TESTOSTERONE FREE EIA WELL Determinazione immunoenzimatica diretta del Testosterone Free nel siero o plasma.

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1 TESTOSTERONE FREE EIA WELL Determinazione immunoenzimatica diretta del Testosterone Free nel siero o plasma. REF KSO015EW 96 DESTINAZIONE D USO Metodo competitivo immunoenzimatico colorimetrico per la determinazione quantitativa della concentrazione del Testosterone Libero nel siero e plasma. 1. SIGNIFICATO CLINICO Il testosterone è un ormone steroideo del gruppo degli androgeni. Il testosterone è secreto nei testicoli e nelle ovaie, anche se piccole quantità sono secrete dalle ghiandole adrenali. È il principale ormone sessuale maschile ed è uno steroide anabolico. Svolge ruoli chiave nella salute e nel benessere di uomini e donne. Soltanto l 1-2% del testosterone presente in circolo esiste come testosterone non legato o libero. Circa il 60% è legato alle SHBG con alta affinità, mentre il resto è legato all'albumina. Sia la frazione legata all albumina che la frazione libera possono essere biologicamente attive, mentre il legame alle SHBG inibisce l'azione del testosterone. Gli effetti del testosterone possono essere classificati come effetti virilizzanti e anabolici. Gli effetti anabolici includono lo sviluppo della massa e della resistenza muscolare, l aumento della densità e della resistenza ossea e la stimolazione dello sviluppo lineare dell'osso. Gli effetti virilizzanti includono la maturazione degli organi sessuali. I livelli di testosterone negli uomini si riducono gradualmente con l'età. M368 Rev. 3 07/2007 Pag. 1/12 La determinazione della frazione libera o non legata del testosterone nel siero rappresenta un metodo per valutare l'ormone fisiologicamente bioattivo. I livelli di testosterone libero sono elevati nelle donne con iperandrogenismo associato ad irsutismo, in presenza o assenza di ovaie policistiche. Inoltre, la determinazione del testosterone libero è più utile di quella del testosterone totale in situazioni in cui si evidenzia un aumento o una riduzione dei livelli di SHBG (per esempio nei casi di ipotiroidismo e obesità). 2. PRINCIPIO DEL METODO Il testosterone libero (antigene) presente nel campione compete con l antigene marcato con perossidasi per il legame con un numero limitato di anticorpi anti- Testosterone adsorbiti sulla micropiastra (fase solida). Al termine dell incubazione la separazione dell antigene libero da quello legato si ottiene mediante semplice lavaggio della fase solida. Viene quindi aggiunto il Tampone Substrato (H 2 O 2 -TMB). L enzima presente nella frazione legata, reagendo con il Tampone Substrato (H 2 O 2 -TMB), sviluppa una colorazione blu che vira al giallo dopo l aggiunta del Reagente Bloccante (H 2 SO 4 ). Si procede quindi con la determinazione dell assorbanza. La concentrazione del Testosterone

2 Libero nel campione è calcolata sulla base di una serie di calibratori. L intensità del colore sviluppato è proporzionale alla concentrazione di antigene marcato e quindi inversamente proporzionale alla concentrazione del testosterone libero presente nel campione. Il testosterone presente nel sangue è legato alle SHBG (60%) e, in minore quantità, ad altre proteine. Solo la determinazione del Testosterone Libero (<1% del Testosterone totale) consente la stima dell ormone biologicamente attivo. 