DUE O TRE COSE CHE NON SI SANNO SUL TEST DEL DNA
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- Rebecca Manfredi
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1 Milano, 23 marzo 2015 DUE O TRE COSE CHE NON SI SANNO SUL TEST DEL DNA LA PROSPETTIVA DEL GENETISTA Andrea Piccinini Sezione di Medicina legale - Università degli Studi di Milano andrea.piccinini@unimi.it
2 L EFFETTO CSI PERCEZIONE DISTORTA DELLE POSSIBILITÀ OFFERTE DALLA SCIENZA ERRONEA IDENTIFICAZIONE DEL METODO SCIENTIFICO CON IL PARERE DELL ESPERTO PROBLEMA DI COMUNICAZIONE DELLA SCIENZA COMUNICAZIONE AL PUBBLICO COMUNICAZIONE ALLA GIURIA COSA SI DICE, COME SI DICE, CHI LO DICE? PROBLEMA DI COMPRENSIONE DELLA SCIENZA IL RUOLO DEI MEDIA.
3 ESPANSIONE DELL ANALISI DEL DNA (e mrna) MEZZO DI PROVA IDENTIFICAZIONE PATERNITÀ HLADQ CROMOS. Y MULTIPLEX PCR NGS MLP SLP PCR STRs SNPs SEQUENZA Colin Pitchfork, 1988 Singolo capello, 1989 HLA DQα, 1990 UK database, 1995 OJ Simpson, 1995 NRC, 1996 Y Ch, 1996 DNA fingerprinting from fingerpints, 1997 Multiplex kit, 1999 Omicidio Dobbiaco, 2002 Saddam Hussein, 2003 Omagh trial, 2007 Omicidio Garlasco, Mummie, 1985 Ossa antiche, 1989 Romanoff, 1994 WTC, 2001 Tsunami, 2004 Bosnia, 2005 Air France, 2009 Haiti, 2010 Malaysia MH17, 2014 Da cadavere Da inclusi in paraffina P. Baudo, 2000 C. Villa V. Sgarbi, D. Modugno, M. Bongiorno Eddie Murphy, 2007 M. Balotelli, 2014 Gemelli identici, 2014
4 ESPANSIONE DELL ANALISI DEL DNA (e mrna) HLADQ CROMOS. Y MULTIPLEX PCR NGS MLP SLP PCR STRs SNPs SEQUENZA MEZZO DI PROVA Colin Pitchfork, 1988 Singolo DNA DATABASE capello, 1989 HLA DQα, 1990 UK database, mrna 1995 e COLORE OJ Simpson, DIAGNOSI 1995 CAPELLI NRC, 1996 GENERICA Y Ch, 1996 COLORE DNA fingerprinting ORIGINE from fingerpints, 1997 OCCHI ETNICA Multiplex kit, 1999 Omicidio Dobbiaco, TRATTI 2002 COLORE Saddam Hussein, SOMATICI PELLE 2003 VOLTO Omagh trial, 2007 BIOMARKERS Omicidio CIRCADIANI Garlasco, IDENTIFICAZIONE Mummie, 1985 IMMIGRAZIONE Ossa antiche, 1989 Romanoff, 1994 STATISTICA PATERNITÀ Da cadavere RICOSTRUZIONI FAMIGLIARI Da inclusi COMPLESSE in paraffina P. GENEALOGIA Baudo, 2000 C. Villa WTC, 2001 V. Sgarbi, GENETICA Tsunami, D. Modugno, POPOLAZIONI 2004 M. Bongiorno ANTICHE Bosnia, 2005 AUTOPSIA Eddie Murphy, 2007 TOLLERANZA MOLECOLARE Air France, 2009 GENETICA M. Balotelli, 2014 Haiti, A 2010 FARMACI DNA, DNA NEUROSCIENZE, Malaysia MICROORGANISMI MH17, 2014 Gemelli IMPUTABILITÀ identici, 2014 DNA PIANTE DNA ANIMALI
5 ESPANSIONE DELL ANALISI DEL DNA (e mrna) HLADQ CROMOS. Y MULTIPLEX PCR NGS MLP SLP PCR STRs SNPs SEQUENZA MEZZO DI PROVA Colin Pitchfork, 1988 Singolo DNA DATABASE capello, 1989 HLA DQα, 1990 UK database, mrna 1995 e COLORE OJ Simpson, DIAGNOSI 1995 CAPELLI NRC, 1996 GENERICA Y Ch, 1996 COLORE DNA fingerprinting ORIGINE from fingerpints, 1997 OCCHI ETNICA Multiplex kit, 1999 Omicidio Dobbiaco, TRATTI 2002 COLORE Saddam Hussein, SOMATICI PELLE 2003 VOLTO Omagh trial, 2007 BIOMARKERS Omicidio CIRCADIANI Garlasco, IDENTIFICAZIONE Mummie, 1985 IMMIGRAZIONE Ossa antiche, 1989 Romanoff, 1994 STATISTICA PATERNITÀ Da cadavere RICOSTRUZIONI FAMIGLIARI Da inclusi COMPLESSE in paraffina P. GENEALOGIA Baudo, 2000 C. Villa WTC, 2001 V. Sgarbi, GENETICA Tsunami, D. Modugno, POPOLAZIONI 2004 M. Bongiorno ANTICHE Bosnia, 2005 AUTOPSIA Eddie Murphy, 2007 TOLLERANZA MOLECOLARE Air France, 2009 GENETICA M. Balotelli, 2014 Haiti, A 2010 FARMACI DNA, DNA NEUROSCIENZE, Malaysia MICROORGANISMI MH17, 2014 Gemelli IMPUTABILITÀ identici, 2014 DNA PIANTE DNA ANIMALI
