17beta-Estradiol Saliva Luminescence Immunoassay
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- Rossana Cuomo
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1 Istruzioni per l Uso 17beta-Estradiol Saliva Luminescence Immunoassay Dosaggio immunologico con marcatori luminescenti per la misurazione diagnostica quantitativa in vitro dell 17beta-estradiolo nella saliva umana. RE62141 / RE / C I B L I N T E R N A T I O N A L G M B H Flughafenstrasse 52a Phone: +49 (0) IBL@IBL-International.com D Hamburg, Germany Fax: +49 (0)
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3 1. USO PREVISTO Dosaggio immunologico con marcatori luminescenti per la misurazione diagnostica quantitativa in vitro dell 17beta-estradiolo nelle saliva umana. Le misurazioni ottenute con questo strumento si possono usare nella diagnosi e nel trattamento di vari disturbi sessuali di tipo ormonale. Questo test non intende essere un controllo del funzionamento della placenta in caso di gravidanza con complicanze. 2. SOMMARIO E SPIEGAZIONI 17β-Estradiolo [1, 3, 5 (10) -estratrien-3, 17β-diolo; E2] è un ormone steroideo C18 ed il più importante estrogeno naturale. E presente in individui di sesso maschile e femminile. In quest ormone gli estrogeni stimolano la crescita degli organi sessuali e lo sviluppo dei caratteri sessuali secondari; influenzano inoltre la secrezione di gonadotropina. Negli individui di sesso maschile il ruolo del 17β-Estradiolo è definito conmeno precisione, per quanto si presume sia coinvolto nella secrezione della gonadotropina. In donne non in stato di gravidanza il 17β- Estradiolo è prodotto quasi esclusivamente dalle ovaie. Specialmente dopo la menopausa il fegato, il cervello, i muscoli ed il tessuto adiposo producono estrogeni. Inoltre, la misurazione di 17β-Estradiolo è utile per determinare una mancanza di estrogeni che può essere espressa come ritardo nello sviluppo puberale, amenorrea primaria e secondaria e che si presenta in menopausa. Altri dosaggi ormonali vengono richiesti per una corretta interpretazione e per la diagnosi differenziale. Per capire l origine della mancanza di estrogeni (sintesi o regolazione) si dovrebbe misurare la concentrazione di gonadotropina. La determinazione del 17β-Estradiolo è utile per la diagnosi della pubertas praecox nelle femmine. Riguardo agli uomini, il livello di 17β-Estradiolo può essere usato per la diagnosi differenziale della ginecomastia. Essendo principalmente legato alla globulina legante ormoni sessuali (SHBG) ed all albumina del siero, solo l 1 3% dell estradiolo circolante nel plasma è presente nella sua forma libera. Solo questa è la parte attiva nella regolazione endocrina. L ormone libero viene rilasciato in quantità uguali nella saliva. Poiché le fluttuazioni dei livelli di 17β-Estradiolo dipendono anche da situazioni individuali, è molto conveniente rilevare un profilo ormonale prelevando numerosi campioni di saliva. 3. PRINCIPIO DEL TEST Immunodosaggio in luminescenza basato sul principio di competizione. Una quantità sconosciuta dell antigene presente nel campione e una quantità fissa di antigene legato all enzima competono per i siti di legame sugli anticorpi che rivestono i pozzetti. Dopo incubazione i pozzetti vengono lavati per bloccare la reazione di competizione. Dopo aggiunta della soluzione substrato luminescente l intensità della luminescenza misurata sarà inversamente proporzionale alla quantità di antigene nel campione. I risultati dei campioni possono essere determinati direttamente usando la curva standard. 4. AVVERTENZE E PRECAUZIONI 1. Solo per uso diagnostico in-vitro. Solo per uso professionale. 2. Leggere attentamente le istruzioni prima di iniziare il test. Utilizzare il manuale fornito nel kit. Assicurarsi di aver compreso tutte le indicazioni. 