3. REATTIVI, MATERIALI E STRUMENTAZIONE 3.1 Reattivi e materiali forniti nel kit Conservare tutti i reattivi a +2 8 C, al riparo dalla luce. I reagenti forniti sono sufficienti per 96 pozzetti. CAL CALIBRATORI 6 fl. (1 ml) di Calibratori per Testosterone Libero. Pronti per l uso. CONJ CONIUGATO ENZIMATICO 1 fl. (24 ml) di Testosterone coniugato con Perossidasi. Pronto per l uso. MTP MICROPIASTRA SENSIBILIZZATA 1 micropiastra da 96 pozzetti frazionabili con anticorpi IgG anti-testosterone adsorbiti sul fondo. Aprire la busta solo dopo averla riportata a temperatura ambiente e chiuderla subito dopo il prelievo delle strips da utilizzare; una volta aperta è stabile fino alla data di scadenza M368 Rev. 3 07/2007 Pag. 2/12 del kit. Non rimuovere il foglio adesivo dalle strip inutilizzate. SUBS TAMPONE SUBSTRATO 1 fl. (13 ml) di H 2 O 2 -TMB (0,25 gr/l) (evitare il contatto con la pelle). Pronto per l uso. STO P REAGENTE BLOCCANTE 1 fl. (14 ml) di Acido Solforico (H 2 SO 4 ) 0.15 mol/l (evitare il contatto con la pelle). Pronto per l uso. 3.2 Reattivi necessari non forniti nel kit Acqua distillata. 3.3 Materiale e strumentazione ausiliaria Dispensatori automatici. Lettore per micropiastre (450 nm). 4. AVVERTENZE Evitare l uso di campioni emolizzati. Osservare la massima precisione nella dispensazione dei reattivi. Non usare reattivi appartenenti a lotti diversi. Evitare l esposizione del reattivo TMB-H 2 O 2 alla luce diretta, ai metalli o agli agenti ossidanti. Questo metodo consente di determinare concentrazioni di Testosterone Libero da 0,10 pg/ml a 100,0 pg/ml. La somministrazione di cortisone, steroidi naturali o sintetici può alterare i livelli ematici di Testosterone libero. 5. PROCEDURA DI DOSAGGIO 5.1 Preparazione dei Calibratori

3 Prima dell uso lasciare su agitatore rotante per almeno 5 minuti. Ai Calibratori corrispondono le seguenti concentrazioni di Testosterone Libero: CAL 0 0 pg/ml CAL 1 0,2 pg/ml CAL 2 1,0 pg/ml CAL 3 4,0 pg/ml CAL 4 20,0 pg/ml CAL 5 100,0 pg/ml Una volta aperti i calibratori sono stabili per 6 mesi, se conservati a C. 5.2 Preparazione del campione La determinazione del Testosterone Libero può essere effettuata su plasma o su siero di pazienti a digiuno. Se il dosaggio non viene effettuato lo stesso giorno del prelievo conservare il campione a -20 C. 5.3 Procedimento Poiché è necessario eseguire il dosaggio in doppio, allestire due pozzetti per ogni punto della curva di Calibrazione (CAL 0 - CAL 5), due per ogni Campione ed uno per il Bianco. Dispensare: CAL Campione Bianco Campioni μl --- CAL 20 μl CONJ 200 μl 200 μl --- Incubare 1 h a +37 C. Togliere la miscela di reazione, lavare aggiungendo in ogni pozzetto 300 μl di acqua distillata. Ripetere il lavaggio ed eliminare completamente l acqua dai pozzetti. Dispensare: CAL Campione Bianco SUBS 100 μl 100 μl 100 μl Incubare 15 minuti a temperatura ambiente (20-25 C), al riparo dalla luce. Dispensare: CAL Campione Bianco STOP 100 μl 100 μl 100 μl Leggere l assorbanza (E) a 450 nm azzerando con il Bianco. Qualora si utilizzasse nel procedimento operativo uno strumento automatico per micropiastre RADIM e/o SEAC, far riferimento al relativo manuale. 6. CONTROLLO QUALITA Per controllare le prestazioni del dosaggio ciascun laboratorio deve testare propri controlli con range di valori di Testosterone libero normali, elevati e bassi. Questi controlli devono essere trattati allo stesso modo dei campioni e testati in ciascuna procedura di dosaggio eseguita. I dati del Controllo Qualità devono essere mantenuti per monitorare le prestazioni dei reagenti forniti. Si devono impiegare, inoltre, adeguati metodi statistici per verificare l andamento delle prestazioni. Ciascun laboratorio deve stabilire i propri limiti di accettabilità riguardo alle caratteristiche di prestazione del dosaggio. Altri parametri da monitorare sono le intercette dell 80, 50 e 20% della curva di calibrazione per valutare la riproducibilità inter-saggio. Inoltre, il valore massimo di assorbanza deve concordare con i dati ottenuti in precedenza. Deviazioni significative dai M368 Rev. 3 07/2007 Pag. 3/12

