DETERMINAZIONE GRUPPO SANGUIGNO E FATTORE Rh

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Benedetta Magni
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DETERMINAZIONE GRUPPO SANGUIGNO E FATTORE Rh Test diretto (Coomb) Per ricercare in laboratorio gli antigeni eritrocitari ABO su campioni di sangue si utilizzano anticorpi specifici agglutinanti.

1 DETERMINAZIONE GRUPPO SANGUIGNO E FATTORE Rh Test diretto (Coomb) Per ricercare in laboratorio gli antigeni eritrocitari ABO su campioni di sangue si utilizzano anticorpi specifici agglutinanti. Questi, nel passato, venivano ricavati dal siero di donatori umani portatori di alloanticorpi naturali o da animali sensibilizzati. Oggi sono prodotti in vitro, utilizzando particolari tecniche di ingegneria genetica. Queste tecniche consentono la produzione di anticorpi altamente specifici di un unica classe anticorpale e pertanto sono detti anticorpi monoclonali. 1

sul secondo di anti-b, sul terzo di anti-a,b ricavato da un donatore di gruppo O.

2 La determinazione classica del sistema gruppale ABO si effettua in laboratorio su vetrini. Per ogni determinazione si utilizzano tre vetrini su ciascuno dei quali si pone una goccia del sangue da testare ed una di fisiologica, sul primo vetrino poi si mette una goccia di siero test anti-a, sul secondo di anti-b, sul terzo di anti-a,b ricavato da un donatore di gruppo O. Su ciascun vetrino si mescolano le tre componenti (sangue, fisiologica ed antisiero) si bascula per qualche minuto a temperatura ambiente e si legge per una agglutinazione che, se presente, è chiara e massiva. L uso dell antisiero anti-a,b da donatore O è motivato dalla maggiore avidità che questo siero presenta per l antigene A e per le sue varianti genetiche (A1, A2, ecc.). L agglutinazione del campione trattato con siero anti-a,b alla quale fa riscontro una agglutinazione ritardata e meno decisa del campione trattato col siero anti-a è caratteristica per le mutazioni dell antigene A. 2

TEST INDIRETTO (Coomb) La determinazione diretta del sistema

complesso di oltre 30 antigeni differenti sulla superficie dei

3 TEST INDIRETTO (Coomb) La determinazione diretta del sistema ABO ha la sua controprova nella ricerca nel siero degli alloanticorpi relativi. DETERMINARE IN LABORATORIO FATTORE Rh Il fattore Rh è un complesso di oltre 30 antigeni differenti sulla superficie dei globuli rossi umani. Il fattore Rh che viene utilizzato di routine nella tipizzazione del sangue è l'antigene D. 3

La presenza del attore Rh è determinata da una reazione di agglutinazione tra anti-d antisiero e globuli rossi. Le persone che possiedono l'antigene Rh sono chiamati Rh-positivo.

presentano. La determinazione del fenotipo Rh ha grande importanza oltre che per le pratiche trasfusionali, per individuare le donne Rh negative coniugate con un D positivo.

Nel corso del parto è frequente che le emazie del feto passino nel circolo della madre.

4 La presenza del attore Rh è determinata da una reazione di agglutinazione tra anti-d antisiero e globuli rossi. Le persone che possiedono l'antigene Rh sono chiamati Rh-positivo. Nella pratica di laboratorio le emazie del paziente vengono testate con siero anti-d su vetrino Vengono definiti Rh positivi i soggetti che presentano l antigene D e negativi quelli che non lo presentano. La determinazione del fenotipo Rh ha grande importanza oltre che per le pratiche trasfusionali, per individuare le donne Rh negative coniugate con un D positivo. Queste donne, qualora il feto fosse D positivo, vanno accuratamente monitorate perché, nel corso della gravidanza, possono sensibilizzarsi verso il D e danneggiare il feto più o meno gravemente. Nel corso del parto è frequente che le emazie del feto passino nel circolo della madre. Ciò potrebbe sensibilizzare la donna e costituire un grave pericolo per future gravidanze con prodotto del concepimento D. Per ovviare a questo pericolo da oltre un decennio alle donne Rh negative che partoriscono figli D positivo entro 72 ore dal parto si somministrano per via intramuscolare delle immunoglobuline anti-d che hanno lo scopo di distruggere eventuali emazie del figlio presenti nel sangue della madre prima che questa venga sensibilizzata. 4

Materiali: 1. 3 vetrini per microscopia 2. Pennarello indelebile 3. Disinfettante 4. Dischetti di Cotone 5. Disinfettante 6. Lancette Sterili 7. Antisieri: anti-a, anti-b, anti-d 8.

5 Materiali: 1. 3 vetrini per microscopia 2. Pennarello indelebile 3. Disinfettante 4. Dischetti di Cotone 5. Disinfettante 6. Lancette Sterili 7. Antisieri: anti-a, anti-b, anti-d 8. 5 stuzzicadenti PROCEDURA: 1. Con un pennarello, disegnare due cerchi su un vetrino pulito, etichettare una A e l'altra B. 2. Disegnare un cerchio su un secondo vetrino ed etichettarlo D. 3. Posizionare i vetrini su un foglio di carta. 4. Disinfettare il dito (utilizzare qualsiasi dito), tranne il pollice. 5. Scartare una lancetta sterile e perforare il dito disinfettato con la lancetta sterile. 6. Inserire la lancetta usata nel cestino apposito. 7. Lasciare cadere una goccia di sangue in ogni cerchio. 8. Fermare l afflusso di sangue dal dito con un batuffolo di cotone sterile 9. Smaltire il cotone utilizzato nel cestino opportuno. 10. Per il cerchio A, aggiungere 1 goccia di antisiero anti-a. 11. Aggiungere 1 goccia di antisiero anti-b al cerchio B 12. Aggiungere 1 goccia di antisiero anti-d al cerchio D. 13. Mescolare ogni sospensione con uno stuzzicadenti diverso. 14. Porre i vetrini in una scatola adeguata. 5

6 15. Il calore migliorerà la reazione e la luce renderà la visione più facile. 16. Osservare l agglutinazione e registrare i risultati e determinare il tipo di sangue (ABO; Rh) 17. Eliminare gli stuzzicadenti utilizzati nel cestino opportuno. 18. Lavare qualsiasi traccia di sangue dalla vostra area di lavoro con un disinfettante e gettate il tutto nel cestino opportuno. 19. Lavare le mani. 6

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