3. In caso di danneggiamento del kit contattare IBL o il Vostro fornitore entro 1 settimana dal ricevimento della merce. Non utilizzare i componenti danneggiati ma conservarli per fornire prove del danno assieme al reclamo che inoltrerete al produttore/fornitore. 4. Rispettare lotto e scadenze. Non scambiare o mescolare tra loro reagenti di lotti diversi. Non usare i reagenti scaduti. 5. Attenersi alle Buone Pratiche di Laboratorio e alle direttive di sicurezza. Indossare camici, guanti in lattice e occhiali protettivi se necessario. 6. Alcuni reagenti del kit contengono sostanze pericolose che potrebbero causare irritazioni a pelle ed occhi. Consultare la sezione MATERIALE FORNITO e le etichette per i dettagli precisi. Schede di sicurezza del prodotto sono disponibili sul sito web IBL o su richiesta specifica ad IBL/fornitore. Version / 8
4 7. I reagenti preparati e usati e le sostanze chimiche del kit devono essere trattati come rifiuti pericolosi secondo le normative di sicurezza e la legislazione vigente nel Paese in cui il prodotto viene usato. 8. Il personale delle pulizie dev essere informato dal personale specializzato sui possibili rischi e sulle procedure da adottare. 9. Alcuni reagenti contengono azido di sodio (NaN 3 ) come conservante. In caso di contatto con occhi e pelle risciacquare subito abbondantemente. NaN 3 potrebbe reagire con piombo e rame piombato formando metalli azidici esplosivi. Quando si eliminano i reagenti provvedere a bagnarli con grandi quantità di acqua per evitare formazione di azidi. 5. CONSERVAZIONE E STABILITÀ Il kit è spedito e trasportato a temperatura ambiente e deve essere conservato a 2-8 C. Non esporre a luce solare diretta e ad alte temperature. Le informazioni relative a conservazione e stabilità di tutti i reagenti e dei campioni sono riportate nel capitolo corrispondente. La piastra microtitrata aperta è stabile 6 settimane se conservata nel suo involucro ben chiuso riposta a 2-8 C. 6. PRELIEVO E CONSERVAZIONE DEI CAMPIONI Saliva Il paziente non dovrebbe bere, mangiare, masticare gomme o lavarsi i denti nei 30 minuti che precedono il prelievo dei campioni. In caso una delle precedenti cose fosse stata fatta far risciascquare la bocca a fondo con acqua fresca 5 minuti prima del prelievo del campione. Non prelevare il campione in caso di infezioni del cavo orale, infiammazioni o lesioni (contaminazione da sangue). La saliva può essere raccolta in un apposito contenitore. Raccogliere un minimo di 0.5 ml di saliva. La salivazione può essere stimolata masticando un pezzo di Parafilm. Si consiglia di congelare il campione prima del test a 20 C. Mescolare e centrifugare Dopo scongelamento centrifugare 10 min a x g per rimuovere il materiale particolato. Controllare l aspetto della saliva. (Colorazione rosata o rossastra - indice di presenza di sangue) Conservazione: 37 C C 2-8 C -20 C (Aliquote) Stabilità: 1 settimana > 2 settimane > 4 settimane 6 mesi 7. MATERIALE FORNITO Quantità RE62141 Quantità RE62149 Simbolo 1 x 12x8 10 x 12x8 MTP 1 x 150 µl 1 x 1.5 ml ENZCONJ CONC 1 x 9 ml 1 x 90 ml ANTISERUM 1 x 10 ml 1 x 100 ml ASSAYBUF 7 x 1.0 ml 7 x 3.5 ml CAL A-G 2 x 1.0 ml 2 x 3.5 ml CONTROL 1+2 Componente Micropiastra Coniugato con anticorpo di asino anti-pecora. Coniugato Enzimatico Concentrato (101x) Contiene: coniugato a fosfatase alcalina, NaN 3. Estradiolo Antisiero Di colore rosso. Pronto/a all uso. Contiene: anti-17β-estradiolo anticorpi (pecora), NaN 3 Tampone Saggio Di colore rosso. Pronto/a all uso. Contiene: Tampone Tris, BSA, NaN 3. Standard A-G 0.0; 0.9; 2.0; 4.0; 8.0; 16; 64 pg/ml Pronto/a all uso. Contiene: 17β-Estradiolo, Tampone, ProClin 300 Controllo 1+2 Pronto/a all uso. Contiene: 17β-Estradiolo, Tampone, ProClin 300. Per le concentrazioni esatte vedere le etichette sulle provette o il certificato di Controllo Qualità. Reagente di Chemiluminescenza AP Pronto/a all uso. Contiene: substrato basato sull acridan. 1 x 9 ml 1 x 90 ml LUMINREAG AP 1 x 100 ml 5 x 100 ml Tampone Lavaggio Concentrato (10x) WASHBUF CONC Contiene: Tampone Tris, Tween, NaN 3. 3 x 12 x FOIL Pellicola Adesiva Version / 8