4 limiti prestabiliti possono indicare impreviste modifiche nelle condizioni sperimentali o una degradazione dei reagenti forniti. Per accertare la causa delle suddette variazioni è necessario utilizzare reattivi freschi. 7. LIMITI DELLA PROCEDURA 7.1 Caratteristiche del dosaggio Campioni microbiologicamente contaminati, altamente lipemici o emolizzati non devono essere utilizzati con questo test. Per ottenere risultati riproducibili è importante che il tempo di reazione sia mantenuto costante in ogni pozzetto. Il tempo impiegato per la dispensazione dei campioni non deve superare i dieci minuti per evitare l effetto deriva. Se viene utilizzata più di una piastra si raccomanda di ripetere la curva dose-risposta. L aggiunta del tampone substrato innesca una reazione cinetica che viene interrotta a seguito dell aggiunta del reagente bloccante. Durante la dispensazione del tampone substrato e del reagente bloccante deve essere seguita la stessa sequenza, in modo da evitare qualsiasi differenza nei tempi di reazione. Il lettore per micropiastre misura le OD in senso verticale: non toccare, pertanto, il fondo dei pozzetti. La non completa aspirazione del liquido dai pozzetti durante la fase di lavaggio può dar luogo a scarsa riproducibilità e a falsi risultati. 7.2 Interpretazione dei risultati Se per il calcolo dei risultati viene utilizzato un sistema computerizzato di riduzione dei dati è indispensabile che i valori attesi dei calibratori cadano entro il 10% delle concentrazioni assegnate. 8. RISULTATI 8.1 Estinzione media Calcolare l estinzione media (Em) di ciascun punto della curva di Calibrazione (CAL 0 CAL 5) e di ogni campione. 8.2 Curva di Calibrazione Riportare sul grafico delle assorbanze i valori calcolati delle estinzioni medie (Em) di ciascun calibratore (CAL 0 CAL 5) in funzione della concentrazione. Tracciare la curva attraverso i punti di calibrazione indicati (es.: elaborazione a Quattro Parametri Logistici). 8.3 Calcolo dei risultati Interpolare i valori dei campioni sulla curva di calibrazione per ottenere la corrispondente concentrazione espressa in pg/ml. Nel caso si utilizzi uno strumento automatico per micropiastre RADIM e/o SEAC, la lettura spettrofotometrica è eseguita automaticamente a 3 lunghezze d onda: 450, 405 e 620 nm, permettendo l ampliamento del range di lettura. 9. VALORI DI RIFERIMENTO MEDIANA MEDIA ± 1DS pg/ml RANGE pg/ml Uomini sani ± Donne: Ovulazione ± 0.9 ND 4.1 Contraccettivi orali ± Post-menopausa ± PARAMETRI CARATTERISTICI 10.1 Precisione Ripetibilità (intra-saggio) La variabilità intra-saggio è stata determinata testando in unico dosaggio M368 Rev. 3 07/2007 Pag. 4/12

5 16 replicati di due diversi sieri di controllo ed è risultata pari al 6.4% Riproducibilità (inter-saggio) La variabilità inter-saggio è stata valutata attraverso la determinazione in replicato di tre diversi sieri di controllo con due kit appartenenti a lotti differenti ed è risultata pari all 8% Specificità L anticorpo impiegato presenta le seguenti reazioni crociate, calcolate al 50% secondo Abraham: Analita % Cross-reattività Testosterone 100 DHT Androstenedione Androsterone 0 DHEA-S 0 Cortisolo 0 Cortisone 0 17 α Estradiolo 0 Estrone 0 Prednisone 0 17 α Etinilestradiolo 0 Norgestrel Sensibilità La concentrazione minima rilevabile di Testosterone libero diversa dal Calibratore 0 è pg/ml, con un limite di confidenza del 95%. entrambi i test i campioni di siero di 69 donne e 26 uomini. E stata quindi calcolata la curva di regressione lineare: y = 0.47 x r = Effetto Gancio Con questo metodo non è stato osservato effetto gancio fino a 400 pg/ml. 11. DISPOSIZIONI PER LO SMALTIMENTO I reagenti devono essere smaltiti in accordo con le leggi locali. 