6 IL PROBLEMA DELLE SCIENZE FORENSI: SOGGETTIVITÀ O OGGETTIVITÀ?
7 NAS - National Academy of Science REPORT 2009 SOGGETTIVITA INTERPRETATIVA DI MOLTE SCIENZE FORENSI BALISTICA, FIBRE, IMPRONTE DI STRUMENTI ( TOOLMARKS ), IMPRONTE DIGITALI MAGGIORE RICERCA E IMPEGNO NELLO SVILUPPO DI PROTOCOLLI RIGOROSI PER EVITARE SOGGETTIVITA ERROR RATE (NON DEFINITO) DNA: GOLD STANDARD (PROFILO SINGOLO, DNA SUFFICIENTE).
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9 OGGETTIVITÀ O SOGGETTIVITÀ? IL CASO DI BRANDON MAYFIELD
10 OGGETTIVITÀ O SOGGETTIVITÀ? IL CASO DI BRANDON MAYFIELD SENIOR FINGERPRINT FBI EXAMINER: A 100 PER CENT MATCH!
11 IMPRONTE DIGITALI E AFFIDABILITÀ IMPRONTA DIGITALE È PERMAMENTE (NON CAMBIA NEL TEMPO) È UNICA DATI ACCETTATI (!) QUANDO I PUNTI DI CONFRONTO SONO SUFFICIENTI NESSUN PROBLEMA DI AFFIDABILITÀ IN CASO DI IMPRONTA PARZIALE O DISTORTA QUAL È IL GRADO DI AFFIDABILITÀ DEL CONFRONTO CON L IMPRONTA DI RIFERIMENTO?
12 IMPRONTE DIGITALI: AFFIDABILITÀ E SOGGETTIVITÀ AFFIDABILITÀ DELL ANALISI DELLE IMPRONTE DIGITALI TRA IL 33% E L 80% (Dror, Rosenthal, 2008) Ulery et al, 2012 AUMENTANO AL 90-98% E L AFFIDABILITÀ DEL DNA?
13 1985: IL DNA FINGERPRINTING Z-3 - FREQUENZE POPOLAZIONE - BANDE SCOMPARSE - CONTAMINAZIONE? A-1 - RACCOLTA/CUSTODIA - ECC. C-1
14 1985: IL DNA FINGERPRINTING Z-3? A-1 C-1
15 1991 : PCR HLA DQ α Apo B D1S80? MULTIPLEX PCR MULTIPLEX PCR FLUORESCENTI
16 1991 : PCR HLA DQ α Apo B D1S80? MULTIPLEX PCR MULTIPLEX PCR FLUORESCENTI
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19 INTERPRETAZIONE SOGGETTIVA E DNA OGGI SOGGETTIVITÀ PRESSOCHÈ ASSENTE CON SUFFICIENTE QUANTITÀ/QUALITÀ DI DNA SOGGETTIVITÀ CON SCARSA QUANTITÀ (LCN/LT-DNA) SOGGETTIVITÀ CON SCARSA QUALITÀ (DNA DEGRADATO) SOGGETTIVITÀ CON MISTURE DI DNA (DNA DI PIÙ SOGGETTI) SOGGETTIVITÀ CON DNA SCARSO+MISTO+ DEGRADATO.
