Direttore Dr.ssa Tiziana Riscaldati. SIMT-POS 027 Analisi Immnunoematologiche

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2 2 1 SCOPO Scopo della presente procedura è quello di illustrare le analisi immunoematologiche che vengono effettuate presso il SIMT andando a descrivere le modalità attraverso le quali vengono gestite. 2 CAMPO D APPLICAZIONE La presente Procedura si riferisce al Laboratorio di Analisi Immunoematologiche del SIMT Bel Colle di Viterbo. 3 DOCUMENTI DI RIFERIMENTO o DL 03 marzo 2005 Protocolli per l accertamento dell idoneità del donatore di sangue ed emocomponenti GU N.85, o DL 19 agosto 2005, n. 191: Attuazione della direttiva 2002/98/CE che stabilisce norme di qualità e di sicurezza per la raccolta, il controllo, la lavorazione, la conservazione e la distribuzione del sangue umano e dei suoi componenti o Legge 21 ottobre 2005, n.219: Nuova disciplina delle attività trasfusionali e della produzione nazionale degli emoderivati GU n. 251, o Raccomandazione n.r(95) 15 del Comitato dei Ministri del Consiglio d Europa: Guida alla preparazione, uso e garanzia di qualità degli emocomponenti 15^ Edizione, 2009 o Deliberazione Giunta Regione Lazio n.343 del 20 giugno 2006 Piano Regionale Sangue e Plasma per il triennio o Technical Manual. AABB. 16^ Edizione, 2009 o Standard di Medicina Trasfusionale SIMTI, II Edizione 2010 o Linee Guida TRALI Centro Nazionale Sangue, 1 Aprile 2011 o Manuale Operativo NEO IMMUCOR o Metodiche prodotti NEO IMMUCOR o Procedure di Verifica e Manutenzione NEO IMMUCOR o Manuale di Assistenza Don t panic! NEO IMMUCOR o Foglietti Illustrativi e Master List dei reattivi e kit emodiagnostici o Marchio CE: Direttiva 98/79/CE o Standard SIMTI 2 edizione 2

3 3 4 DESCRIZIONE ATTIVITÀ 4.1 Tipizzazione Gruppo Sanguigno Donatori Per tutti i donatori tipizzati e non, vengono eseguiti i seguenti test con metodica automatizzata in micro piastra su apparecchiatura NEO Immucor (SIMT-IO 037): ABO controllo gruppo diretto ed indiretto Definizione A1 e H (A2) per i gruppi A e AB Determinazione Rh-D D-Weak Fenotipo Rh e Kell e Cellano (Kell positivi) TAI La determinazione del gruppo completo viene effettuata mediante utilizzo di reagenti anti-a, anti-b, anti-ab, con impiego di eritrociti test A1, A2, B e O per la prova indiretta. La determinazione del tipo Rh viene effettuata utilizzando 2 diversi reagenti anti D monoclonali IgM+IgG e Rapid IgM. In caso di RhD negativo si esegue la ricerca del Dweak (D u ) mediante metodica Capture. Nel caso in cui la ricerca del Dweak (D u ) risulti positiva deve essere verificata la negatività del test diretto all antiglobulina (vedi algoritmo decisionale -SIMT-IO 025), e successivamente effettuato il test D Partial con 6 antisieri per la conferma del DVI. La determinazione del fenotipo Rh e Kell viene effettuata mediante sieri anti C, e, E, e, Kell, mentre il Cellano viene eseguito sui Kell positivi con metodica Capture. La ricerca degli anticorpi irregolari (TAI), viene eseguita in micro piastra con metodica Capture (Pooled), mentre l approfondimento e l identificazione dei test positivi va eseguita su schedina Diamed. Per i donatori che non risultano tipizzati vengono ripetuti i seguenti test con metodica manuale su micro colonna in schedina Diamed: ABO Rh-D Fenotipo Rh e Kell Il controllo gruppo sacca ABD viene eseguito utilizzando la schedina Diamed ma con metodica automatizzata su apparecchiatura IH Criteri di attribuzione dell RhD a. positività con i 2 reagenti anti-d RhD positivo; b. negatività con i 2 reagenti anti-d e negatività della ricerca Dweak RhD negativo c. negatività con i 2 reagenti anti-d e positività della ricerca Dweak RhD positivo d. positività con un solo anti-d e negatività/positività della ricerca Dweak: attribuzione cautelativa del tipo Rh-D positivo. e. accertamento del D parziale RhD positivo 3

