La ricerca del sangue occulto riflessioni dopo il Convegno nazionale Giscor. Modena 21 Novembre 2013 FiorenzaTorricelli Corelab Laboratorio NOCSAE
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1 La ricerca del sangue occulto riflessioni dopo il Convegno nazionale Giscor Modena 21 Novembre 2013 FiorenzaTorricelli Corelab Laboratorio NOCSAE
2 Riflessioni Giscor 2013 Gruppo Italiano Screening Colon Retto Convegno nazionale annuale ROMA 2013 Cosa è il sangue occulto? Ricerca di sangue non visibile nelle feci Perche si utilizza nel primo livello screening? Come marcatore di neoplasia Come è un marcatore ideale? Si stanno cercando nuovi marcatori? Si possono già usare?
3 Riflessioni Giscor 2013 Gruppo Italiano Screening Colon Retto Convegno nazionale annuale ROMA 2013 Cosa è il sangue occulto? Ricerca di sangue non visibile nelle feci Perche si utilizza nel primo livello screening? Come marcatore di neoplasia Come è un marcatore ideale? Si stanno cercando nuovi marcatori? Si possono già usare?
4 Primo livello screening CCR obiettivo Selezione in una popolazione a medio rischio, attraverso esecuzione di un test di ricerca di un marcatore di neoplasia, un gruppo di persone da inviare a Colonscopia (secondo livello) Prima che compaiano sintomi quindi presumibilmente con lesioni iniziali e maggiormente curabili
5 Biologia del CCR Questo approccio è reso possibile dalla biologia del CCR che esordisce quasi sempre con adenoma per evolvere poi in carcinoma dopo un periodo lungo
6 Marcatore fecale ideale Un marcatore fecale ideale (o un pannello di marcatori) dovrebbe avere queste caratteristiche: essere sempre presente nei soggetti con neoplasia rilevanti per lo screening (SENSIBILITA ) non essere presente nei soggetti senza neoplasia (SPECIFICITA ) essere stabile nel materiale fecale recuperabile in adeguata quantità dalle feci e dosato in modo riproducibile
7 Prospettive nei marcatori: applicazioni biomolecolari Alternativa/integrazione primo livello attuale? Le cellule tumorali esfoliano nel lume intestinale L esfoliazione è abbondante,continua e costante e non legata solo alle dimensioni Hanno un vantaggio di sopravvivenza sfuggendo al normale processo di anoikis morte programmata delle cellule lontano dallo loro matrice extracellulare Le principali lesioni a livello molecolare sono conosciute
8 ESFOLIAZIONE I tumori esfoliano abbondantemente cellule displastiche e i loro costituenti nel lume cellulare quindi forniscono un regolare rifornimento di analiti per l analisi sulle feci L esfoliazione è continua e lo strato di muco sovrastante la lesione neoplastica è ricchissimo di cellule a differenza del muco sovrastante l epitelio normale che è tipicamente privo di cellule
9 Marcatori esfoliati di potenziale utilizzo per screening CRC GASTROENTEROLOGY 2005;128:
10 Applicazioni biologia molecolare Non ancora praticabile su larga scala Non esiste un unico marcatore specifico Utilizzo dei marcatori multipli complica le indagini DNA RNA Proteine Analisi dispendiose per costi e tempo Promettente analisi integrità del DNA
11 LONG DNA Ahlquist Calistri 2009 In a group of 70 patients with colorectal cancer, 27 with adenomas greater than 1 cm in diameter, and 70 healthy controls with normal colonoscopy, Dr. Ahlquist and colleagues sought to quantify and correlate human long DNA and occult blood in stool samples using polymerase chain reaction and the HemoQuant assay. Methods A case-control study was conducted on 100 healthy subjects and 100 patients at first diagnosis of colorectal cancer.human longfragment DNA in stool was quantified by fluorescence primers and a standard curve and expressed in DNA nanograms. Results: We validated the 25-ng value, which emerged as the most accurate cut-off in the pilot study, obtaining 79% (95% CI, 71 87%) sensitivity and 89% (95% CI, 83 95%) specificity. Specificity was very high for all cut-off values (15 40 ng) analyzed, ranging from 78 to 96%. Sensitivity was only "Combining these tests detected 80% of colorectal cancers and 46% of adenomas at slightly lower, reaching 84% at the lowest cut-off and maintaining a good 90% specificity." The long DNA test was negative for healthy level at the higher values. Diagnostic potential was independent of gender, controls. age and tumor site. At 90% specificity, "long DNA testing detected 70% of colorectal cancers and 46% of adenomas, while occult blood testing detected 50% and 12%, respectively," Dr. Ahlquist reported. Conclusion: Fecal DNA analysis is a non-invasive and fairly simple test showing high diagnostic potential..