5 8. MATERIALI NECESSARI MA NON FORNITI 1. Micropipette (Multipette Eppendorf o similari, < 3 % CV). Volumi: 20; 50; 100; 1000 µl 2. E necessario usare un attrezzatura idonea per la campionatura 3. Agitatore orbitale ( rpm) 4. Vortex mixer 5. Micropipetta 8-Canali con contenitori per reagenti 6. Spruzzetta per lavaggi, lavatore per micropiastre automatico o semi automatico 7. Lettore per immunodosaggio in luminescenza 8. Acqua bidistillata o deionizzata 9. Carta assorbente, puntali per pipette e timer 9. NOTE PER LA PROCEDURA 1. Qualsiasi manipolazione impropria dei campioni o modifica alla procedura può compromettere i risultati. Rispettare rigorosamente i volumi, i tempi e le temperature di incubazione e i passaggi di pretrattamento dei campioni indicati in metodica. Utilizzare pipette calibrate. 2. Una volta iniziato il test completare tutti i passaggi senza interruzioni. Assicurarsi che tutti i reagenti siano stati precedentemente preparati in tempo utile. Far raggiungere la temperatura ambiente ai campioni e ai componenti del kit (18-25 C) e mescolare delicatamente ciascun reattivo liquido e campione prima dell uso. Non creare schiuma durante il mescolamento. 3. Evitare la contaminazione di reagenti, pipette, pozzetti o provette. Usare puntali di plastica nuovi per ogni reagente, standard e campione. Non scambiare i tappi tra loro. Tappare sempre i flaconi non utilizzati. Non riutilizzare pozzetti/provette o reagenti. 4. Alcuni componenti contengono un volume 250 µl di soluzione. Assicurarsi che la soluzione sia sul fondo del flacone prima di aprirlo. 5. Si consiglia di saggiare i campioni in doppio per poter identificare eventuali errori di pipettamento. 6. Usare uno schema di pipettamento per realizzare un appropriata distribuzione sulla piastra. 7. Il tempo di incubazione influisce sui risultati. Tutti i pozzetti dovrebbero essere dispensati nello stesso ordine e sequenza temporale. Si raccomanda una pipetta multicanale a 8 canali per pipettare le soluzioni in tutti i pozzetti. 8. Il lavaggio della micropiastra è importante. Pozzetti lavati in modo inappropriato possono portare a risultati erronei. Si raccomanda una pipetta multicanale o un lavatore automatico per piastre. Non far asciugare i pozzetti tra le varie incubazioni. Non graffiare i pozzetti rivestiti durante risciacqui e aspirazioni. Risciacquare e versare i reagenti con cura. Durante i risciacqui assicurarsi che i pozzetti siano ben riempiti con la soluzione di lavaggio e che non ci siano residui nei pozzetti. 9. L umidità influisce sui pozzetti/tubi rivestiti. Non aprire l involucro finché non ha raggiunto la temperatura ambiente. Riporre immediatamente i tubi/pozzetti non utilizzati nell involucro con il disseccante. Version / 8
6 10. ISTRUZIONI PRE-TEST Il contenuto del kit per 96 determinazioni può essere diviso per 3 esecuzioni separate. I volumi indicati di seguito si riferiscono a un'esecuzione con 4 strisce (32 determinazioni) Preparazione di componenti liofilizzati o concentrati Diluire / dissolvere Componente Diluente Rapporto Note 10 ml WASHBUF CONC fino a 100 ml acqua bidist. 1:10 20 µl ENZCONJ CONC con 2 ml ASSAYBUF 1:101 Mescolare energicamente. Mescolare senza formare schiuma. Conservazi one 2-8 C Stabilità 4 settimane Preparare freschi ed utilizzare solo una volta Diluizione dei Campioni I campioni sospettati di avere una concentrazione superiore a quella dello standard con concentrazione più alta devono essere diluiti con il diluente dei campioni (ordinabile separatamente ad IBL con codice REF KLZZ731). La diluzione va effettuata in provette di vetro. Per ottenere risultati corretti moltiplicare i valori misurati per il fattore di diluizione. 