12. NOTE SULL AUTOMAZIONE - Il dispositivo può essere utilizzato con strumentazione automatica di kit ELISA su micropiastra. - Si garantisce l applicabilità su strumentazione RADIM e/o SEAC. - Qualora si utilizzi strumentazione automatica di altri fornitori è responsabilità dell utilizzatore assicurarsi che il kit sia stato opportunamente validato. 13. LEGENDA SIMBOLI: vedi pag Correlazione con il dosaggio RIA Il kit Testosterone Free EIA WELL è stato comparato con un altro kit di Testosterone Free disponibile in commercio. Sono stati analizzati con M368 Rev. 3 07/2007 Pag. 5/12

6 TESTOSTERONE FREE EIA WELL Direct immunoenzymatic determination of Free Testosterone in serum or plasma. REF KSO015EW 96 INTENDED USE Competitive immunoenzymatic colorimetric method for quantitative determination of Free Testosterone concentration in serum and plasma. 1. CLINICAL SIGNIFICANCE Testosterone is a steroid hormone from the androgen group. Testosterone is primarily secreted in the testes of males and the ovaries of females although small amounts are secreted by the adrenal glands. It is the principal male sex hormone and an anabolic steroid. In both males and females, it plays key roles in health and well-being. Only 1-2% of circulating testosterone exists as unbound or free testosterone. The majority, approximately 60%, is bound to SHBG with high affinity, while the remainder is loosely bound to albumin. Both the albumin-bound and free fractions may be biologically active, while SHBG effectively inhibits testosterone action. Testosterone effects can be classified as virilizing and anabolic effects. Anabolic effects include growth of muscle mass and strength, increased bone density and strength, and stimulation of linear growth and bone maturation. Virilizing effects include maturation of the sex organs. Testosterone levels decline gradually with age in men. M368 Rev. 3 07/2007 Pag. 6/12 Measurement of the free or unbound fraction of serum testosterone has been proposed as a means of estimating the physiologically bioactive hormone. Free testosterone levels are elevated in women with hyperandrogenism associated with hirsutism in the presence or absence of polycystic ovarian disease. In addition, free testosterone measurements may be more useful than total testosterone in situations where SHBG is increased or decreased (e.g. hypothyroidism and obesity). 2. PRINCIPLE Free Testosterone (antigen) in the sample compets with horseradish peroxidase testosterone (enzyme-labeled antigen) for binding onto the limited number of anti-testosterone (antibody) sites on the microplates (solid phase). After incubation the bound/free separation is performed by a simple solid-phase washing. The Substrate Buffer (H 2 O 2 TMB) is added. After an appropriate time has elapsed for maximum color development, the enzyme reaction is stopped and the absorbance is determinated. Free Testosterone concentration in the sample is calculated based on a series of calibrators. The color intensity is inversely proportional to the Free Testosterone concentration in the sample.