12 Stato dell arte Ritorniamo al vecchio marcatore sangue occulto FIT Utilizzato inizio screening Provincia di Modena anno 2005 Pavullo Marcatore di sanguinamento della lesione Facciamo al meglio con quello che abbiamo dove siamo F. D. Roosvelt
13 Nuove consapevolezze sul FIT Test immunologico per la ricerca del sangue occulto fecale : non è una unica entità Ci sono varie metodiche con diversi reagenti (lattice,oro colloidale ) Diversi dispositivi di prelievo Non c e ancora uno standard di riferimento Diversi cut- off utili diagnostici e screening
14 Principali test disponibili
15 Diversi dispositivi prelievo
16 Metodi in uso : dati Survey Tiziana Rubeca -_ISPO Firenze Rossella Corradini USL Modena Carlo Senore - CPO Torino Manuel Zorzi - IOV Padova
17 Metodi in uso :dati Survey Tiziana Rubeca -_ISPO Firenze Rossella Corradini USL Modena Carlo Senore - CPO Torino Manuel Zorzi - IOV Padova
18 Metodi in uso :dati Survey Tiziana Rubeca -_ISPO Firenze Rossella Corradini USL Modena Carlo Senore - CPO Torino Manuel Zorzi - IOV Padova
19 FIT in Regione Emilia Romagna Test immunoturbidimetrico al lattice OC SENSOR Unico dosaggio Negativo 0-99 ng/ml - Positivo 100 ng/ml - non idoneo da ripetere Il valore numerico della misurazione non viene inserito nel referto. Evoluzione della strumentazione e dei reattivi /provetta prelievo Consapevolezza degli operatori dell importanza del controllo del processo analitico
20 Gruppo di lavoro del I livello RER Obiettivi Conoscenza approfondita dei vari step dell analisi in uso Soluzioni concordate alle criticita Protocollo di lavoro comune Sotto il patrocinio dell assessorato Sanita della RER
21 Protocollo Regionale
22 Laboratorio Importare in Laboratorio le buone pratiche concordate nel PROTOCOLLO Tenere sotto controllo il processo con indicatori di qualità : CQI controllo interno di qualità CQA controllo di qualità allargato Ets errore totale sperimentale VEQ Verifiche esterne di qualità Standard di riferimento degli indicatori Apporto umano determinante nel governo dell analisi di Laboratorio
23 Report degli indicatori Corelab al Referente del Progetto
24 Per ultimo ma non ultimo Integrazione con l epidemiologo Elaborazione dati analitici Numerici Elaborazioni percentuali positività Rapporto con standard riferimento
25 Provincia di Modena Anno Invito Campioni Consegnati Totale
26 Test per la ricerca del sangue occulto Percentuale di positività AUSL Modena Fobt positività per round organizzativo (%) round 3
27 Fobt positività (%) per sesso e età - 3 round maschio femmina età 65-69
28 Test per la ricerca del sangue occulto Percentuale di positività AUSL Modena rispetto a standard di riferimento Fobt positività per round e tipo esame (%) Primi esami Esami successivi % accettabile 5 desiderabile 4.5 accettabile 3.5 desiderabile round
29 Ringraziamenti ringrazio tutto lo staff del Laboratorio per la collaborazione la dott.ssa Lelli per sostegno scientifico
30
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