20 DNA E SENSIBILITÀ DELLA TECNOLOGIA OGGI TRACCE INVISIBILI ( LOW TEMPLATE DNA, TOUCH DNA ) 82% DI TUTTE LE TRACCE È TOUCH DNA * > POSSIBILITÀ DI CONTAMINAZIONE PRIMA (BACKGROUND DNA), DURANTE E DOPO DEPOSIZIONE TRACCE TRASFERIMENTO MEDIATO DI DNA (SECONDARIO/TERZIARIO) TRASFERIMENTO DI QUALE MATERIALE? * NEDERLAND FORENSIC INSTITUTE ANNI 2013/2014
21 LA CONTAMINAZIONE E LA NATURA DELLA TRACCIA OMICIDIO DI MEREDITH KERCHER REP. 165B IL GANCETTO DEL REGGISENO
22 OMICIDIO DI MEREDITH KERCHER REP. 165B - GANCETTO REGGISENO
23 OMICIDIO DI MEREDITH KERCHER REP. 165B - GANCETTO REGGISENO??
24 L INTERPETAZIONE L ACCUSA: C È DNA DI R. SOLLECITO IN DISCRETA QUANTITÀ, TALE DA ESCLUDERE LA CONTAMINAZIONE L ACCUSA: NON C È DNA DI SOLLECITO ALTROVE NELLA CASA (SU 160 TEST) LA DIFESA: PUÒ ESSERE CONTAMINAZIONE LA DIFESA: C È DNA DI ALTRO/I SOGGETTO/I DOMANDA: QUAL È L ORIGINE DEL DNA?
25 LA CONTAMINAZIONE CONTAMINAZIONE: DNA ESOGENO (SPESSO MOLTO SCARSO) INDEBITAMENTE PRESENTE DETERMINA UNA FALSA COMPATIBILITÀ TENDENZA A NEGARE LA FALSA COMPATIBILITÀ: a. LA CONTAMINAZIONE DIPENDE DAL DNA DI PERSONE CHE NON C'ENTRANO NULLA COL SOGGETTO b. È UNA REGOLA L ANALISI DELL INDAGATO DOPO L ANALISI DELLE TRACCE c. ERGO, L'ESITO DI UN TEST CON UN PROFILO UGUALE AL SOGGETTO NON POTRÀ MAI ESSERE DOVUTO A CONTAMINAZIONE E IL PROFILO SARÀ QUINDI AUTENTICO RAGIONAMENTO COERENTE MA ERRATO LA CONTAMINAZIONE SULLA SCENA DEL CRIMINE, TRASPORTO, STOCCAGGIO
26 LA PATATA BOLLENTE IN DEFINITIVA È IL GIUDICE A DOVER VALUTARE L'IPOTESI CHE UNA TRACCIA POSSA ESSERE FRUTTO DI CONTAMINAZIONE E QUINDI IL RICORRERE DI FALSA COMPATIBILITÀ NESSUNO (POCHISSIMI) STRUMENTI NELLE MANI DEL TECNICO LA DEFINZIONE DEL MATERIALE BIOLOGICO DI PARTENZA.
27 IL PROBLEMA DELL ORIGINE DEL DNA IN CASO DI TRACCE VISIBILI (SANGUE, SALIVA, ECC.) È AGEVOLE (ABBASTANZA) IN CASO DI TRACCE INVISIBILI DIFFICILE O IMPOSSIBILE IN CASO DI TRACCE INVISIBILI E DETERIORATE È IMPOSSIBILE.
28 L ORIGINE DEL DNA: ULTERIORE SOGGETTIVITÀ DIRE: C È DNA DI TIZIO NON È PIÙ SUFFICIENTE NECESSARIO PRECISARE L ORIGINE DEL DNA (POTENDOLO FARE ) SE QUESTO NON È POSSIBILE SIGNIFICATIVITÀ MINORE O NULLA DEL DATO IL RUOLO DEL GIUDICE E DEI SUOI ESPERTI
29 UN PERCORSO (MOLTO) DIFFICILE (FRAMEWORK OF PROPOSITIONS) Jackson et al, 2006; Gill, 2014 LIVELLO 1 o DELLA SUB-ORIGINE (sub-source): C È/NON C È DNA E DI CHI? CASO KERCHER: DNA (SCARSO) DI ORIGINE ACCERTATA LIVELLO 2 o DELL ORIGINE (source): DA QUALE LIQUIDO/TESSUTO BIOLOGICO? CASO KERCHER: NESSUN DATO LIVELLO 3 o DELL ATTIVITÀ (activity): CHI HA LASCIATO IL DNA HA PARTECIPATO AL FATTO? CASO KERCHER: NESSUNA RISPOSTA LIVELLO 4 o DEL CRIMINE (offence): È/NON È COLPEVOLE? ESULA DALLE COMPETENZE DEL GENETISTA
30 IMPRONTE DIGITALI E DNA: AFFIDABILITÀ E SOGGETTIVITÀ AFFIDABILITÀ DELL ANALISI DELLE IMPRONTE DIGITALI TRA IL 33% E L 80% (Dror, Rosenthal, 2008) Ulery et al, 2012 AUMENTANO AL 90-98%
31 IMPRONTE DIGITALI E DNA: AFFIDABILITÀ E SOGGETTIVITÀ AFFIDABILITÀ DELL ANALISI DELLE IMPRONTE DIGITALI TRA IL 33% E L 80% (Dror, Rosenthal, 2008) Ulery et al, 2012 AUMENTANO AL 90-98% ANCHE CON DNA, POICHÉ L INTERPRE- TAZIONE IN CASI COMPLESSI È MOLTO SOGGETTIVA, È LOGICO ATTENDERSI UN RANGE COMPRESO TRA IL 90% E IL 98% DI AFFIDABILITÀ DELL ANALISI..