7 Testosterone in the blood is bound to SHBG (60 %) and in lower quantity to other proteins. Only the measurement of Free Testosterone (< 1% of Total Testosterone) permits the estimating of the hormone biologically active. any skin contact). Ready for use. 3.2 Reagents required but not provided Distilled water. 3. REAGENT, MATERIAL AND INSTRUMENTATION 3.1 Reagent and material supplied in the kit - Store all reagents between +2 and + 8 C in the dark. - The reagents are sufficient for 96 wells. CAL CALIBRATORS 6 vials (1 ml) of Free Testosterone Calibrators. Ready for use. CONJ ENZYME CONJUGATE 1 vial (24 ml) of Testosterone- HRP conjugate. Ready for use. MTP SUBS COATED MICROPLATE 96 breakable wells coated with Anti-Testosterone IgG. Open the bag only when it is at room temperature and close immediately after use. The microplate, once opened, is stable until the expire date of kit. Do not remove the adhesive sheets from the unutilized strips. SUBSTRATE BUFFER 1 vial (13 ml) containing H 2 O 2 - TMB 0.25gr/L (avoid any skin contact). Ready for use. STOP BLOCKING REAGENT 1 vial (14 ml) of Sulphuric acid (H 2 SO 4 ) 0.15 mol/l (avoid M368 Rev. 3 07/2007 Pag. 7/ Auxiliary materials and instrumentation Automatic dispenser. Microplates reader (450 nm). 4. PRECAUTION Do not use heavily haemolysed samples. Maximum precision is required for dispensation of reagents. Do not use reagents from different lots. Avoid the exposure of reagent TMB- H 2 O 2 to direct sunlight, metals or oxidants. This method allows the determination of Free Testosterone from 0.10 pg/ml to pg/ml. The clinical significance of Free Testosterone determination can be invalidated if the patient is treated with cortisone or natural or synthetic steroids. 5. ASSAY PROCEDURE 5.1 Preparation of calibrators Before use, mix for 5 min. with rotating mixer. Calibrators have the following concentration of Free Testosterone: CAL 0 0 CAL 1 0,2 CAL 2 1,0 CAL 3 4,0 pg/ml pg/ml pg/ml pg/ml

8 CAL 4 20,0 pg/ml CAL 5 100,0 pg/ml Once opened calibrators are stables for six months, if stored at C. 5.2 Preparation of the sample The determination of Free Testosterone can be performed in plasma as well as in serum of patients who have observed fast. Store specimen at -20 C if the determination is not performed on the same day of the sample collection. 5.3 Procedure As it is necessary to perform the determination in duplicate, prepare two wells for each of the five points of the Calibration curve (CAL 0 CAL 5), two for each sample, one for Blank. Pipette: CAL Sample Blank Sample μl --- CAL 20 μl CONJ 200 μl 200 μl --- Incubate at 37 C for 1 hour. Remove the contents from each well; wash the wells with 300 μl of distilled water. Repeat the washing procedure by draining the water completely. Pipette: CAL Sample Blank SUBS 100μl 100μl 100μl Incubate at room temperature (20-25 C) for 15 minutes in the dark. Pipette: CAL Sample Blank STOP 100μl 100μl 100μl Read the absorbance (E) at 450 nm against Blank. While using for the procedure a RADIM and/or SEAC automatic instrument for microplates, refer to its relative manual. 6. QUALITY CONTROL Each laboratory should assay controls at normal, high and low levels range of Free Testosterone for monitoring assay performance. These controls should be treated as unknowns and values determined in every test procedure performed. Quality control charts should be maintained to follow the performance of the supplied reagents. Pertinent statistical methods should be employed to ascertain trends. The individual laboratory should set acceptable assay performance limits. Other parameters that should be monitored include the 80, 50 and 20% intercepts of the calibration curve for run-to-run reproducibility. In addition, maximum absorbance should be consistent with past experience. Significant deviation from established performance can indicate unnoticed change in experimental conditions or degradation of kit reagents. Fresh reagents should be used to determine the reason for the variations. 7. LIMITATION OF PROCEDURE 7.1 Assay Performance M368 Rev. 3 07/2007 Pag. 8/12