11. PROCEDURA DEL TEST 1. Pipettare 50 µl di ogni Standard, di ogni Controllo e di ogni campione nei rispettivi pozzetti della micropiastra. 2. Pipettare 50 µl del Coniugato Enzimatico appena preparato in ogni pozzetto. 3. Pipettare 50 µl di Antisiero Anti-Estradiolo in ogni pozzetto. 4. Coprire la piastra con pellicola adesiva. Incubare per 4 h a TA (18-25 C) su un agitatore orbitale ( rpm). 5. Rimuovere la pellicola adesiva. Eliminare la soluzione d incubazione. Lavare la piastra 4 x con 250 µl di Tampone di Lavaggio diluito. Rimuovere l eccesso di soluzione picchiettando la piastra capovolta su una salvietta di carta. 6. Pipettare 50 µl di Reagente di Chemiluminescenza AP in ogni pozzetto con lo stesso intervallo di tempo e lo stesso ordine con cui verranno misurati nel Luminometro (nel Luminometro Berthold per esempio serve 2 sec per pozzetto). 7. Misurare le unità di luminescenza relativa (RLU) con un Luminometro dopo 10 min. 12. CONTROLLO DI QUALITA I risultati del test sono validi solo se il test è stato eseguito seguendo le istruzioni per l uso. L utente deve inoltre attenersi rigorosamente ai principi della BPL (Buona Pratica di Laboratorio) o a norme equivalenti. Gli utenti e il laboratorio devono avere un sistema di formulazione della diagnosi conforme alle Buone Pratiche di Laboratorio. Tutti i controlli devono risultare compresi entro gli intervalli accettabili indicati sulle etichette e il Certificato QC. Se i criteri non sono soddisfatti il test non è valido e dovrebbe essere ripetuto. Ogni laboratorio dovrebbe usare campioni noti come ulteriori controlli. Si consiglia la partecipazione a programmi di controllo qualità periodici. In caso di deviazioni devono essere forniti i seguenti dati: Scadenza dei reagenti (preparati), condizioni di conservazione, pipette, strumenti, condizioni d incubazione e metodi di lavaggio. Version / 8
7 13. CALCOLO DEI RISULTATI Le RLU media ottenute per gli standards (asse-y, lineare) vengono messe in grafico contro le loro concentrazioni (asse-x, logaritmico) sia su grafico semi-logaritmico che usando un metodo automatico. Buoni risultati si ottengono con grafici cubic spline, 4 Parametri Logistica o Logit-Log. Per il calcolo della curva standard utilizzare ogni segnale degli standard (omettere ovviamente I valori dei duplicati molto al di fuori dei risultati attesi e impiegare il valore singolo più plausibile). La concentrazione dei campioni può essere ricavata direttamente dalla curva standard. In caso di campioni diluiti i valori devono essere moltiplicati per il corrispondente fattore di diluizione. I campioni con concentrazioni superiori al più alto degli standards devono essere diluiti come descritto nel paragrafo ISTRUZIONI PRE-TEST e ritestati. Campioni di Saliva con valori eccessivamente elevate devono essere controllati poiché potrebbero avere contaminazione da sangue. Conversione: 17β-Estradiolo (pg/ml) x 3.67 = pmol/l Portata di Riferimento: Saliva: pg/ml 17β-Estradiolo Tipica Curva di Calibrazione (Esempio. Non usare per il calcolo!) Standard 17β-Estradiolo RLU/RLU RLU max Media (pg/ml) (%) A B C D E F G RLU Estradiol (pg/ml) Version / 8
8 14. VALORI ATTESI I soli risultati non dovrebbero essere l unica motivazione alla base di una scelta terapeutica. Devono essere correlati ad altre osservazioni cliniche e test diagnostici. I valori normali pubblicati per donne e uomini tendono a variare leggermente in base al metodo usato per la determinazione. Soggetti apparentemente sani mostrano i seguenti valori: Estradiolo (pg/ml) Premenopausa n = 18, Età: profilo mensile (~1500 campioni singoli) Fase Follicolare Ciclo Mediano Fase Luteale Postmenopausa n = 13, Età < 4.3 n = 40, Età: Si consiglia ad ogni laboratorio di calcolare i propri valori di riferimento. Per stabilire un range normale della saliva è stato eseguito uno studio su donne in pre-menopausa che non usavano contraccettivi. Sono stati