32 CHE FARE?
33 PIÙ TECNOLOGIA E RICERCA (1) SU CONTAMINAZIONE IN LABORATORIO ORIGINE DNA EMIVITA DNA ASSOCIAZIONE FLUIDO/TESSUTO-DNA SOFTWARE DI INTERPRETAZIONE PER CASI COMPLESSI OGGI MANCA ACCORDO SU DIVERSE MODALITÀ ACCREDITAMENTO DEI LABORATORI E SULLA SCENA DEL CRIMINE!
34 IL LABORATORIO RESTITUISCE QUANTO RACCOLTO SULLA SCENA DEL CRIMINE
35 ACCREDITAMENTO LABORATORI ALL ESTERO E IN ITALIA LABORATORI USA, GB, AUSTRALIA, ECC. E ACCREDITAMENTO MIGLIAIA DI CAMPIONI OGNI GIORNO STAFF DI CENTINAIA DI TECNICI NECESSITÀ DI PROCEDURE BLINDATE LABORATORI IN ITALIA E ACCREDITAMENTO N. DI ANALISI MOLTO MINORE DISCRETO N. SOLO INDAGINI AD INZIATIVA PG (NON 360 cpp) COSTI PER ANALISI SUPERIORI IMPENSABILE PER MOLTI LABORATORI IL COSTO DELL ACCREDITAMENTO NON NECESSARIAMENTE UN (GRAVE) PROBLEMA.
36 I COSTI DELLA RICERCA: DNA FORENSE E RICERCA IN EUROPA E USA Articoli scientifici pubblicati sulle riviste Forensic Science International e Forensic Science International: Genetics, anni
37 DNA FORENSE E FONDI PER RICERCA E PER FUNZIONAMENTO (USA ) Fonte: NIJ RICERCA FUNZIONAMENTO Totale anni $ ,00 Totale anni $ ,00
38 PIÙ TECNOLOGIA E RICERCA (2) TECNOLOGIA IN LABORATORIO GIÀ IN ATTO UNA NUOVA SVOLTA DI TIPO TECNOLOGICO RICERCA E SVILUPPO NELLA FASE PRE-LABORATORIO (RACCOLTA, STOCCAGGIO, CONSERVAZIONE CAMPIONI) RICERCA E SVILUPPO TEMATICHE NELLA FASE POST-LABORATORIO (COMUNICAZIONE DATI)..
39 ASPETTI POSITIVI DEL SISTEMA ITALIANO (1) NESSUN CASO CLAMOROSO DI MISCARRIAGE OF JUSTICE PER DNA IN VERITÀ MANCANZA DI DIBATTITO SCIENTIFICO IN CASI DI DNA COMPLESSO (PRIMA CHE SI FORMI NELL AULA DI GIUSTIZIA) ANALISI MOLTO SPESSO COME CT IRRIPETIBILE (360 cpp).
40 ASPETTI POSITIVI DEL SISTEMA ITALIANO (2) IL RUOLO DEL CT/PERITO, BEN DIVERSO DA QUELLO DELL ANALISTA IN USA/GB MENO TECNICALITÀ MA PIÙ ACCURATEZZA DEL PRODOTTO SPESSO MINORE COINVOLGIMENTO NELL ATTIVITÀ INVESTIGATIVA MAGGIORE INDIPENDENZA L IMPORTANZA DEL QUESITO IL CONTRADDITTORIO COME UNA DELLE SOLUZIONI (GIURIDICA) A QUESTIONI TECNICHE.
41 grazie
42 Laboratorio di Genetica Forense Dip. Scienze Biomediche per la Salute Via L. Mangiagalli, Milano
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