9 Sample(s), which are microbiologically contaminated, should not be used in the assay. Highly lipaemic or haemolysed specimen(s) should similarly not be used. It is important that the time of reaction in each well is held constant for reproducible results. Pipetting of samples should not extend beyond ten minutes to avoid assay drift. If more than one plate is used, it is recommended to repeat the dose response curve. Addition of the substrate solution initiates a kinetic reaction, which is terminated by the addition of the stop solution. Therefore, the addition of the substrate and the stopping solution should be added in the same sequence to eliminate any time deviation during reaction. Plate readers measure vertically. Do not touch the bottom of the wells. Failure to remove adhering solution adequately in the aspiration or decantation wash step(s) may result in poor replication and spurious results. 7.2 Interpretation If computer controlled data reduction is used to calculate the results of the test, it is imperative that the predicted values for the calibrators fall within 10% of the assigned concentrations. 8. RESULTS plotted points (e.g. Four Parameter Logistic). 8.3 Calculation of results Interpolate the values of samples on the Calibration curve to obtain the corresponding values of concentrations expressed in pg/ml. While using a RADIM and/or SEAC automatic instrument for microplates, the spectrophotometric reading will be performed automatically at 3 different wavelengths: 450, 405 and 620 nm, thereby allowing a wider curve range. 9. REFERENCE VALUES MEDIAN MEAN ± 1SD pg/ml RANGE pg/ml Normal Male ± Female: Ovulating ± 0.9 ND 4.1 Oral contraceptives ± Postmenopausal ± PERFORMANCE CHARACTERISTICS 10.1 Precision Repeatability (intra-assay) Within run variation was determined by replicate determination (16x) of two different control sera in one assay. The within assay variability is 6.4%. 8.1 Mean absorbance Calculate the mean of the absorbance (Em) for each point of the calibration curve and for each sample. 8.2 Calibration curve Plot the mean value of the absorbance of calibrators (Em) against concentration. Draw the best-fit curve through the M368 Rev. 3 07/2007 Pag. 9/ Reproducibility (inter-assay) Between run variation was determined by replicate measurements of three different control sera with 2 different lots. The between assay variability is 8% Specificity The cross reaction of the antibody calculated at 50% according to Abraham are shown in the table:

10 Analyte % Cross-reactivity Testosterone 100 DHT Androstenedione Androsterone 0 DHEA-S 0 Cortisol 0 Cortison 0 17 α Estradiol 0 Estrone 0 Prednisone 0 17 α Ethynilestradiol 0 Norgestrel Sensitivity The lowest detectable concentration of Free Testosterone that can be distinguished from the zero calibrator is pg/ml at the 95% confidence limit Correlation with RIA The Testosterone Free EIA WELL kit was compared to another commercially available Free Testosterone assay. Serum samples of 69 females and 26 males were analysed with both tests. The linear regression curve was calculated: y = 0.47 x r = Hook Effect The Testosterone Free EIA WELL, a competitive enzyme immunoassay, shows no Hook Effect up to 400 pg/ml. 11. WASTE MANAGEMENT Reagents must be disposed off in accordance with local regulations. 12. AUTOMATIC TEST - This test can be used with automatic instrument for ELISA kits on microplate. - We guarantee its applications on RADIM and/or SEAC automatic instruments. - While using a non RADIM or SEAC automatic instrument for microplate, it is under end user responsibility, to make sure that it was appropriately tested for ELISA kits. 13. SYMBOLS LEGEND: see p. 11 BIBLIOGRAFIA - BIBLIOGRAPHY 1) McCann D, Kirkish L. Evaluation of Free Testosterone in serum. J. Clin. Immunoassay 1985;8: ) Ekins RP. Free hormones in blood J. Clin. Immunoassay 1984; 7(2): ) Paulson JD, et al. Free Testosterone concentration in serum: elevation is the hallmark of hirsutism. Am. J Obst. Gynecol 1977; 128: ) Odlind V. et al. Plasma androgenic activity in women with acne vulgaris and in healthy girls before, during and after puberty. Clin. Endocrinology 1982; 16: ) Green PJ. Free Testosterone determination by ultrafiltration and comparation with dialisys. Clin Chem 1982; 28:1237 6) Wu CH. Plasma free and proteinbound testosterone in hirsutism. Obstet Gynecol. 1982; 60: M368 Rev. 3 07/2007 Pag. 10/12