raccolti campioni di saliva tre volte al giorno (mattina, mezzogiorno e pomeriggio/sera). I tre campioni sono stati usati in pool e la concentrazione di Estradiolo misurata per ottenere un valore giornaliero durante tutta la durata del ciclo mestruale. Il diagramma seguente illustra i risultati degli studi: Monthly profiles of 18 women without contraceptiva Salivary Estradiol (pg/ml) 16,0 14,0 12,0 10,0 8,0 6,0 4,0 2,0 0,0 10% 25% Median 75% 90% Day of menstrual cycle 15. LIMITI DELLA PROCEDURA La raccolta e conservazione dei campioni ha influenza significativa sui risultati del test. Vedere la sezione PRELIEVO E CONSERVAZIONE DEI CAMPIONI per maggiori dettagli. Per le reazioni crociate vedere la sezione PERFORMANCE. Il kit 17beta-Estradiol Saliva Luminescence Immunoassay non dovrebbe essere utilizzato in pazienti trattati con medicinale Fulvestrant (Falsodex ) il quale ha azione interferente con l 17beta-Estradiol Saliva Luminescence Immunoassay e potrebbe generare risultati falsamente elevati nel test. I seguenti componenti del sangue non hanno effetto significativo (+/-20%) sui risultati del test fino ai livelli di concentrazione riportati in tabella: Saliva Conc. Estradiolo (pg/ml) Sangue 0.125% 1.4; 7.3 Thimerosal 0.1% 11; 80 NaN 3 1% 11; 80 Version / 8
9 16. PERFORMANCE Sostanza Reazione crociata (%) 17β-Estradiolo 100 Estrone 14.0 Deossicortisolo 0.58 Estriol 0.50 Specificità Analitica Fulvestrant 0.42 (Reattività Crociate) Estrona-3-Solfato 0.26 Etinilestradiolo 0.05 Estradiolo-Glucuronide 0.03 Epiestradiolo 0.02 Diidrotestosterone 0.02 Sensibilità Analitica (Limite di Rilevazione) Saliva 0.3 pg/ml Media (Zero-Standard) - 2SD Sensibilità Funzionale Saliva 0.9 pg/ml Media Conc. < 20% CV Precisione Media SD CV (pg/ml) (pg/ml) (%) n Intra-Saggio Inter-Saggio Conc. (pg/ml) Diluizione Misurato (pg/ml) Linearità Recupero Saliva 1 (46.2) Saliva 2 (52.6) Saliva 3 (62.6) Conc. (pg/ml) Saliva 1 (1.2) Saliva 2 (4.8) Saliva 3 (21.4) Cross-reattività di altre sostanze esaminate 0.01% Recupero (%) : : : : : : : : : : : Aggiunto (pg/ml) Misurato (pg/ml) Recupero (%) r 2 = 0.94 Metodo di Paragone IBL 17beta-Estradiol Saliva Luminescence Immunoassay = 1.02 x ELISA r = 0.97 verso ELISA n = 39 Version / 8
10 17. RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI SUL PRODOTTO 1. Kumari, V et al.: A Comparison of Prepulse Inhibition in Pre- and Postmenopausal Women and Age- Matched Men. Neuropsychopharmacology (2008) 33, Laine, M. A. et A. O. Ojanotko : Estradiol metabolism in human saliva in vitro, J Steroid Biochemistry and Molecular Biology 70: (1999) 3. Sumiala, S. et al.: Salivary Estradiol concentrations after tubal sterilization, Obstet Gynecol 88: (1996) 4. Lipson, S. F. et P. T. Ellison : Reference values for luteal Estradiol measured by salivary radioimmunoassay 61: (1994) 5. Wingfield, M. et al. Follicular and luteal phase salivary Estradiol profiles in women with endometriosis and infertility. Gynecol. Endocrinol. 8: (1994) 6. Finn M. M. et al. The frequency of salivary Estradiol sampling and the diagnosis of luteal phase insufficiency. Gynecol. Endocrinol 6: (1992) 7. Vuorento,T. et I. Huhtaniemi: Daily levels of salivary Estradiol during menstrual cycle in adolescent girls. Fertil Steril 58: (1992) 8. Li, T. C. et al.: The relation between daily salivary Estradiol profile and endometrial development in the luteal phase of fertile and infertile women. British Journal of Obstetrics and Gynaecology 96: (1989) 9. Lenton E. A. et al. Measurement of Estradiol in saliva : assessment of the normal fertile range using spontaneous conception cycles. Clinical Endocrinology 28: (1988) 10. Lequin, R. M. et al. Estradiol in Saliva : pitfalls and consequent implications for accuracy of the determination. Clin. Chem. 32: (1986) 11. Sufi, S. B. et al. Multicenter evaluation of assays for estradiol and Estradiol in saliva. Clin. Chem. 31: (1985) Version / 8