4 4 4.2 Tipizzazione Gruppo Sanguigno Pazienti Per i pazienti tipizzati viene eseguito il test ABO controllo gruppo con determinazione Rh-D con metodica su schedina secondo quanto riportato nelle SIMT-IO 050 e SIMT-IO 023: Sui pazienti che non risultano tipizzati vengono eseguiti i seguenti test: ABO Rh-D (gruppo completo test diretto +indiretto) Fenotipo Rh e Kell (per pazienti politrasfusi in DHT e DHE, reparti ostreticia e neonatologia, Pz in età fertile) ABO controllo gruppo con determinazione Rh-D AB0 Rh D (test diretto) più D Weak per i neonati 4.3 Altre Analisi Immunoematologiche Test di Coombs Diretto TCD (eseguito con metodica in schedina). Approfondimento del TCD positivo eseguito con metodica in schedina contenente anticorpi monospecifici (IgG, IgM, IgA, C3c, C3d). Test di Coombs Indiretto TCI eseguito con metodica in schedina utilizzando come screening un pannello a 3 cellule. Approfondimento del TCI positivo eseguito con metodica in schedina utilizzando un pannello a 11 cellule con e senza enzima (vedi algoritmo decisionale SIMT- IO 025). Prova di compatibilità Cross Match eseguita con procedura in schedina mediante la tecnica del TCI. Tipizzazione altri sistemi gruppo ematici, viene eseguita con metodica in schedina nei casi particolari di Pz immunizzati. 5 INDICATORI N Standar d SIMTI 2010 Attività 1 E Controllo richieste test di lab. e relativi campioni biologici 2 E Valutazione Esterna della Qualità (VEQ) 3 E.3.2 Esecuzione delle tipizzazioni ematiche 4 E.3.3 Ricerca Anticorpi Irregolari Caratteristiche da monitorare Conformità delle richieste di test di lab. e dei campioni alle specifiche definite Performance dei sistemi e processi analitici gestiti Performance dei sistemi e processi analitici dedicati alle tipizzazioni eseguite Performance dei sistemi e processi analitici dedicati alle ricerca Anticorpi Irregolari indicatore di controllo N. non conformità richieste-campioni/ N. richieste N. errori-scostamenti in esercizi VEQ/ N. esercizi VEQ effettuati N. discrepanze prova sierica/globulare/ N tipizzazioni eseguite N. anticorpi identificati/ N. di test di screening risultati positivi 4

5 5 6 RESPONSABILITA Responsabilità: le responsabilità per le attività e gli operatori previsti nella presenta procedura sono indicate dalla seguente tabella secondo la priorità: C = Collabora, R = Responsabile ATTIVITA' TSLB MEDICO BIOLOGO Accettazione campioni e schede anamnestiche donatori R R R Accettazione campioni e richieste esami Pazienti R R R Processazione campioni: avvio seduta analitica R C C Controllo gruppo unità: accettazione sacche e avvio seduta analitica R C C Validazione e controllo finale R R R Refertazione C R R Rilascio schede validate C R R Gestione test non conclusi R R 7 ABBREVIAZIONI Abbreviazione DHT DHE MEA TSLB SIMT Ab TAI AB0 A1 A2 A3 Ax Ael... RhD D-weak D-Partial, D-mosaic Fenotipo Rh K K Descrizione Day Hospital trasfusionale Day Hospital ematologico Malattia emolitica Autoimmune Tecnico Sanitario di Laboratorio Biomedico Servizio Immunoematologia e Medicina Trasfusionale Anticorpi Test anticorpi Irregolari Gruppo Sanguigno AB0 Varianti gruppo A Antigene D Varianti antigene D Varianti Antigene D Antigeni C,c,E,e Antigene Kell Antigene Cellano 5

6 6 8 ALLEGATI SIMT-IO 023 Metodiche manuali SIMT-IO 025 Algoritmo 6