11 SIMBOLI, SYMBOLS, SYMBOLES, SÍMBOLOS, SÍMBOLOS, SYMBOLE, ΣΥΜΒΟΛΑ, SYMBOLIT, SYMBOLER EN 980 EDMA REF Codice di riferimento o di ordine / reference or order code / Référence ou numéro de commande / referencia o número de pedido / referência ou número da encomenda / Referenz oder Bestellnummer / κωδικός προϊόντος ή παραγγελίας / Refarans veye sipariş numarsı / referenční nebo objednací číslo LOT Lotto / lot / Lot / lote / lote / charge / παρτίδα / parti / šarže IVD Data di scadenza / expiry date / date d expiration / Fecha de caducidad / Data de vencimento / Verfallsdatum / Ηµεροµηνία λήξης / Son kullanma targhi / datum expirace Per uso diagnostico in-vitro / For in-vitro diagnostic use / Pour diagnostic in-vitro / Para uso diagnóstico In-vitro / aplicação do diagnóstico In-vitro / Für den Gebrauch in der IN-VITRO- DIAGNOSTIK / για in vitro διαγνωστική χρήση / in vitro diagnostik kullanım / pro použití in-vitro Marcatura CE secondo la direttiva IVD 98/79/CE / CE marking according to IVD guidelines 98/79/EC / marquage CE conforme aux directives IVD 98/79/EC / marcado CE según directiva de IVD 98/79/CE / marcação-ce segundo a directriz-ivd 98/79 / CE-Markierung bei Erfüllung der IVD Richtlinie 98/79/EG / Σηµανση CE βάσει κοινοτικής οδηγίας IVD 98/79/EC / 98/79/EC IVD tüzüğüne göre CE işareti / CE označení dle IVD 98/79/EU Conservare a 2-8 C / keep at 2-8 C / conserver à 2-8 C / Conservar a 2-8 C / conservar a 2-8 C / Lagerung bei 2-8 C / φύλαξη στους 2-8 C / 2-8 C da saklayınız / skladovat při 2-8 C 96 Rischio biologico/ Biohazard / Risque Biologique /Riesgo Biológico /Risco Biológico / Bιολογικός κίνδυνος/riziko tehlike biyolojik /Biologicky nebezpečné Consultare la metodica operativa / consult instructions for use / consulter le mode opératoire / consultar las instrucciones de uso / consultar as instruções de uso / Schauen Sie die Arbeitsanleitung an / συμβουλευτείτε τις οδηγίες χρήσης / kullanımda başvurulacak bilgiler / Sledujte návod k použití Sufficiente per 96 test / sufficient for 96 tests / suffisant pour 96 déterminations / suficiente para 96 determinaciones / Componentes para 96 testes / genügend für 96 Tests / επαρκεί για 96 τεστ / 96 test için yeterli / dostačující pro 96 testů RDATE Data di Riferimento / Reference date / Date de référence / Fecha de referencia / Data de refêrencia / Referenzdatum / ημερομηνία βαθμονόμησης / Referans Targhi / referenční datum RCNS Ricostituire con / reconstitute with / reconstituer avec / reconstituir con / reconstituir com / rekonstituiren mit / ανασυστάται με / ile karıştırma / rekonstituovat H 2 O Acqua distillata o deionizzata / deionized or distilled water / eau deionisée ou distillée / agua destilada o desionizada / água destilada ou deionizada / Deionisiertes oder Destilliertes Wasser / απιονισμένο -απεσταγμένο νερό / deiyonize veya distile su / deionizovaná nebo destilovaná voda Fabbricante / Manufacturer / Fabriquant / produzido por / Fabricante / produkt der / κατασκευάζεται από / tarafından üretilmiştir / výrobce M368 Rev. 3 07/2007 Pag. 11/12

12 "Le Istruzioni per l'uso tradotte nelle altre lingue di interesse sono consultabili sul sito Internet all'indirizzo The instructions for use available in the other languages of interest can be viewed on our website Οι οδηγίες χρήσης μεταφρασμένες στις άλλες ενδιαφερόμενες γλώσσες όπως επίσης στην ηλεκτρονική διεύθυνση In den anderen Sprachen von Interesse ist die Bedienungsanleitung kann auf der Website unter der Adresse konsultiertwerden. "Le mode d emploi dans les autres langues intéressées est consultable sur le site Internet à l'adresse Las instrucciones de uso traducidas en los otros idiomas de interés se pueden consultar en nuestro sitio Internet "As instruções de uso traduzidas nos outros idiomas de interesse podem ser consultadas no nosso site Internet, ao endereço RADIM S.p.A. - Via del Mare, 12 - Pomezia (Roma) - Italia Tel.: Fax: National Order Entry: Export Department: Customer Care: info@radim.it -