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12 Symbols / Symbole / Symbôles / Símbolos / Símbolos / Σύμβολα REF LOT CONC LYO IVD Cat.-No.: / Kat.-Nr.: / No.- Cat.: / Cat.-No.: / N.º Cat.: / N. Cat.: / Αριθμός-Κατ.: Lot-No.: / Chargen-Bez.: / No. Lot: / Lot-No.: / Lote N.º: / Lotto n.: / Αριθμός -Παραγωγή: Use by: / Verwendbar bis: / Utiliser à: / Usado por: / Usar até: / Da utilizzare entro: / Χρησιμοποιείται από: No. of Tests: / Kitgröße: / Nb. de Tests: / No. de Determ.: / N.º de Testes: / Quantità dei tests: / Αριθμός εξετάσεων: Concentrate / Konzentrat / Concentré / Concentrar / Concentrado / Concentrato / Συμπύκνωμα Lyophilized / Lyophilisat / Lyophilisé / Liofilizado / Liofilizado / Liofilizzato / Λυοφιλιασμένο In Vitro Diagnostic Medical Device. / In-vitro-Diagnostikum. / Appareil Médical pour Diagnostics In Vitro. / Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro. / Equipamento Médico de Diagnóstico In Vitro. / Dispositivo Medico Diagnostico In vitro. / Ιατρική συσκευή για In-Vitro ιάγνωση. Evaluation kit. / Nur für Leistungsbewertungszwecke. / Kit pour évaluation. / Juego de Reactivos para Evaluació. / Kit de avaliação. / Kit di evaluazione. / Κιτ Αξιολόγησης. Read instructions before use. / Arbeitsanleitung lesen. / Lire la fiche technique avant emploi. / Lea las instrucciones antes de usar. / Ler as instruções antes de usar. / Leggere le istruzioni prima dell uso. / ιαβάστε τις οδηγίες πριν την χρήση. Keep away from heat or direct sun light. / Vor Hitze und direkter Sonneneinstrahlung schützen. / Garder à l abri de la chaleur et de toute exposition lumineuse. / Manténgase alejado del calor o la luz solar directa. / Manter longe do calor ou luz solar directa. / Non esporre ai raggi solari. / Να φυλάσσεται μακριά από θερμότητα και άμεση επαφή με το φως του ηλίου. Store at: / Lagern bei: / Stocker à: / Almacene a: / Armazenar a: / Conservare a: / Αποθήκευση στους: Manufacturer: / Hersteller: / Fabricant: / Productor: / Fabricante: / Fabbricante: / Παραγωγός: Caution! / Vorsicht! / Attention! / Precaución! / Cuidado! / Attenzione! / Προσοχή! Symbols of the kit components see MATERIALS SUPPLIED. Die Symbole der Komponenten sind im Kapitel KOMPONENTEN DES KITS beschrieben. Voir MATERIEL FOURNI pour les symbôles des composants du kit. Símbolos de los componentes del juego de reactivos, vea MATERIALES SUMINISTRADOS. Para símbolos dos componentes do kit ver MATERIAIS FORNECIDOS. Per i simboli dei componenti del kit si veda COMPONENTI DEL KIT. Για τα σύμβολα των συστατικών του κιτ συμβουλευτείτε το ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΥΛΙΚΑ. COMPLAINTS: Complaints may be submitted initially written or vocal. Subsequently they need to be filed including the test performance and results in writing in case of analytical reasons. WARRANTY: The product is warranted to be free from material defects within the specific shelf life and to comply with product specifications delivered with the product. The product must be used according to the Intended use, all instructions given in the instructions for use and within the product specific shelf life. Any modification of the test procedure or exchange or mixing of components of different lots could negatively affect the results. These cases invalidate any claim for replacement. LIMITATION OF LIABILITY: IN ALL CIRCUMSTANCES THE EXTENT OF MANUFACTURER S LIABILITY IS LIMITED TO THE PURCHASE PRICE OF THE KIT(S) IN QUESTION. IN NO EVENT SHALL MANUFACTURER BE LIABLE FOR ANY INCIDENTAL OR CONSEQUENTIAL DAMAGES, INCLUDING DAMAGES FOR LOST PROFITS, LOST SALES, INJURY TO PERSON OR PROPERTY OR ANY OTHER INCIDENTAL OR CONSEQUENTIAL LOSS. IBL International GmbH Flughafenstr. 52A, Hamburg, Germany Tel.: + 49 (0) Fax: IBL@IBL-International.com WEB: Symbols Version 4.5 /
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