI IN PCR REAL TIME 6

ELEMENTI VALUTABILI per caratteristiche tecnico/scientifiche di strumentazione e reattivi Punti max 42 Preparazione simultanea di almeno 6 metodiche di PCR nella medesima piastra di Real Time. Reagenti di estrazione pronti all uso. Massima automazione del sistema estrattore/preparatore proposto e adattabilità alle esigenze del laboratorio. A tal fine saranno valutate le caratteristiche dell intero sistema proposto in termini di necessità di intervento dell operatore, tempistiche relative al processamento dei campioni, semplicità di organizzazione rispetto alle richieste analitiche in arrivo presso il laboratorio ed affidabilità/qualità del metodo (relazionare) Possibilità di acquisizione del segnale ottico effettuato tramite telecamera CCD raffreddata (relazionare). Software di elaborazione dei dati grezzi capace di fornire una refertazione rapida sia di tipo qualitativo che quantitativo e di fornire informazioni sull idoneità del risultato. 0-4 0-3 0 6 0 3 0 3 Sorgente luminosa costituita da lampada alogena a tungsteno. 0 2 Capacità di eseguire sedute di amplificazione con modalità fast su blocco Peltier in grado di alloggiare provette o micropiastre con volume massimo di 0.1 ml. 0 2 Utilizzo di sonde MGB per una migliore stabilità e specificità del legame con il DNA 0 5 Utilizzo di sonde ad ibridazione che permettano l analisi delle curve di dissociazione al termine della seduta di amplificazione. Standardizzazione dei risultati rispetto alle unità internazionali WHO per gli analiti di cui sono disponibili. 0 8 0 6 ADATTABILITA AL LABORATORIO E ALTRI ELEMENTI VALUTABILI Punti max 18 Uniformità dei profili termici di amplificazione per tutti i parametri quantitativi richiesti (relazionare). Tempi di intervento tecnico su chiamata e possibilità di assistenza tecnico-scientifica anche per via telematica per lo strumento principale di estrazione. 0 11 0 1 Completezza dell offerta di analiti richiesti 0-6 Lotto 1 : SISTEMA MACCHINA-REATTIVI PER LA DIAGNOSI MOLECOLARE DI VIRUS, BATTERI, FUNGHI IN PCR REAL TIME 7